TNFα对小鼠骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活力影响

目的观察肿瘤坏死因子α(TNFα)对KM小鼠骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力的影响。方法80只清洁级KM小鼠随机分为TNFα高剂量连续注射组(TH组,n=20)、TNFα低剂量连续注射组(TL组,n=20)、TNFα高剂量一次注射组(T1组,n=20)和正常对照组(C组,n=20)。密度梯度离心分离组织细胞膜,麦胚凝集素(WGA)亲和柱层析纯化膜胰岛素受体,外源聚谷-酪多肽底物同位素32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力,观察各组胰岛素刺激前后的离体骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化。结果1)TH和TL组基础(无胰岛素刺激)骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力均明显低于C组,且TH组明显低于TL组(P均<0.01);2)TH组和TL组胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均明显低于C组,且TH组明显低于TL组,(P均<0.01);3)T1组无论基础还是胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均与C组无显著差别(P>0.05)。结论TNFα可抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,在组织细胞膜胰岛素受体信号转导障碍中发挥重要作用。TNFα抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,需连续刺激,一次刺激作用效果不明显。     

胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶在重度烫伤大鼠胰岛素抵抗中作用的研究

以３０％体表面积背部皮肤全层烫伤大鼠为模型，通过建立肝细胞膜和骨骼肌细胞膜外源性底物磷酸化的分析方法，观察烫伤后３ｄ胰岛素刺激的胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶海性的改变，探讨创伤后胰岛素抵抗的分子机理。     

受体酪氨酸蛋白激酶的研究

酪氨酸蛋白激酶是细胞信号转导的主要信号酶之一，对细胞的生长、发育与功能调控起着重要的作用。受体型酪氨酸蛋白激酶是细胞内段具有酪氨酸激酶活性跨膜结构的酶蛋白受体，其胞外区与生长因子配体结合，然后激活胞内段的酶活性区启动信号转导，参与细胞的生长、增殖、转化及胚胎发育和肿瘤形成。主要介绍受体型酪氨酸蛋白激酶的结构、分类及其信号转导途径。     

胰岛素受体的分离纯化及其酪氨酸蛋白激酶特性的研究

本文利用差速离心,2%Triton X-100增溶,伴刀豆球蛋白A-琼脂糖,胰岛素-亲和胶及麦胚凝集素-亲和胶亲和层析分离纯化了人胎盘的胰岛素受体。纯化的受体经圆盘电泳及HPLC凝胶过滤得单一峰。SDS-电泳显示分子量分别为135000及90000的两条带。纯受体有自身磷酸化作用,且对外源性底物呈现酪氨酸蛋白激酶活性。有意义地是纯化的受体的磷酸化可受促癌剂促癌因子抑制。     

酪氨酸蛋白激酶受体B在人卵泡中的表达及意义

目的 探讨酪氨酸蛋白激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)在人卵泡中的表达及意义。方法 用免疫细胞化学方法检测TrkB在超促排卵妇女壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞、未受精或未成熟卵母细胞中的表达，并用Western免疫印迹方法检测TrkB在壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞中的表达水平。结果 壁层颗粒细胞、卵丘颗粒细胞、卵母细胞均有TrkB表达。壁层颗粒细胞表达量高于卵丘颗粒细胞。结论 脑源性神经营养因子在人卵巢可能通过与TrkB结合，参与颗粒细胞功能的完成和卵母细胞发育的调控。     

硝苯地平对肝细胞膜胰岛素受体的影响

目的：观察钙拮抗剂硝苯地平（NF）对正常大鼠肝细胞膜胰岛素受体的作用,探讨NF对胰岛素生物学效应的影响。方法：不同浓度（0．5μmol/L、1.0μmol/L和10．0μmol/L）NF灌注大鼠肝脏,或在胰岛素与大鼠肝细胞受体结合的反应体系中加入上述浓度NF,用放免法测定受体的结合能力。结果：NF灌注后大鼠肝细胞膜高亲和力胰岛素受体亲和常数（K1）及结合位点浓度（Q1）无显著变化;NF作用于反应体系,高亲和力胰岛素受体亲和常数（K1）及结合位点浓度（Q1）下降。结论：NF直接作用于反应体系,对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的结合能力产生一定程度影响。     

新生小牛肝组织胰岛素受体的功能

检测7例胎龄276～284d、年龄7～11h的新生小牛肝组织胰岛素受体功能。用WGA－Setherose亲和层析法提纯肝组织胰岛素受体（Ins-R），观察受体125I-胰岛素特异性结合率;用Scatchard模型分析Ins－R数目及亲和性；以γ32P－ATP示踪底物多聚Glu4：Tyr1的磷酸化程度，了解胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶（TPK）活性。同时检测血糖、皮质醇、胰高血糖素及胰岛素浓度，并分析各变量间的相关性。结果提示：肝组织Ins-R的TPK活性与年龄、胰岛素水平及胰岛素特异性结合率成正相关；新生小牛出生后不久肝组织Ins-R就具有一定的功能，且随着年龄增大而增强。     

烧伤后胰岛素受体信号传导缺陷机理的研究

目的：为了探索烧伤后胰岛素受体信号传递缺陷的机理，以阐明烧伤胰岛素抵抗的分子基础。方法：采用ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层杆纯化大鼠肝脏和肌肉细胞膜胰岛素受体，通过胰岛素受体蛋白γ－３２Ｐ磷酸化的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ放射自显影和外源底物磷酸化，观察烫伤大鼠早期胰岛素受体β－亚基自身磷酸化和受体酪氨酸蛋白激酶（ＩＲ－ＴＰＫ）活性变化。结果：３０％ＴＢＳＡⅢ°烫伤３ｄ大鼠肝和肌肉胰岛素受体β－亚基自身磷酸化能力明显下降；胰岛素受体ＴＰＫ活性亦明显降低并对胰岛素刺激的反应性明显减退。结论：胰岛素受体信号偶联障碍可能是烧（创）伤后胰岛素抵抗发生的分子基础。     

不同甲状腺机能与红细胞膜胰岛素受体的表达

本文通过对红细胞膜、胰岛素受体的测定，探讨了甲状腺机能对胰岛素受体数目以及亲和力的影响，为研究甲状腺机能与糖耐量异常提供了理论基础。     

放射性配基法研究胰岛素受体在肝硬变肝及肝癌细胞膜的分布特点

1　资料与方法1 1　资料来源1994年 7月～ 1996年 7月华西医科大学附属第一医院普外科住院患者 2 7例。其中肝硬化组 10例 ,男性 8例、女性 2例 ;年龄 30岁～ 47岁 ,平均 41. 5岁 ;肝功检查 3例ＡＳＴ轻度、中度升高 ;1例Ａ/Ｇ倒置 ,余项肝功正常。肝活检为结节型肝硬化 ,肉眼可见肝脏缩小 ,表面满布结节。 10例行门奇静脉断流术。肝癌组 10例 ,男性 9例、女性 1例 ;年龄 2 6岁～6 3岁 ,平均 45岁 ;肝功检查γ ＧＴ轻度、中度升高 4例 ;病检均为肝细胞癌 ,癌旁组织病检为结节性肝硬变。10例行肝癌切除术。对照组 7例 ,男性 5例、女性 2例 ;…     

脂肪组织中IRS-1相关的PI3K活性在多囊巢综合征 胰岛素抵抗中的作用

 【目的】 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)脂肪组织胰岛素受体底物I相关的磷脂酰肌醇3激酶(IRS-1-Associcrted-PI3K)的活性在PCOS发病中的作用?【方法】 PCOS患者和对照者根据体质量指数(BMI)分为PCOS肥胖组?PCOS非肥胖组? 肥胖对照组和非肥胖对照组,各12例,采用免疫沉淀?薄层层析?放射自显影半定量检测脂肪组织IRS-1相关的PI3K活性?【结果】 脂肪组织中IRS-1- Associated PI3K 活性在PCOS肥胖组为55% ± 24%,较非肥胖对照组84% ± 16%明显降低(P < 0.001);肥胖对照组为46% ± 22%,PCOS非肥胖组为71% ± 26%,均较非肥胖对照组明显降低(P < 0.001和P < 0.05), PCOS肥胖组和肥胖对照组之间以及PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组之间的差异均无显著性意义(P > 0.05)?【结论】 PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组脂肪组织IRS-1相关的PI3K活性均较非肥胖对照组明显减弱,可能抑制胰岛素受体后的信号传导,并与PCOS胰岛素抵抗的发生有关?     

NIDDM患者外周血红细胞膜胰岛素受体(EIR)与糖化血红蛋白(HbAic)的相关性研究

本文通过对35例非胰岛素依赖型糖尿病患者外周血红细胞膜胰岛素受体数(EIR)及糖化血红蛋白(HbAic)的测定,发现两参数之间的相关系数r=-0.694(P<0.01);而两种不同亲和力的胰岛素受体数之比(高亲和力结合位点数/低亲和力结合位点数)与HbAic的相关系数r’=-0.001(P>0.05).作者认为细胞膜上胰岛素受体绝对数目的变化在血红蛋白糖基化过程中与精化的产物HbAic呈负相关,而两种不同亲和力受体数目之比值则与HbAic无明显相关性.     

花生油对2型糖尿病大鼠海马CA1区胰岛素受体及胰岛素受体底物表达的影响

目的通过观察2型糖尿病大鼠海马CA1区胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、InsR底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)、InsR底物-2(IRS-2)表达的改变,研究花生油对2型糖尿病大鼠海马神经元InsR信号转导通路的影响,探讨花生油在防治糖尿病脑病中的作用及相关机制。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组(C组)、2型糖尿病组(T2DM组)、2型糖尿病给予2mL花生油组(T2DM+2mL组)及2型糖尿病给予5mL花生油组(T2DM+5mL组)。其中C组大鼠给以正常饮食喂养,其他3组大鼠给以高脂饮食喂养。2个月后,按25mg/kg体质量腹腔注射链脲佐菌素制成2型糖尿病模型,T2DM组、T2DM+2mL组及T2DM+5mL组大鼠继续给予高脂饮食。糖尿病造模1个月后处死全部大鼠,行脑冰冻切片,用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马CA1区InsR、IRS-1和IRS-2的表达。结果①T2DM组大鼠海马CA1区InsR表达比C组明显降低(P<0.05),T2DM+5mL组大鼠海马CA1区InsR表达明显高于未给予花生油的T2DM组(P<0.05)。②T2DM组大鼠海马CA1区IRS-1表达显著低于C组(P<0.05),T2DM+2mL组及T2DM+5mL组大鼠海马CA1区IRS-1表达均明显高于未给予花生油的T2DM组(P<0.05)。③T2DM组大鼠海马CA1区IRS-2表达比C组明显降低(P<0.05),T2DM+5mL组大鼠海马CA1区IRS-2表达明显高于未给予花生油的T2DM组(P<0.05)。结论 2型糖尿病大鼠海马CA1区存在胰岛素信号转导通路障碍,这可能是2型糖尿病脑病发生的原因之一。花生油可改善2型糖尿病大鼠海马区内胰岛素信号转导通路相关蛋白的表达,因此,花生油具有一定的保护大鼠糖尿病脑病的作用。     

改良胰岛素受体活性测定与临床应用

目的 研究糖尿病（ＤＭ）Ⅰ型和２型发病机制中胰岛素受体（ＩｎｓＲ）活性改变及其治疗作用。方法 应用改良红细胞ＩｎｓＲ活性放射受体分析法,测定１７例Ⅰ型糖尿病（ＩＤＤＭ）,其中初诊８例;４７例２型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）,其中初诊５例;２１例初诊ＮＩＤＤＭ在口服降糖药治疗前后,及２８例健康志愿者的ＩｎｓＲ活性。结果 与正常人相比,ＩＤＤＭ患者发病时ＩｎｓＲ活性升高,用胰岛素治疗后降低;ＮＩＤＤＭ患者虽不     

加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素受体基因表达的影响

[目的]探讨加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。[方法]造模大鼠随机分成正常组、模型组、加减抵当汤高、中、低剂量组、文迪雅组,用RT-PCR方法检测加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。[结果]加减抵当汤高、中剂量组能明显上调IR大鼠肝脏InRmRNA的表达（P〈0.05或P〈0.01）。[结论]加减抵当汤能上调InRmRNA的表达,可能是其改善IR的机理之一。     

胰腺癌细胞的增殖同膜脂质饱和度,膜胰岛素受体的关系

外源性表皮生长因子(或生长抑素)能促进(或抑制)胰腺癌细胞的增殖。胰腺癌细胞增殖速率的高低与细胞膜脂质饱和度的降、升;与膜胰岛素受体数量的增减密切相关。测定细胞膜脂质饱和度和胰岛素受体数量,是判断胰腺癌增殖状态的灵敏指标,有一定临床价值。     

胰岛素受体底物-1基因多态性与多囊卵巢综合征

目的 通过检测多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）病人的胰岛素敏感等指标,观察是否存在胰岛素抵抗,对ＰＣＯＳ病人胰岛素受体底物－１（ＩＲＳ－１）基因多态性进行分析,探讨ＩＲＳ－１基因与ＰＣＯＳ的关系,判断其可否作为ＰＣＯＳ胰岛素抵抗的致病基因。方法采用ＰＣＲ技术检测正常人与ＰＣＯＳ病人ＩＲＳ－１的等位基因与基因频率,据不同的基因型（ＧＧ、ＧＡ或ＡＡ）将病人分为３组,比较各组的体重指数、腰臀围比例、黄体生成     

原发性高血压家系胰岛素受体基因第17外显子变异分析

应用聚合酶链反应／单链构象多态性、PCR直接测序的方法，对6个原发性高血压家系（36人）和2个正常家系（8人）共44例受试者的胰岛素受体基因第17外显子基因变异进行了筛查，并测定了葡萄糖耐量曲线和胰岛素释放曲线以及血脂、血浆血管紧张素Ⅱ、血管紧张素原含量。结果显示，有5例受试者胰岛素受体基因第17外显子1058位编码子发生了单个碱基突变，以CAT代替了CAC但编码的组氨酸未变。该5例受试者中4例伴有高血压家族史，而且胰岛素受体基因1058位突变型轻野生型受试者空腹时血糖与胰岛素的比值低（P＜0．01），突变型的胰岛素敏感性低，而血浆血管紧张素Ⅱ水平较高（统计学处理未见显著差异，P＞0．05，可能由于突变型例数少）。因此推测，胰岛素受体基因1058位突变可能与高血压患者、有高血压遗传倾向老的胰岛素抵抗状态有关。