乙肝表面抗原室内质控血清的研制

目的:研制医院日常使用的检测乙肝表面抗原(HBsAg)室内质控血清。方法:筛选HBsAg阳性血清,分为1组(60℃加热1h)、2组(98℃加热1min)、3组(乙醚6h)、4组(pH2.4处理6 h)进行灭活。用ELISA法检测灭活前后效果。结果:1组最好,2组、3组较好,4组最差。结论:所采用的4种灭活方法制备的HBsAg阳性血清,用ELISA法检测HBsAg的灭活结果,4种方法都阳性(符合),可作为室内质控血清供医院日常使用。     

化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝表面抗原的比较

目的比较化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与酶联免疫法（ELISA）两种方法检测乙肝表面抗原灵的敏度。方法采用酶联免疫法测定经化学发光微粒子免疫分析法筛选的低浓度HBsAg阳性患者血清标本107例。同时采用上述两种方法对福建省临检中心提供的不同浓度HBsAS质控品进行测定,比较分析两种方法的灵敏度。结果CMIA法测定灵敏度为0．05IU／ml,ELISA法测定灵敏度为0．25IU／ml。107例CMIA法检测阳性标本中ELISA法检出阳性88例。结论CMIA法的检测性能大大优于ELISA法,尤其是对低浓度的HBsAg检测,能最大程度地减少假阴性结果。     

利用自制质控血清对HBsAg检测质量的初步评价

目的:对乙肝表面抗原(HBsAg)的酶联免疫(EIA)检测系统进行评价,以提高HBsAg的检测质量;方法:收集新鲜无溶血、无黄疸、无细菌污染的阴性与阳性血清,经灭活处理后,阳性血清用定值HBsAg质控血清进行标定,制备临界值与强阳性血清,分装安瓿或离心管中,-20℃保存,每批标本检测时用临界值血清做室内质控,绘制室内质控图,并进行试剂盒的敏感度评价.用阴性质控血清与强阳性质控血清进行特异性与"HOOK"效应的评价;结果:通过室内质控观察,我科EIA分析系统的稳定性或重复性良好,阴性血清检测试剂盒的特异性达98 %,临界值血清检测试剂盒的敏感度达95 %,强阳性血清检测试剂盒未出现"HOOK"效应;结论:EIA是检测HBsAg既敏感又特异的方法,但应加强室内质控,同时应参加室间质量评价,以提高HBsAg检测的可靠性,防止临床的误诊与漏诊.     

CMIA法在检测孕妇HBsAg中的临床意义

目的：应用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）和酶联免疫（ELISA）方法分别检测孕妇HbsAg,探讨CMIA法在检测孕妇HBSAG的重要性.方法：回顾分析2011年8月-2013年7月住院分娩孕妇用上述二种方法检测HbsAg的结果.结果：在28229个孕妇中有1373份阳性,CMIA法HBsAg（0.05-2.00IU/ml）标本50份中,ELISA法检测阳性33例,阳性符合率66.00％;二组比较有统计学意义（P＜0.05）.CMAI法HBsAg＞ 2.00IU/ml阳性标本有1323例,ELISA法检测阳性也1323例,阳性符合率100.00％.结论：采用CMIA法定量检测HBsAg灵敏度更高,自动化程度高,在低浓度标本检测中更具优势,有着重要的临床意义.     

雅培i2000SR化学发光仪测定HBsAg出现假阳性结果的分析和处理

目的探讨雅培i2000SR全自动化学发光仪检测HBsAg出现假阳性结果的原因及相应处理。方法对2017年1月至11月我院住院患者,i2000SR检测HBsAg结果≥0.1 IU/ml的标本分别进行原标本原机复查、金标法复查、ELISA法复查等,同时重新抽取对应患者标本进行复查。结果共复测HBsAg结果≥0.1 IU/ml标本19例(排除仪器、质控、试剂等原因后,确定为假阳性),其中19例原机复查结果仍≥0.1IU/ml,19例金标复查均阴性,17例ELISA法复查阴性,2例弱阳性。19例患者重新抽血后(10000 g RCF,10 min)复查HBsAg结果 0.01 IU/ml。结论实验前标本质量对结果准确性至关重要,血清分离是否完全,离心质量等均有可能造成实验结果出现假阳性,因此,对HBs Ag弱阳性标本,应进行多方法复核,以保证实验结果的准确性。     

温度与时间对HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体的影响

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段，日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象，严重影响血液标本检测结果的正确性，导致室内质控图曲线的失控。为此，笔者对12份阳性标本、4份质控品分别在室温、2～6℃冰箱及-20℃冰箱中贮存，在不同时间用ELISA法分别进行HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体检测，结果如下。     

乙型肝炎表面抗原室内质控血清制备及质量保证的探讨

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂,由于各生产厂家之间质量存在差异;同一厂家试剂盒内批间差异或因实验室内技术人员操作误差等因素,使实际工作中HBsAg检测结果不够准确,假阴性、假阳性时有发生.鉴于此种状况,自1994年以来,我科自制了HBsAg室内质控血清,并对其技术指标提出了具体要求.笔者在制备HBsAg室内质控血清方面,对其质量保证和实际应用作如下探讨.材料与方法一、室内质控血清(S)的制备1.将本室剩余HBsAg阳性血清(外观无溶血、黄疸、脂肪、污染,清晰透明)收集20～30份,约100ml,56℃ 10小时灭活.     

HBsAg与HBsAb中和比的研究及应用探讨

目的明确 HBsAb 与 HBsAg 中和作用不同时间两者之间的消耗比,为 HBsAg/HBsAb 确认试验的标准化奠定基础。方法将卫生部临床检验中心提供的质控血清用电化学发光法测定;并将5ng/ml HBsAg 与30mIU/mlHBsAB 质控血清不同比例37℃作用不同时间后,用电化学发光法测定 HBsAg、HBsAb 浓度的变化;留取日常工作中酶联免疫吸附试验测定病人血清,结果为 HBsAg( )、HBsAB(-)、HBeAg(-)、HBeAb( )、HBcAb( )的标本30份;结果为 HBsAg(-)HBsAB( )、HBeAg(-)、HBeAb(-)、HBcAb(-)的标本30份,将两种血清不同比例混合37℃作用不同时间用 ELISA、电化学发光法测定 HBsAg、HBsAb 浓度的变化。结果 5ng/ml、2ng/ml、0.5ng/ml HBsAg、30mIU/ml HBsAb 质控血清电化学发光法测定结果分别为116.2 COI、42.43 COI、14.02 COI、62.54 mIU/ml;ELISA 的中和比,以 HBsAg 完全被 HBsAb 中和计算即有223/774=0.283 ng HBsAg/mIU HBsAb,如果以 HBsAb 完全被 HBsAg 中和计算即有570/757=0.753 ng HBsAg/mIU HBsAb。而 ECLIA 的中和比,以 HBsAg 完全被 HBsAb 中和计算即有2304/1664=1.38 COI HBsAg/mIU HBsAb,如果以 HBsAb 完全被 HBsAg 中和计算即有13106/1577=8.31COIHBsAg/mIU HBsAb。5ng/ml HBsAg 与30mIU/mlHBsAB 质控血清37℃水浴作用1h 中和比在3.00～4.25COI HBsAg/mIU HBsAb 之间;2h 中和比在2.31～3.47COI HBsAg/mIU HBsAb 之间;24h 中和比在2.03～2.43COI HBsAg/mIUHBsAb 之间。结论 ELISA 完全中和比在0.283～0.753 ng HBsAg/mIU HBsAb;ECLIA 完全中和比在1.38～8.31 COI HBsAg/mIUHBsAb。     

三种不同方法检测乙型肝炎表面抗原的结果比较

目的探讨胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验法(ELISA)和化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)三种方法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)敏感度和阳性检出率的差异。方法选取我院2016年3~8月用安图化学发光法确诊的乙肝患者465例,乙肝阴性健康体检者150例,采用GICA、ELISA和CMIA进行检测并比较其敏感度。结果在CMIA检测结果 HBsAg<0.05IU/ml阴性者中,三种检测方法全部为阴性;在CMIA检出HBsAg浓度值3.001~250.00IU/ml时,三种方法全部检出阳性结果,检出率一致;在HBsAg处于低水平表达时即CMIA检出HBsAg0.050~3.000IU/ml时,CMIA、ELISA、GICA三种方法检出阳性标本分别为310例(100.00%)、245例(79.03%)、31例(10.00%),CMIA检出率均高于ELISA(χ~2=72.613,P<0.001)和GICA(χ~2=507.273,P<0.001);ELISA检出率高于GICA(χ2=299.055,P<0.001),差异均有统计学意义。结论在检测低浓度HBsAg时,三种方法中以CMIA的敏感度最高,其次为ELISA,GICA敏感度最低。当GICA检测出阴性结果与临床不符以及ELISA遇到灰区时可选择CMIA进行复查,以免漏检。CMIA可在早期感染及血清转换期患者中检测出低浓度HBsAg,为临床及时判断病情和制定治疗方案提供依据,值得推广使用。     

ELISA法检测乙肝标志物的临床应用

目的探讨ELISA法检测健康体检者血清中HBsAg的临床效果。方法用三个不同公司生产的乙肝表面抗原（HBsAg）检测试剂盒,通过ELISA法检测220例健康体检患者血清中HBsAg水平,检测出的阳性标本再用免疫胶体金试纸条检测,比较三个不同公司生产试剂盒检测阳性率及与金标试纸条法检测的一致性。结果江莱、万泰、新创三家厂家生产的试剂盒检测HBsAg阳性率分别为12.3%（27/220）、9.5%（21/220）、13.6%（30/220）。新创阳性率最高。阳性血清经金标试纸条检测阳性结果分别为24、18、27例。新创试剂盒ELISA法检测抗原包被浓度为1.25 IU/L时,仍可检出阳性标本。其他两个试剂盒最低检出浓度为2.5 IU/L,差异无统计学意义（χ2=1.25,P〉0.05）。结论不同厂家ELISA试剂盒检测结果存在差异,临床检测时需综合几个试剂盒结果及其他试验进行印证。     

PCR与ELISA检测乙肝病毒的对比及临床意义

目的 探讨荧光PCR法检测HBV-DNA定量ELISA定性检测乙肝病毒标志物临床价值比较.方法 取受试者空腹血清标本同时以荧光定量PCR法检测HBV-DNA和酶联免疫法捡测乙肝病毒两对半.结果 HBV-DNA定量在9.99×10^8 IU/mL～1.00×10^6 IU/mL之间的404例,大三阳比例为85.89％;HBV-DNA定量在9.99×10^5 IU/mL～1.00×10^3 IU/mL之间的416例,小三阳比例为59.38％;HBV-DNA定量在1.00×10^3 IU/ml～1.00×10^2 IU/mL的140例中,HBsAg、HBcAb阳性患者比例为71.43％;HBV-DNA定量＜1.00×102 IU/mL的992例中,HBsAg、HBeAg阴性模式比例为95.67％.结论 荧光定量PCR法检测HBV-DNA和ELISA定性检测HBV表面标记物呈正相关,即HBV-DNA拷贝数多的以大三阳居多,HBV-DNA拷贝数少的以无传染性病毒携带者和阴性者居多.荧光定量PCR可以直接反映体内乙肝病毒感染状态及病毒载量情况,较ELISA更利于判断疾病的严重程度和传染性,更有利于指导临床药物选择和疗效观察.     

乙型肝炎血清学标志物与HBV-DNA含量关系的探讨

目的:为了进一步探讨乙型肝炎患者血清中HBV-DNA含量与HBV血清学标志物之间的关系,了解荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒的应用价值。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测510例来自我院门诊就诊者和住院患者血清标本中的特异性抗原抗体,并同时应用荧光定量PCR分析系统测定血清标本中HBV-DNA的含量进行分析。结果:经ELISA法与FQ-PCR法检测的510例血清标本中,51例"大三阳"(HBsAg+HBeAg+HBcAb)的血清标本,其HBV-DNA检出数均呈阳性,阳性率为100%,其HBV-DNA的拷贝数范围为105~109/ml;76例"小三阳"(HBsAg+HBeAb+HBcAb)的血清标本,其HBV-DNA检出的阳性率为47.4%,HBV-DNA的拷贝数范围为104~107/ml。结论:HBV-DNA是乙型肝炎病毒感染和复制的特异性指标,应用FQ-PCR技术检测乙型肝炎病毒,具有较高的灵敏度和特异性,其操作简便,定量准确,结果可靠,它比HBV血清学标志物更能反映乙型肝炎病毒在体内的存在和真实复制状况,在HBV-DNA感染诊断,特别是药物疗效的观察中,具有良好的应用价值。因此,HBV-DNA与血清学标志物的相互关系是本文研究的课题。     

探讨ELISA方法中HBsAg弱阳性标本复查方式及其意义

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方法中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱阳性标本复查方式,确保结果的准确可靠。方法用ELISA法筛查出144例如下的标本:①S/CO值0.8～0.99,14例;②S/CO值在1.0～1.99,60例;③S/CO值在2.0～4.99,38例;④S/CO值在5.0～15,32例,以上标本均进行Elecsys HBsAg定量试验和HBsAg确证试验,对结果进一步确证。结果 144例标本中,三种方法都阳性的标本有62例,Elecsys HBsAg定量试验阳性62例,HBsAg确证试验阳性64例,ELISA与Elecsys HBsAg定量试验,ELISA与HBsAg确证试验比较,均有显著性差异(P0.05),Elecsys HBsAg定量试验与HBsAg确证试验比较,结果没有显著性差异(P0.05)。结论 ELISA试验做为临床乙肝的筛查方法容易出现假阳性,弱阳性标本可以用Elecsys HBsAg定量试验进行快速复查。     

血清中sHLA-G水平与自然流产的关系

目的:通过定量测定正常妊娠妇女与自然流产患者血清中sHLA-G,探讨sHLA-G的水平与自然流产的关系。方法:采用ELISA法定量检测16例正常妊娠妇女和16例自然流产患者血清中的sHLA-G水平。结果:正常妊娠组血清中sHLA-G的浓度为(1.37±1.44)IU/ml;自然流产组为(0.57±0.27)IU/ml。自然流产组sHLA-G水平明显低于正常妊娠组,差异有统计学意义,P<0.05。结论:血清中sHLA-G水平在维持妊娠的过程中有重要作用,低水平的sHLA-G与自然流产具有一定的关联性。     

ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪的使用方法学评价

目的比较时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法在测定乙肝病毒标志物（HBV—M）时结果的符合程度、灵敏度、特异性，并通过内质控的定量分析，对TRFIA法的方法学进行客观评价，了解TRFIA法测定HBVM的准确性和可行性为其在临床上广泛应用提供依据。方法对200份随机标本同时用TRFIA及ELISA法作表面抗原（HBsAg）的测定；并以HBsAg为例，对系统探测灵敏度，低、中、高质控血清的批内和批间精密度，线性范围等进行定量测定和描述。结果HBsAg阴性阳性结果，经配对资料的卡方检验，无显著性差异，P〉0．05，HBsAg的最小测定值为0．02ng／mL，低、中、高三种质控血清的批内和批间CV均小于5％，线性r=0．999。结论TRFIA法测定HBVM特异性、灵敏度及结果符合率较ELISA法高，TRFIA作为定量的方法，可为临床疗效观察提供依据，能较好的为临床检测服务。     

乙肝病毒表面抗原浓度与AFU及AFP的相关性研究

目的 探讨乙肝病毒表面抗原（HBsAD浓度与α—L-岩藻糖苷酶（AFU）及甲胎蛋白（AFP）的相关性。方法收集240例HBsAg阳性病例的血清,根据HBsAg定量的不同浓度分为1组（0．5ng／ml-150ng／ml）、2组（151ng／ml-300ng／ml）、3组（301ng／ml-450ng／ml）、4组（〉450ng／ml）,每组60例,正常对照组60例,分别检测AFU、AFP,对其结果进行分析。AFU检测采用速率法,HBsAg检测采用时间分辨免疫荧光法,AFP检测采用化学发光法。结果1组的AFU与AFP呈正相关（r=0．310,P〈0．05）,2组的AFU与AFP也呈正相关（r=0．298,P〈0．05）,3组和4组的AFU与AFP之间无相关性（分别r=0．298,r=-0．067,P〉0．05）;各HBsAg浓度组与对照组AFU比较差异无统计学意义（F=1．719,P〉0．05）,而与对照组AFP比较差异有统计学意义（F=3．000,P〈0．05）;各组AFU阳性率随HBsAg浓度升高无升高趋势（X^2=1．44,P〉0．05）,而AFP阳性率随HBsAg浓度升高呈升高趋势（X^2=8．28,P〈0．005）结论对HBsAg高浓度的HBV感染者同时检测AFP和AFU对观察肝脏损害的演变过程有重要的临床价值。     

乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与HBV血清学标志组合的关系

目的：了解HBV感染的不同血清学组合的HBV-DNA阳性情况。方法：对324例血清同时进行ELISA方法测定HBV-M及荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果：HBsAg（＋）组HBV-DNA阳性率为78.4%（254/324）,HBsAg（-）组HBV-DNA阳性率为4.8%（5/103）,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为100.0%（120/120）,平均含量为1.61×107拷贝/ml;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为47.0%（76/162）,平均含量为3.42×104拷贝/ml;HBsAg（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为69.0%（29/42）,平均含量为6.32×103拷贝/ml;HBsAb（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）血清HBV-DNA阳性率为5.2%（5/96）,平均含量为4.12×101拷贝/ml。结论：定量PCR可真实反映HBV感染、复制及病程变化,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义。     

乙型肝炎病毒慢性感染自然病程中HBsAg变化规律

目的 研究乙型肝炎病毒慢性感染的自然病程中血清表面抗原浓度的变化规律及其与血清中HBV DNA的相关性.方法 根据HBV感染自然病程的不同阶段,收集205例慢性乙型肝炎病毒感染的患者,其中免疫耐受期（IT）组53例,免疫清除期（IC）组60例,低复制期（LR）组52例,HBeAg阴性肝炎组（ENH）组40例.应用罗氏电化学发光法定量检测患者血清中的HBsAg,采用FQ-PCR法定量检测患者血清中的HBV DNA,用IFCC检测患者血清中的ALT和AST.结果 慢性乙型肝炎病毒感染不同时期的患者血清中HBsAg的中位数各不相同.免疫耐受期（IT）为1079IU/ml,免疫清除期（IC）为2005.5IU/ml,低复制期（LR）为5276IU/ml,HBeAg阴性肝炎期（ENH）为5923IUml,呈逐渐升高的趋势,组间比较差异均具有统计学意义（P＜0.001）.慢性乙型肝炎患者血清中的HBsAg与HBV DNA在免疫免受期及免疫清除期两者存在相关性,且呈负相关（IT r=-0.452,P=0.001;IC r=-0.455,P＜0.001）,在低复制期与HBeAg阴性肝炎期两者无明显相关性（LR r =0.241,P=0.086;ENHr=-0.069,P=0.633）.结论 HBV慢性感染的不同阶段,患者血清中HBsAg水平存在明显差异.从免疫耐受期到HBeAg阴性肝炎期,患者血清中HBsAg浓度呈递增的趋势,而HBV DNA的浓度则呈递减的趋势.虽然在免疫耐受期和免疫清除期HBsAg与HBV DNA之间存在负相关,但低复制期及HBeAg阴性肝炎期两者之间则无明显的相关性.所以在临床实践中HBsAg的定量检测能否代替HBV DNA作为监测慢性乙肝患者病情变化的指标仍需进一步研究.     

酶联免疫法检测HBsAg假阳性临床研究

目的：研究分析酶联免疫法（ELISA）检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的假阳性情况。方法：对酶联免疫法检测HBsAg结果为阳性的1500例血清标本用金标法验证,并用化学发光仪微粒子捕捉免疫发光法（MEIA）定量检测HBsAg的含量,以确认酶联免疫法检测结果的假阳性。结果：1500例酶联免疫法检测HBsAg阳性的血清标本,其中1479例为真阳性,真阳性率为98．6％（1479／1500）;2l例为假阳性,假阳性率为1．4％（21／1500）。结论：酶联免疫法检测HBsAg有一定的假阳性,临床检测时应高度注意,避免错报误诊。     

电化学发光法和酶联免疫吸附法对HBSAg和HBSAb测试结果的评价

目的：探讨电化学发光法（ECLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的差异。方法：分别使用ECLIA和ELISA法对2013年1-12月广州医学院荔湾医院收集的标本进行HBV-M检测,分析两种检测方法的差异及临床应用价值。结果：两种检测方法测定HBs Ag的阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,有较好的一致性（Ka Pp=0.96）。ELISA法测定HBs Ab的S/CO比值〉11.0者156例,其中152例ECLIA法测定值〉100 mlU/mL,一致性达97.4%。结论：ELISA法测定HBs Ag与ECllA法测定结果一致;与ECLIA相比,ELISA测定的HBs Ab具有肯定的免疫保护作用的S/CO比值〉11.0;不具有免疫保护作用的S/CO比值〈5。