影响周围神经再生的细胞学因素

周围神经再生过程涉及雪旺细胞的变性、增殖和迁移;巨噬细胞向损伤区的定向趋化,对变性雪旺细胞和崩解髓鞘的吞噬;轴浆的运输和轴突的再生等方面的变化,其间有多种细胞因子参与起作用.本文对影响周围神经再生的几种主要的细胞因素进行总结和分析.……     

视神经损伤与再生

中枢神经损伤后的再生问题一直是近年来研究比较活跃的领域 ,视神经作为中枢神经的代表在中枢神经系统 (ＣＮＳ)损伤及再生的问题中得到了广泛而深入的研究。周围神经系统 (ＰＮＳ)和ＣＮＳ损伤后都将发生一系列形态学的变化 :损伤远端轴突发生溃变 ,近端发芽 ,损伤区周围胶质细胞增多。但ＣＮＳ的发芽不继续生长 ,发芽很快夭折。之所以发生这种变化是因为ＣＮＳ与ＰＮＳ的周围环境不同 ,主要是它们的髓鞘细胞类型不同 ,ＰＮＳ的髓鞘是雪旺细胞 ,而ＣＮＳ是少突胶质细胞。雪旺细胞可产生多种神经营养因子 ,能促进ＰＮＳ轴突再生 ,少突胶质细…     

脊髓损伤修复的实验研究及基因治疗的应用

脊髓损伤后影响神经轴突生长或再生的因素可分为两大类。一类是能促进诱导神经生长的因素 :如多种促进神经生长的神经营养因子和为再生的轴突提供桥梁及管道、支持引导神经生长的雪旺细胞及细胞外基质成分 ;另一类是抑制轴突生长的因素 :如脊髓断端产生的囊腔和瘢痕组织以及一些抑制性生长因子等。治疗脊髓横断性损伤的研究 ,主要是围绕这两个方面进行。目前脊髓移植、神经营养因子的应用以及利用基因工程技术 ,使神经营养因子或促有丝分裂物质基因在损伤的脊髓局部不断表达是重要的研究方向。1　脊髓移植Ｃａｊａｌ(192 8)认为中枢神经系统…     

Co-transplantation of Neural Stem Cells and Schwann Cells within Poly (lactide-co-glycolide acid) Scaffolds Facilitates Axonal Regeneration in Hemisected Rat Spinal Cord

背景 为了促进脊髓损伤后的轴突再生,已经开发了各种组织工程学方法。我们的目的是研究是否神经干细胞能在PLGA支架中存活,与雪旺细胞共移植时被诱导向神经元分化,并形成突触联系,最终促进轴突及髓鞘化和运动功能。 方法 神经干细胞和雪旺细胞种植于PLGA取向支架,然后移植于半横断大鼠脊髓。 对照组大鼠也半横断后,但移植的支架中仅有神经干细胞或无细胞。分析神经干细胞存活、迁移、分化及突触形成情况,轴突再生及髓鞘化情况和运动功能。 结果 有神经干细胞存活下来,但是大部分迁移到邻近脊髓而死亡。与雪旺细胞共移植,神经干细胞存活情况改善,并且可被诱导向神经元分化,还肯能形成突触连接。当种植细胞后,轴突再生和髓鞘化情况及运动功能改善了。实验组的运动诱发电位恢复率及波幅显著高于对照组。同侧二次半横断后运动诱发电位再次消失,运动功能消失数天后恢复。但是对侧二次半横断后双侧运动功能完全消失。 结论 神经干细胞可在PLGA支架内存活。在体内,雪旺细胞可促进神经干细胞存活,并且向神经元分化,后者甚至可能形成了突触连接。种植了细胞的支架促进了轴突再生和髓鞘化及运动功能恢复。但是再生轴突对运动功能的恢复有限。     

干细胞移植用于周围神经再生的研究进展

周围神经再生是复杂的过程,突出表现为沃勒变性、轴突再生和再髓鞘化。施万细胞在神经再生的多个方面发挥不可或缺的作用,但用于细胞基础治疗的施万细胞的获取受到采集的侵袭性和供体部位发病率的限制。干细胞移植为周围神经再生提供了一种基于细胞的替代疗法,具有多种再生益处,机体组织多种干细胞(如肌源干细胞、间充质干细胞等)具有多向分化能力,可稳定传代。在相关神经分化诱导因子的干预下,干细胞具有分化成类施万细胞的潜力,可募集巨噬细胞以清除细胞碎片改善微环境,还能分泌神经营养因子促进轴突生长和再髓鞘化。目前,对各种类型干细胞在周围神经再生中应用的研究正在进行。     

诱发电位在监测细胞移植修复脊髓损伤大鼠中的应用

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是一种严重致残性伤害，因脊髓结构、功能损害导致损伤平面以下脊髓段支配的运动、感觉、自主神经功能障碍及多种并发症的发生。但对于SCI，现在还没有效的治疗方法，究其原因，一方面是由于中枢神经系统（central nervous system，CNS）损伤后再生能力有限，另一方面是对CNS损伤的再生和调控缺乏足够的认识。近20年来，随着基础医学和现代科学技术的迅速发展，尤其是在细胞和分子水平上对SCI后继发性损伤的病理机制的研究不断深入，采用组织工程方法，直接将有活性的种子细胞移植治疗脊髓损伤，使损伤轴突修复、再生和恢复功能是治疗脊髓损伤的一种有效方法。目前，可用于移植的细胞主要有神经干细胞、雪旺细胞、少突胶质细胞，嗅鞘细胞等，均能促使脊髓神经功能得到不同程度的改善。同时，[第一段]     

Rho 激酶抑制剂在视神经损伤后修复再生的研究进展

在视神经的损伤过程中,视网膜神经节细胞因其自身逆行退化产生凋亡,同时其轴突在损伤后缺乏再生能力。既往研究认为：视神经无法在损伤之后再生,进而因视神经损伤后导致的视力损害也无法得到恢复［1］。已知视神经纤维表面由少突胶质细胞构成髓鞘细胞,故而视神经与其他周围神经不同,属于中枢神经系统,其组织学结构类似于脑实质和脊髓组织中白质部分［2］。近年研究发现,RhoA ／ROCK 通路在中枢神经轴突再生过程中,可以被少突胶质细胞髓鞘糖蛋白、Nogo-A 和髓鞘相关糖蛋白等激活,从而抑制轴突再生［3］。作为目前唯一获准应用于临床的 Rho 激酶抑制剂,法舒地尔对于 RhoA ／ROCK 通路具有较强的抑制作用,进而对于受损的神经起到保护。目前,研究已证实,法舒地尔通过抑制 Rho 激酶,在心血管疾病、脑卒中和神经系统疾病中均具有一定的作用［4］。本文主要针对以法舒地尔为代表的 Rho 激酶抑制剂在视神经损伤后修复再生的机制和临床应用进行探讨,报道如下。     

嗅神经鞘细胞与雪旺氏细胞在脊髓损伤修复中的作用

雪旺氏细胞和嗅神经鞘细胞都能分泌多种神经营养因子、细胞外基质及黏附因子,提供有利于脊髓神经轴突再生的微环境,且两者都能促进轴突的再髓鞘化和再生.嗅神经鞘细胞具有在中枢神经系统内长距离迁移的能力,能够促进神经轴突穿越移植物-宿主界面重新进入中枢神经系统,其与星型胶质细胞相容性也更好.而雪旺氏细胞在促进轴突髓鞘形成的能力上可能更强.该文就两者在脊髓损伤修复中的作用进行综述,以促进中枢神经再生机制的研究,并为进一步修复脊髓损伤奠定理论基础.     

嗅神经鞘细胞与雪旺氏细胞在脊髓损伤修复中的作用

雪旺氏细胞和嗅神经鞘细胞都能分泌多种神经营养因子、细胞外基质及黏附因子,提供有利于脊髓神经轴突再生的微环境,且两者都能促进轴突的再髓鞘化和再生。嗅神经鞘细胞具有在中枢神经系统内长距离迁移的能力,能够促进神经轴突穿越移植物一宿主界面重新进入中枢神经系统,其与星型胶质细胞相容性也更好。而雪旺氏细胞在促进轴突髓鞘形成的能力上可能更强。该文就两者在脊髓损伤修复中的作用进行综述,以促进中枢神经再生机制的研究,并为进一步修复脊髓损伤奠定理论基础。     

脊髓损伤修复的研究进展

脊髓损伤(Spinal Cord Iniury．SCI)是目前公认的疑难病之一．它具有高致残率、高耗费、低死亡率、患者主要为青壮年等特点，对受害者是灾难性事故。如何修复损伤脊髓及恢复损伤脊髓的功能目前仍没有有效的对策．究其原因在于成熟中枢神经再生困难．但近年来对脊髓再生的一系列的实验研究取得了令人鼓舞的结果。许多新的方法如神经营养因子．生长抑制因子阻滞剂，电刺激，神经移植包括周围神经移植、胚胎脊髓移植、神经干细胞移植、嗅鞘细胞移植．基因治疗等均可使成年动物表现出某种程度的恢复。     

Survival and migration of Schwann cells after the vascularized peripheral nerve grafted into spinal cord in rats

Objective：To study the survival and ability of inducing axonal regeneration of the Schwann cells after the peripheral nerve being grafted into spinal cord. Methods：A total of 30 adult female Wistar rats were randomly divided into the VN （vascularized peripheral nerve） and PN （peripheral nerve） groups. A 5-mm spinal cord defect of the left posterior column was made at the T1-3 vertebral level. The defect was grafted with the vascularized or isolated peripheral nerve respectively. The survival and proliferation of the Schwann cells were assessed by histological and morphometric analysis 8 weeks after the operation. Resuits：In the VN group, the peripheral nerve grew into the cord with lots of Schwann cells survived and proliferated, and had more NF and S-100 positive fibers than in the PN group. Conclusion：The vascularized peripheral nerve enhances the survival and proliferation of the Schwann cells and prompts the regener- ation of injured axon of the central nerve system to certain degree.     

神经轴突损伤后再生修复的治疗展望

脊髓损伤的病因有脊髓休克、脊髓挫裂伤、脊髓受压。损伤的治疗主要是手术解除脊髓的压迫,利用内固定恢复脊柱的序列和稳定性,维持椎体的正常形态和椎间隙的高度。而手术对于神经细胞的损伤没有治疗作用。目前细胞移植是治疗脊髓神经损伤的重要手段,移植的细胞可以分化为神经元和神经胶质细胞,并分泌大量的神经生长因子,促进损伤后神经轴突的再生,对脊髓损伤和外周神经损伤治疗的研究有极大的推动作用。     

GDNF基因修饰的雪旺细胞对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的应用携带胶质细胞源性神经营养因子基因的逆转录病毒载体质粒(pLXSN-GDNF)对体外培养的雪旺细胞进行基因修饰,并结合细胞外基质凝胶及生物可降解聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)管构建神经移植复合体,用于大鼠坐骨神经缺损的修复,同时对其促轴突再生及神经元保护作用予以检测评价.方法 40只成年Wistar大鼠随机分为4组:A组(n=10) 细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;B组(n=10)雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;C组(n=10) GDNF基因修饰的雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;D组(n=10)自体神经桥接组.损伤各组12周时应用神经电生理及甲苯胺蓝染色和透射电镜观测神经再生情况,辣根过氧化物酶神经逆行示踪技术用于脊髓前角运动神经元再生评价.结果 12周时再生神经运动传导速度检测、甲苯胺蓝染色轴突形态计量学分析、透射电镜超微结构观察以及脊髓前角运动神经元再生评价结果提示:C组优于A、B组,而与D组相比无明显差异.结论雪旺细胞的转基因处理可能弥补单纯细胞移植神经营养因子含量的不足,而可能达到与自体神经移植相似的效果.     

干细胞在周围神经再生中的应用研究进展

周围神经损伤是一种非常常见的疾病,临床严重程度不一,但对患者的工作效率和生活质量影响很大。目前治疗方法有限,作为首选的外科治疗在许多情况下不能提供令人满意的功能恢复。因此,如何更好地对周围神经损伤进行治疗一直是医学界的难题。在神经修复机制的研究中发现,周围神经损伤后伴随着复杂的再生过程,包括沃勒变性、轴突出芽以及髓鞘再生。施万细胞(Schwann cell,SCs)是外周神经系统的支持细胞,在神经损伤的生理反应和再生中起着不可或缺的作用。自体SCs的局限性包括获取困难、往往伴随着一定的侵袭性以及供体并发症、有限的扩增能力以及来源有限等限制其临床应用。随着生物医学的发展,人们把目光投向干细胞,实验发现干细胞是具有自我更新能力的多能细胞,有望改善神经损伤后功能恢复。干细胞可以分化为SCs样细胞,增强神经营养作用以及促进髓鞘形成,而不存在自体SCs的缺点,为改进现有治疗提供了途径。目前,很多学者研究各种类型的干细胞用于周围神经再生,根据干细胞来源有骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、牙髓间充质干细胞、神经干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、皮肤来源前体细胞以及肌源性干细胞等。本文就近年来上述干细胞在周围神经再生中的研究进展作一综述。      

嗅鞘细胞的研究进展

神经损伤与再生研究是当今神经科学领域的热点,在众多研究方法之中,细胞移植为一种理想的研究治疗手段.选择的移植材料是否理想,直接关系到神经再生及其功能恢复.近年来,对嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的研究呈现出如火如荼的局面,对于神经损伤的修复及病变的治疗显示出了广阔的临床应用前景.研究发现,OECs终身具有神经再生功能,还能够释放多种神经营养因子,神经粘附分子等,被认为是髓鞘化能力最强的胶质细胞,它具有星型胶质细胞和雪旺细胞的特点,并迁徙于周围神经和中枢神经,具有促进损伤神经轴突再生的能力,还能帮助神经轴突穿越损伤的瘢痕区域到达损伤的靶细胞,帮助加速神经功能的恢复.本文就近些年OECs的研究进行了综述.     

自体静脉套管联合雪旺细胞移植对周围神经缺损再生的影响

目的观察自体静脉套管联合雪旺细胞移植对周围神经缺损再生的影响,以探索周围神经缺损修复的新的治疗方法。方法20只新西兰白兔随机分为实验组和对照组,每组10只。取兔自体股外静脉,套于神经两断端之间,制成静脉套管,实验组向静脉套管内注射雪旺细胞、对照组注射生理盐水,术后6周通过光镜及透射电镜观察神经再生情况,采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计分析,组间均值比较采用t检验,P〈0.05为差异有统计学意义。结果HE染色结果显示,实验组有髓神经和无髓神经数量较多,排列较整齐,髓鞘清晰可见,纤维数量较少。对照组有一定数量无髓神经,而有髓神经少见,纤维数量较多。t检验结果显示差异具有统计学意义（P〈0.05）。电镜观察实验组有髓神经纤维数量较多,排列较整齐,髓鞘清晰可见,纤维数量较少。可见雪旺细胞与有髓神经纤维相连。对照组有髓神经纤维和无髓神经纤维数量较少,排列不整齐,髓鞘不清晰,纤维数量较多,无雪旺细胞。结论本研究结果表明静脉套管可以促进周围神经再生;雪旺细胞注入神经缺损的静脉套管对周围神经再生的作用优于单纯使用静脉套管。     

神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究

目的：研究周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白（Growth-associated protein,GAP-43)mRNA表达和蛋白质合成的变化规律。方法：建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型，用原位杂交和免疫组化技术观察大鼠腰髓和背根神经节的GAP－43mRNA表达和蛋白质合成变化。结果：大鼠坐骨神经损伤后，腰髓腹角运动神经元和感觉神经元GAP－43mRNA表达和蛋白质合成增强。结论：周围神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达显著增强，神经再生完成后表达减弱，表明GAP－43在神经再生过程中起重要作用。     

大鼠坐骨神经损伤中GAP—43免疫电镜初步观察

目的：进一步研究ＧＡＰ－４３（生长相关蛋白４３）在周围神经损伤和再生中的表达部位及其作用。方法：采用免疫电镜技术对６只大鼠坐骨神经损伤和再衙的ＧＡＰ－４３表达情况作初步观察。结果：电镜观察发现大鼠腰骶髓神经元、背根神经节神经元、胶质细胞等胞浆和胞核表密集的ＧＡＰ－４３免疫反应颗粒沉积。结论：据结果和笔者筠有的ＧＡＰ－４３免疫组化研究，发现周围神经损伤和再生中，可引起ＧＡＰ－４３较广泛斩表达；其表达     

血小板源性生长因子B在损伤周围神经再生中的作用

目的：观察血小板源性生长因子B（PDGF-B）在损伤大鼠坐骨神经中的表达,旨在阐明其在末梢神经再生中的作用。 方法：分别构建大鼠坐骨神经切割伤和碾压伤模型,应用免疫组织化学S-P法检测PDGF-B的表达。结果：两类损伤模型中,损伤近端神经和再生轴突PDGF-B的表达均增强。两类损伤模型均可见损伤神经远端的雪旺氏细胞PDGF-B表达量明显增加,在碾压伤模型中,随着轴突-雪旺氏细胞关系的恢复,PDGF-B表达水平下降,并最终恢复正常;在切割伤模型中,二者关系不能恢复,PDGF-B减至极低水平。 结论：坐骨神经损伤后PDGF-B的表达增强在末梢神经再生中发挥重要作用。     

转化生长因子β1在大鼠周围神经再生过程中的作用

目的：探讨转化生长因子β1(TGFβ1)在大鼠周围神经损伤后再生过程中的作用及是否参与了再生中脊髓前角运动神经元碱性成纤维生长因子（bFGF）表达的调节。方法: 将48只成年SD大鼠在右侧坐骨神经压榨损伤术后随机分为TGFβ1组和生理盐水（NS）组。TGFβ1组在坐骨神经压榨损伤近心端注射TGFβ1 50μL(0.1μg/mL)，术后隔日在右侧下肢后群肌内注射TGFβ1 50μL, 对照组同样方法注射等量NS。实验动物分别存活3，7，14和21d后运用免疫组织化学方法检测TGFβ1对脊髓前角运动神经元bFGF蛋白的表达变化。存活21d的实验动物还用半薄切片和Fast Blue逆行荧光示踪方法观察TGFβ1对坐骨神经损伤后远端的再生情况。结果：TGFβ1组脊髓前角bFGF蛋白的表达高于NS组（P<0.05）；损伤远侧端再生轴突数目、直径与髓鞘厚度TGFβ1组均明显好于NS组（P<0.05）； TGFβ1实验组脊髓和背根节内荧光标记细胞数量明显多于NS组（P<0.01）。结论：外源性TGFβ1可以促进周围神经损伤后再生；TGFβ1上调周围神经损伤后脊髓前角运动神经元bFGF的表达。