基于PI3K/AKT/mTOR通路研究杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响

目的:探讨杜仲总黄酮基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响。方法:55只SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余建立PCOS大鼠模型,40只大鼠建模成功,随机分为模型对照组、PI3K抑制剂BKM120 40 mg/kg组、BKM120 40 mg/kg+杜仲总黄酮200 mg/kg组、杜仲总黄酮200 mg/kg组,各组灌胃生理盐水或相应药物,连续干预3 w。Elisa法检测血清促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平;HE染色观察卵巢病理学变化;流式细胞术检测卵巢组织颗粒细胞自噬率;Western blot检测卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白及微管相关蛋白1轻链3 II(LC3 II)表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低P<0.01);大鼠卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,抑制剂组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低(P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组大鼠AMH、LH、T含量明显降低,FSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著降低(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著升高,LC3 II/LC3 I比值显著降低(P<0.01)。模型对照组卵巢表面苍白,黄体减少,出现多个囊状扩张卵泡;杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组卵巢体积减小,表面色泽较红,黄体有所增加,囊状扩张卵泡减少;抑制剂组卵巢体积更大、黄体更少,囊状扩张卵泡更多。结论:杜仲总黄酮可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路降低PCOS大鼠卵巢组织自噬水平,改善其性激素水平。     

归肾丸对卵巢储备功能减退小鼠模型卵巢自噬的影响

目的：探讨归肾丸对卵巢储备功能减退(DOR)小鼠卵巢功能和自噬的影响。方法：将C57BL/6小鼠随机分为5组：正常组、模型组、归肾丸低、中、高剂量组。除正常组外，各组小鼠采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)法建立DOR小鼠模型并给予相应药物。ELISA法检测血清抗苗勒管激素(AMH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E₂)、促黄体生成素(LH)水平；HE染色观察卵巢组织形态；Western blot、qRT-PCR检测卵巢组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1、p62蛋白和mRNA水平。结果：与正常组相比，模型组小鼠血清FSH、LH水平升高(P<0.05),AMH、E₂水平降低(P<0.05);卵巢中生长卵泡和原始卵泡的数量减少，闭锁卵泡增加；卵巢组织LC3和Beclin 1蛋白和mRNA水平增高，p62蛋白和mRNA水平降低。经归肾丸干预后，DOR小鼠血清中FSH和LH激素水平降低(P<0.05),AMH和E₂激素水平增高(P<0.05);卵巢形态改善，原始卵泡和生长卵泡增多，闭锁卵泡减...     

毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTOR信号通路的影响

目的观察毓麟珠对早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢功能、卵泡发育及mTOR通路的影响,探讨其作用机制。方法以小鼠透明带3(Zp3)为抗原,皮下多点注射BALB/c雌性小鼠建立免疫性POI模型。实验分为空白组、模型组、阳性药组和毓麟珠低、中、高剂量,各给药组给予相应药物。HE染色观察小鼠卵巢形态及卵泡,ELISA检测小鼠血清激素水平,Western blot检测卵巢组织AKT、mTOR的蛋白表达,PCR检测mTOR下游相关Rheb、S6k1、4E-BP1的mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠卵巢明显缩小,卵泡数量明显减少,血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)明显升高,抗苗勒氏管激素(AMH)、雌二醇(E2)明显下降,Rheb、S6k1、4E-BP1 mRNA和AKT、mTOR蛋白相对表达量明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组小鼠卵巢增大,卵泡数量增加,血清FSH、LH均下降,AMH、E2均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);小鼠卵巢mTOR蛋白表达及其下游相关Rheb、S6k1、4E-BP1 mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论毓麟珠治疗POI机制可能与调节mTOR信号通路相关因子基因和蛋白表达水平有关,通过促进卵泡发育,改善卵巢功能。     

安坤种子丸对卵巢储备功能下降闭经FSH、LH、E_2、AMH的影响

目的观察安坤种子丸对卵巢储备功能下降闭经(肾虚证)卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗苗勒氏管激素(AMH)的影响。方法将62例患者随机分为治疗组和对照组,对照组服戊酸雌二醇、黄体酮胶囊,治疗组在对照组基础上加服安坤种子丸。观察FSH、LH、E_2、AMH变化及伴随症状改善、停药后月经恢复等情况。结果 2组FSH均降低(P0.05);雌二醇、AMH升高,治疗组优于对照组(P0.05)。LH呈下降趋势,变化小,2组对比差异无明显统计学意义(P0.05),症状改善、停药后月经恢复情况治疗组较对照组明显好转。结论安坤种子丸降低卵巢储备功能下降闭经(肾虚证)患者FSH水平,提高E_2、AMH水平,具有提高卵巢储备功能的影响。     

补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰模型小鼠卵巢PI3K/AKT通路的影响

目的研究补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰小鼠磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、Ki67蛋白表达及各级卵泡数量的影响。方法选用动情周期规律的57只SPF级雌性C57BL/6J型小鼠随机分为空白对照组(7只)、模型组(50只)。模型组使用雷公藤多苷片造模,将成功造模的35只小鼠随机分为模型组、益真低剂量组[仙子益真胶囊0. 75 g/(kg·d)]、益真中剂量组[仙子益真胶囊1. 5 g/(kg·d)]、益真高剂量组[仙子益真胶囊3. 0 g/(kg·d)]和西药组[戊酸雌二醇片0. 15 mg/(kg·d)],每组7只。给予相应药物治疗,治疗21天后采用HE染色法检测卵巢组织的形态变化,计算各级卵泡数目,免疫组化方法检测Ki67蛋白表达,Western blot法检测小鼠卵巢AKT及PI3K蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡百分比降低,Ki67表达、AKT及PI3K蛋白表达降低(P 0. 05,P 0. 01),闭锁卵泡百分比升高(P 0. 01)。与模型组比较,益真低、中、高剂量组及西药组原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡百分比升高,闭锁卵泡百分比降低(P 0. 05,P 0. 01),Ki67表达、AKT及PI3K蛋白表达增高(P 0. 05)。结论补肾填精中药仙子益真胶囊改善卵巢功能的机制可能与提高了卵巢细胞中PI3K/AKT通路活性及细胞增殖状态相关,从而增加了原始卵泡、次级卵泡、窦状卵泡的含量,降低了闭锁卵泡的含量。     

育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备下降大鼠卵巢形态和性激素的影响

目的观察育肾助孕方对雷公藤多苷致卵巢储备功能下降大鼠卵巢组织形态和性激素的影响,探讨其作用机制。方法采用雷公藤多苷药液灌胃制作卵巢储备功能下降大鼠模型。48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组及育肾助孕方低、中、高剂量组,育肾助孕方各剂组分别给予低、中、高浓度育肾助孕方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续14 d。观察大鼠一般情况,取卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)水平,酶联免疫吸附法检测抑制素B(INHB)、抗苗勒管激素(AMH)水平。结果与空白组比较,模型组卵巢组织萎缩,各级卵泡数目减少,卵巢指数和E2、INHB、AMH水平降低,FSH、LH水平升高(P0.01);与模型组比较,育肾助孕方高剂量组卵巢组织形态明显改善,各级卵泡和黄体增加,闭锁卵泡减少;卵巢指数和E2、INHB、AMH水平升高,FSH、LH水平降低(P0.01),且INHB与AMH具有显著相关性(P0.01)。结论育肾助孕方可调节性激素水平,促进卵泡生长和分泌,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能。     

养精种玉汤对卵巢储备功能减退模型大鼠RNA-m6A修饰的影响

目的 观察养精种玉汤对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠RNA-m⁶A修饰的影响,探讨其改善卵巢储备功能的机制。方法 选取60只动情周期正常的SD雌性大鼠,采用雷公藤甲素诱导DOR模型,将大鼠分为空白组、模型组、脱氢表雄酮(DHEA)组和养精种玉汤低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组),每组10只,给药组分别灌胃相应药液,连续2周。HE染色观察卵巢组织形态,ELISA检测血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗米勒管激素(AMH)含量,Western blot、qPCR测定卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白和基因表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织皮质区损伤,颗粒细胞脱落,各级卵泡数量明显减少,闭锁卵泡及黄体数量增加(P<0.05);血清E2、AMH含量减少,FSH、LH含量增加(P<0.05),卵巢组织METTL3、FTO、YTHDC2蛋白及m RNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,中药高剂量组大鼠卵巢组织损伤明显改善,各级卵泡数量增加,闭锁卵泡及黄体数量减少(P<0.05);血清E2...     

紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征不孕症大鼠卵巢超微结构的影响及作用机制探讨

目的：探讨紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症大鼠卵巢超微结构的影响及作用机制。方法：取60只SD大鼠采用随机数字表分为正常对照组(10只)、PCOS造模组(50只),后者通过来曲唑法复制PCOS大鼠模型,并将建模成功大鼠按照随机数字表分为模型组、二甲双胍组及紫仙助孕汤低、中、高剂量组。观察各组大鼠受孕率;ELISA法检测血清E₂、T、LH、FSH水平;HE染色观察大鼠卵巢组织病理学变化;透射电镜下观察大鼠卵巢超微结构改变;RT-qPCR法检测卵巢组织PI3K、AKT、GLUT4、Foxo3a mRNA表达;Western Blot法检测卵巢组织PI3K、AKT、p-AKT、GLUT4、Foxo3a蛋白表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢组织各级卵泡、黄体数目及卵泡颗粒细胞层数明显减少,颗粒细胞呈明显凋亡形态,囊状卵泡和闭锁卵泡增加,卵泡膜细胞内脂滴和线粒体明显增多,存在大量的滑面内质网,受孕率、血清E₂水平和卵巢组织PI3K、AKT、GLUT4 mRNA及蛋白表达显著降低,血清T、LH、FSH水平及卵巢组织Foxo3a mR...     

电针对多囊卵巢综合征大鼠自噬相关因子的影响

目的:观察电针对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠PI3K/AKT通路介导的自噬及性激素的影响,探讨电针治疗PCOS排卵障碍性不孕的可能机制。方法:SD大鼠随机分成对照组、模型组、电针组,每组10只。使用来曲唑灌胃21 d制备PCOS大鼠模型。电针组电针大鼠双侧"三阴交""太冲",每次20 min,每天1次,连续14 d。HE染色观察卵巢形态结构,ELISA法检测血清雄激素(T)、促黄体生成素(LH)、抗缪勒氏管激素(AMH)水平,Western blot法检测卵巢组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组T、LH、AMH水平显著升高(P0.05),PI3K和AKT表达明显降低(P0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ明显升高(P0.05)。与模型组比较,电针组T、LH、AMH水平显著降低(P0.05),PI3K和AKT表达水平明显升高(P0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ明显降低(P0.05)。结论:电针可能通过上调PCOS大鼠卵巢组织中PI3K和AKT的蛋白表达进而降低卵巢组织自噬水平,从而改善其性激素水平及卵泡的生长发育状态,这可能是电针治疗PCOS排卵障碍性不孕的机制之一。     

阿胶对正常雌性小鼠雌激素样作用研究

目的:观察阿胶对正常雌性小鼠子宫和卵巢系数、雌激素水平、子宫和卵巢病理学变化的影响。方法:48只正常雌性小鼠随机分为空白对照组、阿胶高剂量组、阿胶低剂量组和戊酸雌二醇组,每天灌胃给予相应药物或蒸馏水,连续灌胃30 d。末次灌胃后称小鼠体质量,计算各组小鼠子宫和卵巢系数,Elisa法检测各组小鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的含量,观察小鼠子宫、卵巢病理学变化。结果 :与空白对照组比较,阿胶高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠子宫系数增大,差异有统计学意义(P0.01);阿胶高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠血清E2水平升高,血清FSH、LH水平降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 :阿胶对正常雌性小鼠具有一定的雌激素样作用。     

PI 3K/Akt/mTOR信号通路介导艾灸改善大鼠卵巢早衰的研究

目的:探讨艾灸对雷公藤多苷片诱导的卵巢早衰大鼠卵巢的保护作用及机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组,每组15只。除空白组外,模型组和艾灸组均采用雷公藤多苷片(40mg/kg)灌胃,每日1次,连续6周;灌胃第4周给予艾灸组悬灸"关元"及双侧"三阴交"10min,每日1次,治疗3周。HE染色观察卵巢组织形态结构;ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)等激素水平,白介素-6(IL-6)、IL-1β等炎性因子含量;Western blot法测定卵巢组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI 3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)含量及磷酸化水平。结果:与空白组相比,模型组卵巢内卵泡减少,卵泡的粒细胞层次明显减少,黄体减少,闭锁卵泡明显增多,血清中E2显著降低(P0.01),LH、FSH、IL-6、IL-1β含量均显著增加(P0.01),卵巢组织中p-PI 3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达显著增加(P0.01);与模型组相比,艾灸组卵巢组织病理损伤改善,艾灸能够显著降低血清中LH(P0.05)、FSH(P0.01)、IL-6(P0.01)、IL-1β(P0.01)含量,增加E2含量(P0.05),降低卵巢组织磷酸化PI 3K、Akt、mTOR的表达水平(P0.01)。结论:艾灸能够改善雷公藤多苷片诱导的大鼠卵巢早衰,其机制可能与抑制PI 3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化相关。     

补肾活血方对多囊卵巢综合征-胰岛素抵抗模型大鼠性激素水平及胰岛素抵抗的影响

目的 观察补肾活血方对多囊卵巢综合征-胰岛素抵抗（PCOS-IR）模型大鼠性激素水平及胰岛素抵抗的影响,探讨其作用机制。方法 采用来曲唑联合高脂饮食喂养建立PCOS-IR大鼠模型,将30只成模大鼠随机分为模型组、西药组和补肾活血方低、中、高剂量组（中药低、中、高剂量组）,每组6只,另取6只正常大鼠作为空白组。造模成功后,给药组分别予相应药物干预21 d。血糖仪检测大鼠空腹血糖（FPG）,评估大鼠糖耐量;ELISA检测血清卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、抗米勒管激素（AMH）水平;RT-PCR和Western blot分别检测卵巢组织蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）mRNA和蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠FPG、血糖曲线下面积（AUC）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显著升高（P<0.01,P<0.05）,血清FSH、E2水平显著降低（P<0.01）,LH、T、AMH水平显著升高（P<0.01）,卵巢组织AKT、mTOR mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01,P<0.05）;...     

左归丸及右归丸对卵巢早衰小鼠卵巢衰老的预防作用

目的研究左归丸及右归丸对卵巢早衰小鼠卵巢功能及卵巢沉默调节蛋白(SIRTs)表达的影响。方法 48只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、左归丸及右归丸4组,除正常组外,其余3组动物腹腔注射环磷酰胺建立卵巢早衰模型。给药8周后,采用卵泡计数和血清黄体生成素(LH)、基础卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)、基础抑制素B(INHB)评价卵巢功能。RT-PCR法和Western blot法测定卵巢组织SIRTs mRNA和蛋白的表达。结果模型组小鼠卵巢卵泡计数、SIRT1、SIRT3及血清AMH、INHB显著低于正常组;血清LH、FSH显著高于正常组。左归丸和右归丸组卵泡计数、SIRT1及血清AMH、INHB显著高于模型组;血清LH、FSH显著低于模型组。右归丸组原始卵泡数显著高于左归丸组。结论左归丸和右归丸具有显著的抗卵巢衰老作用,其作用机制与对卵巢SIRT1表达的上调作用有关。     

朱氏调经促孕方加减治疗卵巢储备功能下降的临床观察

目的 观察朱氏调经促孕方加减治疗卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve, DOR)患者的临床疗效。方法 将90例患者按照随机数字表法分为2组。对照组45例予雌二醇/雌二醇地屈孕酮片；治疗组45例予朱氏调经促孕方加减治疗。2组均连续服药3个月后统计血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清卵泡刺激素与黄体生成素比值(FSH/LH)、雌二醇(E2)、抗缪勒管激素(AMH)水平及窦卵泡个数(AFC),并观察2组治疗前后中医证候积分改善情况，统计临床疗效。结果 治疗后2组经期、经色、经量、腰骶酸痛、小腹胀痛、头晕耳鸣、痛经、性欲减退积分及总分均有明显降低(P<0.05),且治疗组积分(除经期、性欲减退外)与对照组相比较，差异有统计学意义(P<0.05);2组治疗后FSH、LH、FSH/LH、E2、AMH水平及AFC个数组内比较均改善(P<0.05),治疗组FSH、FSH/LH、E2与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05);2组总有效率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 朱氏调经促孕方加减能够有效改善DOR...     

定坤丹对雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下小鼠性激素和卵泡计数的影响

目的:建立雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下(DOR)小鼠模型,探讨定坤丹对DOR的治疗作用,为其临床应用提供科学依据。方法:将60只动情周期规律的雌性小鼠随机分为空白组、模型组、定坤丹低、中、高剂量组和戊酸雌二醇组,每组10只。除空白组外,其余各组予40 mg·kg~(-1)雷公藤多苷混悬液灌胃;同时定坤丹低、中、高剂量组分别予1. 64,3. 28,6. 56 g·kg~(-1)定坤丹混悬液灌胃,戊酸雌二醇组予0. 15 mg·kg~(-1)戊酸雌二醇混悬液灌胃,1次/d,连续30 d。观察小鼠的一般状况、体质量、性腺指数和动情周期变化,采用放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)和雌激素(E_2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态和卵泡计数。结果:与空白组比较,模型组小鼠动情周期处于紊乱状态,子宫和卵巢指数明显下降(P0. 05),血清FSH水平明显上升(P0. 05),LH呈上升趋势,E_2呈下降趋势,各级生长卵泡和黄体数减少、闭锁卵泡明显增加(P0. 05)。与模型组比较,定坤丹组半数小鼠恢复规律动情周期,戊酸雌二醇组小鼠动情周期停滞在动情期;定坤丹中、高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠子宫和卵巢指数增加,血清FSH值明显下降(P0. 05),LH呈下降趋势;定坤丹高剂量组和戊酸雌二醇组血清E_2值明显上升(P0. 05);定坤丹能增加各级生长卵泡和黄体数、减少闭锁卵泡数,其中以中剂量效果更佳(P0. 05),戊酸雌二醇组能明显增加原始卵泡、窦状卵泡和黄体数(P0. 05),但不能减少闭锁卵泡数。结论:定坤丹能够通过改善血清性激素,促进卵泡发育、减少卵泡闭锁从而对DOR起到治疗作用。     

不同剂量加减苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR大鼠胰岛素抵抗的影响

目的建立多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(polycystic ovary syndrome with insulin resistance,PCOS-IR)动物模型,观察加减苍附导痰汤高、中、低剂量组对肥胖型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠胰岛素抵抗和血清性激素水平的影响,以及卵巢组织及骨骼肌组织胰岛素信号通路磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PI3K/PKB/mTOR)蛋白表达水平的影响。方法选取2 1日龄SPF级SD雌性大鼠6 0只,其中1 2只为空白对照组,剩余48只利用经典Poresky造模方法联合高脂饲料诱导肥胖型PCOS-IR大鼠。造模成功后,随机分为模型对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组各12只,分别实施不同的干预措施。经治疗28天后,用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FPG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),酶联免疫法检测大鼠血清中促黄体生成素(LH)、促卵泡生长素(FSH)、睾酮(T);Western Blot法检测大鼠卵巢组织中PI3K、PKB、mTOR蛋白水平的表达。结果 (1)与空白对照比较,模型对照组体重、FPG、FINS、IR、LH、FSH、T、mTOR蛋白表达水平显著升高(P0.05),PI3K/PKB蛋白表达水平显著降低(P0.05);(2)与模型对照组比较,中药中剂量组体重显著降低(P0.05),中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组FPG、FINS、IR、T值显著下降(P0.05);(3)在卵巢组织中,中药高剂量组PI3K/PKB蛋白表达比中药中剂量组、中药低剂量组显著升高(P0.05);(4)在骨骼肌组织中,中药高剂量组、中药中剂量组PI3K/PKB蛋白表达比中药低剂量组显著升高(P0.05),中药中剂量组、中药高剂量组mTOR蛋白表达水平比低剂量组显著降低(P0.05)。结论 (1)中药加减苍附导痰汤能够明显改善PCOS-IR大鼠体重、胰岛素抵抗情况及高雄状态。(2)中药上调PCOS大鼠卵巢组织及骨骼肌组织胰岛素信号通路PI3K/PKB/mTOR的活性,使蛋白PI3K/PKB相对表达量升高,mTOR蛋白相对表达量下降,具有浓度依赖性,推测中药改善肥胖型PCOS-IR大鼠胰岛素抵抗情况可能通过影响胰岛素信号通路PI3K/PKB/mTOR来起作用的。     

坤泰胶囊在卵巢储备功能降低的不孕症患者中的应用

目的探讨中药坤泰胶囊在卵巢储备功能降低的不孕症患者中的应用。方法选择自2013年10月31日至2015年10月31日在我院生殖医学科门诊就诊的不孕症患者中,根据入选标准以及用药记录,分为3组,芬吗通组55例,月经第3天测定卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、基础窦卵泡数(AFC)、抗苗勒管激素(AMH),开始口服芬吗通1片qd,连用3个月,月经第3天再次测定FSH、LH、E_2、AFC、AMH;坤泰组(芬吗通+坤泰组)58例,月经第3天测定FSH、LH、E_2、AFC、AMH,开始口服芬吗通1片qd加坤泰胶囊4粒tid,连用3个月,月经第3天再次测定FSH、LH、E_2、AFC、AMH;空白对照组(未用药,自然周期试孕)60例,月经第3天测定FSH、LH、E_2、AFC、AMH,3个月后再次测量FSH、LH、E_2、AFC、AMH;比较前后两次FSH、LH、FSH/LH、E_2、AFC、AMH水平。结果组内比较:芬吗通组FSH、LH降低,FSH/LH升高,有统计学意义(P0.05),AMH、AFC呈升高趋势,无统计学意义(P0.05);坤泰组FSH、LH降低、FSH/LH升高,有统计学意义(P0.05),AMH、AFC呈升高趋势,无统计学意义(P0.05);空白对照组FSH、LH、FSH/LH升高,有统计学意义(P0.05),AFC、AMH降低,有统计学意义(P0.05)。组间比较:空白对照组FSH、LH、FSH/LH升高,有统计学意义(P0.05);AFC、AMH降低,有统计学意义(P0.05);芬吗通组、坤泰组FSH、LH、FSH/LH、AFC、AMH组间比较无统计学意义(P0.05)。结论坤泰胶囊能够改善卵巢储备功能,并有助于妊娠。     

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响

目的探讨坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠的影响。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、坤泰胶囊组(0.5 g/kg)、西药组[戊酸雌二醇片(0.12 mg/kg)、黄体酮胶囊(18 mg/kg)]、中西药组,雷公藤多苷片(50 mg/kg)灌胃14 d建立卵巢储备功能下降模型。ELISA法检测抗苗勒氏管激素(AMH)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平,HE染色观察卵巢变化,Western blot、实时荧光定量PCR检测大鼠卵巢组织Smad2、Smad3、Smad7表达。结果与模型组比较,坤泰胶囊组、中西药组、西药组能显著提高E2、AMH水平及Smad2、Smad3表达,且显著降低Smad7表达(P<0.05);中西药组、西药组能显著降低FSH、LH水平(P<0.05)。药物干预后,各级卵泡发育,卵泡结构完整,卵泡外围包绕的颗粒细胞层数、黄体数量多于模型组,排列规则,发育尚可。结论坤泰胶囊可能通过调控卵巢组织Smad2/3/7表达,促进及维持卵泡发育,从而改善卵巢储备功能下降大鼠卵巢功能。     

更年汤对肾阳虚围绝经期模型大鼠卵巢PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响

目的:探讨肾阳虚围绝经期模型大鼠在自拟更年汤不同剂量干预下对卵巢PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响。方法:选24只4～6月龄的青年大鼠作为对照组,构建肾阳虚模型。另采集阴道脱落细胞将10～12月龄雌性SD大鼠筛选出围绝经期模型,并将该模型大鼠随机分为模型组、利维爱组、更年汤低、中及高剂量共5组,每组24只。以上6组均给予相应药物灌胃,末次给药24 h后,检测卵巢组织中IGF-1、IGF-1R及PI3K/AKT/mTOR蛋白表达。结果:更年汤高剂量组、西药组IGF-1、IGF-1R及PI3K/AKT/mTOR蛋白表达均较高,与模型组比较均有统计学差异(P0.05)。结论:更年汤能改善肾阳虚型围绝经期模型大鼠卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR蛋白表达,可能与能调节IGF-1及其受体的表达量有关。     

七子益肾理冲汤对DOR大鼠卵巢储备的影响

[目的]探讨七子益肾理冲汤对脱氧乙烯基环己烯(VCD)致卵巢储备功能低下(DOR)大鼠卵巢储备功能的影响。[方法]60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药低、中、高剂量组及脱氢表雄酮(DHEA)组。模型组采用VCD注射制作DOR大鼠模型。观察卵巢指数,HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测促卵泡刺激素(FSH)、血清雌二醇(E2)及抗穆勒管激素(AMH)水平。[结果]与空白组比较,模型组卵巢组织萎缩,各级卵泡数目减少,卵巢指数和E2、AMH水平降低,FSH水平升高(P0.05);与模型组比较,中药高剂量组卵巢指数上升,卵巢组织形态明显改善,原始卵泡和黄体增加,闭锁卵泡减少;E2、AMH水平升高,FSH水平降低(P0.05)。[结论]七子益肾理冲汤可修复卵巢储备的损失,促进卵泡生长,抑制卵泡闭锁。