miR-301通过激活Wnt/β-catenin信号通路改善冠心病大鼠心肌细胞凋亡

目的]探讨miR-301影响冠心病大鼠心肌细胞凋亡的机制。 [方法]SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-301激动剂组(agomir miR-301组)、miR-301激动剂对照组(agomir NC组)、Wnt/β-catenin通路抑制剂组(Dkk1组)及agomir miR-301＋Dkk1组,每组10只。除对照组外,其余各组均高脂喂养建立大鼠冠心病模型,连续给药1周后,超声检测大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)、左心室舒张期末内径(LVEDD)和左心室收缩期末内径(LVESD)等心功能指标。HE染色观察大鼠心肌组织形态,TUNEL检测心肌细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测心肌组织miR-301表达,Western blot检测大鼠心肌组织Caspase-3、Bax、Wnt3a及β-catenin蛋白表达。 [结果]与对照组相比,模型组大鼠LVEF、FS降低49.2%、49.1%,心肌组织miR-301表达水平降低69.0%,Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平降低60.7%、39.7%(P＜0.05),LVEDD、LVESD升高32.2%、99.6%,心肌细胞凋亡率升高1362.6%,心肌组织Caspase-3、Bax蛋白表达水平升高100.0%、114.6%(P＜0.05);与模型组相比,agomir miR-301组大鼠LVEF、FS升高71.4%、71.8%,心肌组织miR-301表达水平升高1935.5%,Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平升高102.4%、45.1%(P＜0.05),LVEDD、LVESD降低15.6%、39.2%,心肌细胞凋亡率降低65.0%,心肌组织Caspase-3、Bax蛋白表达水平降低70.2%、78.4%(P＜0.05),而Dkk1可逆转这种现象。 [结论]miR-301通过激活Wnt/β-catenin信号通路改善冠心病大鼠心肌细胞凋亡。     

去卵巢对大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探索去卵巢对大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将20只3月龄SD雌性大鼠随机分为去势组和正常对照组,每组10只。去势组大鼠行双侧卵巢切除术,正常对照组大鼠不作任何处理。去除卵巢12 w后,取血检测血清雌二醇、骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平;取左股骨进行骨密度检测;取右股骨骨髓检测低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)和β-catenin mRNA和蛋白表达。结果去势组大鼠血清雌二醇水平较正常对照组显著下降(P<0.01),骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平较正常对照组显著增高(P<0.01);去势组大鼠骨密度比正常对照组显著降低(P<0.01);去势组的β-cantenin mRNA和蛋白表达比正常对照组显著增高(P<0.05),尽管去势组的LRP5 mRNA和蛋白表达比正常对照组增高,但差异没有统计学意义。结论大鼠去卵巢12 w后Wnt/β-catenin信号通路被激活。     

Wnt/β-catenin信号通路对动脉粥样硬化的调节作用

动脉粥样硬化是由内皮细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞等多种细胞功能障碍所致的血管壁疾病,异常血脂为其重要导火索。近年来大量研究表明Wnt蛋白在不同种类细胞中广泛表达,并且对内皮损伤,巨噬细胞泡沫化等方面具有显著的调节作用。现具体综述Wnt/β-catenin信号通路在动脉粥样硬化发生及发展中的作用。     

Wnt/β-catenin信号通路介导参麦注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用

目的观察Wnt/β-catenin信号通路是否介导参麦注射液(SM)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的脑保护作用。方法 84只SD大鼠按随机区组的方法分成7组:假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、参麦注射液+模型组(SM+MCAO)、生理盐水(NS)+模型组(NS+MCAO)、磷酸盐缓冲液(PBS)+参麦注射液+模型组(PBS+SM+MCAO)、Wnt/β-catenin拮抗剂Dickkopf-1(Dkk-1)+参麦注射液+模型组(Dkk-1+SM+MCAO)、Dkk-1+模型组(Dkk-1+MCAO),每组12只。采用线栓大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立大鼠CIRI模型。在脑缺血即刻,SM+MCAO组、PBS+SM+MCAO组、Dkk-1+SM+MCAO组大鼠腹腔注射参麦注射液(15 mL/kg),NS+MCAO组大鼠注射等量生理盐水。Dkk-1+SM+MCAO组、Dkk-1+MCAO组大鼠分别在建立模型前30 min脑室注射Dkk-1(1 g/L,1μL),PBS+SM+MCAO组大鼠脑室注射等量PBS。再灌注24 h,评估各组大鼠神经行为学评分,检测脑梗死体积以及脑梗死半暗带区Bcl-2、Bax和β-catenin蛋白表达量,并计算Bcl-2/Bax比率。结果与假手术组相比,MCAO组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、Bcl-2和Bax以及β-catenin蛋白表达量均增加(P0.05),而Bcl-2/Bax比率减小(P0.05);与MCAO组相比,SM+MCAO组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积以及Bax蛋白表达量明显减少(P0.05),Bcl-2和β-catenin蛋白表达量以及Bcl-2/Bax比率明显增加(P0.05);与SM+MCAO组相比,Dkk-1+SM+MCAO组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、Bax蛋白表达量明显增加(P0.05),而Bcl-2蛋白表达量、Bcl-2/Bax比率明显减小(P0.05)。结论参麦注射液通过上调Wnt/β-catenin信号通路改善CIRI大鼠的脑损伤。     

Wnt/β-catenin信号通路在糖尿病创面难愈中的作用

目的 探讨Wnt/β-catenin信号途径在糖尿病创面难愈中的作用.方法 在1型糖尿病大鼠制作背部皮肤缺损,分为对照组、糖尿病组、氯化锂组和表皮生长因子(EGF)组,观察背部创面愈合情况及β-catenin表达变化.结果 伤后各组大鼠创面未见感染征象.对照组、氯化锂组及EGF组大鼠与糖尿病组大鼠相比,创面愈合时间短,创面愈合率高,伤腔容积缩小显著,肉芽组织成熟,且β-catenin阳性细胞率高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 Wnt/β-catenin信号通路参与了糖尿病大鼠创面愈合过程.

Abstract：

Objective To investigate the role of Wnt/β-catenin signaling pathway in impaired wound healing of diabetes mellitus.Methods The back skin defect was produced in rats with type1diabetes.All of these rats were divided into normal group, diabetes group, lithium chloride group, and epidermal growth factor (EGF) group.The back wound healing and β-catenin expression were observed.Results There were no signs of infection in the wound of rats after injury.Compared with diabetic group, the wound healing time was shorter,wound healing rate was higher, wound cavity volume was smaller, granulation tissue was more mature, and β-catenin positive cell rate was higher in normal group, lithium chloride group, and EGF group(P＜0.05 or P＜0.01).Conclusions Wnt/beta-catenin signaling pathway is involved in the process of wound healing in diabetic rats.     

Wnt/β-catenin信号通路通过下调自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤

目的观察Wnt/β-catenin信号通路通过调控大鼠皮层神经元细胞自噬水平对脑缺血再灌注(CIR)损伤的影响。方法将56只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、CIR组、Wnt/β-catenin激动剂氯化锂(Li Cl)处理组(Li Cl+CIR组)、生理盐水(NS)处理组(NS+CIR组),每组14只。采用大脑中动脉线栓阻塞法建立大鼠CIR损伤模型,缺血2 h后再灌注24 h。采用Garcia神经功能缺陷评分评估各组大鼠神经行为学改变;氯化三苯基四氮唑染色测定脑梗死体积;Western blot测定大鼠皮层β-catenin、LC3-Ⅱ及P62蛋白表达。结果再灌注24 h后,与Sham组相比,CIR组神经行为学评分升高,脑梗死体积增加,皮层β-catenin表达降低,LC3-Ⅱ表达升高,P62蛋白表达水平下降(P0.05);与CIR组相比,Li Cl+CIR组神经行为学评分降低,脑梗死体积减少,皮层β-catenin表达增加,LC3-Ⅱ表达降低,P62蛋白表达水平增加(P0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号通路通过调控自噬改善大鼠CIR的神经损伤。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阿魏酸对大强度力竭运动大鼠软骨细胞损伤的保护作用

目的探讨阿魏酸(FA)对大强度力竭运动大鼠软骨细胞损伤的保护作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将5周龄的SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、力竭运动模型组(E组)、低剂量组、高剂量组,各组建模后,对软骨细胞进行染色鉴定,并采用透射电镜观察细胞超微结构的形态学变化;取软骨细胞体外培养后,CCK-8法检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素样生长因子(IGF)-1和前列腺素(PG)E2水平,Western印迹检测Wnt2、p-GSK-3β、β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)13、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果模型组软骨细胞基质着色深,出现严重变形,细胞核均着色;而低剂量组及高剂量组着色较浅,部分细胞核着色,尤其是高剂量组改善明显。超微结构显示,模型组细胞大部分呈现肿胀状态,细胞核形态异常,线粒体数目明显减少,大部分粗面内质网高度扩张,部分溶解断裂;而高剂量组细胞变化明显,少部分细胞肿胀,细胞核基本正常,可见线粒体空泡化及轻度扩张的粗面内质网。与空白组相比,模型组细胞增殖率、IGF-1及Bcl-2水平均显著降低,而Bax、PGE2和MMP13水平均显著升高;与模型组相比,低剂量组、高剂量组细胞增殖率、IGF-1及Bcl-2水平均显著升高,而Bax、PGE2和MMP13水平均显著降低,且高剂量组升高及降低幅度更明显(均P<0.05)。与空白组相比,模型组Wnt2、p-GSK-3β、β-catenin水平明显升高,FA呈剂量依赖性抑制Wnt2、GSK-3β、β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论FA可以降低溶解蛋白表达,提高OA软骨细胞增殖,抑制OA软骨细胞凋亡,其作用机制可能与Wnt/β-catenin通路有关。     

Wnt/β-catenin信号通路在肝癌中的研究进展

肝癌的发病机制复杂,细胞信号途径转导对其发生、发展起着至关重要的作用,目前倍受关注的是Wnt/β-catenin转导途径。已经发现Wnt/β-catenin信号通路主要通过激活其下游靶基因而导致肝癌的发生与发展。研究Wnt信号通路的调节因子及各信号通路之间的相互作用,深入探讨肝癌发生、发展及转移的机制,为寻找新的肝癌标志物和治疗靶点提供理论依据。现对肝癌中的Wnt信号异常作一综述。     

Wnt／β-catenin信号通路与骨关节炎

骨关节炎是老年人常见的退行性骨关节疾病,以天仃软骨破坏及骨赘形成为主要特点。目前其确切的发病机制尚不明确。近年来研究发现,Wnt／β－catenin信号通路住骨关甘炎发病机制中起着重要作刚。本文对Wnt／β－catenin信号通路与骨关节炎的新近研究进展做一综述。     

异丙酚通过Wnt/β-catenin信号通路对HepG2细胞表达抑制作用的研究

选取人肝癌细胞株(HepG2)平均分为三组,分别加入5μg/m L,10μg/ml和20μg/m L三种浓度的异丙酚1μL,采用ATP—Lite法测定三组48小时后对应的活细胞数,每组重复试验9次,结果取平均值。计算HepG2细胞抑制率:HepG2细胞抑制率(%)=(异丙酚组活细胞数/4×10~4)×100%;采用荧光定量PCR检测对Wnt/β-catenin信号通路的关键因子β-catenin和Tcf-4的基因表达mRNA的作用。结果随异丙酚浓度的增加,HepG2细胞抑制率明显增加,并且因子β-catenin和Tcf-4的基因表达mRNA的计量亦逐渐降低。结论异丙酚可抑制肝癌细胞增殖和侵袭,并诱导HepG2细胞凋亡,可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路在HepG2细胞的表达而发挥抗肿瘤作用。     

吡格列酮通过Wnt/β-catenin信号通路减轻大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的:探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮(PIO)对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的作用及其相关机制。方法:利用10 mmol/Lβ甘油磷酸(β-GP)诱导大鼠VSMC钙化,建立钙化模型(即钙化组);同时以完全培养基培养大鼠VSMC为正常对照组,并分别以不同浓度(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L)PIO干预,观察培养12d,用茜素红染色法检测细胞钙沉积并检测细胞外基质钙离子浓度来观察VSMC钙化程度。Western Blot检测大鼠VSMC的α平滑肌动蛋白(α-SMA)、Runx2、BMP2、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β)及核蛋白cyclin-D1的表达情况。选择合适的PIO浓度(20μmol/L)并以PPARγ拮抗剂GW9662(20μmol/L)干预,观察以上指标的变化。结果:(1)钙化组钙离子浓度较正常对照组明显增高(P0.05),而不同浓度PIO均可减轻VSMC细胞外基质的钙离子浓度(P0.05),同时钙化组茜素红染色较正常对照组明显,而20μmol/L PIO干预组茜素红染色较钙化组减轻最为明显;(2)钙化组大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2、cyclin-D1较正常对照组升高;20μmol/L PIO可显著下调钙化大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2和cyclin-D1,并上调α-SMA的表达;(3)PPARγ拮抗剂GW9662可部分阻断PIO对钙化大鼠VSMC的干预作用。结论:PPARγ激动剂PIO可减轻β-GP诱导的大鼠VSMC的钙化,其作用机制与下调Wnt/β-catenin信号通路活性有关。     

Wnt/β-catenin信号通路与肺纤维化关系的研究进展

肺纤维化是一类慢性进行性呼吸系统疾病,病死率较高,目前尚无根治方法。Wnt/β-catenin信号通路是在进化上高度保守的信号转导通路之一,参与哺乳动物发育,细胞分化、增殖及凋亡等。研究表明,Wnt/β-catenin信号通路在肺纤维化发生发展过程中发挥着重要的调控作用。本文主要综述了Wnt/β-catenin信号通路与肺纤维化的关系。     

臭氧水疗法对KOA大鼠关节软骨及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨臭氧水关节腔联合穴位注射对膝关节骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 将48只SD大鼠随机分为空白组(12只)和造模组(36只)。造模组均给予右后下肢膝关节腔注射木瓜蛋白酶溶液制备KOA模型,造模结束后随机抽取空白组1只、造模组3只大鼠并处死,改良Mankin评分评价造模成功与否,将造模组大鼠随机分为模型组、生理盐水组、臭氧水组,每组11只。进行3 w治疗干预,取关节软骨并制备苏木素-伊红(HE)染色组织切片,光镜下观察并采用改良Mankin法评分;分别采用Western印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠关节软骨中Wnt3a、β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)-13蛋白及mRNA的表达。结果 与空白组相比,臭氧水组、生理盐水组、模型组软骨组织出现的病理变化逐渐加重,改良Mankin评分逐渐升高,Wnt3a、β-catenin、MMP-13蛋白及mRNA的表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、生理盐水组相比,臭氧水组出现的病理变化减轻,改良Mankin′s评分逐渐降低,Wnt3...     

Wnt/β-catenin信号通路在结直肠癌中的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路(Wnt经典信号通路)是目前Wnt信号通路中研究较为深入的一条分支.他在从果蝇到人类的胚胎发育、组织器官形成以及肿瘤发生等重大事件中扮演重要角色.结直肠癌具有发病率和死亡率高的特征,故对其机制进行深入地研究十分重要.结直肠癌的分子生物学研究经常可以发现Wnt/β-catenin信号通路的异常激活.因此,研究Wnt/β-catenin信号通路可能为临床结直肠癌的治疗提供新的潜在靶点.通过回顾近年来相关文献,就Wnt/β-catenin信号通路和其与结直肠癌的关系及以Wnt/β-catenin信号通路为靶点的抗结直肠肿瘤研究做一综述.     

抑制Wnt/β-catenin信号通路可减轻脓毒症急性肺损伤

摘要 目的：探讨抑制Wnt/β-catenin信号通路对脓毒症急性肺损伤(ALI)的影响。方法：选取（250±10）g健康成年SD雄性大鼠50只,随机分为3组：对照组10只、脓毒症ALI组（CLP组）20只、脓毒症ALI治疗组（CLP+XAV939组）20只。统计各组大鼠体重下降率及死亡率,取肺组织观察肺组织病理学变化,通过蛋白印迹法（WB）、免疫组化（IHC）、免疫荧光(IF)、实时定量PCR等技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白（TNF-α、β-catenin、Cyclin D 、LRP5/6）表达在3组之间的差异性。结果：CLP组48h内死亡率为40%,而对照组和CLP+XAV939组无大鼠死亡。对照组大鼠术后48h体重无变化,而CLP组大鼠体重下降20%,CLP+XAV939组下降10%。组织病理学表现,对照组可见完整的肺泡结构,未见炎症细胞浸润;CLP组见肺泡水肿和塌陷,肺泡间隔增厚增宽并有大量炎症细胞浸润,肺血管充血明显;CLP+XAV939组可见基本完整的肺组织结构,炎症细胞数量及分部范围较CLP组减小。WB显示,与对照组比较,CLP组、CLP+XAV939组Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达量上升,且CLP组高于CLP+XAV939组（P<0.01或P<0.05）。 实时定量PCR示,CLP组β-cateninmRNA表达量较对照组增高（P<0.05）,CLP+XAV939组与对照组无差异。 IHC示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内多种细胞内β-catenin蛋白表达量明显增多,且CLP组多于CLP+XAV939组（P<0.05）。IF示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内LRP5/6表达量明显升高,且CLP组高于CLP+XAV939组（P均<0.05）。结论：Wnt/β-catenin信号通路参与脓毒症ALI过程,腹腔注射XAV939抑制Wnt/β-catenin信号通路可减轻ALI。     

Wnt/β-catenin信号通路在肝癌发病机制中作用的研究

Wnt/β-catenin信号通路也称Wnt经典信号通路,参与调控细胞分化、癌变、凋亡及机体免疫、应激等多种病理生理过程。有研究表明Wnt信号通路与肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生相关。深入研究Wnt/β-catenin信号通路在肝癌发病中的作用,将有助于进一步揭示肝癌的发病机制,为肝癌的防治提供新的可能途径及干预靶点。     

Wnt/β-catenin信号通路在郑氏补肝益肾丸治疗骨质疏松症大鼠中的作用

目的 探讨郑氏补肝益肾丸对骨质疏松的影响及其作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组(阿仑膦酸钠)和郑氏补肝益肾丸低、中、高剂量组。假手术组切除卵巢附近部分脂肪组织,其余各组均采用切除双侧卵巢法建立骨质疏松症大鼠模型。术后7 d,郑氏补肝益肾丸低、中、高剂量组分别灌胃给药0.315、0.63、1.26 g/kg,阳性组灌胃给药0.5 mg/kg阿仑膦酸钠,假手术组和模型组灌胃等量生理盐水,1次/d,连续灌胃10周。micro-CT扫描股骨远端重建三维图像,扫描电镜观察股骨干骺端骨结构,HE染色观察骨组织病理损伤情况,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色统计破骨细胞数目,ELISA检测血清骨钙素(osteocalcin, OC)、降钙素(calcitonin, CT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)水平,Western blot检测股骨组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组骨密度(bone mineral density, BM...     

Wnt/β-catenin信号通路与致心律失常性右室心肌病关系的研究进展

炎症、免疫、退行性变、细胞凋亡、基因突变等多种因素未能解释致心律失常性右室心肌病(ARVC)独特的病理学特点——心肌组织脂肪浸润的发生机制。晚近研究表明桥粒斑珠蛋白(Plakoglobin,PG)核移位、Wnt/β-catenin信号通路的抑制、脂肪形成因子的增加,引起心外膜的心脏祖细胞向脂肪细胞分化,是ARVC心肌脂肪浸润的主要分子机制。     

西红花苷基于Wnt/β-catenin信号通路改善阿尔茨海默病大鼠的空间记忆

目的 观察西红花苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马突触小泡蛋白(SYP)和Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为正常对照组、AD模型组、西红花苷组.侧脑室注射 β 淀粉样蛋白(Aβ25～35)建立AD大鼠模型,西红花苷组从次日开始腹腔注射西红花苷(40 mg/kg),连续注射14 d.Morri...