戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑组织NO和NOS变化及灵芝孢子粉干预

癫痫是一种原因不明的疾病,而传统的抗痫剂治疗效果不太理想且具有一定的毒副作用。在有关灵芝孢子粉的基础和临床研究资料中,发现灵芝孢子粉具有免疫调节、清除自由基、提高机体耐缺氧能力、保护神经系统等作用[1]。NO与NOS作为脑血管舒缩主要调节因子在脑缺血再灌注损伤     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠大脑皮质及海马区PCNA变化的影响

目的：探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠大脑皮质及海马区增殖细胞核抗原（PCNA）变化的影响,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的干预机制。方法：免疫组织化学法（SABC法）检测皮质和海马区PCNA的免疫反应性;Western-blot检测海马区PCNA蛋白含量的变化。结果：癫痫模型组PCNA阳性细胞数目明显增多与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较PCNA阳性细胞数明显减少差异有显著性（P〈0.01）;PCNA在戊四氮致痫组的大脑海马区的蛋白含量与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,灵芝孢子粉干预组与癫痫模型组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论：灵芝孢子粉可以通过调节PCNA含量抑制星形胶质细胞（AS）增生,从而影响戊四氮致痫大鼠癫痫发作的发生与发展。     

颞叶癫痫儿童脑海马组织内 BDNF表达变化的意义

目的：探讨脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）在颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy, TLE）发病机制中的作用。方法观察组为2012年3月-2013年3月在某医院神经外科癫痫中心16例TLE患儿术中切除的海马脑组织,对照组为2011年9月-2013年3月某医院神经外科8例非癫痫手术患儿的海马脑组织。标本采用免疫组化SABC法进行检测。免疫组化结果的判定以显微镜下观察,按每张切片的阳性细胞着色程度及数量,采用积分综合计量,并采用Ridit分析。结果按照显微镜下观察评分对两组数据进行分类,经Ridit 分析可知两组分级差异有统计学意义（ Hc＝9.2472,P＜0.01）,故认为观察组海马脑组织中BDNF表达强于对照组中海马脑组织BDNF表达。结论 BDNF在颞叶癫痫患儿的海马脑组织中表达增强,可能在颞叶癫痫的发病机制中起重要作用。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6含量变化的影响。方法:10周龄Wistar雄性大鼠30只,体重(150±10)g,随机分成3组,每组10只,分别是灵芝孢子粉组、癫痫模型组和空白对照组。灵芝孢子粉组和癫痫模型组用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量(32mg/kg),每日1次,腹腔注射28d,停药1周,再用相同剂量的PTZ测试,凡显示连续5次2级以上惊厥的大鼠为达到点燃标准,空白对照组用同体积生理盐水腹腔注射。同时灵芝孢子粉组经灌胃给予灵芝孢子粉(灌胃前禁食6h),灌胃体积为1.0ml/次;癫痫模型组和空白对照组经灌胃给予同等体积的生理盐水。实验结束处死动物,在低温条件下迅速取出鼠脑,用放射免疫法测定脑组织细胞因子IL-6含量变化。结果:灵芝孢子粉组与癫痫模型组动物相比脑组织IL-6明显降低(P<0.05)。结论:灵芝孢子粉能够有效降低癫痫大鼠脑组织细胞因子IL-6水平,纠正免疫失调而起到抗癫痫作用。     

脐血单核细胞对VD大鼠认知功能及脑组织BDNF的影响

目的观察颈内动脉输注脐血单核细胞(Human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)大鼠认知功能及脑组织脑源性神经营养因子(Brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)含量的影响。方法改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型;体外分离HCMNCs,术后24h颈内动脉输注数量为3×106/0.5ml的BrdU标记细胞;利用穿梭箱系统和ELISA法检测注射HCMNCs后2、4、8周VD大鼠学习记忆能力以及脑组织BDNF含量的变化。结果模型组大鼠主动回避反应比率明显低于对照组(P<0.01),治疗组较模型组显著提高(P<0.01)。术后2周模型组大鼠脑组织BDNF含量较对照组明显增高(P<0.01),4周时达到高峰(P<0.01),8周时则明显下降,与2周时相比有显著性差异(P<0.05);颈内动脉输注HCMNCs后治疗组大鼠脑组织BDNF含量较模型组显著升高(P<0.01),4周时最高(P<0.01),8周时略有下降,但仍维持在较高水平,与4周时相比无显著性差异(P>0.05)。结论颈内动脉输注HCMNCs可显著改善VD大鼠学习记忆能力,增加VD大鼠脑组织BDNF含量,具有脑保护作用。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织BDNF与livin的影响

目的研究灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织BDNF与livin的影响,探讨灵芝孢子粉保护癫痫大鼠脑细胞的可能机制。方法对健康雄性Wistar大鼠36只进行建模,随机分成对照组(生理盐水腹腔注射+生理盐水灌胃),模型组(PTZ腹腔注射+生理盐水灌胃),灵芝孢子粉组(PTZ腹腔注射+灵芝孢子粉灌胃),每组各12只,采用免疫组织化学方法检测3组脑组织BDNF与livin水平。结果 BDNF与livin在大鼠皮质区、海马区均可见表达。与对照组和模型组比较,灵芝孢子粉组的BDNF、livin表达水平明显增加(P<0.05)。结论BDNF与livin的表达可能在癫痫发病过程中扮演着重要的角色,推测灵芝孢子粉通过调控BDNF与livin表达来减少脑细胞损伤及凋亡,进而对癫痫脑组织起到保护作用。     

脑出血大鼠脑内NGF和BDNF蛋白表达变化的研究

目的观察脑出血大鼠脑组织内神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化,探讨神经营养因子在脑出血后脑损伤的作用。方法SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组和脑出血组,通过自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,采用免疫组织化学法检测脑出血后3、6、12、24、48、72h、7d脑组织中NGF和BDNF蛋白表达情况。结果脑出血组6hNGF表达增加,12hBDNF表达增加,均于24h达高峰,与假手术组及正常组相比差异具有显著性(P<0.05)。结论脑出血后可诱导NGF和BDNF蛋白表达增加,有利于对脑出血后损伤神经元的保护和修复。     

戊四氮致痫大鼠脑GFAP的变化及甜菜碱的干预作用

目的:观察戊四氮致痫大鼠脑神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)变化及甜菜碱的干预治疗,研究癫痫的发病机理及甜菜碱的作用机制.方法:健康雄性的Wistar实验大鼠共24只,按体重随机分为正常对照组、癫痫模型组、甜菜碱干预组,每组8只.模型组和甜菜碱干预组均以致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射点燃Wistar大鼠模型.在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化检测大鼠脑GFAP的变化.结果:实验性癫痫大鼠模型复制成功,甜菜碱组和癫痫模型组的实验大鼠均已达到点燃标准,与癫痫组动物相比,甜菜碱组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间之间的差别没有显著性.免疫组化检测实验结果表明:癫痫模型组脑GFAP含量比正常对照组增加,差异具有显著性(P＜0.05);甜菜碱组脑GFAP含量与癫痫模型组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:甜菜碱能够降低GFAP的表达从而减轻癫痫发作,维持神经元存活起到抗癫痫作用.     

抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织中海马区白细胞介素Iβ蛋白表达的影响

癫痈作为一种免疫相关性神经系统疾病,其发生发展与细胞因子有着密切关系.近几年通过实验及临床研究证实了诸多细胞因子参与癫痫的发病过程,其中主要有白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素α(IFN)等,这些细胞因子具有广泛生物学作用.本研究通过观察中药复方抗痫灵对戊四氮(PTZ)致痈大鼠脑组织相关细胞因子IL-β蛋白表达的影响,从分子生物学水平探讨癫痫的发病机制及其抑痫作用.     

戊四氮慢性致痫大鼠海马区PPARγmRNA的表达及神经细胞损伤的影响

目的:探讨戊四氮慢性点燃大鼠在癫痫形成过程中海马区PPARγmRNA表达变化及神经细胞损伤,探讨PPARγ在癫痫发作后神经元炎症损伤的潜在作用机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、PTZ组,除正常组外均给予戊四氮(PIZ)35mg/kg·d腹腔注射,持续28d。实验结束后以RT-PCR法检测检测不同时间点(24h、48h、72h)海马区PPARγmRNA含量,同时尼氏染色观察海马组织形态变化。结果:通过RT-PCR及尼氏染色,PTZ组大鼠脑海马PPARγmRNA含量比正常对照组增高,注射PIZ的各组大鼠海马区PPARγmRNA的表达随着注射时间逐渐增加,尼氏染色显示PTZ组海马区炎症改变较正常组显著。结论:PPARγ低表达可能是癫痫发作后神经元炎症损伤的潜在机制之一。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区NMDAR1免疫反应影响的研究

目的:观察灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型皮质和海马区NMDAR1含量及神经元形态学的影响,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉干预组,点燃后断头取脑,行免疫组化染色观察NMDAR1含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内NMDAR1含量明显下降(P<0.05),同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸受体NMDAR1的含量,使神经元兴奋性减弱,抑制癫痫的发作,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤, 以达到抗癫痫作用.所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

Effects of sildenafil on pentylenetetrazol-induced convulsions in mice and amygdala-kindled seizures in rats

Sildenafil is the first marketed phosphodiesterase 5 inhibitor for the treatment of erectile dysfunction and recently, for pulmonary hypertension. While the treatment was found to be highly effective, several adverse effects are associated with this compound. Among numerous central nervous system-related untoward effects, proconvulsant activity was reported. The purpose of this study was to assess the effect of sildenafil on seizure threshold in rodents. Two seizure models/tests were used: the timed intravenous (iv) pentylenetetrazol (PTZ) infusion test in mice and the amygdala-kindling model in rats. Sildenafil was administered intraperitoneally 30 min before induction of seizures. In the iv PTZ paradigm, the first myoclonic twitch, generalized clonus with loss of the righting reflex, and forelimb tonus were recorded. In the amygdala-kindling model in rats, the following parameters were analyzed: threshold for induction of epileptiform discharges in the stimulated amygdala (afterdischarge threshold, ADT), seizure severity, seizure duration, and afterdischarge duration. Sildenafil (dosage range of 5–40 mg/kg) did not significantly affect the threshold for myoclonic twitches in the timed iv PTZ infusion test in mice but significantly decreased the threshold for clonic seizures at a dose of 20 mg/kg. Sildenafil at all doses tested neither significantly influenced the focal seizure threshold in the amygdala-kindling model of epilepsy in rats nor influenced seizure severity. Sildenafil significantly shortened afterdischarge duration and seizure duration recorded at the ADT current, indicative of a weak anticonvulsant activity. Our results show that sildenafil may have both pro- and anticonvulsant activity, which depends on the experimental model of epilepsy, on animal species and the dose of sildenafil. Based on these data and in view of the clinical observations, sildenafil should be used in patients suffering from epilepsy with caution and only based on a careful individual risk/benefit evaluation.     

促肾上腺皮质激素对慢性痛大鼠痛行为、额叶皮层内脑源性神经营养因子和促肾上腺皮质激素释放因子水平的影响(英文)

目的:研究促肾上腺皮质激素对佐剂性关节炎大鼠额叶大脑皮层中CRF、BDNF及其功能性受体trkB的影响。方法:痛行为评分法,BDNF、trkB的免疫组化法及CRF的原位杂交法。结果:在注射完全福氏佐剂后24h,大鼠的痛行为评分明显增高,同时对侧额叶皮层的BDNF、trkB免疫活性神经元、CRFmRNA阳性神经元和BDNF/CRFmRNA双染神经元数均明显升高,腹腔注射促肾上腺皮质激素后能明显抑制该效应,摘除双侧肾上腺后,促肾上腺皮质激素的抑制效应可被显著翻转。结论:肾上腺的促肾上腺皮质激素可抑制关节炎大鼠对侧额叶皮层内BDNF和CRF水平的升高而介导镇痛作用。     

美满霉素对阿尔茨海默病大鼠认知损伤及海马 BDNF、 Bcl-2 和 Bax 表达的影响

目的 观察美满霉素对阿尔茨海默病（AD）大鼠认知功能和海马脑源性神经营养因子（BDNF）、凋亡相关因子 Bcl-2 和 Bax 表达的影响, 探讨美满霉素对 AD 大鼠脑保护作用的机制。 方法 侧脑室注射 Aβ25-35 建立 AD 大鼠模型。 30 只健康雄性 SD 大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组, 每组 10 只。 对照组和模型组腹腔内注射生理盐水 1 mL/（kg· d）, 治疗组腹腔注射美满霉素 50 mg/（kg· d）, 均持续 14 d。 Morris 水迷宫检测行为学变化, 蛋白免疫印迹（Western blotting）法和酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测海马 BDNF、Bcl-2 和 Bax 蛋白的表达, 原位末端标记（TUNEL）法检测海马神经元凋亡率。 结果 美满霉素可以明显提高 AD 大鼠学习记忆能力, 上调 AD 大鼠海马 BDNF、Bcl-2 表达, 下调 Bax 表达, 减少海马神经元凋亡。 结论 美满美素可以通过促进神经元的生长、抑制神经元的凋亡发挥脑保护作用。     

BDNF基因多态性对恐惧记忆获得和消退的影响研究

目的:探索脑源性神经营养因子(BDNF)rs6265位点基因多态性与条件性恐惧记忆获得、消退及复燃的关系。方法:招募符合入组和排除标准的90名18-30岁的汉族健康男性,采集人口学资料、血液样本并进行恐惧记忆的学习、消退及测试。采用MassARRAY基因分型方法确定受试者在BDNF基因位点rs6265的单核苷酸多态性,采用方差分析探索BDNF rs6265位点与恐惧记忆学习和消退的关联。结果:BDNF rs6265位点的三种基因型CC、CT、TT对恐惧记忆获得、消退、自发恢复和复燃的影响无显著差异(P>0.05)。结论:BDNF rs6265多态性位点不影响恐惧记忆的获得、消退和表达。     

Tetramethylpyrazine Produces Antidepressant-Like Effects in Mice Through Promotion of BDNF Signaling Pathway

Background:

Current antidepressants are clinically effective only after several weeks of administration. Tetramethylpyrazine (TMP) is an identified component of Ligusticum wallichii with neuroprotective effects. Here, we investigated the antidepressant effects of TMP in mice models of depression.

Methods:

Antidepressant effects of TMP were first detected in the forced swim test (FST) and tail suspension test (TST), and further assessed in the chronic social defeat stress (CSDS) model. Changes in the brain-derived neurotrophic factor (BDNF) signaling pathway and in hippocampal neurogenesis after CSDS and TMP treatment were then investigated. A tryptophan hydroxylase inhibitor and BDNF signaling inhibitors were also used to determine the mechanisms of TMP.

Results:

TMP exhibited potent antidepressant effects in the FST and TST without affecting locomotor activity. TMP also prevented the CSDS-induced symptoms. Moreover, TMP completely restored the CSDS-induced decrease of BDNF signaling pathway and hippocampal neurogenesis. Furthermore, a blockade of the BDNF signaling pathway prevented the antidepressant effects of TMP, while TMP produced no influence on the monoaminergic system.

Conclusions:

In conclusion, these data provide the first evidence that TMP has antidepressant effects, and this was mediated by promoting the BDNF signaling pathway.     

姜黄素对戊四氮致癫大鼠海马区IL-2和IL-6表达水平的影响

目的探讨姜黄素抗癫的作用机制。方法取健康成年雄性SD大鼠,连续腹腔注射戊四氮,诱发大鼠点燃致癫模型。空白组和模型组灌予生理盐水5ml,1次/d,连续28d。低剂量和高剂量姜黄素组分别灌予姜黄素100mg/kg和200mg/kg,1次/d,连续28d;丙戊酸钠组灌予丙戊酸钠400mg/kg,1次/d,连续28d。治疗结束后,按照Racine的6级评分标准,观察癫大鼠发作等级变化,用酶联免疫法(ELISA)检测海马区IL-2和IL-6表达水平的变化。结果姜黄素组的癫大鼠惊厥发作等级降低。模型组IL-2和IL-6高表达,比空白组呈显著升高(P<0.05)。与模型组比较,姜黄素组大鼠海马区IL-2和IL-6的表达明显降低(P<0.05);与低剂量姜黄素组相比,高剂量姜黄素组IL-2和IL-6水平降低更为明显(P<0.05)。高剂量姜黄素组与丙戊酸钠组比较,无显著差异(P>0.05)。结论姜黄素能降低癫大鼠惊厥发作级别,具有一定的抗癫作用,并且呈剂量依赖性,其可能机制是通过降低海马区IL-2和IL-6的表达发挥作用。     

梓醇上调局灶脑缺血大鼠缺血灶周围大脑皮质BDNF和TrkB蛋白表达

目的观察梓醇对局灶脑缺血大鼠缺血灶周围大脑皮质BDNF及其受体TrkB蛋白表达的影响,探讨梓醇促神经修复作用分子基础。方法 SD大鼠42只,随机分为假手术组、模型组、生理盐水组、梓醇低、中、高剂量治疗组(剂量分别为1、5、10 mg.kg-1)和胞磷胆碱(剂量为0.5 g.kg-1)对照组。开颅电凝右侧大脑中动脉制备局灶永久性脑缺血模型,造模后24 h,首次经腹腔注射梓醇或胞磷胆碱进行干预,每日1次,连续7 d。于造模后15 d断头取脑,制备脑片和脑组织匀浆,采用免疫荧光组织化学染色和Western blot检测缺血灶周围大脑皮质BDNF及其受体TrkB蛋白表达。结果 BDNF阳性细胞被Cy3标记,具有神经元的形态特征,胞质和突起呈现红色,细胞核未见红色荧光。缺血灶周围大脑皮质BDNF阳性细胞数模型组和生理盐水组均较假手术组明显增加(P<0.05),梓醇1、5、10 mg.kg-1剂量组均较模型组明显增加(P<0.05),且梓醇5、10 mg.kg-1剂量组明显高于胞磷胆碱组(P<0.05)。TrkB阳性细胞被FITC标记,具有神经元形态特征,胞质和突起呈现绿色,胞核未见绿色荧光。TrkB阳性细胞数模型组较假手术组有减少趋势,但差异无显著性(P>0.05);梓醇5 mg.kg-1剂量组较模型组和胞磷胆碱组明显增加(P<0.05)。Western blot检测结果与免疫荧光原位检测结果一致。结论梓醇上调局灶脑缺血大鼠缺血灶周围大脑皮质BDNF及其受体TrkB蛋白表达,有助于模型大鼠神经缺失功能恢复。     

黄精总皂苷对慢性应激模型大鼠的行为学以及对海马的BDNF和TrkB表达的影响

目的:通过观察慢性应激对大鼠行为学的变化和海马与大脑皮层脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(tyrosine kinase receptor,TrkB)表达的影响,探讨黄精总皂苷(saponins ofRhizoma Polygonati,SRP)抗抑郁作用及其机制。方法:48只SD大鼠,分为6组:正常组、模型组、氟西汀(fluoxetine,Flu)组(2 mg.kg-1)、SRP低、中、高剂量组(30,60,120 mg.kg-1)。采用不同应激因子交替持续应激21 d复制大鼠慢性应激抑郁模型,观察大鼠行为学指标和实验前后动物学习记忆能力等变化,用免疫组化法测定海马和大脑皮层中BDNF及TrkB的表达。结果:①应激刺激后,行为学指标显示,与正常组相比,模型组大鼠明显处于抑郁状态。②海马、大脑皮层可见到BDNF,TrkB染色阳性细胞,模型组阳性细胞数目及其灰度少于正常组和SRP低、中、高剂量组。结论:SRP能有效地减少慢性应急模型大鼠海马和大脑皮层神经元表达BDNF和TrkB的降低,SRP可能通过减少BDNF和TrkB的降低...