人玻璃体膜及视网膜前膜免疫组化研究

目的 鉴定人玻璃体膜及视网膜前膜的细胞成分。方法 对增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）１２例和外伤性ＰＶＲ８例患者经玻璃体手术取出的增生膜标本,用鼠抗人角蛋白、波形蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和ＣＤ１４等４种单抗做免疫组织化学ＡＢＳ法染色并观察。结果 １２例ＰＶＲ膜抗角蛋白染色均为阳性,６例抗ＧＦＡＰ阳性,１０例抗ＣＤ１４阳性;８例外伤性ＰＶＲ膜２例抗角蛋白染色阳性,７例抗ＧＦＡＰ阳性,３     

增殖性玻璃体视网膜病变中视网膜前膜的台盼蓝染色

目的：明确台盼蓝是否有助于增殖性玻璃体视网膜病变中视网膜前膜的去除。方法：10例增殖性玻璃体视网膜病变化玻璃体切除手术的患者，剥除视网膜前膜，直到不能清楚辨认为止。液气交换后，注入0．06％台盼蓝溶液于视网膜膜表面。1min后，去除多余的染料，气液交换后，完成视网膜前膜的剥除。剥除的视网膜前膜标本送透射电镜分析。主要结果测量：每例患者在手术中，对剥除台盼蓝染色的视网膜前膜效率进行评分。结果：所有患者眼内视网膜前膜台盼蓝染色是一种有用的辅助方法，手术中使视网膜表面膜更清楚辨认，更易于剥除。在着染的视网膜前膜与无着染的其下面的视网膜组织间建立了很好的对比度。电镜显示只有视网膜表面膜组织被去除了。术后3个月随访观察未见有与膜染色相关的副作用发生。结论：由于台盼蓝可促使视网膜前膜完整、安全的去除，所以在手术治疗增殖性玻璃体视网膜病变中，台盼蓝可能成为一种重要的新工具。     

维甲酸与增殖性玻璃体视网膜病变

增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是导致视网膜复位手术失败的主要原因，减少术后PVR的发生是手术成功的重要环节。维甲酸具有抑制视网膜色素上皮（RPE）细胞增殖的作用，多种给药途径表明，维甲酸无细胞毒性，安全范围大，抗增殖能力强，是防治术后PVR的有效药物。     

糖尿病前部增殖性玻璃体视网膜病变

报告9例糖尿病前部增殖性玻璃体视网膜病变,描述了:其临床表现、治疗方法及手术方式,强调除行晶状体摘除外,尚需选择性采用视网膜切开、眼内电凝、条带剪切等措施。并对此病的分类、病因、病理及手术预后进行了详细讨论。     

增殖性玻璃体视网膜病变的玻璃体手术治疗

目的 评估玻璃体手术治疗增殖性玻璃体视网膜病变的疗效。方法 Ｃ２级以上ＰＶＲ合并视网膜脱离２１眼,特发性ＰＶＲ１４眼,外伤性ＰＶＲ７组,Ｃ级９眼,Ｄ级１２眼,均作常规玻璃体切除术联合环扎、膜剥离、视网膜切开、气体或硅油填充等附加术式。结果随访２～９个月,视网膜复位１５眼（７８．９％）,视力提高２０眼（９５．２％）。４眼手术失败,均系ＰＶＲ再次复发所致。结论 现代玻璃体手术是治疗严重ＰＶＲ的理想术     

瘦素在增殖性糖尿病性视网膜病变和增殖性玻璃体视网膜病变中的表达

目的 通过检测瘦素在增殖性糖尿病性视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）和增殖性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreous retinopathy,PVR）中的表达,探讨瘦素在PDR、PVR发生、发展过程中可能的调节机制。方法 分别用免疫组织化学染色的方法和酶联免疫吸附实验检测30例PDR患者、20例PVR病变患者眼内视网膜前膜中瘦素的表达,以及患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度。用Chi－Square Tests统计学方法分析和比较PDR、PVR与对照组之间瘦素表达的差异。结果 免疫组织化学染色结果：30例PDR患者中,有18例患者眼内视网膜前膜的瘦素受体呈阳性表达,阳性率为60%,与对照组比较,差异有统计学意义;20例PVR患者中,有3例患者眼内视网膜前膜的瘦素受体呈阳性表达,其中2例为血管纤维性视网膜前膜,1例为细胞纤维性视网膜前膜,阳性率为15%,与对照组比较,差异无统计学意义。ELISA结果：检测30例PDR患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度,与对照组之间差异有统计学意义（P＜0.05）;检测20例PVR患者的血清、眼前房水、玻璃体液中瘦素的浓度,与对照组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 瘦素可能主要是通过促进新生血管的生成参与到增殖性糖尿病性视网膜病变的发生、发展中,与增殖性玻璃体视网膜病变的发生、发展无明显相关性。     

肝细胞生长因子受体在增生性糖尿病视网膜病变视网膜前膜中的表达

目的 肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor receptor,HGF)是具有多种生物活性的细胞因子,通遇与受体结合转导生物学效应,发挥促细胞增生、促运动和促形态发生等作用。本实验目的在于观察增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)不同时期视网膜前膜(epiretinal membranes,ERM)中HGF受体的表达情况。方法 13例PDR患者行玻璃体切除术剥离视网膜前膜。采用免疫组化染色方法观察HGFR在ERM中的表达情况。结果 在7例Ⅳ、Ⅴ期ERM标本中,5例HGF受体阳性表达,阳性表达率为71.4％;6例PDRⅥ期增殖前膜标本中,有5例HGF受体阳性表达,阳性表达率为83.3％。HGF受体阳性表达率与PDR分期无显著性差别(P>0.05)。结论 HGF受体在PDR视网膜前增生膜中表达,提示HGF可能参与了PDR增生膜的形成。     

闭合漏斗型视网膜脱离手术治疗的探讨

目的 探讨闭合漏斗型视网膜脱离合并严重PVR病例的手术治疗方法。方法 对12例进行闭合式三切口玻璃体切除及视网膜复位术。结果 12例视网膜全部复位,7例有不同程度的视功能改善,保持眼球外观。眼轴缩短呈塌陷状外观的病例术后外观及视力均有改善。结论 对闭合漏斗型视网膜脱离合并严重PVR病例手术治疗可以使部分病人保持视功能甚至恢复一定的视力。即使是无望恢复视力者也可以改善眼球的外观。     

RPE细胞发生上皮间充质转化机制及PVR的治疗研究进展

增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是眼外伤、糖尿病性视网膜病变、血管性视网膜病变和炎症性视网膜病变等眼部疾病的严重并发症,也是孔源性视网膜脱离手术失败的最重要原因,对视功能的危害较大。大量研究已证明PVR发生的主要危险因素是视网膜损伤后血视网膜屏障受损,视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞受到玻璃体腔内细胞因子的刺激,RPE细胞发生上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),转分化为成纤维样细胞,细胞的形态发生了变化,细胞间的紧密连接消失,细胞极性丧失,增殖、迁移、侵袭能力增强。在视网膜前表面或视网膜下形成具有收缩性的纤维增殖膜,形成的纤维增殖膜会使视网膜形成皱褶,牵拉视网膜导致视网膜脱离,最终会导致患者视力下降甚至失明。国内外对预防和治疗PVR进行了大量的研究,本文对RPE细胞发生上皮间充质转化相关信号通路及PVR的治疗进行简要综述。     

苏拉明对外伤性增生性玻璃体视网膜病变抑制作用的实验研究

目的探讨苏拉明（suramin）对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的防治作用。方法40只健康新西兰大白兔,随机分5组：空白组（玻璃体腔内不予注射）,模型组（玻璃体腔内注入0．1ml生理盐水及0．1ml富含血小板的血浆）,实验1组、2组、3组（玻璃体腔内分别注入40mg／ml、60mg／ml和80mg／ml苏拉明0．1ml和0．1ml富含血小板的血浆）。观察并记录玻璃体视网膜的改变,术后28d分别检测玻璃体中EGF和TNF-α的含量。结果术后21d、28d实验1组、2组、3组的增生级别均低于模型组（P〈0．05）。组织学检查,苏拉明实验三组均未发现明显的视网膜形态改变。实验1组、2组、3组玻璃体中TNF—α和EGF含量均低于模型组（P〈0．01）。实验2组、3组间玻璃体中TNF-α和EGF含量无显著性差异,均低于实验1组。结论苏拉明能够有效地抑制外伤性增生性玻璃体视网膜病变中TNF—α和EGF表达,并能够有效地防治外伤性增生性玻璃体视网膜病变。     

早期取出硅油的原因和手术效果

目的 探讨提前取出硅油的原因和再次手术后的效果.方法 对2005年1月至2012年6月在中山眼科中心,选择硅油注入眼内不足2个月(61天)并有完整病例资料的36例(36只眼),提前行硅油取出原因及再次手术后效果.术后随访≥6个月,记录患者最佳矫正视力、眼压及视网膜复位情况.结果 提前硅油取出原因中视网膜未复位18只眼(50％,18/36);难以控制的高眼压8只眼(22.2％,8/36);黄斑前膜4只眼(11.1％,4/36);硅油入前房或者硅油乳化5只眼(13.9％,5/36);眼内出血1只眼(2.8％,1/36).术后视力提高者22只眼(占61.1％,22/36),不变者9只眼(占25％,9/36),5只眼(占13.9％,5/36)轻度下降.高眼压原因(8只眼)取油者术前平均眼压(36.54±11.35) mmHg,术后平均眼压(13.13±6.93) mmHg,差异有统计学意义(P＜0.01).共6只眼术后发生视网膜脱离,再次手术后4只眼视网膜复位,总复位率为94.4％ (34/36).结论 早期硅油取出的原因主要是视网膜脱离和难以控制的高眼压,其他是黄斑前膜和硅油入前房和乳化,及时取出硅油和处理原发原因,可挽救患者视功能.     

Vitro Culture and Immunohistochemical Identification of Astrocytes of Infantile Optic Nerve

Objective: To culture astrocytes of optic nerve and to establish the cell lines for further study of healing process after optic nerve trauma.Methods: Optic nerve astrocytes of infantile and adults with sudden death were cultured by tissue inoculation or tissue digestion with 0. 25% Trypsin and 0. 06% EDTA. The second and fourth passage cells were stained with HE and and- GFAP, S-100 protein, Vi-mentin, and CD34 antibodies.Results: The trypsinized astrocytes of infantile optic nerve reached confluence in 7 days, but the astrocytes of adults weren't successfully cultured. The cultured cells were in polygonal shape with processes; the cytoplasm was abundant and pink; the cells had light-blue nuclei. These cells were positive in GFAP, S-100 protein and vimentin staining, and negative in CD34 staining.Conclusions: The results showed that astrocytes of infantile optic nerve can be successfully cultured and trypsinization is a better method than tissue inoculation. The culture of infantile astrocytes is easie     

PDGF受体、TGF-β1及其受体在视网膜下液中的表达

目的　了解视网膜下液中转化生长因子 - β1(T GF- β1)及其受体、血小板源性生长因子 (PDGF)受体的表达及与增生性玻璃体视网膜病变 (PVR )之间的关系。方法　采用 EL ISA和免疫组化技术分别对 3 7例和 3 3例伴有 PV R患者的视网膜下液进行检测。结果　 3 7例患者的视网膜下液 TG F-β1水平为 84 6.7ng· L- 1± 3 2 2 .6ng· L- 1,显著高于正常玻璃体 (3 77.78ng· L- 1± 87.2 9ng· L- 1) ,3 3例中的大多数标本可见 PDGFα(n=2 7)和β(n=2 0 )受体、TGF-β1受体 (n=2 3 )阳性表达细胞。结论　视网膜脱离伴 PV R患者视网膜下液的 PDGF、T GF-β1高表达提示 2个生长因子在 PVR发生中的作用 ,视网膜色素上皮细胞、神经节细胞可能是这 2个生长因子的靶细胞。     

In Vitro Susceptibility to Different Topical Ophthalmic Antibiotics of Bacterial Isolates from Patients with Conjunctivitis

Purpose: To test in vitro the susceptibility to different commercially-available topical antibiotics of isolates from patients with conjunctivitis, evaluated at the Microbiology Service of Turin Ophthalmic Hospital between January 2005-February 2007.

Methods: Bacterial isolates were cultured using both liquid and solid media. The four most frequent isolates were analyzed and their in vitro susceptibility to levofloxacin, ofloxacin, norfloxacin, lomefloxacin, tobramycin, netilmycin, ampicillin, and chloramphenicol was tested, using the Kirby-Bauer diffusion method and National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) serum standards.

Results: The four most common bacteria isolates were: Staphylococcus aureus (27%), viridians Streptococci (22%), Staphylococcus epidermidis (16%) and streptococcus pneumoniae (13%). The in vitro susceptibility to levofloxacin was highest (p<0.01) for all bacterial isolates.

Conclusions: In vitro susceptibility tests showed that levofloxacin had the highest cumulative efficacy against bacterial isolates. Netilmycin showed the highest efficacy against staphylococcus aureus, the most common bacterial isolate in this study.     

家族性渗出性玻璃体视网膜病变致病基因 FZD4变异位点的遗传学研究

目的筛查一个家族性渗出性玻璃体视网膜病变(FEVR)致病基因变异的突变位点。 方法2019年7月收集常染色体显性遗传FEVR家系三代6例的临床资料。采集家系中2例FEVR患者和2位眼正常者的外周血样本。利用二代高通量基因测序技术及Sanger测序对4位受检者的20 000个基因进行测序分析，比较分析眼科疾病相关基因，明确该家系致病基因的突变位点。 结果本家系的先证者，女性，15岁，右眼最佳矫正视力为0.6，左眼最佳矫正视力为0.5。眼底检查结果显示视网膜周边部血管分支多，呈"柳枝"样形态，荧光素眼底造影可见无血管区。患儿四肢修长，身材高大，全身患有二尖瓣和三尖瓣关闭不全，疑似Loeys-Dietz综合征。先证者父亲右眼最佳矫正视力为0.2，左眼最佳矫正视力为0.5，曾行双眼激光治疗，眼底显示有FEVR改变。其余家族成员中，先证者祖父母可见晶状体混浊，眼底检查未见异常；先证者母亲和姑母，视力良好，眼前节及眼底检查均未见异常。家系中4位受检者周围血的遗传基因检测结果显示，先证者及其父亲2例FEVR患者携带基因/转录本FZD4/NM_012193.3核苷酸杂合变异c.1498delA，氨基酸变异p.Thr500fs，该变异导致第500位氨基酸由苏氨酸突变为亮氨酸，可致后续蛋白翻译发生提前终止，产生截断蛋白。根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南，该变异被评定为疑似致病性变异，2位眼正常人未检测出该基因变异。4位受检者中发现先证者及其母亲携带基因/转录本转化生长因子β2(TGFβ2)/NM_001135599.3核苷酸杂合变异c.673G>A，氨基酸变异p.Glu225Lys，该变异点为临床意义不明变异，可能与Loeys-Dietz综合征相关。 结论FZD4基因核苷酸变异c.1498delA(p.Thr500fs)属于基因位点变异，该变异可以解释此FEVR家系的致病原因。FZD4和TGFβ2基因突变可以共存于一个个体。     

Activation of Conjunctiva-Associated Lymphoid Tissue in Patients With Infectious Keratitis Using In Vivo Confocal Microscopy

PurposeWe aimed to evaluate activation of conjunctiva-associated lymphoid tissue (CALT) in patients with keratitis using in vivo confocal microscopy (IVCM) and conjunctival impression cytology (CIC).MethodsIn addition to anterior segment photography and corneal fluorescein staining, IVCM revealed the palpebral conjunctiva in all subjects, and CIC and immunofluorescence staining were performed.ResultsDiffuse lymphoid tissue cell density in the eyes of patients with keratitis was significantly greater compared with healthy volunteers (P < 0.001). Similar trends were found in perifollicular lymphocyte density (P < 0.001), follicular density (P = 0.029), follicular center reflection intensity (P = 0.011), and follicular area (P < 0.001). Immunofluorescence staining showed that the proportions of CD4⁺ (61.7% ± 8.0% vs. 17.3% ± 10.2%, respectively, P < 0.001) and CD8⁺ (46.9% ± 10.0% vs. 19.6% ± 11.5%, respectively, P < 0.001) cells in patients with keratitis was greater compared with healthy volunteers. Interestingly, we also observed changes in the contralateral eye in subjects with keratitis.ConclusionsOur research suggests that CALT, as an ocular immune structure, is activated and plays an important role in the pathogenesis of keratitis. This has been overlooked previously. CALT is also active in the contralateral eye of subjects with keratitis.