急性冠脉综合征患者OX40配体表达的变化

目的： 探讨急性冠脉综合征（ACS）患者外周血单核细胞表达OX40配体（OX40L）及血清可溶性OX40L（sOX40L）水平变化的临床意义。方法: 应用流式细胞术和双抗夹心酶联免疫测定法（ELISA）分别对正常对照组30例、稳定心绞痛（SA）40例（包括20例PTCA）、不稳定心绞痛（UA）50例、急性心肌梗死（AMI）30例患者血单核细胞表达OX40L及血清可溶性sOX40L水平进行检测。结果: UA组［(67.1±12.3)MFI］及AMI组［(70.2±18.3)MFI］血单核细胞表达OX40L,血清sOX40L水平［(35.7±8.4)ng/L,(38.1±10.5)ng/L］明显高于SA组［(23.1±6.7)MFI, (13.6±4.1)ng/L］和对照组［(20.8±8.1)MFI,(12.8±3.6)ng/L］。AMI患者血清sOX40L水平与UA组无明显差异,但AMI发病后24 h sOX40L有一升高峰值。PTCA后血清sOX40L明显高于PTCA前, 但血单核细胞表达OX40L无差异。结论: OX40L表达可能参与ACS的发生机制,且可能是冠脉斑块不稳定的活动性标志物。     

单核巨噬细胞极化在慢性活动性乙型肝炎中的表达及意义

目的:研究慢性活动性乙型肝炎患者单核巨噬细胞的数量与功能变化。方法:随机选择51 例慢性乙型肝炎患者(其中轻中度20 例,重度31 例)以及正常对照13 例。采用Percoll 分层液分离PBMCs,以CD14 标记单核细胞,流式细胞仪检测PBMCs 表面分子CD80、CD86、HLA-DR、CD163 的表达;ELISA 检测血清细胞因子IL-10、IL-12 与IL-23 的水平;免疫组织化学染色检测CD68 在肝脏的分布。结果:轻中度慢性乙型肝炎组、重度慢性乙型肝炎组CD80 表达水平低于对照组。慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞CD86 的表达低于对照组,其中重度组与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者HLA-DR 的表达低于对照组,其中轻中度组与重度慢性乙型肝炎组间HLA-DR 的表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。此外,慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞CD163 的表达明显高于对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者肝脏汇管区CD68 阳性细胞浸润增加,汇管区增大(P<0.05)。轻中度慢性乙型肝炎组、重度慢性乙型肝炎组与对照组血清IL-10 表达水平之间两两比较差异显著,均具有统计学意义(P<0.01)。结论:慢性乙型肝炎患者巨噬细胞参与肝脏病变的发生,外周血中单核细胞存在M1 型/ M2 型平衡失调,向M2 型极化的现象,可能参与其慢性化发展。     

Th17细胞在子痫前期患者外周血表达增加

观察正常妊娠妇女和子痫前期疾病患者外周血CD4+T细胞中Th17细胞和特异性转录因子维A酸相关孤独受体(retinoid-related orphan nuclear receptor,RORγt)的表达和意义。实验组为子痫前期疾病患者25例,正常妊娠妇女20例,未孕妇女20例。采集研究对象外周血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Th17细胞相关细胞因子IL-17A,IL-6,TNF-α的表达,Ficoll法分离外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠分选CD4+T淋巴细胞,逆转录-聚合酶联反应(RT-RCR)半定量检测CD4+T细胞中Th17细胞特异性转录因子RORγt的表达,流式细胞术检测CD4+IL-17+T细胞比例。子痫前期患者外周血清中IL-6、IL-17A的含量分别为(31.72±13.34)ng/L、(2.61±1.64)ng/L,高于正常妊娠组水平,差异有显著统计学意义(P<0.01),TNF-α在子二组间的表达分别为(18.00±8.64)ng/L和(11.69±3.68)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05);RORγt mRNA在子痫前期组的表达高于正常妊娠组,净光密度值差异有显著统计学差异(P<0.01),CD4+IL-17+T细胞在子痫前期组的表达为(1.83±0.42)%,高于正常妊娠组(0.87±0.26)%,差异有显著统计学意义(P<0.01)。子痫前期患者外周血CD4+T细胞中RORγt mRNA、Th17细胞以及Th17细胞相关细胞因子表达异常,可能在疾病的发病机理中起到重要作用。     

重型乙型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子表达及临床意义

目的:探讨重型乙型肝炎患者外周血单核细胞功能变化的特点及其意义.方法:应用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法对重型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子的表达及外周血中白细胞介素.10(IL-10)的水平进行检测,并结合临床资料加以分析.结果:与正常对照组比较,慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血单核细胞HLA-DR的表达水平逐渐下降,尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显;而慢性重型肝炎患者外周血中IL-10的水平则明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).相关分析表明,HLA-DR的表达水平与凝血酶原活动度呈正相关(rs=0.61,P＜0.01).慢性重型肝炎患者死亡与存活组比较,前者HLA-DR水平明显降低;而IL-10水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:外周血单核细胞HLA-DR的表达水平与慢性重型肝炎患者病情严重程度以及预后密切相关,检测外周血单核细胞HLA-DR分子水平有助于评价重型肝炎患者的免疫功能状态以及判断预后.     

乙型肝炎肝硬化患者外周血骨桥蛋白与IL-18水平变化的临床意义

目的：探讨慢性乙型肝炎、肝硬化患者外周血细胞因子骨桥蛋白与IL-18水平变化的临床意义。方法：应用ELISA法对102例慢性乙型肝炎、34例乙型肝炎肝硬化、95例HBV携带者及20名健康献血者（对照组）外周血细胞因子骨桥蛋白与IL-18表达水平进行了测定。结果：慢性乙型肝炎、肝硬化患者组外周血骨桥蛋白及IL-18表达水平明显高于对照组（P〈0.05）;肝硬化患者组骨桥蛋白、IL-18水平明显高于慢性乙型肝炎组（P〈0.05）;慢性乙型肝炎重型组骨桥蛋白、IL-18水平明显高于慢性乙型肝炎轻型组（P〈0.05）;慢性乙型肝炎患者血清总胆红素水平与骨桥蛋白和IL-18表达水平呈正相关关系（r=0.71,P〈0.05;r=0.78,P〈0.05）。结论：乙肝病毒感染性慢性肝脏疾病发生发展与细胞因子骨桥蛋白及IL-18水平变化相关,慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化患者外周血骨桥蛋白与IL-18表达水平呈正相关关系（r=0.74,P〈0.05）。     

FTY720抑制TLR4信号转导的炎症反应

FTY720是一种1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)受体拮抗剂。为阐明FTY720抑制炎症反应的机理,本研究采用流式细胞术检测FTY720对细菌脂多糖(LPS)刺激后小鼠脾脏细胞TLR4表达水平的影响。研究发现,注射适当剂量的FTY720可削弱LPS所引起的TLR4表达水平增强(FTY720处理组与对照组相比,TLR4+细胞构成比分别为6.7%±1.5%和38.6%±3.1%,P<0.01),并可消除LPS刺激所引起的外周血TNF-α、IFN-γ和IL-12等Th1型细胞因子表达水平增高(FTY720组血清TNF-α、IFN-γ和IL-12浓度分别为(72±22)ng/ml、(46±21)ng/ml和(19±4)ng/ml,LPS组分别为(300±75)ng/ml、(175±35)ng/ml和(50±8)ng/ml,均为P<0.01)。相反,FTY720组血清Th2型细胞因子IL-4水平与对照组相比分别为(7±3)ng/ml和(7±2)ng/ml,无显著性差异。在体外细胞培养实验中可观察到一致的结果。这些发现提示,FTY720可能通过抑制LPS/TLR4信息转导通路,下调TNF-α、IFN-γ和IL-12等Th1型细胞因子表达而抑制炎症反应。     

柳氮磺胺吡啶对溃疡性结肠炎患者血清IFN-γ、IL-4及黏膜炎症的影响

目的： 探讨柳氮磺胺吡啶（SASP）对溃疡性结肠炎（UC）患者血清干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL-4)和黏膜炎症的影响。方法： 活动期中度UC患者50例，口服SASP 1 g，每日3次，共6周，应用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-4，组织学检测黏膜炎症。结果： 患者治疗前血清IFN-γ为（31.6±4.3) ng/L，显著高于治疗后的(22.3±5.6) ng/L（P<0.05），治疗前IFN-γ明显高于对照组的(17.5±5.9) ng/L（P<0.01）；治疗前IL-4为(4.6±1.8) ng/L，显著低于治疗后的(8.9±2.0) ng/L（P<0.05），治疗前IL-4明显低于对照组的(10.9±2.7) ng/L（P<0.01）。治疗前后嗜酸性粒细胞浸润率分别为100.0%和90.0%（P<0.05），隐窝脓肿分别为48.0%和13.3%（P<0.01），黏膜组织学分级分别为（2.49±0.84）级和（1.31±0.75）级（P<0.01）。结论： SASP能明显逆转中度活动期UC患者的Th1和Th2细胞的失衡状态和UC炎症黏膜的隐窝脓肿，减少中性白细胞和嗜酸性粒细胞的浸润，从而促进炎症黏膜的愈合。     

非小细胞肺癌患者血清VEGF水平和外周血CK19 mRNA的表达

目的： 研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化和外周血中细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）mRNA的表达及相互关系。方法： 3组研究对象为NSCLC组患者96例，支气管、肺良性病变组40例，健康对照组25例，分别采用ELISA法进行血清VEGF的检测，RT-PCR法进行外周血CK19 mRNA表达水平的测定。结果： NSCLC组的血清VEGF水平为（346.3±95.6）ng/L,外周血CK19 mRNA的阳性率为63.5%，均显著高于其它2组（P<0.01）；且两者均随临床分期的递增而逐步升高，差异显著（P<0.05）；不同病理类型的NSCLC患者的血清VEGF水平及CK19 mRNA阳性率之间无显著差异（P>0.05）；NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性者，其血清VEGF水平为（407.4±121.2）ng/L，显著高于阴性患者（P<0.01）。结论： VEGF血清水平联合外周血CK19 mRNA的检测有助于对NSCLC的病情和预后进行判断，且不受肺癌病理分型的影响。     

肝移植围术期血液中单核细胞TLR4表达和血清细胞因子变化的关系

目的： 探讨肝移植围术期血液中单核细胞TLR4及血清细胞因子浓度的变化。方法：采集15例肝移植患者外周静脉血，用流式细胞仪检测单核细胞TLR4的表达；ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-8，分析TLR4表达与细胞因子的关系。结果：单核细胞TLR4在新肝期3 h、新肝24 h显著上调表达(P<005)；新肝24 h细胞因子的浓度显著高于其它各时间点 (P<001)；新肝24 h时TNF-α、IL-1β和IL-8的浓度与单核细胞TLR4的表达呈正相关(P<005)；发生急性肺损伤患者TLR4表达强且血清细胞因子水平升高。     

急性呼吸窘迫综合征患者血浆TNF-α、IL-6、IL-10和IL-13水平变化

目的：通过检测分析急性呼吸窘迫综合征（ARDS）和全身炎症反应综合征（SIRS）病人血浆促炎症细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和抗炎细胞因子白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素13（IL-13）水平的变化，探讨这些细胞因子在ARDS炎症发展机制中的作用。 方法： 选择临床诊断ARDS病例22例和SIRS 8例，以及正常对照10例，收集血样品，采用酶联免疫法（ELISA）检测TNF-α、IL-6和IL-10、IL-13蛋白含量。 结果： ARDS病人血浆TNF-α、IL-6、IL-10、IL-13含量分别为(629.30±187.00)ng/L、(261.10±71.30)ng/L、(458.10±111.93)ng/L、(5.21±2.02) ng/L，SIRS病人则分别为(206.10±85.90) ng/L、(141.40±41.50)ng/L、(259.60±54.34) ng/L、(1.69±0.39) ng/L，两者血浆细胞因子水平比较有显著差异(P<0.01)；但SIRS和ARDS病人的细胞因子水平均显著高于正常对照组(P<0.01)。 结论： TNFα、IL-6是SIRS和ARDS演变中的重要促炎细胞因子，抗炎细胞因子IL-10和IL-13的过度释放在促进炎症反应失控和ARDS发展中发挥一定作用。     

Do CCR5 (CCR5Δ32) and TLR3 (RS5743313) gene polymorphisms prevent chronic hepatitis B infection?

Hepatitis B virus (HBV) is still a significant health problem in human. HBV severity or sensitivity of patients may be based on the individual genetic factors significantly. The aim of this study is to investigate the association of CCR5 (CCR5Δ32), TLR3 (rs5743313) functional gene polymorphisms, interferon-gamma (IFN-ɣ) level in HBV infection, which are thought to play an important role in innate and acquired immunity in patients who have undergone HBV seroconversion and those who have chronic hepatitis B disease and receive treatment. One hundred patients who are became naturally immune against HBV infection (HBsAg negative, anti-HBc IgG, and anti-HBs IgG positive), and 100 patients with chronic hepatitis B infection (>6 months HBsAg positive) who are receiving oral antiviral therapy were compared for CCR5Δ32, TLR3 (rs5743313) genotypes and serum IFN-ɣ level. It was found that CCR5Δ32 polymorphism (Wt/Δ32 and Δ32/Δ32) was significantly higher in the chronic hepatitis B group (p = 0.048) but not for TLR3 gene polymorphism. However, serum IFN-ɣ level was significantly higher in the HBV seroconversion group (75 ± 89 ng/ml) than in the chronic hepatitis B group (4.35 ± 17.27 ng/ml) (p < 0.001). In conclusion, a higher CCR5Δ32 allele frequency in patients with chronic hepatitis B might be considered as a marker of progression to chronic hepatitis.     

IL-38 抑制LPS / TLR4 诱导炎症减轻类风湿关节炎的机制研究

目的:探讨IL-38 和TLR4 在类风湿关节炎中的潜在关联及其在类风湿性关节炎中致病的机制。方法:选取2013 年1 月至2016 年2 月间本院收治的41 例类风湿关节炎患者(观察组)及45 例本院实施创伤后滑膜切除术的患者(对照组)为研究对象。收集观察组和对照组的外周血单个核细胞(PBMCs)、滑膜组织及血清。荧光定量PCR 检测PBMCs 及滑膜组织中IL-38 及TLR4 的mRNA 水平。ELISA 检测滑膜液及血清中IL-38 的表达,Western blot 检测滑膜组织中IL-38 及TLR4的表达。LPS 和/ 或IL-38 刺激RAW264.7 细胞,ELISA 检测RAW264.7 细胞上清中IL-6、IL-8 及TNF-α的含量,荧光定量PCR检测RAW264.7 细胞TLR4、IL-6、IL-8 及TNF-α的表达。NF-κB 激活-核转运试剂盒及Western blot 检测NF-κB 信号的激活水平。结果:与对照组相比,类风湿关节炎患者PBMCs、血清及滑膜组织和滑膜液中IL-38 水平显著升高,而TLR4 水平也显著升高,Pearson 相关分析显示二者呈负相关。LPS 和/ 或IL-38 刺激RAW264.7 细胞后,IL-38 能够抑制LPS 诱导的TLR4、IL-6、IL-8 及TNF-α表达,进一步的分析显示,IL-38 能抑制NF-κB 信号途径激活,因此推测IL-38 可能是通过抑制NF-κB 信号途径激活从而抑制LPS/ TLR4 信号诱导的炎症因子表达。结论:IL-38 能抑制LPS/ TLR4 诱导炎症减轻类风湿关节炎,其机制可能是通过抑制NF-κB 信号途径的激活。     

慢性重型乙型肝炎患者血清IL-23水平检测及其意义

目的 检测慢性重型乙型肝炎患者血清中IL-23表达,探讨IL-23水平与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)及HBV DNA载量的相关性.方法 用酶联免疫吸附法(ELISA)检测50例慢性重型乙型肝炎患者(重肝组)及18名健康人(对照组)血清中IL-23表达,并与患者ALT、AST、TBil、HBV DNA载量进行相关性分析.结果 重肝组患者血清中IL-23表达高于对照组,两组之间的差异有统计学意义(P＜0.05);IL-23水平与ALT、AST呈正相关(P＜0.05),与TBil、HBV DNA载量无相关性(P＞0.05).结论 慢性重型乙型肝炎患者血清中IL-23表达增高,与炎症程度相关,可能参与慢性重型乙型肝炎的发病.     

慢性乙型肝炎患者血清IL-17、IL-6水平研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素-17（IL-17）水平变化及其在慢性肝炎肝损伤中的意义.方法 采用ELISA方法检测42例慢性轻度乙肝患者、37例慢性中度乙肝患者、38例慢性重度乙肝患者及50例正常对者血清IL-17浓度,采用放射免疫方法测定血清IL-6、IL-8浓度.结果 IL-17、IL-6、IL-8水平在各组乙肝患者血清中均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,慢性轻度乙肝患者与中度患者相比,差异无统计学意义,慢性重度患者与轻、中度患者相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 IL-17可能在慢性乙型肝炎的疾病过程中扮演着免疫与炎症的双重角色,作为一种新近发现的细胞因子,它可能在临床上对乙肝患者的治疗提供一种新的思路.     

小儿肺炎中PCT、WBC、hs-CRP检测对疾病诊断及预后判断价值分析

目的 分析小儿肺炎中PCT、WBC、hs-CRP检测对疾病诊断及预后的判断价值.方法 选取2015年5月至2016年4月在本院住院治疗的肺炎患儿120例作为观察组,健康儿童65例作为对照组.检测治疗前后患儿及健康儿童血清PCT、WBC、hs-CRP的变化.结果 治疗前,细菌感染组WBC数量(15.5±3.4)×109/L、hs-CRP水平(19.8±2.6) mg/L和PCT水平(21.9±2.1)ng/mL均明显高于非细菌感染组(6.8 ±2.3)×109/L、(4.5±2.3)mg/L、(4.7±1.8) ng/mL和健康对照组(8.1 ±1.4)×109/L、(3.5±1.2) mg/L、(1.8±0.5) ng/mL,且差异具有统计学意义(P＜0.05).而非细菌感染组和健康对照组的WBC、hs-CRP和PCT结果差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,细菌感染组WBC数量(7.3±1.4)×109/L、hs-CRP水平(5.1 ± 1.2) mg/L和PCT水平(2.3 ± 1.2) ng/mL均明显低于治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05);WBC、hs-CRP、PCT联合检测的灵敏性95.2％、特异性93.0％、准确度93.3％显著高于WBC、hs-CRP、PCT单独检测,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 在小儿肺炎治疗过程中,动态监测患儿血清的WBC、hs-CRP、PCT的变化,并结合临床,有助于诊疗和判断患儿疾病愈后的情况,具有显著的临床意义,值得推广应用.     

慢性乙型肝炎患者血清趋化因子RANTES水平的检测及意义

目的 了解慢性乙型肝炎患者血清趋化因子RANTES水平,探讨不同病情慢性乙型肝炎患者血清RANTES水平变化情况及原因分析.方法 选择144例慢性乙型肝炎患者,按照病情分为轻中度组(46例)、重度组(51例)及重型肝炎组(47例)以及18名健康人作为正常对照组,应用ABC-ELISA方法检测患者及正常健康人血清中趋化因子RANTES浓度,利用SPSS 13.0软件进行各组之间统计分析.结果慢性乙型肝炎患者血清中RANTES的浓度均比正常对照组增高,且随着慢性乙型肝炎患者病情的加重,血清中RANTES浓度逐渐升高,但重型肝炎组较重度肝炎组下降,正常对照组、轻中度肝炎组、重度肝炎组及重型肝炎组患者血清RANTES浓度分别为(29.46±152.00)ng/L、(2227.06±790.80)ng/L、(5878.49±3334.58)ng/L和(3482.77±2315.62)ng/L,各组之间差异比较均有统计学意义(P<0.05).结论 慢性乙型肝炎患者血清中RANTES表达水平增高,趋化因子RANTES可能参与慢性乙型肝炎的发病.     

脓毒症婴幼儿Toll样信号传导途径相关因子改变的临床意义

目的 探讨脓毒症婴幼儿Toll样信号传导途径相关因子改变的临床意义。方法 选取广东省肇庆市端州区妇幼保健院和广州市儿童医院2009年6月至2011年3月收治脓毒症患儿20例（脓毒症组）,重症脓毒症感染性休克及多器官功能障碍综合征患儿20例（严重脓毒症组）,以同时期20例健康婴幼儿为健康对照组。用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMC)表面Toll样受体2(TLR2)、TLR4的表达情况;酶联免疫吸附法检测血浆中前炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的浓度变化。结果脓毒症组和严重脓毒症组婴幼儿外周血PBMC表面TLR2、TLR4的表达阳性率比健康对照组均明显增高[(52.48±27.37)％和（80.56.±42.95）％比(15.63±9.28)％;(26.58±14.26)％和(49.32±23.74)％比(2.84±2.0r7)％;均P＜0.01];严重脓毒症组婴幼儿PBMC表面TLR2、TLR4的表达明显高于脓毒症组(P＜0.01)。与健康对照组比较,脓毒症组血浆TNF-α和IL-6水平均明显增高,且严重脓毒症组较脓毒症组升高更加明显(P＜0.01)。结论 TLR2和TLR4可能共同参与了婴幼儿脓毒症时机体对病原微生物的识别,激活TLR信号通路。婴幼儿脓毒症时TLR2和TLR4可能介导了血清前炎性因子TNF-α,IL-6的产生和释放。     

Downregulation of TLR7/9 leads to deficient production of IFN-α from plasmacytoid dendritic cells in chronic hepatitis B

Objective

To investigate whether Toll-like receptor (TLR) 7 and TLR9-mediated interferon α (IFN-α) production in plasmacytoid dendritic cells (pDCs) is compromised in patients with chronic hepatitis B virus (HBV) infection.

Materials and methods

Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were prepared from 32 chronic HBV patients and 13 healthy volunteers, and treated with loxoribine or cytidine phosphate guanosine (CpG) oligodeoxynucleotides (ODN). Interferon α in the supernatant was measured by sandwich ELISA. PDC frequency and the expression levels of TLR7 and TLR9 in pDCs were quantified by flow cytometry. The serum viral load of HBV was quantified using a highly sensitive real-time PCR kit.

Results

Compared to cells from healthy control group, PBMCs and pDCs from the HBV group showed significantly decreased production of IFN-α in response to ligand for TLR7 (loxoribine) and TLR9 (CpG ODN, P?P?Conclusion Impaired IFN-α production from pDC may contribute to the immunopathogenesis of chronic HBV infection, which may be the result of a reduced amount of pDCs as well as decreased expression of TLR7 and TLR9 on pDCs.