益生注射液对人内皮细胞缺氧再给氧损伤的拮抗机理研究

目的　探讨内皮细胞缺血再灌注损伤及中药益生注射液对其的拮抗机理。方法　用无糖培养基在无氧条件下培养使人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4缺氧 1.5小时 ,然后以含糖培养基 ,在 5 % CO2 和 37℃条件下给氧培养 5小时 ,建立内皮细胞缺氧再给氧模型 ,以模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤 ,并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程 ,荧光染色显示胞内钙离子与线粒体 ,细胞化学染色显示胞内琥珀酸脱氢酶 (SDH)和乳酸脱氢酶 (L DH)活性 ,并检测细胞培养液中超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO)浓度。结果　缺氧再给氧使 ECV30 4细胞变圆、收缩、脱落 ,细胞内钙离子含量增高 ,线粒体膜电位减弱 ,SDH活性下降 ,L DH活性增高 ,培养液中 SOD与 NO含量减少 ,而 MDA浓度增高 ;用益生注射液干预后 ,ECV30 4细胞形态基本恢复正常 ,上述多项检测指标的改变得以逆转。结论　缺氧再给氧导致 ECV30 4细胞发生脂质过氧化 ,胞内钙离子超载、SOD活性及 NO水平降低、线粒体功能受损 ,益生注射液可使上述变化得以逆转 ,从而拮抗内皮细胞缺氧再给氧损伤     

血管内皮细胞缺氧/再给氧后E-选择素的表达研究

目的 检测血管内皮细胞(EC)缺氧／再给氧反应后E—selectin的表达，探讨杭氧化剂PDTC对血管内皮细胞E—selectin转录的抑制作用。方法 以人胚肾血管内皮细胞为材料，建立缺氧／再给氧模型，检测E—selectin的表达；应用PDTC干预EC的缺氧培养过程，观察E—selectin表达的改变。结果 血管内皮细胞缺氧／再给氧反应后E—selectin的表达明显增加，4h到达峰值；PDTC能有效抑制E—selectin的表达。结论 缺氧／再给氧促进EC活化，增强E—selectin的表达，抗氧化剂PDTC能有效降低E—selectin的转录，为缺血再灌注损伤的治疗提供理论基础。     

红花抗幼鼠窒息缺氧时脑NO含量的变化

目的：探讨红花抗缺氧脑损伤中的作用。方法：采用SD幼鼠常压缺氧模型，测定红花对缺氧耐力的影响，并观察幼鼠经40min窒息缺氧后复氧24h,48h脑组织中的NO含量变化及红花对其影响。结果：缺氧前30min腹腔注射红花浸出液（7g生药／kg)，能明显延长幼鼠的存活时间；幼鼠经窒息缺氧后复氧24h,48h脑NO含量显著升高，而红花组能明显降低缺氧后复氧脑组织的NO含量。结论：NO参与了窒息缺氧的脑损伤，红花对缺氧脑损伤的保护作用是通过抑制NO实现的。     

依那普利对大鼠心肌细胞缺氧与缺氧/再给氧损伤的保护作用

目的：观察依那普利对培养的大鼠心肌细胞缺氧与缺氧／再给氧损伤时释放心肌酶的影响，研究依那普利对心肌细胞是否有直接的保护作用。方法：用培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧与缺氧／再给氧模型，检测细胞培养液中肌酸磷酸激酶(CPK)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)等心肌酶的活性变化，观察依那普利对上述指标的影响。结果：心肌细胞内CPK、ALP、AST及LDH的释放量随着缺氧与缺氧／再给氧时间的延长逐渐升高，依那普利能显著减少心肌细胞缺氧与缺氧／再给氧损伤期间心肌酶的释放量。结论：依那普利能减轻缺氧与缺氧／再给氧造成的心肌细胞损伤，依那普利对心肌细胞真有直接的保护作用。     

冬虫夏草水提液抗心肌细胞缺氧再给氧损伤的实验研究

采用荧光素染色法和ACAS570型粘附细胞仪观察冬虫夏草水提液对正常心肌细胞内Ca2+的作用及对缺氧再给氧时细胞内Ca2+的影响。结果显示：冬虫夏草水提液能降低正常心肌细胞内Ca2+的浓度，减轻缺氧再给氧时细胞内Ca2+超载现象，二者均呈良好的量效关系。提示冬虫夏草水提液可能有减轻缺氧再给氧损伤的作用。     

益生注射液对人内皮细胞缺氧再给氧损伤的拮抗机理研究

目的 探讨内皮细胞缺血再灌注损伤及中药益生注射液对其的拮抗机理。方法 用无糖培养基在无氧条件下培养使人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧1.5小时，然后以含糖培养基，在5%CO2和37℃条件下给氧培养5小时，建立内皮细胞缺氧再给氧模型，以模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤，并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程，荧光染色显示胞内钙离子与线粒体，细胞化学染色显示胞内琥珀酸脱氢酶（SDH）和乳酸脱氢酶（LDH）活性，并检测细胞培养液中超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）浓度。结果 缺氧再给氧使ECV304细胞变圆，收缩、脱落，细胞内钙离子含量增高，线粒体膜电位减弱，SDH活性下降，LDH活性增高，培养液中SOD与NO含量减少，而MDA浓度增高；用益生注射液干预后，ECV304细胞形态基本恢复正常，上述多项检测指标的改变得以逆转。结论 缺氧再给氧导致ECV304细胞发生脂质过氧化，胞内钙离子超载，SOD活性及NO水平降低，线粒体功能受损，益生注射液可使上述变化得意以逆转，从而拮抗内皮细胞缺氧再给氧损伤。     

牛磺酸对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用

目的：观察牛磺酸对培养的心肌细胞损伤的影响。方法：以培养的心肌细胞为模型。在缺氧再给氧损伤细胞后,观察心肌细胞活力及搏动频率的变化,结果：牛磺酸可以提高心肌细胞的活力,提高心肌细胞的搏动频率,使心肌细胞的搏动频率明显恢复。结论：牛磺酸对缺氧再给氧损伤培养的心肌细胞有保护作用。     

冬虫夏草水提液抗心肌细胞缺氧再给氧损伤的实验研究

采用荧光素染色法和ＡＣＡＳ５７０型粘附细胞仪观察冬虫夏草水提液对正常心肌细胞内Ｃａ＾２＋的作用及对缺氧再给氧时细胞内Ｃａ＾２＋的影响。结果显示：冬虫夏草水提液能降低正常心肌细胞内Ｃａ６２＋的浓度，减轻缺氧再给氧时细胞内Ｃａ＾２＋超载现象，二均呈良好的量效关系。     

缺氧再给氧损伤对人肝细胞MHCⅠ分子相关抗原表达变化的影响

目的 探讨缺氧再给氧(hypoxia／reoxygenation,H／R)损伤是否能介导入MICA、B(MHC class Ⅰ chain-related antigenA,B)的表达变化。方法 建立人正常肝细胞缺氧再给氧损伤模型,模拟移植器官缺血再灌注损伤过程,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光分别检测肝细胞MICA、B在mRNA和蛋白质水平的变化。结果 发现H／R损伤可以导致肝细胞中MICA和MICB表达上调．缺氧15h,再给氧2h、4h、6h、12h、24h后两者的表达逐步增多。结论 缺氧再给氧损伤能够诱导MICA、B表达上调。     

一氧化氮、一氧化氮合酶在脑出血病人中的变化和意义

目的：探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)在脑出血病人中的变化和意义。方法：比较49例脑出血患者及66例健废人血浆NO、NOS含量，分析上述指标在出血后三个时期的变化以及是否合并蛛网膜下腔出血和临床预后的关系。结果：与对照组相比，脑出血l～3d组NO、NOS含量明显高于4～7d组、14d组和对照组，NO变化与脑出血和(或)合并蛛网膜下腔出血有一定关系。结论：NO、NOS参与了脑出血的病理生理过程，其变化对病情的预后有一定的影响。     

一氧化碳中毒血浆一氧化氮及氧自由基含量与病情关系的探讨

目的：检测一氧化氮(NO)、过氧化脂质(LPO)及超氧化物歧化酶(SOD)在急性一氧化碳(CO)中毒急性期血浆中的变化与病情的关系，探讨其临床意义。方法：88例CO中毒患者根据临床症状分为轻型(A组)、中型(B组)和重型(C组)3组，分别在入院后第1、3、7及第14天检测血浆NO、LPO和SOD的变化，并行健康对照。结果：急性CO中毒患者血浆NO、LPO明显高于对照组(P＜0．01)，SOD明显低于对照组(P＜0．01)；3组中毒患者在入院后第1、3天NO、LPO均明显升高，SOD均明显降低，C组与A组比较，C组NO、LPO明显升高(P＜0．05)，SOD明显降低(P＜0．01)；入院后第7天及第14天C组NO、LPO仍明显高于A组(P＜0．05)，SOD仍明显低于A组(P＜0．05)。结论：CO中毒患者血浆NO、LPO明显升高，SOD明显降低；重症患者NO、LPO升高及SOD降低更为明显，持续时间更长，其预后愈差。     

窒息新生儿血浆NO、NOS水平及对预后的影响

目的　探讨新生儿窒息时一氧化氮 (Nitrogenmonoxide ,NO)、一氧化氮合成酶 (Nitrogenmonoxidesyntase ,NOS)水平的变化及其对判断预后的指导意义。方法　采用比色等方法测定 32例窒息新生儿及 30例正常新生儿血浆一氧化氮、一氧化氮合成酶活性水平。结果　正常对照组NO、NOS水平分别为 (72 .84± 1 2 .35) μmol/L和 (0 .2 0 3± 0 .0 5)U/mg ,窒息组为 (1 2 9.80± 32 .66) μmol/L和(0 .352± 0 .1 2 4 )U/mg ;其中轻度窒息组为 (1 0 5 .65± 36 .30 ) μmol/L和 (0 .2 89± 0 .0 9)U/mg ;重度窒息组为 (1 4 4 .55± 2 6 .32 ) μmol/L和 (0 .364± 0 .0 1 0 )U/mg。窒息新生儿NO、NOS水平较正常新生儿明显升高 (P <0 .0 1 ) ,重度窒息患儿较轻度窒息患儿升高 (P <0 .0 1 )。结论　NO、NOS水平高低与窒息新生儿脑损伤程度和预后有关 ,可作为判断新生儿窒息及其所致新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)病情及预后的指标之一     

NITRIC OXIDE AND VEGF EXPRESSION IN ISCHEMIC-HYPOXIC RETINOPATHY

Objective To evaluate nitric oxide（NO）and vascular endothelial growth factor（VEGF）in vitreous humor and blood samples in patients with proliferative diabetic retinopathy（PDR）and in patients with branch retinal vein occlusion（BRVO）.Methods NO concentrations were determined by using the Greiss reaction in plasma and vitreous humor samples.VEGF levels were assayed by ELISA.The patients in the studies were divided into four groups：16 patients with PDR,5 patients with BRVO,11 patients with rhegmatogenous retinal detachment（RRD）,and 10 patients with idiopathic macular hole（IMH）.Results The vitreous fluid levels of NO were significantly higher in patients with PDR（15.2μmol/L,4.6-50.9μmol/L）than those in the other three groups（F=5.13,P=0.005）.The concentrations of VEGF were significantly higher in patients with PDR and BRVO（1507.2 μg/mL,50.71-3722.0μg/ml; 838.8μg/mL,159.6-3328.0μg/mL）than those in the other two groups（F=6.84,P=0.0008）,but highest in PDR（T=3.92,P=0.001）.There was no significant difference between NO and VEGF in serum in four groups.There was no correlation between concentrations of NO and VEGF in four groups whatever in vitreous or plasma（all P〉0.05）.Conclusion The results suggest that higher levels of NO and VEGF may be related to the angiogenesis in DR.     

氯胺酮对大鼠丘脑一氧化氮合酶活性和一氧化氮含量的影响

目的：观察不同剂量的氯胺酮对大鼠丘脑一氧化氮合酶（NOS）和一氧化氮（NO）含量的影响。方法：Sprague Dawley(SD)大鼠32只，雌雄不限，体重200－300g。随机分为四组（n=8):组I为对照组，给予生理盐水10ml/kg腹腔注射；组Ⅱ、组Ⅲ和组Ⅳ分别给予氯胺酮35ml/kg,100ml/kg和200ml/kg。组I和组Ⅱ在用药后5min后断头取材，组Ⅲ和组Ⅳ在大鼠翻正反射消失后立即断头取材。在低温操作箱内生理盐水冰面上取脑，以分光光度法测定NOS活性和NO量，Lawry法测蛋白含量。结果：大鼠腹腔注射氯胺酮35ml/kg后，其丘脑的NOS活性和NO量与对照组相比均无明显变化（P＞0．05）而腹腔注射氯胺酮100ml/kg和200ml/kg后，NOS活性明显降低，分别较对照组降低了44．3％和40％（P＜0．05）和P＜0．01），NO量也明显减少，分别较对照组减少了42．9％和47．1％（P＜0．05）或（P＜0．01）；且这两组的NOS活性和NO量也明显低于氯胺酮35ml/kg组，NOS活性分别降低了47．3％和43．2％（P＜0．01），NOS量降低了47．4％和51．3％（P＜0．01）；此两组之间相比较，丘脑的NOS活性和NO量无统计学意义（P＞0．05）。结论：NO在氯胺酮的中枢作用机制中可能发挥重要作用。     

哮喘患儿血清——氧化氮,一氧化氮合酶的变化及意义

目的：探讨哮喘患儿血清一氧化氮（ＮＯ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化及意义。方法：采用化学比色法测定６１例哮喘患儿及２０例正常健康儿童血清ＮＯ、ＮＯＳ水平。结果：哮喘急性发作期患儿血清ＮＯ、ＮＯＳ均显著高于正常对照组,其中ＮＯ以单纯哮喘组较哮喘并肺炎组升高更著。缓解期ＮＯ、ＮＯＳ均降至正常。结论：ＮＯ、ＮＯＳ在哮喘发病过程中起重要作用。     

心肌炎患儿血一氧化氮与氧自由基的变化及意义

目的探讨血一氧化氮（N0）及氧自由基（OFR）在小儿心肌炎（MC）中的作用及意义。方法检测30例急性心肌炎患儿NO、丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量，选择18例健康体检者为对照组。结果MC忠儿NO、MDA水平明显高于对照组（P〈0．01），SOD活性明显低于对照组（P〈0．01）；MC组于治疗后2周时NO、MDA水平均比治疗前显著下降（P〈0．01），SOD活性比治疗前明显升高（P〈0．01）。结论NO与OFR参与了心肌炎的发病过程；测定NO、MDA及SOD含量有助于心肌炎患儿的病情评价。     

一氧化氮及一氧化氮合酶在遗传性癫痫易感大鼠惊厥发作中的作用

目的：探讨一氧化氮、一氧化氮合酶在遗传癫痫易感大鼠惊厥发作中的变化及作用。方法：选择惊厥评分在30－40的P77PMC大鼠35只，均分A－G7组，A组为对照组、G组预先30min腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L－NAME，分别于铃声刺激致惊后0．5、1、2、4,12h断头处死，取出脑组织分离双侧大脑皮层、海马等组织匀浆，测定一氧化氮及一氧化氮合酶，分别统计并进行t检验。结果：惊厥后0．5－1h皮层、海马一氧化氮、一氧化氮合酶逐渐升高，2h达峰值，4－12h恢复正常，应用L－NAME后，一氧化氮、一氧化氮合酶升高被抑制，但大鼠惊厥评分增高并致1例惊厥后死亡和明显延长惊厥持续时间。结论：惊厥后大鼠体内一氧化氮、一氧化氮合酶合成增加，给予合成酶抑制后能明显下降，但能加重惊厥程度和延长持续时间，提示一氧化氮于惊厥后升高，可能作为内源性抑制性性质，在惊厥发作自行终止机制中具有重要作用。     

CHANGES OF NITRIC OXIDE AND PROTECTIVE EFFECTS OF NITRIC OXIDE INHIBITORS IN NEWBORN RATS WITH SEPSIS

In a newborn rat model of sepsis, the changes of nitric oxide and the protective effects of methylene blue or/and dexaraethason were investigated. The results revealed that plasma nitric oxide levels were ele-cted at 6 h and peaked at 12 h after bacterial challenge. The treatment with methylene or/and dexam-etbasone was found to Munt hypoglycenua and hyperlacdcemla, to reduce the occurrence rate of loss ot re-sponse to pain, and to prolong the survival time. Moreover, therapy by dexamethasone was shown to de-crease the 24 h mortality. The results suggested that nitric coide play an important role during the course of fatal P. aeruginosa sepsis, hut it is clear that the clinical value of nitric oxide and its inhibitors need to be further studied.