天津地区儿童人博卡病毒感染及基因型分析

目的 了解天津地区急性下呼吸道感染儿童中人博卡病毒(HBoV)的感染情况及病毒基因特性.方法 采集2008年9月- 2009年5月急性下呼吸道感染住院儿童的鼻咽吸取物标本202份,进行PCR扩增来检测HBoVNP-1基因,对VP1及VP2基因进行扩增及序列测定,与GenBank中登录的序列进行比较,分析序列特征并绘制种系发生树,同时采用多重PCR方法检测其他12种呼吸道病毒及WU多瘤病毒.结果 202份标本中,6.9％( 14/202)为HBoV阳性,所有阳性患儿的年龄均≤6岁,6月～12月龄患儿感染率最高,为14.3％ (6/42);所有感染者均为肺炎和喘息性支气管炎患儿,各月份均有检出;HBoV与其他病毒的混合感染率为85.7％ (12/14),其中58.3％ (7/12)为3种以上呼吸道病毒混合感染;VP1/VP2基因种系发生树分析表明13株HBoV均属于Ib簇,同源性分析表明,天津地区HBoV VP1基因与从GenBank下载的Ⅰ型序列比较,核酸及氨基酸的同源性分别为99.0％～ 99.8％及99.0％ ～99.9％.结论 天津地区存在HBoV流行,感染者多为＜6岁儿童,HBoV与其他呼吸道病毒混合感染常见,HBoV病毒均属于Ib簇.     

粤东地区小儿呼吸道感染病原中首次检出人类偏肺病毒

目的分析人类偏肺病毒(hMPV)在粤东地区的感染情况及所致疾病的临床特点。方法(1)应用TemPCR技术对120例呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物扩增多种病原体,并应用多重荧光微球技术检测hMPV等病毒核酸;(2)分析hMPV感染患儿的临床资料。结果120份标本中hMPV阳性6份(5%),占常见病毒阳性者的24%,占100例其他常见呼吸道病毒检测阴性患儿的6%。6株hMPV特异性核酸扩增片段核酸测序结果与GenBank中人类偏肺病毒AF371337(NL00-1)株的基因同源性>95%。6例hMPV阳性患儿中,临床表现为毛细支气管炎4例、喘息型肺炎1例、上呼吸道感染1例。结论hMPV是粤东地区小儿呼吸道感染的重要病毒性病原体之一,其感染主要引起小儿喘息性疾病。     

武汉市呼吸道感染儿童博卡病毒的检测及临床分析

目的 分析武汉市呼吸道感染儿童博卡病毒(HBoV)感染的临床特点,为临床治疗提供理论依据。方法 收集2014年12月1日-2015年12月1日期间在本院儿科住院的365例急性呼吸道感染患儿为研究对象,在疾病急性期用一次性吸痰管采集患儿鼻咽分泌物(NPA)标本液2 ml。先进行7种常见呼吸道病毒的筛查,然后采用PCR方法检测HBoV 基因,对阳性标本进行序列验证及分析。结果 1)对365份标本进行免疫荧光检测,结果显示呼吸道合胞病毒(RSV)的阳性检出率最高18.90%(69/365),其他依次为腺病毒(ADV)阳性15例(4.11%),副流感病毒Ⅲ(PIV-Ⅲ)阳性8例(2.20%),甲型流感病毒(IFV-A)阳性5例(1.37%),乙型流感病毒(IFV-B)阳性3例(0.82%),副流感病毒Ⅱ型(PIV-Ⅱ)阳性2例(0.55%)。2)365例标本中,32例(8.77%)出现HBoV 的PCR扩增产物,均为单一条带,大小约为354 bp,与预期的扩增片段大小相符合,显示为HBoV阳性。32例阳性标本进行测序后经Blast分析,HBoV1型28例(7.67%),HBoV2型3例(0.82%),HBoV3型1例(0.27%)。3)32例HBoV阳性患儿中,其中男19例,女13例,男女比例为1.47∶1;年龄3~13个月,平均6.87个月。结论 HBoV 感染是引起武汉市小儿呼吸道感染的重要病毒之一,主要以HBoV1型感染为主,而且多为混合感染。应加强对婴幼儿的预防保健工作,以便进行合理用药、早期治疗。     

武汉地区人类博卡病毒呼吸道感染患儿的临床特点

目的研究武汉地区住院患儿呼吸道感染人类博卡病毒(Human Bocavirus,HBoV)的临床特点。方法选择2017年1-12月武汉市第三医院因呼吸道感染住院患儿1 438例以及健康儿童310名为研究对象。应用RT-PCR检测1 438例患儿咽拭子病毒感染情况;比较健康儿童和HBoV阳性患儿炎症指标水平;分析HBoV阳性患儿临床症状;采集HBoV阳性患儿咽拭子,进行扩增后基因测序,分析基因突变情况。结果 1 438例呼吸道感染住院患儿中HBoV阳性333例(23.16%)其中1～5岁患儿HBoV阳性率为46.4%;与对照组健康儿童相比,HBoV阳性患儿白细胞(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平显著升高,差异具有统计学意义(P0.05); 333例HBoV阳性患儿,其中高载量病毒(10~4 copies/ml)224例,低载量病毒109例,高载量与低载量病毒患儿的呼吸道症状无明显差别,但高载量病毒患儿更容易出现腹泻(P=0.016),更容易引起肺炎(P=0.034); 333例HBOV阳性临床标本基因测序,共获得48个全基因序列,其中15个为NP1基因序列,NP1基因236位点(G236A)、447位点(A447G)突变的样本中,病毒载量显著低于未突变的样本,差异具有统计学意义(P0.05)。结论呼吸道感染患儿中,HBoV阳性率较高,感染患儿易引起肺炎,炎症指标水平升高。某些位点基因突变可能影响病毒基因复制。     

人冠状病毒HKU1重症肺炎病原检测及鉴定

目的 对内蒙古自治区赤峰市重症肺炎病例进行病原检测鉴定,分析pol基因的同源性并确定其病原学分类地位.方法采集10例重症肺炎患者的咽拭子样本,采用逆转录聚合酶链式反应(RT -PCR)进行流感病毒核酸检测,采用多重PCR方法进行呼吸道病毒鉴定,采用RT - PCR法特异性扩增人冠状病毒OC43、299E、NL63和HKU1的pol基因,阳性样本进行pol基因序列测定及同源性分析.结果 检出1份人冠状病毒HKU1阳性样本,RT-PCR法扩增到长度约440bp的特异性目的片段;其pol基因与人冠状病毒HKU1参比毒株的pol基因的同源性最高达99.7％以上.结论1例重症肺炎患者因感染人冠状病毒HKU1而发病,其他患者的病原学鉴定有待进一步研究.     

从我国儿童呼吸道标本中首次检出人博卡病毒

目的 调查国内儿童急性呼吸道感染中是否存在人类博卡病毒（human Boeavirus）感染。方法 采用聚合酶链反应（PCR）技术对湖南地区急性呼吸道感染儿童的鼻咽抽吸物（NPA）进行包括HBoV等12种病毒基因筛查，然后将PCR扩增阳性产物构建到Ppbs-T载体进行TA克隆及步移法测序，获取全长cDNA，登录Gen Bank作对比研究。结果 从某儿童急性肺炎的呼吸道标本中，检获到HBoV基因，该患者11种常见呼吸道病毒PCR均为阴性，唯检出HBoV。患者表现咳嗽、低热、呼吸困难等临床症状，在儿科诊断为肺炎。结论 国内儿童急性呼吸道感染中，特别是在中国南方地区的急性呼吸道感染患儿中，有部分可能系HBoV感染引起，应引起临床医护人员重视。     

小儿急性呼吸道感染与人博卡病毒相关性的研究

目的:了解小儿急性呼吸道感染与人博卡病毒(Human Bocavirus,HBoV)的相关性。方法:对2008年1～5月在长春市儿童医院住院的1007例急性呼吸道感染患儿鼻咽深部分泌物样本用PCR扩增的方法进行HboV NS1基因检测。随机选取8例HBoV阳性产物进行测序,并将测到的序列与GenBank中的基因序列和HBoV阳性病例的临床资料进行分析。结果:1007例标本共检测出44例HBoV阳性,阳性率为4.37%,其中急性上呼吸道感染、急性支气管炎、毛细支气管炎和支气管肺炎患儿人博卡病毒阳性检出率分别为1.29%(2/155)、5.71%(2/35)、8.70%(2/23)和4.79%(38/794)。HboV急性呼吸道感染的年龄分布为1岁以下39例,占88.64%;1岁以上5例,占11.36%;男女性别比值是1.75∶1;临床表现咳嗽伴喘憋占97.56%,咳嗽伴腹泻占34.14%,入院时体温升高占54.55%,肺部听诊闻及干和/或湿性罗音者占95.12%,X线胸片片状影占87.80%,病程平均为13.79天。结论:人博卡病毒是引起小儿急性呼吸道感染的病原之一;HboV所致呼吸道感染部位多在下呼吸道;感染患儿以1岁以内婴儿为主。     

新疆石河子地区绵羊嗜吞噬细胞无形体的检测和16S rRNA序列分析

目的 调查新疆石河子地区绵羊嗜吞噬细胞无形体感染状况以及分析其病原16S rRNA序列特征.方法 在石河子地区采集羊血,提取DNA,巢式PCR扩增16S rRNA基因并与GenBank中相应基因序列进行比对分析.结果 在109份羊血样本中,检测出阳性样本37份,阳性率为33.94％,检测出的16S rRNA(524 bp)基因序列与部分GenBank中嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因序列同源性达99％.结论 新疆石河子地区绵羊中存在嗜吞噬细胞无形体的感染.     

乌鲁木齐地区儿童人偏肺病毒感染状况 初步研究

目的 了解人偏肺病毒(hMPV)在乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染患者中的致病情况.方法 选取2006年11月至2007年4月因呼吸道感染于新疆维吾尔自治区人民医院儿科住院患儿和部分门诊患儿的呼吸道分泌物及咽拭子标本共209份.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测hMPV的M基因片段.并对阳性标本进行测序,用BLAST及DNAStar软件进行分析.结果 共检出2例阳性标本,占总例数1.0%.将2份阳性标本扩增的hMPV M基因片段进行对比,同源性为83.8%.进一步选取GenBank中与本次扩增目的基因相同的hMPV M基因片段做基因进化树分析,结果提示2例标本可能属于不同的2种基因型.结论 hMPV是乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染病原之一,在一个流行季节当地可同时有2种不同基因型的hMPV流行.     

2016年武汉地区住院儿童人博卡病毒感染的临床特征及流行病学

目的了解武汉地区住院儿童呼吸道人博卡病毒（HBoV）感染情况、临床特征及流行病学特点。方法收集2016年1—12月该院儿科因急性呼吸道感染的住院患儿968例,采用无菌负压吸引法采集新鲜标本检查痰HBoV、RSV、ADV、INF A/B和PIV I/II/III,分析HBoV感染病例的流行情况及临床特征。结果968例患儿中,HBoV阳性75例,检出率7.75%。男女患儿检出率分别为5.68%、2.07%,不同性别HBoV检出率比较,差异无统计学意义（χ2=2.083,P=0.140）;53例（70.67%）HBoV阳性患儿年龄＜1岁,63例（84.00%）HBoV阳性患儿年龄＜3岁,各年龄组检出率比较,差异有统计学意义（χ2=4.60,P=0.043）。春、夏、秋、冬HBoV检出率分别为9.78%、5.29%、2.86%、5.20%;除9、10月份外,HBoV在其余月份均有检出,3月份检出率最高（为33.33%）。17例单纯HBoV感染,58例混合感染,HBoV临床诊断以支气管肺炎为主（26例,占34.67%）。HBoV病例主要临床特征为发热（81.33%）、咳嗽和喘息（各占77.33％）。结论HBoV是武汉地区住院儿童呼吸道感染的重要病原体之一,全年均可发生HBoV感染,流行高峰在春季和夏季,无性别差异。住院儿童感染HBoV临床诊断以支气管肺炎最常见,主要表现为发热、咳嗽、喘息。