壳聚糖固定L-天门冬酰胺酶的研究

研究了以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，固定化Ｌ－天门冬酰胺酶的最适条件，并对固定化天门冬酰胺酶的理化性质进行了初步探讨。分别从不同固定化程序、缓冲液及保护剂等方面进行了固定化天门冬酰胺酶的条件优化；固定化酶的活力回收可达２０％左右。固定化酶的最适范围变宽，由游离酶的最适ｐＨ＝４～６变为ｐＨ＝６～１０。连续使用６次后仍可基本维持固定化酶的活力。固定化酶对胃蛋白酶的水解性也较游离酶大大提高。     

以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶

目的 探讨以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶的最佳条件及固定化酶的理化性质.方法 以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱酯酶固定在甲壳胺上,并分别测定固定化酶与溶液酶的活力.结果 固定化酶与溶液酶的最适温度相同,均为37℃;固定化酶与溶液酶最适pH分别为8.2、8.0;固定化酶在50℃仍有较高热稳定性,而溶液酶活力明显下降;固定化酶的米氏常数Km=0.84 mmol/L,溶液酶的Km=1.16 mmol/L;固定化酶活力回收为44.66%,在重复使用8次后仍能保持原有活力的50%.结论 该固定化酶与溶液酶相比,其热稳定性提高,与底物的亲和能力增大,且重复使用性较好.     

色氨酸酶基因工程菌固定化及其培养条件的研究

目的 :对色氨酸酶基因工程菌ＷＷ 11进行固定化及培养条件研究 ,为工业化生产Ｌ 色氨酸奠定基础。方法 :通过色氨酸酶活力测定 ,考察三种固定化材料及温度、ｐＨ、单价阳离子降乙醇对固定化ＷＷ 11色氨酸酶活力的影响。结果 :以聚乙烯醇作为ＷＷ 11的固定化载体 ,其活力回收为 6 0 9%。固定化ＷＷ 1色氨酸酶降解反应最适 ｐＨ为 9 0、最适温度为 5 0℃ ;固定化ＷＷ 1色氨酸酶合成反应最适 ｐＨ为 7 5、最适温度为 45℃。Ｋ 、ＮＨ 4对固定化工程菌色氨酸酶有明显激活作用 ,而Ｎａ 则有一定的抑制作用。结论 :固定化工程菌色氨酸酶对温度…     

甲醛活化壳聚糖制备固定化l—天冬酰胺酶

研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ－天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定化酶的性质作了探讨。     

乙二胺羟丙基壳聚糖固定化天门冬酰胺酶的研究

研制了新型壳聚糖胺基衍生物-乙二胺羟丙基壳聚糖（EDA-HPCS）,并将其用于固定天门冬酰胺酶,分别考察了甲醛活化载体和戊二醛活化载体对固定化酶活力的影响,结果表明,在适当的固定化条件下,甲醛活化EDA-HPCS的固定化酶活力约为30U/g载体,而戊二醛活化EDA-HPCS固定化酶活力约为16U/g载体。     

壳聚糖固定α-淀粉酶的研究

目的　从虾蛄壳提取壳聚糖 ,将α-淀粉酶固定在壳聚糖上。　方法　以自制壳聚糖为载体 ,一氯乙酸或三氯乙酸为交联剂 ,将α-淀粉酶固定化。　结果　三氯乙酸是较好的交联剂。固定化酶与原酶的最适 p H及最适温度基本相同 ,均为 6.5 ,5 0℃ ;固定化酶在 65℃仍有较高热稳定性 ,而原酶活力明显下降 ;固定化酶的表观米氏常数 Km =0 .6× 10 -2 g/ml,原酶 Km =1.1× 10 -2 g/ml;一定浓度 Cl-、Br-离子有助提高固定化酶活力。　结论　该固定化酶活力较高 ,热稳定性和贮存稳定性好 ,是良好的检测试剂。     

抗癌酶制剂L—天冬酰胺酶在甲壳素上的固定化

研究了以甲壳素为载体固定化Ｌ－天冬酰胺酶的最适条件,探讨了固定化Ｌ－天冬酰胺酶的一系列理化性质。交联剂用量、缓冲液ｐＨ值和载体活化时间均对Ｌ－天冬酰胺酶的固定化有一定影响,得到的固定化Ｌ－天冬酰胺酶的活力回收可达２５．４％。固定化Ｌ－天冬酰胺酶理化性质的实验研究表明,酶经固定化后,对蛋白水解酶的稳定性及存贮稳定性均较游离酶有很大程度的提高。     

固定化脂肪酶的动力学研究

以壳聚糖为载体，用物理吸附固定化脂肪酶，对影响固定化过程的各种因素进行了考察，确定了最优条件，并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7．0)稍低于游离酶(pH8．0)，最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0．96h)是游离酶(0．32h)的3倍，在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。     

漆树酶的固定化研究

本文对我国特产资源生漆液中漆树酶的固定化进行了研究。考查了各种无机盐溶液处理不同无机载体,活化反应及漆树酶固定化条件对固定化漆树酶性能的影响。研究表明,经ZrCl_4处理后的多孔硅胶作载体的固定化漆树酶活力回收高、稳定性好、重复使用20次其保留活力仍有75%。同时对固定化漆树酶和自由态漆树酶的反应pH、温度、K_m值作了比较。对漆树酶通过过渡金属氢氧化物固定在无机载体土的机理也作了初步探讨。     

甲壳糖固定血管紧张素转换酶的制备及其性质

目的 将血管紧张素转换酶(ACE)固定化并测定其动力学性质。方法 以甲壳糖为载体，碳二亚胺(EDC)为交联剂，与分离纯化的ACE混合,使ACE固定化；并以马尿酰甘氯酰甘氨酸(HCG)为底物，分别测定了其游离酶和固定化酶的动力学性质。结果 固定化酶活力110u／g湿重，固定化率为22％，与游离酶比较，固定化酶稳定且具良好的耐热性，在50—80℃固定化酶较游离酶稳定。在pH7．1的底物缓冲体系中，37℃，游离酶Km=0.026mol／L；在间歇振摇下固定化酶的表现Km=0．040mol／L。游离酶最适pH为、8.0固定化酶最适pH为9．0。结论 用甲壳糖固定ACE方法简便可行，且固定后的甲壳糖性能稳定，有广阔的应用前景。     

急诊外科急腹症42例临床误诊原因分析及对策

目的:分析42例急诊外科急腹症患者临床误诊的原因及解决对策,提高急腹症的正确诊断率。方法:对2007年3月-2011年3月我院收治的42例急诊外科急腹症误诊患者的临床资料进行回顾性分析。结果:误诊42例患者中溃疡病误诊为急性胆囊炎8例;肠系膜淋巴结炎误诊为急性阑尾炎3例;急性肾炎误诊为尿路结石5例;妇产科疾病误诊为外科急腹症12例(盆腔炎误诊为阑尾炎7例;右侧输卵管脓肿误诊为阑尾炎3例;卵巢囊肿误诊为肠扭转2例);上消化道穿孔误诊为阑尾炎8例;小儿肠套叠误诊为中毒性菌痢2例;嵌顿性疝误诊为急性胃肠炎4例。42例患者全部进行急救处理或抢救治疗,除1例死亡外,全部好转或治愈出院。结论:外科急腹症患者误诊的原因包括:病史询问不详细、查体不仔细、辅助检查不完善、病情进展观察不仔细、手术解剖不清楚、操作鲁莽等。详细询问患者病情,认真仔细查体,密切观察病情变化,分析变化原因并结合必要的辅助检查是减少或避免误诊的关键。     

盐酸氨基葡萄糖分散片的制备及质量控制

目的探讨盐酸氨基葡萄糖分散片的制备及质量控制方法。方法选用微晶纤维素为填充剂,羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联聚维酮为崩解剂,阿斯帕坦为矫味剂,薄荷油为芳香剂,硬脂酸镁为润滑剂,微粉硅胶为助流剂。采用紫外分光光度法测定其含量。结果制得的盐酸氨基葡萄糖分散片口感好、表面光滑、服用方便。盐酸氨基葡萄糖分散片的含量测定的线性范围为12~32 mg/L（r=0.999 8）,平均回收率为99.65%,RSD为0.35%（n=9）。结论本制剂处方工艺可靠,检测方法简便、准确、适用于医院配制和应用。     

Magnetic Iron Oxide Nanoparticles Mediated Gene Therapy for Cancer An In Vitro Study

The aim of this study was to evaluate the feasibility and efficacy of using TRAIL gene to treat breast cancer mediated with a novel carrier - magnetic iron oxide nanoparticles (polyMAG-1000) coated with PEI. The magnetic iron oxide nanoparticles were used as gene carrier to transfect TRAIL gene into MCF-7 cells. The polyMAG-1000 without TRAIL gene was transfected into the tumor cells as negative control. TRAIL gene transfection with liposome as carrier served as positive control. The apoptosis of cells was detected with TUNEL method. The apoptosis ratio of tumor cells was measured with flow cytometry (FCM). It was found that the apoptosis occurred in the tumor cells after transfection of TRAIL gene mediated by both polyMAG-1000 and liposome. The apoptosis ratio in the group with polyMAG-1000 as gene carrier was (25.11±2.85) %, whereas it was (5.06±1.05) % in the control group with polyMAG-1000 (P＜0.01). The apoptosis ratio was as low as (18.31±2.44) % in the group with liposome as gene carrier (P＜0.05, as compared with the group with polyMAG-1000 as gene carrier). It is suggested that TRAIL gene may induce apoptosis in MCF-7 breast cancer cells. The magnetic iron oxide nanoparticles coated with PEI may be a potential gene carrier with high transfection efficacy for cancer gene therapy.     

均匀设计在三七提取工艺条件选择中的应用

采用均匀设计法，以三七皂甙为指标，探讨了三七提取工艺条件．结果表明，乙醇浓度为７００ｍＬ／Ｌ，溶剂用量为药材量的５倍，回流时间为７ｈ，回流温度为９０℃，浸泡时间为１２ｈ为佳     

Magnetic Iron Oxide Nanoparticles Mediated Gene Therapy for Breast Cancer-An In Vitro Study

Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), also designated as Apo-2 ligand, is a typical member of the structurally related tumor necrosis factor (TNF) ligand family. It has been shown that TRAIL only induces the apoptosis of cancer cells rather than normal cells. This characteristic offers a new target for cancer treatment[1]. In fact, TRAIL gene has been successfully used for the treatment of cancer[2]. Viruses have been the common vectors used in TRAIL gene t…     

一次性干髓治疗慢性牙髓炎34例的初步临床观察

34例慢性牙髓炎行一次性干髓治疗,随访时间最短者3个月,最长者18个月,平均11个月。成功31例。治疗中对常规操作进行改进,克服了原治疗方法中的某些不足。只要病例选择合适,近期疗效较满意。     

人胚胎和新生儿心室肌心钠素发生的电镜免疫细胞化学研究

用包理后电镜免疫细胞化学方法，研究了不同胎龄胚胎及新生儿心室肌纤维中心钠素的胚胎发生，对心肌纤维内心钠素颗粒进行了体视学分析及统计学处理。结果表明：随着胎龄增长，细胞内肌丝由稀疏逐渐增多然后形成肌原纤维，线粒体的数目也逐渐增多；心钠素颗粒于第5周开始出现，颗粒的数目随胎龄增加而逐渐减少，至妊娠7月时基本消失。同一胎龄，左心室颗粒多于右心室。新生儿心室肌纤维内未见心钠素颗粒。     

维生素C催化合成阿司匹林的条件研究

目的:以维生素C为催化剂、水杨酸为原料、醋酐为酰化剂,合成阿司匹林.方法:采用乙酰化法合成.结果:初步确定了合成条件,温度为80℃,反应时间为40 min,维生素C用量为0.2 g,收率为56.8%.结论:本方法可行,合成条件需进一步完善.     

利多卡因微乳制备及体外透皮吸收研究

目的制备利多卡因微乳透皮载药系统,并对其理化性质及体外透皮行为进行考察。方法分别以油酸乙酯为油相,吐温-80为表面活性剂,无水乙醇为助表面活性剂,用水滴定的方法制备利多卡因微乳,绘制伪三元相图确定Km值,采用单纯网格法优化微乳,以稳态渗透速率和累积透皮量为指标,采用改良的Franz扩散池考察利多卡因微乳的体外透皮过程,并对其形态、粒径大小等进行了考察。结果优化微乳处方为油酸乙酯-吐温80-无水乙醇-重蒸水-利多卡因(3∶20∶7∶68∶2),微乳为淡黄色透明液体,平均粒径为78 nm。结论利多卡因微乳质量稳定,具有较好的透皮能力,可以为利多卡因经皮给药剂型选择提供参考。     

中药注射液体外肾细胞毒性评价的方法学探讨

目的研究柴胡注射液和丹参注射液在犬肾近端小管上皮细胞（MDCK细胞）和人胚肾细胞（HEK-293细胞）模型的毒性作用,并探讨中药注射液体外肾细胞毒性检测的实验方法。方法选用马兜铃酸A作为阳性对照,将不同厂家和批次的丹参注射液、柴胡注射液的原液及稀释液,与MDCK细胞或HEK-293细胞共同孵育,通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）量化细胞毒性,计算相对增殖率,进行中药注射液体外肾细胞毒性评价。结果在MDCK细胞模型中,两批丹参注射4个液稀释浓度下毒性分级显示为0级,一批稀释9、27、81倍后显示为0级,柴胡注射液稀释27、81倍后显示为0级;在HEK-293细胞模型中,一批丹参注射液4个稀释浓度下毒性分级显示为1级,一批稀释9、27、81倍后显示为1级,一批稀释27、81倍后显示为1级;柴胡注射液稀释27、81倍后显示为2级。结论利用肾脏细胞来源的细胞,可尝试建立中药注射液体外肾细胞毒性检测的实验方法。