雄激素对雌激素引发去势雄性SD大鼠前列腺炎症及炎症因子的抑制作用

目的给予不同比例苯甲酸雌二醇(E2)和丙酸睾酮(T)诱导SD大鼠前列腺炎,探讨炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环氧合酶2(COX-2)和巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP~(-1)α)表达的变化。方法 SD大鼠无菌条件下去势后,颈背部分别sc给予E20.25 mg·kg~(-1)+T 0.25,0.5和1.0 mg·kg~(-1),连续给药30 d。取血离心取血清,采用ELISA检测E2,T和双氢睾酮(DHT)激素水平。HE染色观察前列腺组织病理变化,免疫组化检测前列腺中TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α的表达。结果 ELISA检测结果显示,与假手术组比较,E20.25 mg·kg~(-1)组血清E2水平明显升高[(80±7)ng·L~(-1),P<0.01];E20.25 mg·kg~(-1)组和E2+T 0.25 mg·kg~(-1)组血清T水平显著下降[111±6和(111±5)nmol·L~(-1),P<0.05]。与去势对照组相比,E20.25 mg·kg~(-1)组血清E2明显升高[(80±7)ng·L~(-1),P<0.01],其他各指标未见统计学差异。光学显微镜观察发现,假手术组和去势对照组前列腺组织结构完整、腺腔和间充质无炎症细胞浸润;E20.25 mg·kg~(-1)组前列腺腺腔内有少量炎症细胞浸润,间充质未见炎症细胞浸润;E2+T 3个剂量组间充质内有少量炎症细胞浸润。假手术组前列腺上皮细胞及前列腺基质细胞胞浆内TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α均为阴性表达或极少量表达,去势对照组和E20.25 mg·kg~(-1)组TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α均为强阳性表达,E2+T 3个剂量组TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α呈弱阳性表达。结论雄激素具有抑制雌激素引起的去势SD大鼠前列腺炎及炎症因子TNF-α,COX-2和MIP~(-1)α表达的作用。     

竹节参总皂苷干预自然衰老大鼠肝脏炎症的实验研究

目的探讨竹节参总皂苷干预自然衰老大鼠肝脏炎症的作用。方法以自然衰老大鼠为对象,将SPF级SD大鼠按月龄分为3月龄组(3 M组)、9月龄组(9 M组)、15月龄组(15 M组)、24月龄组(24 M组)及24月龄的竹节参总皂苷(TSPJ)低、中、高剂量组,每组12只大鼠。TSPJ低、中、高剂量组的大鼠从18 M开始,分别给予竹节参总皂苷10、30、60 mg·kg~(-1)灌胃至24个月,每周停药1 d,连续6个月。采用HE染色观察组织病理形态学变化,RT-PCR检测肝脏白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(1L-12)、白介素17α(IL-17α)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA的表达,Western blot检测肝脏IL-1β和TNF-α蛋白表达。结果随着大鼠年龄的逐渐增长,HE染色发现肝组织中肝索及肝血窦的排列紊乱加重,脂肪空泡和炎症细胞增多,TSPJ(10、30、60 mg·kg~(-1)各剂量组均能在一定程度上改善其病变情况;IL-1β、IL-6、IL-12、IL-17α、TNF-α、IFN-γmRNA和IL-1β、TNF-α蛋白的表达随着年龄的增长逐渐升高,TSPJ各剂量组均在一定程度上降低其表达。结论竹节参总皂苷对自然衰老大鼠肝脏有一定的保护作用,可能与其对抗肝脏炎症有关。     

肉苁蓉苯乙醇总苷对脂多糖致大鼠急性肺损伤的抑制作用

目的探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhG)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。方法 SD大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型组(LPS 3 mg·kg~(-1))、模型+地塞米松(Dex)2 mg·kg~(-1)(阳性药对照组)、模型+CPhG 125,250和500 mg·kg~(-1)组,每组10只,CPhG各剂量组每天按设定剂量ig给予受试物,其余3组均给予相同体积的蒸馏水,连续30 d;第31天,除正常对照组外,其余各组大鼠均经口气管插管后,采用雾化注射器喷入LPS建立大鼠急性肺损伤模型,模型+Dex 2 mg·kg~(-1)组在造模前1 h给予Dex 2 mg·kg~(-1);造模3 h后,经腹主动脉采血处死大鼠。检测全血中性粒细胞百分比,血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量;检测肺泡灌洗液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6含量;计算右肺中叶湿/干重比值(W/D),HE染色观察右肺后叶病理组织变化。结果与正常对照组相比,模型组大鼠全血中性粒细胞百分比、右肺中叶W/D升高(P<0.05),血清MDA和NO含量升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),TNF-α和IL-6含量升高(P<0.05);与模型组相比,模型+CPhG 500 mg·kg~(-1)组大鼠全血中性粒细胞百分比和右肺中叶W/D降低(P<0.05),大鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6含量明显下降(P<0.05),右肺后叶组织炎症反应程度均有不同程地的减轻(P<0.05),血清中SOD和GSH活性显著升高(P<0.05),MDA和NO含量明显降低(P<0.05)。结论CPhG对LPS致大鼠急性肺损伤具有抑制作用,其作用机制可能与其抗氧化作用、减轻肺水肿和减少炎症因子的释放有关。     

丹酚酸B保护大鼠缺血心肌与炎症小体NLRP3表达的相关性研究

目的探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌缺血损伤的保护作用及炎症小体NLRP3(NLR family,pyrin domain containing 3)相关蛋白的表达对心肌缺血的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组、模型组和Sal B低、中、高剂量组。Sal B各剂量组腹腔注射给予Sal B 5、10、15 mg·kg~(-1),模型组和对照组腹腔注射等体积生理盐水,各组连续给药7 d;从d 5开始,皮下多点注射ISO(30 mg·kg~(-1)),连续2 d造模。末次造模24 h后观察Sal B对大鼠心电图、血清中心肌酶、氧化指标和炎症因子含量、心肌组织中炎症小体NLRP3相关蛋白表达及形态学的影响。结果 Sal B可以明显减轻心肌组织坏死和炎细胞浸润,明显降低心电图中T波值(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Sal B各剂量组的肌酸激酶(creatine kinase,CK)值、谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT)值和白细胞介素1-β(interleukin 1-β,IL-1β)值,Sal B中、高剂量组的丙二醛(malonaldehyde,MDA)值及中剂量组的乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)值均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清Sal B中、高剂量组的总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)值明显升高(P<0.05,P<0.01);Sal B给药组的心脏组织中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)和IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 Sal B具有抗ISO所致大鼠心肌缺血作用,该作用机制可能与调控炎症小体NLRP3相关蛋白表达,抑制炎症因子的生成有关。     

藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的分子作用机制研究

目的:从细胞层面观察五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠滑膜组织中细胞因子的影响以及对蛋白表达的调控作用,并探讨其中可能的分子机制。方法:除正常对照组外,大鼠采用弗氏完全佐剂(FCA)造模,随机分为模型对照组、地塞米松组(0.150 mg·kg~(-1))、五味甘露药浴颗粒高剂量组(11.80 g·L~(-1))、中剂量组(5.90 g·L~(-1))、低剂量组(2.95 g·L~(-1)),药浴组40℃药浴30 min·d~(-1),模型对照组和正常对照组40℃温水浴30 min·d~(-1)。给药四周后采用酶联反应、免疫组化法检测并分析五味甘露药浴颗粒对滑膜组织中细胞因子及蛋白表达的干预效应。结果:五味甘露药浴颗粒组大鼠血清中白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、前列腺素E2 (PGE2)、基质金属蛋白酶(MMP-3、TIMP-1)的含量均有不同程度的下降。结论:五味甘露药浴颗粒在类风湿关节炎滑膜病理改变的过程中,通过下调致炎因子(TNF-α、IL-1、IL-6)、上调抗炎因子(IL-10)来激活体内免疫系统,抑制成纤维样滑膜细胞分泌各类细胞因子对滑膜的刺激,来控制关节滑膜炎症,达到抑制RA滑膜细胞增殖、促进细胞凋亡、抗炎、消肿、保护关节骨与软骨的目的。     

金钗石斛生物碱对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的作用

目的观察金钗石斛生物碱(ADNL)对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤小鼠的作用。方法50只C57小鼠随机分为正常对照组,正常给药(ADNL 20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组,模型组和ADNL低、高剂量(10、 20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组,每组10只,连续灌胃7 d。末次给药后2 h,除正常对照组和正常给药组外,其余各组腹腔注射0.2%CCl4玉米油溶液(10 mL·kg~(-1))建立急性肝损伤模型。采用全自动生化仪检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)含量, HE染色观察肝组织病理学变化, RT-PCR检测肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6 (IL-6) mRNA表达水平, Western blot检测TNF-α、 IL-6、 p-核转录因子(NF)-κB p65蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,正常给药组ALT、 AST及肝组织病理学无明显变化,模型组小鼠血清ALT、 AST的含量均明显升高(P <0.05),肝脏组织可见明显病理损伤, TNF-α、 IL-1β和IL-6 mRNA和IL-6、 TNF-α和p-NF-κB p65蛋白表达显著增加(P <0.05)。与模型组比较, ADNL低、高剂量组血清ALT和AST含量显著降低(P <0.05),肝组织病理损伤明显改善, TNF-α和IL-1βmRNA表达显著下调(P <0.05), TNF-α和p-NF-κB p65蛋白表达显著减少(P <0.05), ADNL高剂量组IL-6蛋白和mRNA表达也显著下调(P <0.05)。结论 ADNL对CCl4所致急性肝损伤具有显著改善作用,可能与抑制炎症反应有关。     

藏药五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠的分子作用机制研究

目的:从细胞层面观察五味甘露药浴颗粒对AA模型大鼠滑膜组织中细胞因子的影响以及对蛋白表达的调控作用,并探讨其中可能的分子机制。方法:除正常对照组外,大鼠采用弗氏完全佐剂(FCA)造模,随机分为模型对照组、地塞米松组(0.150 mg·kg~(-1))、五味甘露药浴颗粒高剂量组(11.80 g·L~(-1))、中剂量组(5.90 g·L~(-1))、低剂量组(2.95 g·L~(-1)),药浴组40℃药浴30 min/d,模型对照组和正常对照组40℃温水浴30 min·d~(-1)。给药四周后采用酶联反应、免疫组化法检测并分析五味甘露药浴颗粒对滑膜组织中细胞因子及蛋白表达的干预效应。结果:五味甘露药浴颗粒组(11.8 g·L~(-1)、5.90 g·L~(-1)、.2.95 g·L~(-1))大鼠血清中白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、前列腺素E_2(PGE_2)、基质金属蛋白酶(MMP-3、TIMP-1)的含量均有不同程度的下降(P0.05～0.01)。结论:五味甘露药浴颗粒在类风湿关节炎滑膜病理改变的过程中,通过下调致炎因子(TNF-α、IL-1、IL-6)等、上调抗炎因子(IL-10)来激活体内免疫系统,抑制成纤维样滑膜细胞分泌各类细胞因子对滑膜的刺激,来控制关节滑膜炎症,达到抑制RA滑膜细胞增殖、促进细胞凋亡、抗炎、消肿、保护关节骨与软骨的目的。     

低氧诱导因子-1α对脓毒症肠黏膜屏障的保护作用

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法:SD大鼠随机分4组:假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组(脓毒症+DMOG组)、脓毒症+HIF-1α抑制剂组(脓毒症+Bay87-2243组),每组6只。采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)建立脓毒症模型。ELISA检测大鼠血浆炎性标记物IL-1β、IL-6、TNF-α,氧化应激标记物丙二醛(MDA)以及抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的水平。Western blot检测大鼠肠黏膜HIF-1α表达。HE染色检测肠黏膜病理学损伤。结果:与假手术组相比,脓毒症大鼠炎症因子、氧化应激因子以及HIF-1α显著上调(P<0.05);给予腹腔注射DMOG明显降低脓毒症大鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平(P<0.05);增加血浆SOD、CAT水平(P<0.05);HIF-1α表达上调(P<0.05),肠黏膜病理损伤减轻,Chiu's评分显著降低(P<0.05)。口服灌胃Bay87-2243则得到相反的结果。结论:HIF-1α对脓毒症肠黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与缓解脓毒症炎性反应和抑制氧化应激水平有关。     

杠板归总黄酮抗大鼠肝纤维化作用的机制研究

目的在明确杠板归总黄酮(TFP)抗二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化(HF)药效基础上,探索TFP抗HF的作用机制。方法将90只SD大鼠随机均分为正常组、模型组、秋水仙碱(0.1 mg·kg~(-1))组和TFP(200、100、50mg·kg~(-1))组。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射体积分数为0.5%的DMN溶液(2 m L·kg~(-1)),隔天1次,连续8周。从造模d 1起,各给药组分别给予相应剂量的药物进行干预,正常组和模型组给予等体积的溶媒,每天1次。8周后实验结束,取血和肝组织。取相同位置的肝组织,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病变程度;比色法检测血清ALT、AST、SOD和MDA含量或活性;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C含量;ELISA法检测肝组织TNF-α、IL~(-1)β和IL-6的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织α-SMA、TGF-β1、JAK2、STAT3、pJAK2和p-STAT3蛋白表达。结果与模型组比较,TFP(200、100、50 mg·kg~(-1))能明显改善肝组织病变,降低ALT、AST、HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C表达,降低MDA水平,增加SOD活性,同时减少TNF-α、IL-1β和IL-6释放,抑制α-SMA、TGF-β1、p-JAK2和p-STAT3表达。结论 TFP能够抗DMN诱导的大鼠HF,其机制可能与抗氧化作用,抑制TGF-β1表达,调控JAK2/STAT3信号通路,并抑制炎症反应有关。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路研究愈疡胶囊抗中耳炎的作用

目的构建肺炎链球菌诱导大鼠中耳炎(OM)模型,探讨愈疡胶囊延缓OM炎的作用与机制。方法体外抑菌实验测定愈疡胶囊对肺炎链球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)与最低杀菌质量浓度(MBC)。将50只大鼠均分为模型组、阳性对照组(左氧氟沙星20 mg·kg~(-1))以及愈疡胶囊高、中、低剂量组(600,300,150 mg·kg~(-1)),每组10只。采用鼓室内注射菌液构建模型,灌胃给药,每日1次(20 mL·kg~(-1))。第7天和第14天观察鼓膜情况并收集眼眶静脉血,使用Elisa法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。第14天后处死大鼠,采集中耳鼓室,使用HE染色与扫描电镜观察鼓室黏膜,用Western Blot法检测鼓室Toll-样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-88(MyD88)和磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)的含量。结果体外MIC与MBC分别为12.5,25.0 g·L~(-1);与模型组相比,愈疡胶囊高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IgA和IgG含量均降低,TLR4、MyD88与p-NF-κB蛋白含量均降低(P<0.05),鼓膜观察、HE染色与电镜观察均显示细菌感染情况减轻。结论愈疡胶囊对大鼠细菌感染OM具有抑菌抗炎作用,主要表现为减少炎症与免疫反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。