艾灸对卵巢储备功能减退大鼠Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的:观察艾灸对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响,探讨艾灸对卵巢储备功能的保护效应机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、激素组,每组10只。模型组、艾灸组、激素组均采用雷公藤多苷片混悬液灌胃制备DOR大鼠模型,空白组灌胃等体积的0.9%氯化钠溶液,每日1次,连续灌胃14 d。激素组在造模即日起采用激素序贯疗法连续干预14 d;艾灸组在造模即日起每日给予双侧"肾俞"或"关元""中脘"艾灸治疗,两组穴隔日交替,每次10 min,连续14 d。每日采用阴道脱落细胞涂片观察大鼠的动情周期,统计各组大鼠动情周期紊乱率。干预结束后,采用HE染色观察各组大鼠卵巢组织学形态;ELISA法检测各组大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;免疫组化法检测各组大鼠卵巢组织Nrf2和HO-1蛋白水平;实时PCR(TaqMan探针法)检测各组大鼠卵巢组织Nrf2和HO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱率升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和激素组大鼠动情周期紊乱率降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血清FSH、LH、MDA含量增多(P<0.01),血清E2、AMH、SOD含量减少(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和激素组大鼠血清FSH、LH、MDA含量减少(P<0.01,P<0.05),血清E2、AMH、SOD含量增多(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达减少(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和激素组大鼠卵巢组织Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达增多(P<0.01)。结论:艾灸可以降低DOR大鼠的动情周期紊乱率,改善血清性激素水平和抗氧化应激能力,其机制可能与调控Nrf2/HO-1信号通路有关。     

温针结合电针对卵巢早衰大鼠血清性激素及炎症因子的影响

目的观察温针"关元"结合电针"三阴交"对卵巢早衰(POF)模型大鼠血清性激素及炎症因子的影响。方法将动情周期规律SPF级雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组和药物组,雷公藤多苷灌胃制备POF模型,并给予相应干预。HE染色观察大鼠卵巢形态,ELISA测定血清雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)及抗苗勒氏管激素(AMH)的含量,免疫组化检测卵巢组织干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清E_2、AMH含量明显减少,FSH含量明显增加(P0.05,P0.01),卵巢组织IFN-γ蛋白表达显著升高,IL-4蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05);与模型组比较,针刺组、药物组大鼠血清E_2、AMH含量明显增加,FSH含量明显减少(P0.05,P0.01),卵巢组织IFN-γ蛋白表达显著降低,IL-4蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论温针"关元"结合电针"三阴交"可调节POF大鼠血清性激素水平,改善生殖内分泌环境,降低卵巢炎性反应。     

养精种玉汤对卵巢储备功能减退模型大鼠RNA-m6A修饰的影响

目的 观察养精种玉汤对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠RNA-m⁶A修饰的影响,探讨其改善卵巢储备功能的机制。方法 选取60只动情周期正常的SD雌性大鼠,采用雷公藤甲素诱导DOR模型,将大鼠分为空白组、模型组、脱氢表雄酮(DHEA)组和养精种玉汤低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组),每组10只,给药组分别灌胃相应药液,连续2周。HE染色观察卵巢组织形态,ELISA检测血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗米勒管激素(AMH)含量,Western blot、qPCR测定卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白和基因表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织皮质区损伤,颗粒细胞脱落,各级卵泡数量明显减少,闭锁卵泡及黄体数量增加(P<0.05);血清E2、AMH含量减少,FSH、LH含量增加(P<0.05),卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白及m RNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,中药高剂量组大鼠卵巢组织损伤明显改善,各级卵泡数量增加,闭锁卵泡及黄体数量减少(P<0.05);血清E2...     

针药联合对卵巢储备功能不足大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响

目的:观察针药结合对卵巢储备功能不足(decreased ovarian reserve,DOR)大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响,探讨其作用机理。方法:将72只SD大鼠随机分为对照组、中药组、针刺组、模型组、西药组和针药组,每组12只。除对照组采用等量生理盐水灌胃外,其余五组均采用雷公藤多苷药液灌胃,建立符合实验要求的DOR大鼠模型。针药组、中药组予护卵汤灌胃,针刺组和模型组采用等量生理盐水灌胃,西药组采用克龄蒙药液灌胃,同时对针药组、针刺组进行针刺,以上操作持续16 d。采用ElISA法检测血清雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)水平,PCR检测卵巢组织中细胞凋亡因子Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达。结果:与对照组比较,模型组FSH、LH、Bax、Caspase-3表达明显升高,E2、AMH、Bcl-2明显降低(P 0. 05);与模型组比较,针刺组、中药组、针药组及西药组FSH、Bax、Caspase-3明显降低,E2、AMH、Bcl-2明显升高(P 0. 05)。结论:针刺联合护卵汤可调节性激素和凋亡因子,促进卵泡生长,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢功能。     

七子益肾理冲汤对DOR大鼠卵巢储备的影响

[目的]探讨七子益肾理冲汤对脱氧乙烯基环己烯(VCD)致卵巢储备功能低下(DOR)大鼠卵巢储备功能的影响。[方法]60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药低、中、高剂量组及脱氢表雄酮(DHEA)组。模型组采用VCD注射制作DOR大鼠模型。观察卵巢指数,HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测促卵泡刺激素(FSH)、血清雌二醇(E2)及抗穆勒管激素(AMH)水平。[结果]与空白组比较,模型组卵巢组织萎缩,各级卵泡数目减少,卵巢指数和E2、AMH水平降低,FSH水平升高(P0.05);与模型组比较,中药高剂量组卵巢指数上升,卵巢组织形态明显改善,原始卵泡和黄体增加,闭锁卵泡减少;E2、AMH水平升高,FSH水平降低(P0.05)。[结论]七子益肾理冲汤可修复卵巢储备的损失,促进卵泡生长,抑制卵泡闭锁。     

坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠卵巢GDF-9、Egr-1的影响

目的:观察预防性应用坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠血清性激素FSH、LH、E2、AMH水平的影响以及对卵巢GDF-9(生长分化因子9)、Egr-1(早期生长反应基因)基因及蛋白表达的影响,探讨坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠的治疗作用及作用机制。方法:将60只12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组(模型组)、坤泰胶囊组(分设高中低剂量)、结合雌激素组。空白组正常喂养;模型组用环磷酰胺腹腔注射法建立卵巢储备功能低下大鼠模型~([1]);各给药组于造模同时分别给予不同剂量的坤泰胶囊及结合雌激素片灌胃。实验期间观察大鼠行为学改变,行阴道涂片观察大鼠动情周期的变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清性激素AMH及FSH、LH、E2水平变化;光镜下观察卵巢形态与卵泡数;实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1m RNA表达水平的变化;免疫组化法检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1蛋白表达水平的变化。结果:坤泰胶囊能够降低模型大鼠体内性激素FSH、LH的水平,升高E2及AMH水平,并且能够增加大鼠卵巢中GDF-9、EGR-1蛋白及m RNA表达,修复大鼠受损的卵巢组织结构,改善卵巢血供,减少卵泡闭锁,提高成熟卵泡存在数量,改善大鼠动情周期及行为学变化。结论:预防性应用坤泰胶囊,可有效提升卵巢敏感性,治疗效果与西药结合雌激素片无明显差异。     

补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH表达的影响

目的 研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢储备力及其相关因子INHB、AMH蛋白表达的影响,为临床防治卵巢储备力降低提供理论依据.方法 建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只;另设正常对照组.于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周.实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Western blot法检测各组大鼠卵巢内INHB及AMH蛋白表达水平.结果 ①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P＜0.05),提高E2水平(P＜0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学结果显示治疗组大鼠始基卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少.②与正常组比较,POF大鼠卵巢INHB及AMH蛋白表达水平均明显降低(P＜0.01),而治疗组大鼠卵巢INHB及AMH表达水平较模型组明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 补肾调冲方可明显改善POF大鼠血清高促性素低雌激素状态,促进卵泡发育,抑制卵泡过度闭锁,从而调节卵巢功能,提高卵巢储备力,其机制可能是通过上调卵巢局部因子INHB及AMH的表达而实现的.     

芹菜素通过调节ERK/Nrf2/HO-1信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响

目的 探究芹菜素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢功能的影响。方法 60只大鼠随机分为对照组,模型组,芹菜素低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),阳性对照组(戊酸雌二醇0.1 mg/kg),每组10只。计算各组大鼠卵巢指数,观察卵巢组织病理学变化,ELISA法检测血清AMH、FSH、LH、DHEA、E₂、T水平,试剂盒法检测血清MDA、SOD、GPx水平,Western blot法检测卵巢组织p-ERK、ERK、HO-1、Nrf2蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量和卵巢指数,AMH、E₂、SOD、GPx水平,p-ERK/ERK、Nrf2、HO-1蛋白表达降低(P<0.05),FSH、LH、T、DHEA、MDA水平升高(P<0.05),卵巢组织存在病理学损伤;与模型组比较,芹菜素各剂量组和阳性对照组大鼠体质量和卵巢指数,AMH、E₂、SOD、GPx水平,p-ERK/ERK、Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05),FSH、LH、T、DHEA、MDA水平降低(P<0.0...     

不同时机电针对卵巢损伤大鼠卵巢储备功能的影响

目的：基于血清与卵巢组织抗缪勒氏管激素(anti-müllieus hormones, AMH)表达探讨造模前和造模中电针对卵巢损伤大鼠卵巢储备功能的调控作用。方法：经阴道涂片法检测具有规则动情周期的32只SD雌性大鼠,随机分为空白组、模型组、模前组、模中组,每组8只,除空白组外的3组以连续15d腹腔注射去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide, VCD)160 mg/kg造模,其中模前组连续进行4周的电针预处理然后进行造模给药,模中组在造模用药的第1天即开始电针处理并连续电针干预4周,2电针组治疗频率均为前2周5次/周,后2周3次/周,模型组无电针干预。在模型组造模成功后,比较各组大鼠卵巢各级卵泡数,检测各组大鼠血清AMH水平以及卵巢组织AMH蛋白和mRNA表达。结果：与空白组比较,模型组原始卵泡、初级卵泡数相对降低,闭锁卵泡数相对增多,卵巢组织AMH蛋白明显降低(均P<0.05),血清AMH和卵巢组织mRNA表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,模前组大鼠卵巢原始卵泡、初级卵泡数相对增加,闭锁卵泡相对减少(均P<0.05)...     

归肾丸对卵巢储备功能减退小鼠模型卵巢自噬的影响

目的：探讨归肾丸对卵巢储备功能减退(DOR)小鼠卵巢功能和自噬的影响。方法：将C57BL/6小鼠随机分为5组：正常组、模型组、归肾丸低、中、高剂量组。除正常组外，各组小鼠采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)法建立DOR小鼠模型并给予相应药物。ELISA法检测血清抗苗勒管激素(AMH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E₂)、促黄体生成素(LH)水平；HE染色观察卵巢组织形态；Western blot、qRT-PCR检测卵巢组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1、p62蛋白和mRNA水平。结果：与正常组相比，模型组小鼠血清FSH、LH水平升高(P<0.05),AMH、E₂水平降低(P<0.05);卵巢中生长卵泡和原始卵泡的数量减少，闭锁卵泡增加；卵巢组织LC3和Beclin 1蛋白和mRNA水平增高，p62蛋白和mRNA水平降低。经归肾丸干预后，DOR小鼠血清中FSH和LH激素水平降低(P<0.05),AMH和E₂激素水平增高(P<0.05);卵巢形态改善，原始卵泡和生长卵泡增多，闭锁卵泡减...     

补肾健脾方对卵巢早衰大鼠下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响

目的观察补肾健脾方对卵巢早衰(POF)大鼠下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)功能的影响机制。方法筛选具有正常动情周期的雌性SD大鼠34只,按随机数字表法分为正常组10只和造模组24只,正常组不予处理,造模组采用环磷酰胺法成功建立POF大鼠模型19只。将造模组随机分为模型组10只和补肾健脾组9只。补肾健脾组予补肾健脾方10 mL/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予等体积生理盐水灌胃,每日1次,共4周。监测3组大鼠动情周期变化,计算体质量增量及卵巢指数,观察卵巢组织形态变化,检测促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素(GnRH)、抗苗勒管激素(AMH)水平以及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA相对表达量。结果与正常组比较,模型组体质量增量、卵巢指数、Akt和mTOR mRNA表达量下降(P均<0.05),血清FSH、GnRH水平显著提高(P均<0.05),E₂、AMH水平显著降低(P均<0.01),动情周期延长、紊乱,卵巢组织病理显示闭锁卵泡数量增多,生长卵泡数量少,未见成熟卵泡;与模型组比较,...     

克龄蒙联合坤泰胶囊治疗卵巢储备功能下降的临床观察

目的观察克龄蒙配合坤泰胶囊治疗卵巢储备功能下降的临床疗效,为中西医治疗卵巢储备功能下降提供安全有效的临床用药。方法将80例卵巢储备功能下降的患者随机分为两组,每组各40例。对照组单独给予克龄蒙治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用中成药坤泰胶囊治疗,治疗3个月,检测患者治疗前后月经情况、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗苗勒管激素(AMH)和窦卵泡数。结果经3个月治疗后,治疗组月经改善有效率(90%)优于对照组(70%)(0.05);两组患者LH、FSH值较治疗前降低,AMH、E_2、窦卵泡数较治疗前升高,差异均有统计学意义(0.05);并且治疗组在改善FSH、E_2、AMH、窦卵泡数方面均优于对照组,差异均有统计学意义(0.05)。结论克龄蒙结合中成药坤泰胶囊治疗卵巢储备功能下降疗效显著,可有效改善卵巢储备,对临床治疗具有参考价值。     

安坤种子丸对卵巢储备功能下降闭经FSH、LH、E_2、AMH的影响

目的观察安坤种子丸对卵巢储备功能下降闭经(肾虚证)卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗苗勒氏管激素(AMH)的影响。方法将62例患者随机分为治疗组和对照组,对照组服戊酸雌二醇、黄体酮胶囊,治疗组在对照组基础上加服安坤种子丸。观察FSH、LH、E_2、AMH变化及伴随症状改善、停药后月经恢复等情况。结果 2组FSH均降低(P0.05);雌二醇、AMH升高,治疗组优于对照组(P0.05)。LH呈下降趋势,变化小,2组对比差异无明显统计学意义(P0.05),症状改善、停药后月经恢复情况治疗组较对照组明显好转。结论安坤种子丸降低卵巢储备功能下降闭经(肾虚证)患者FSH水平,提高E_2、AMH水平,具有提高卵巢储备功能的影响。     

加减归肾丸对卵巢储备功能减退模型小鼠卵巢组织PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的探讨加减归肾丸治疗卵巢储备功能减退的可能作用机制。方法将90只ICR雌性小鼠随机分为空白对照组、模型组、雌二醇组和加减归肾丸低、中、高剂量组,每组15只。除空白对照组外,其余小鼠腹腔注射二氧化乙烯环己烯溶液160mg/(kg·d)连续15天建立卵巢储备功能减退小鼠模型。造模成功后加减归肾丸高、中、低剂量组分别灌服加减归肾丸混悬液57.0、28.5、14.3g/(kg·d),雌二醇组灌服戊酸雌二醇0.15mg/(kg·d),空白对照组和模型组每日灌服0.1ml/10g生理盐水,共干预30天。HE染色观察卵巢组织病理形态学变化,酶联免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗缪勒管激素(AMH)水平,Western Blot法检测小鼠卵巢组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达。结果病理结果显示,模型组较空白对照组始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡数量明显减少,闭锁卵泡明显增多,黄体数量稀少。雌二醇组和加减归肾丸高剂量组卵泡数量较为丰富,可见到较多黄体。加减归肾丸中、低剂量组主要以闭锁卵泡为主,可见少量黄体。与空白对照组比较,模型组小鼠血清FSH、LH显著升高,AMH、E_2显著降低,卵巢组织PI3K、AKT、mTOR蛋白含量均降低(P0.05或P0.01)。与模型组比较,加减归肾丸中、高剂量组和雌二醇组血清FSH、LH显著降低,AMH显著升高,卵巢组织PI3K、AKT蛋白升高(P0.05或P0.01)。加减归肾丸高剂量组各指标与雌二醇组差异均无统计学意义(P0.05)。结论加减归肾丸可能通过影响卵巢组织PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而改善卵巢功能,并且以高剂量效果更佳。     

针刺对卵巢储备功能减退大鼠血清激素及PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达的影响

摘要：目的：观察针刺对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠血清激素、卵巢形态学变化及卵巢组织中p-PI3K、p-Akt及p-mTOR蛋白表达的影响,探索针刺治疗DOR的可能机制。方法：18只SPF级SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组和针刺组,每组6只;模型组、针刺组采用腹腔注射环磷酰胺制备DOR大鼠模型,空白组仅腹腔注射同等量生理盐水。造模后针刺组取肾俞、关元、中极、气海、太溪、双侧三阴交和双侧子宫穴进行针刺,每次留针20 min, 1次/d,连续21 d。空白组、模型组：仅抓取不进行干预,1次/d,连续21 d。观察比较各组间大鼠的血清激素改变情况,HE染色法观察大鼠卵巢形态学改变、卵巢中各级卵泡及黄体的数目变化,颗粒细胞层厚度改变;免疫组织化学法、Western blot法检测卵巢组织中p-PI3K、p-Akt及p-mTOR的蛋白表达。结果：与空白组比较,模型组血清FSH、LH水平升高(P<0.05),血清E2、AMH水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);卵巢组织中各级卵泡数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);卵巢组织中PI3K、Akt及mTOR蛋白表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,针刺组血清FSH、LH水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);血清E2、AMH水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);卵巢组织中各级卵泡数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);卵巢组织中p-PI3K、p-Akt及p-mTOR蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：针刺可以有效改善DOR大鼠卵巢储备功能,促进卵泡数量增加。作用机制可能与针刺调节卵巢组织中p-PI3K、p-Akt及p-mTOR蛋白表达有关。     

育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备下降大鼠卵巢形态和性激素的影响

目的观察育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备功能下降大鼠卵巢组织形态和性激素的影响,探讨其作用机制。方法采用雷公藤多苷药液灌胃制作卵巢储备功能下降大鼠模型。48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组及育肾助孕方低、中、高剂量组,育肾助孕方各剂组分别给予低、中、高浓度育肾助孕方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续14 d。观察大鼠一般情况,取卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)水平,酶联免疫吸附法检测抑制素B(INHB)、抗苗勒管激素(AMH)水平。结果与空白组比较,模型组卵巢组织萎缩,各级卵泡数目减少,卵巢指数和E2、INHB、AMH水平降低,FSH、LH水平升高(P0.01);与模型组比较,育肾助孕方高剂量组卵巢组织形态明显改善,各级卵泡和黄体增加,闭锁卵泡减少;卵巢指数和E2、INHB、AMH水平升高,FSH、LH水平降低(P0.01),且INHB与AMH具有显著相关性(P0.01)。结论育肾助孕方可调节性激素水平,促进卵泡生长和分泌,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能。     

针刺对雷公藤多苷片所致卵巢功能减退大鼠氧化应激及凋亡的影响

目的:探索针刺是否通过调节大鼠抗氧化应激状态及颗粒细胞凋亡来改善雷公藤多苷片所致的卵巢功能减退(DOR)。方法:将有正常动情周期的SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、激素组、针刺组,每组10只。采用雷公藤多苷片混悬液灌胃(50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续14 d)制备DOR大鼠模型。激素组予雌孕激素序贯疗法干预,针刺组针刺双侧"肾俞"或"关元""中脘"(隔日轮流进行),连续14 d。第9天开始观察各组大鼠的动情周期;实验结束后观察各组大鼠卵巢指数;采用HE染色法观察各组大鼠卵巢形态;ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量;免疫组织化学法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达水平;荧光定量PCR法检测各组大鼠卵巢内Bax及Bcl-2 mRNA相对表达量。结果:与空白组比较,模型组卵巢内成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多,颗粒细胞形态多出现异常,动情周期紊乱比例升高(P<0. 01),卵巢湿重及卵巢指数明显降低(P<0. 01),血清E2含量显著降低(P<0. 01),FSH、LH、MDA含量明显升高(P<0. 05,P<0. 01),血清SOD含量明显降低(P<0. 01),卵巢组织Bax蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0. 01),卵巢组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0. 05,P<0. 01)。与模型组比较,激素组及针刺组卵巢内成熟卵泡增多,闭锁卵泡减少,颗粒细胞形态异常情况明显减少,动情周期紊乱比例显著下降(P<0. 01),卵巢湿重及卵巢指数显著升高(P<0. 01),血清E2含量升高(P<0. 05),FSH、LH、MDA含量降低(P<0. 01,P<0. 05),血清SOD含量明显升高(P<0. 05,P<0. 01),卵巢组织Bax蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0. 01),卵巢组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0. 01)。与激素组比较,针刺组SOD含量显著升高(P<0. 01),Bax及Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0. 05,P<0. 01),Bcl-2 mRNA表达水平下降(P<0. 01)。结论:针刺可以提高大鼠对抗卵巢氧化应激的能力,降低颗粒细胞的凋亡情况,从而减轻雷公藤多苷片所致的DOR损伤。     

补肾健脾疏肝法治疗高龄卵巢储备功能低下临床观察

目的:观察补肾健脾疏肝法对高龄卵巢储备功能低下(DOR)患者卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)及抗苗勒氏管激素(AMH)水平的影响。方法:将70例高龄DOR患者按随机数字表法分成中药组和西药组各35例。中药组予补肾健脾疏肝法治疗,西药组予激素替代疗法治疗,2组均治疗6月。观察2组治疗前后FSH、LH、E_2及AMH水平的变化。结果:治疗后,2组FSH、LH及西药组的AMH水平均较治疗前降低(P0.05,P0.01),2组E_2水平均较治疗前升高(P0.05,P0.01);中药组的E_2水平高于西药组(P0.05)。结论:补肾健脾疏肝法能有效降低高龄DOR患者的FSH、LH水平,提高E_2水平及延缓AMH的下降速度。在延缓AMH下降速度方面,效果优于西药组,且无明显不良反应,值得在临床推广。     

补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠始基卵泡募集因子GDF-9、AMH表达的影响

目的:研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢功能的调节,探讨补肾调冲方通过调控卵巢始基卵泡募集因子GDF-9及AMH调节卵巢功能及治疗POF的机制。方法:建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只,另设正常对照组。于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周。实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Real-time PCR法检测各组大鼠卵巢内GDF-9及AMH mRNA表达水平。结果:①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P<0.05),提高E2水平(P<0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学检测结果显示治疗组大鼠卵巢体积较POF模型组增大,各级卵泡生长较好,颗粒细胞层次多,黄体数目明显增多;始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少。②与正常组比较,POF大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平均明显降低(P<0.01),而治疗组大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾调冲方治疗POF的作用机制之一可能是通过上调卵巢局部始基卵泡募集因子GDF-9及AMH的表达,促进卵泡的生长发育,抑制卵泡的过度耗竭与闭锁,恢复始基卵泡的正常募集状态,从而抑制卵巢功能的过早衰竭。     

针刺对雷公藤所致卵巢功能减退模型小鼠卵巢的影响

目的观察针刺对卵巢功能减退模型小鼠卵巢的保护作用。方法 40只动情周期正常的小鼠随机分为4组,每组10只,分别为空白组、模型组、雌二醇组、针刺组。除空白组每日灌胃等体积生理盐水外,其余3组每日予50mg/kg雷公藤多苷片混悬液灌胃;针刺组每日予双侧"肾俞","关元"及"中脘"穴隔日一次轮流交替针刺,每5min行针10s,共留针10min。其余3组给予同步抓取。雌二醇组另予0.2mg/kg戊酸雌二醇片混悬液灌胃。连续干预14天。结果与空白组相比,模型组卵巢指数明显下降(P0.01),血清E_2下降,FSH、LH上升(P0.01);与模型组相比,针刺组和雌二醇组卵巢指数上升(P0.01),血清E_2上升,FSH、LH下降(P0.01)。HE染色见模型组卵泡及黄体减少,闭锁卵泡增多;针刺组及雌二醇组黄体、卵泡数量增多,闭锁卵泡数量减少。电镜下模型组颗粒细胞排列分散,细胞器损坏,脂滴减少;针刺组及雌二醇组细胞器损坏减少,颗粒细胞排列紧密,细胞器损坏较少,脂滴丰富。结论针刺可以保护雷公藤所致卵巢功能减退。