四君子汤调节2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的活性部位筛选研究

目的筛选四君子汤调节2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠糖脂代谢紊乱的活性部位。方法采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量(40 mg·kg^-1)链脲佐菌素(STZ)诱导建立T2DM小鼠胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)模型。将雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组(盐酸二甲双胍,0.03 g·kg^-1)、SJZT组(四君子汤水提液,8.48 g·kg^-1)、SJZT-U组(四君子汤水提醇沉液,8.48 g·kg^-1)及SJZT-D组(四君子汤水提醇沉物,8.48 g·kg^-1),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续28 d。每周测定小鼠体质量;采用血糖仪检测小鼠空腹血糖(FBG);采用ELISA试剂盒测定血清空腹胰岛素(FINS)水平及肝脏中肝糖原(LG)含量;计算IR指数(HOMA-IR);灌胃葡萄糖溶液(1 g·kg^-1)进行口服葡萄糖耐量(OGTT)检测,计算血糖-时间曲线下面积(AUC);采用生化试剂盒检测血清中总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及甘油三酯(TG)含量。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、AUC、HOMA-IR及FBG、FINS、T-CHO、TG含量均明显升高(P<0.01),HDL-C、LG含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的AUC、FINS含量明显降低(P<0.05,P<0.01);SJZT及SJZT-D组小鼠的FBG、HOMA-IR明显降低(P<0.01),LG含量明显升高(P<0.01);SJZT及SJZT-U组小鼠的T-CHO含量明显降低(P<0.05);SJZT组小鼠的TG含量明显降低(P<0.05)。结论四君子汤及其不同提取部位能调节T2DM小鼠的糖脂代谢紊乱,其降糖有效部位为水煎液及水提醇沉物,调脂有效部位为水煎液及水提醇沉液。     

四君子汤调节2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的药效学研究

目的探讨四君子汤调节高糖高脂饮食联合腹腔注射(i.p.)小剂量链脲佐菌素(STZ)致2型糖尿病(T2DM)小鼠糖脂代谢紊乱的药效学变化。方法将60只ICR小鼠按血糖随机分为空白组、模型组、阳性组、四君子汤高剂量(SJZT-H)、四君子汤中剂量(SJZT-M)和四君子汤低剂量(SJZT-L)组,采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量STZ诱导建立小鼠T2DM胰岛素抵抗模型,观察小鼠的一般情况,探讨四君子汤对T2DM小鼠体重(W)、肝脏指数、口服葡萄糖耐量(OGTT)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、和肝糖原(Liver Glycogen,LG)含量的影响。结果四君子汤各给药组均可显著提高T2DM小鼠的OGTT,显著降低其FBG、FINS、LG、HOMA-IR;四君子汤高中剂量组可显著降低2型糖尿病小鼠的T-CHO以及TG。结论四君子汤能显著改善2型糖尿病小鼠的胰岛素抵抗,促进胰岛素功能的恢复,同时可以调节糖脂代谢紊乱。     

当归芍药散对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠模型的影响

目的观察当归芍药散对非酒精性脂肪肝小鼠模型肝功能、肝脏和血清三酰甘油(TG)水平以及肝组织形态学的影响。方法雄性小鼠40只,随机分为正常组10只及高脂高糖造模组30只。造模成功后将高脂高糖组小鼠随机分为模型组、当归芍药散组和奥贝胆酸对照组。当归芍药散组(25.8 g/kg)和奥贝胆酸对照组(0.6 mg/kg)均灌胃给予相应的药物,正常组与模型组小鼠以等量饮用水灌胃,各组均于6周后取材。测定各组小鼠的体质量、肝湿重、肝脏和血清三酰甘油水平,血清空腹胰岛素(FINS)含量、空腹血糖(FBG)含量、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),血清ALT、AST水平,肝组织病理及肝组织NAS评分。结果与模型组比较,当归芍药散组小鼠体质量、肝湿重显著降低(P0.01),肝脏和血清TG水平显著降低(P0.01),血清ALT、AST活性均大幅下降(P0.01),血清FBG、FINS和HOMA-IR均显著降低(P0.01),肝组织NAS总分显著下降(P0.01)。结论当归芍药散可有效抑制小鼠肝脏脂肪沉积,减轻小鼠肝脏炎症损伤。     

尿石素A激活自噬改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗研究

目的研究尿石素A(UA)对2型糖尿病模型小鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及与自噬的关系。方法将C57BL/6小鼠按体质量随机分成4组,即对照组、模型组、尿石素A(50 mg/kg)组、尿石素A(50 mg/kg)联合氯喹(50 mg/kg)组,高脂饲料喂养6周后,ip链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型。各组小鼠ig给药7周,检测小鼠体质量、饮水量、血脂、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);HE染色观察小鼠肝组织病理变化;蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、葡萄糖转运蛋白2(Glut2)、磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK3β)及自噬相关蛋白微管相关蛋白质1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3 Ⅱ/Ⅰ)、选择性自噬接头蛋白(p62)表达水平。结果与模型组比较,UA能够显著改善糖尿病模型小鼠肝组织脂肪变和水肿;显著降低血浆三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、FBG、FINS水平,升高高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平(P0.01);显著降低HOMA-IR,升高ISI(P0.01);上调肝组织p-Akt、Glut2、p-GSK3β、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达,抑制p62蛋白表达(P0.01)。联合氯喹后,小鼠FBG、FINS、HOMA-IR增加,ISI降低(P0.05);肝组织水肿和脂肪病变明显加重;肝组织p-Akt、Glut2、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P0.05),显示自噬抑制剂氯喹明显削弱了UA的作用。结论 UA可能是通过激活肝脏自噬改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗。     

芪药消渴胶嚢对高脂饮食诱导追赶生长大鼠肝脏及骨骼肌糖脂代谢的影响

目的观察益气滋阴中药芪药消渴胶囊对高脂饮食诱导追赶生长大鼠肝脏及骨骼肌糖脂代谢的影响。方法采用限食及开放高脂膳食法复制追赶生长大鼠模型,用不同剂量的芪药消渴胶囊[1.8g/(kg.d),0.6g/(kg.d)]干预,并与吡格列酮组比较,8周后观察各组大鼠血糖、血清游离脂肪酸(FFA)、血清胰岛素(Fins)、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)、血浆脂联素、附睾及肾周脂肪重量及与体重相对比值,肝脏及骨骼肌脂质总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量及葡萄糖摄取率。结果高脂饮食可诱导追赶生长大鼠胰岛素抵抗,与模型组比较,芪药消渴胶囊可降低高脂饮食诱导追赶生长大鼠血清Fins及IRI(P0.01,P0.05);芪药消渴胶囊还能明显降低高脂饮食诱导追赶生长大鼠血中FFA水平,升高血浆脂联素含量,与模型组比较差异有统计学意义(Р0.01,P0.05);大剂量芪药消渴胶囊组还能降低肝脏及骨骼肌TG含量,促进骨骼肌葡萄糖摄取率,其疗效与吡格列酮组相似(P0.05)。结论芪药消渴胶囊可通过不同的干预途径改善高脂饮食诱导追赶生长大鼠的葡萄糖代谢水平和(或)脂代谢以减轻或延缓肝脏尤其是骨骼肌胰岛素抵抗的发生和发展。     

仙鹤草不同提取物对小鼠运动性疲劳及耐缺氧能力的影响

目的考察仙鹤草不同提取物对运动性疲劳小鼠抗疲劳及耐缺氧能力的影响。方法将KM种小鼠随机分为空白组20只和造模组140只,造模组小鼠定时分批进行游泳训练2周。选造模达标运动性疲劳小鼠随机分为模型组、水提取物组、70%乙醇组、正丁醇组、石油醚组、乙酸乙酯组、二氯甲烷组,20只/组。各给药组在游泳训练后30 min灌胃给予相应药物(生药量) 2.4 g/kg,空白组及模型组分别给予同体积蒸馏水,均1次/d,连续1周。末次给药30 min后,每组随机取10只小鼠,测定血清乳酸(LAC)、尿素氮(BUN)水平及肝组织中肝糖原(LG)含量和脑组织中谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)含量;各组剩余10只小鼠依次放入内置10 g新鲜钠石灰的广口瓶内,记录封口后至小鼠呼吸停止所需时间(耐缺氧存活时间)。结果模型组小鼠血清LAC、BUN水平均显著高于空白组(P均0.05),肝组织中LG含量显著低于空白组(P0.05),耐缺氧存活时间显著短于空白组(P0.05);水提取物组、正丁醇组、乙酸乙酯组小鼠血清LAC水平和70%乙醇组、正丁醇组、乙酸乙酯组血清BUN水平均显著低于模型组(P均0.05),水提取物组、70%乙醇组、正丁醇组、乙酸乙酯组小鼠肝组织中LG含量显著高于模型组(P均0.05),正丁醇组、乙酸乙酯组小鼠耐缺氧存活时间显著长于模型组(P均0.05)。模型组小鼠脑组织中GLU含量显著低于空白组(P0.05),GABA、5-HT含量均显著高于空白组(P均0.05);各给药组小鼠脑组织中GLU、GABA含量与模型组比较差异均无统计学意义(P均0.05),正丁醇组小鼠脑组织中5-HT含量与模型组比较显著降低(P0.05)。结论仙鹤草的正丁醇与乙酸乙酯提取物可能是其抗疲劳的主要有效部位,作用机制与干预机体能量代谢、保护缺氧组织有关,其正丁醇提取物对中枢疲劳也有一定影响。     

脂肪细胞因子瘦素、脂联素及趋化素与胰岛素抵抗及妊娠期糖尿病的关联研究

目的探讨血清脂肪细胞因子瘦素、脂联素及趋化素与体质量指数、各生化指标及胰岛素抵抗的关系及妊娠期糖尿病(GDM)发病中所起的作用。方法随机选取妊娠期糖尿病孕妇100例作为GDM组,正常孕妇100例作为对照组,对受试者进行相关生化指标如空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂等检测,根据公式计算胰岛素抵抗指数(HOMAIR)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),并采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清瘦素、脂联素及趋化素水平,分析三者与临床生化指标及胰岛素抵抗的关系。结果 GDM孕妇血清瘦素水平明显增高(P0.05),脂联素水平明显降低(P0.05);趋化素在2组外周血中均有表达,差异无统计学意义(P0.05)。GDM孕妇血清瘦素水平与产前BMI呈正相关(P0.05),与FBG、FINS、HOMA-IR呈显著正相关(P均0.01);正常孕妇血清瘦素水平与FBG、FINS、HOMA-IR均呈正相关(P均0.05),与产前BMI无明显相关性(P0.05)。2组孕妇血清瘦素水平与FINS、HOMA-IR相关系数差异有统计学意义P0.05)。GDM孕妇血清脂联素水平与产前BMI、HOMA-IR呈明显负相关(P0.05),而与FBG、FINS无明显相关性(P0.05);正常孕妇血清脂联素水平与产前BMI、HOMA-IR、FINS呈负相关(P均0.05),而与FBG无明显相关性(P均0.05)。对所有受试者进行分析发现血清脂联素水平与产前BMI、HOMA-IR、FBG、FINS呈负相关(P均0.05),其中与产前BMI独立相关(P0.05)。血清趋化素水平与FBG、FINS、HOMA-IR呈明显正相关(P均0.05),而与产前BMI无明显相关性(P0.05)。结论 GDM孕妇存在较高的血清瘦素水平,且与血糖代谢、胰岛素抵抗密切相关。瘦素通过多种途径参与胰岛素与血糖之间的调节,导致胰岛素抵抗,并参与了GDM的发病。GDM孕妇较正常孕妇脂联素水平降低,血清脂联素水平与体内脂肪含量有关,脂联素参与了孕期糖代谢的调节,不仅是妊娠期胰岛素抵抗发生的机制之一,而且参与了GDM的发病。趋化素与了妊娠期糖代谢及胰岛素抵抗,但可能与GDM的发病无关。     

益气化浊胶囊对KKAy小鼠胰岛素、抵抗素、视黄醇结合蛋白4的影响

目的:观察益气化浊胶囊对KKAy小鼠胰岛素抵抗及脂肪组织抵抗素(resistin)、视黄醇结合蛋白-4(RBP4)表达的影响。方法:将KKAy小鼠随机分为模型对照组(20 mL·kg-1·d-1)、益气化浊胶囊高、低剂量组(2,1 g·kg-1·d-1)、阳性对照(吡格列酮)组(2.5 mg·kg-1·d-1),另选C57BL/6J小鼠为空白对照组(20 mL·kg-1·d-1)。连续灌胃给药10周,每天1次,其中空白对照组、模型对照组,灌服无菌水。10周后测空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、脂肪组织抵抗素(resistin)、视黄醇结合蛋白(RBP)4含量。结果:模型对照组FBG,FINS,HOMA-IR,ISI,resistin,RBP4显著高于正常对照组(P<0.01);益气化浊高剂量组FBG低于模型对照组(P<0.05);益气化浊低、高剂量组FINS,HOMA-IR,ISI均低于模型组(P<0.01);益气化浊高剂量组resistin,RBP4低于模型组(P<0.05)。结论:模型组KKAy小鼠产生明显的胰岛素抵抗,表现为FBG,FINS,HOMA-IR,resistin,RBP4明显增高,ISI降低;益气化浊胶囊明显改善KKAy小鼠胰岛素抵抗状态,其结果为FBG,FINS,HOMA-IR,Resistin,RBP4降低,ISI升高,总体趋势为高剂量组优于低剂量组。     

益气养阴通络方对糖尿病足小鼠胰岛素抵抗及胰岛β细胞的干预作用

目的:观察益气养阴通络方对糖尿病足(diabetic foot,DF)小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹C-肽(fasting C-Peptide,FC-P)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)表达变化,探讨益气养阴通络方对胰岛素抵抗、胰岛β细胞的干预作用。方法:SPF级C57BL/6J雄性小鼠70只,随机抽取10只为正常对照组,予普通饲料喂养,其余小鼠在给予高脂饮食喂养2周后,禁食16 h,腹腔快速注射STZ(streptozotocin,STZ)(120 mg/kg)造模,筛取符合糖尿病诊断标准的小鼠,用于建立DF模型,并按随机数字表分为6组:模型对照组、二甲双胍+西洛他唑组(西药对照组)、通塞脉片组(中药对照组)、益气养阴通络方高、中、低剂量组。连续用药3周,观测各组小鼠的体质量、FBG、血清FC-P、FINS、IGF-1及胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance index,HOMA-IR)的变化,并对胰岛进行免疫组织化学染色。结果:与模型对照组相比,益气养阴通络方高剂量组的体质量增加(P0.05);高、中、低剂量组的FBG、HOMA-IR水平降低(P0.001);高、中剂量组FC-P水平升高(P0.05或P0.001);高剂量组IGF-1含量升高(P0.05)。与低剂量组比较,高、中剂量组的FINS含量增加(P0.05);高剂量组FC-P含量增加(P0.01)。免疫组化染色及图像分析显示:益气养阴通络方能延缓小鼠胰岛萎缩,减轻胰岛细胞的病理损伤。结论:高剂量益气养阴通络方能有效地降低FBG,升高FC-P、IGF-1、FINS含量,降低胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感性,促进胰岛结构及胰岛β细胞的修复,与西药对照组疗效比较接近,但高剂量组的综合效果优于中剂量组、低剂量组以及中药对照组。     

梅连消渴胶囊对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢的影响

目的研究梅连消渴胶囊对Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢的影响。方法高脂饲料喂养雄性SD大鼠5周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30 mg.kg-1),建立类似人类Ⅱ型糖尿病大鼠模型。动物随机分为模型对照组,盐酸二甲双胍组,梅连消渴胶囊高、中、低剂量组及空白对照组,连续灌胃给药4周。给药期间每周测定体重,每天记录动物的饮水量和摄食量;实验结束后测定空腹血糖水平(FBG)、口服糖耐量(OGTT)。末次给药后禁食12 h,腹主动脉采血测血清胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbAlc)。结果与模型组相比,梅连消渴胶囊高、中剂量组能显著降低糖尿病大鼠的FBG和FINS含量,同时改善动物摄食量、饮水量(P<0.01),降低HbAlc、胰岛抵抗指数(HOMA-IR)及OGTT曲线下面积(P<0.05),能明显提高胰岛敏感指数(ISI),高剂量组与二甲双胍组比较无显著性差异。结论梅连消渴胶囊对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢具有较好的调节作用,同时改善大鼠饮水及进食状况,降低大鼠胰岛素抵抗指数。     

黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿总黄酮对2型糖尿病小鼠IR相关因子的影响

目的:研究黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿中总黄酮(TFE)对四氧嘧啶(ALX)诱发2型糖尿病模型小鼠胰岛素抵抗(IR)相关因子的影响。方法:雄性小鼠100只,随机取10只为正常组,喂养基础饲料;其余的采用高脂饲料喂养小鼠6周,单次ip 2%ALX(200 mg·kg-1),建立2型糖尿病小鼠模型。将糖尿病模型小鼠随机分为6组,每组10只,分别为模型组,二甲双胍(150 mg·kg-1)组,两种TFE分别按剂量100,50 mg·kg-1分组,ig给药14 d。于末次给药后取血,检测小鼠血清胰岛素(FINS)、C肽水平;检测小鼠空腹血糖(FBG),注射胰岛素(Ins)40 min后血糖(BG);计算胰岛素耐量(ITT),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰腺指数;观察小鼠胰腺形态学改变。结果:与正常组比较,模型组小鼠血糖升高非常显著(P0.01),空腹血清中C肽,FINS有明显增加(P0.05),胰腺组织损伤极为严重(P0.01),胰腺指数降低非常显著(P0.01)。与模型组相比,两种淫羊藿TFE均能够较明显地改善模型小鼠ITT(P0.05),降低模型小鼠血清C肽、FINS含量及HOMA-IR(P0.05),提高模型小鼠的胰腺指数(P0.05),明显地修复模型小鼠的胰腺组织损伤(P0.05)。两种TFE同剂量组相比,以粗毛淫羊藿TFE作用较为显著(P0.05,P0.01)。结论:两种黔产淫羊藿TFE对ALX诱生的2型糖尿病模型小鼠能增加胰岛素敏感性,较明显地改善模型小鼠胰岛素抵抗相关因子,保护受损的胰腺组织。以粗毛淫羊藿TFE作用较为明显,这可能与粗毛淫羊藿TFE中淫羊藿苷(ICA)含量高有较大关系。     

清肝祛湿活血方对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响

目的:通过观察治疗前后胰岛素抵抗指数的变化,探讨清肝祛湿活血方治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:将90只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,罗格列酮组,清肝祛湿活血方低、中、高剂量组6组,每组15只。适用性喂养7 d后造模。造模周期30 d,期间正常对照组和模型对照组给予普通饲料喂养,其余各组通过高脂饲料喂养+腹腔注射四环素制备非酒精性大鼠脂肪肝模型。模型复制成功后,正常对照组和模型对照组给予生理盐水10μL/(g·d)灌胃,罗格列酮组给予罗格列酮片5μg/(g·d)灌胃,清肝祛湿活血方低、中、高剂量组分别给予清肝祛湿活血方生药5.63,11.25,22.50 g/(kg·d)灌胃,均灌胃30 d。灌胃结束后尾静脉采血检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠HOMA-IR、FPG及FINS均明显升高,差别有统计学意义(P0.01)。与模型对照组对比,罗格列酮组、清肝祛湿活血方各剂量组大鼠HOMA-IR、FPG及FINS均降低,差别有统计学意义(P0.01或P0.05)。与罗格列酮组对比,清肝祛湿活血方中、高剂量组大鼠HOMA-IR、FPG及FINS降低,差别有统计学意义(P0.01或P0.05),而清肝祛湿活血方低剂量组无统计学意义(P0.05)。结论:清肝祛湿活血方能够有效改善非酒精性脂肪肝大鼠的胰岛素抵抗,这可能是中药复方治疗非酒精性脂肪肝的作用机制之一。     

金顶侧耳提取物拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤作用的研究

目的探讨金顶侧耳提取物拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤的作用。方法小鼠以环磷酰胺(85 mg/kg×2)腹腔注射制备肝损伤模型,金顶侧耳提取醇沉上清部分按1.6,0.8,0.4 g/(kg.d)分为3个剂量组,沉淀部分按0.8,0.4,0.2 g/(kg.d)分为3个剂量组,腹腔注射给药(正常对照组注射生理盐水)13 d后测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量及肝组织MDA含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠ALT、AST和MDA含量明显提高(P均<0.05);与模型组比较,金顶侧耳提取物沉淀部分0.8 g/(kg.d)组和0.4 g/(kg.d)组小鼠ALT和AST的活性明显降低(P<0.05或0.01);上清部分0.4 g/(kg.d)组小鼠血清AST的活性明显降低(P<0.05);金顶侧耳提取物沉淀部分0.4 g/(kg.d)组和上清部分0.4 g/(kg.d)组小鼠血清MDA含量明显降低(P均<0.05)。结论金顶侧耳提取物具有一定的拮抗环磷酰胺致小鼠肝损伤的作用,其中沉淀部分的生物活性较强。     

健脾消渴方对2型糖尿病大鼠胰岛细胞分泌功能的影响

目的 探讨健脾消渴方对2型糖尿病(T2DM)的作用及机制。方法 将46只大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(36只)。正常组常规饲料喂养,造模组大鼠高糖高脂饲料喂养。6周后,造模组大鼠一次性腹腔内注射链脲佐菌素(30 mg/kg)建立T2DM模型。36只造模成功大鼠随机分为模型组、优降糖组、中药组,每组12只。优降糖组给予优降糖混悬液0.27 mg/(kg·d)灌胃,中药组给予健脾消渴方水煎液6.36 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水。6周后观察大鼠体重并检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰高血糖素(GC),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素分泌指数(HOMA-β),免疫荧光分析胰岛β、α细胞在胰腺中的分布和定位。结果 优降糖组和中药组给药后FBG、体重较本组给药前显著下降,并且FBG较同时间点的模型组显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,优降糖组和中药组GC水平下降明显(P<0.01),FINS、HOMA-β水平升高(P<0.05或P<0.01),优降糖组FINS、HOMA-IR、HOMA-β水平明显高于中药组(P<0.05)。免疫荧光显示中药组胰岛β细胞数量较模型组和优降糖组明显增多,胰岛α细胞数量减少。结论 健脾消渴方可升高T2DM大鼠FINS、降低GC及改善胰岛素抵抗,调节胰岛α、β细胞在胰腺分布和数量,这可能是其作用机制之一。     

七味白术散对糖尿病小鼠肝脏组织PI3K/Akt信号通路的调节作用

目的:研究七味白术散对高脂饮食与链脲佐菌素(STZ)导致的糖尿病小鼠肝脏组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法:采用网络药理与实验药理学的方法研究七味白术散的降糖作用。通过公共数据库筛选活性成分和疾病靶点,构建成分-靶点和疾病-靶点的PPI网络,进行基因本体(GO),京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析信号通路。以高糖高脂饲料联合腹腔注射80 mg·kg-1·d-1STZ建立糖尿病小鼠模型,分为正常组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、七味白术散祖(七味白术散煎剂18.7 g·kg-1·d-1),灌胃28 d后分析其降糖作用及对血清总胆固醇(T-CHO),空腹胰岛素(FINS)含量和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织的胰岛素受体(IR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),PI3K和Akt蛋白和mRNA的表达。结果:网络药理学研究共筛选到36种活性成分,KEGG分析推测七味白术散可能是通过调节PI3K/Akt信号通路发挥降糖作用的。实验药理学实验表明,七味白术散组与模型小鼠相比,血糖含量、血清TNF-α和T-CHO显著降低(P0.01),FINS显著升高(P0.01)。肝脏组织的IR,IRS-1,PI3K和Akt蛋白和mRNA的表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:七味白术散可下调高脂饮食和STZ导致FINS升高,其调节作用与PI3K/Akt信号通路与胰岛素的代谢效应有关。     

虎杖提取物对2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响

目的:研究虎杖提取物对2型糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。方法:通过高脂饮食加链脲佐菌素建立大鼠2型糖尿病模型,随机分为模型组、消渴降糖胶囊(75 mg/kg)阳性对照组及虎杖提取物高(888 mg/kg)、中(444mg/kg)、低(222 mg/kg)剂量组,另设正常对照组。连续灌胃给药4 w,每2 w检测1次空腹血糖,末次给药后检测血清中游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、糖化血清蛋白(GSP)、胰岛素(FINS)等指标,计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果:虎杖提取物各剂量均可显著降低2型糖尿病模型大鼠空腹血糖并改善其胰岛素抵抗,显著降低2型糖尿病模型大鼠血清FFA、TC、TG及LDL-C含量,提高血清HDL-C含量(P0.05或P0.01),并改善胰腺组织病理学改变;虎杖提取物中、低剂量可显著降低2型糖尿病大鼠GSP含量(P0.05)。结论:虎杖提取物能改善2型糖尿病大鼠糖代谢与脂代谢和胰岛素抵抗情况,对治疗2型糖尿病具有一定疗效。     

降糖消脂片对KK-Ay转基因小鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察降糖消脂片对KK-A~y转基因小鼠稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)、胰腺组织胰岛素(insulin,INS)及胰岛素受体(insulin receptor,InsR)蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料喂养KKAy转基因小鼠,制备糖尿病肥胖小鼠模型。同时选取11只同龄C57小鼠作为正常对照。将成模的55只KK-A~y小鼠采用随机数字表法分为模型组、吡格列酮组(8 mg/kg)、降糖消脂片高、中、低剂量组(分别给予降糖消脂片10、5、2.5 g生药/kg),每组11只。以上各组均灌胃给药,正常对照组及模型组灌胃等体积灭菌水,每日1次,连续8周。给药8周后,称体重并测随机血糖(random blood glucose,RBG);眼静脉丛取血,测定INS、TC及TG水平,计算HOMA-IR及ISI;取胰腺进行形态学观察;采用免疫组化方法检测胰腺组织INS及InsR表达;采用免疫印迹(Western blot)法检测胰腺胰岛素受体β(insulin receptorβ,InsRβ)及胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,造模后各组小鼠出现肥胖,血糖及血脂明显升高(P0.01)。给药8周后模型组小鼠体重增加(P0.01),血糖及血脂稳定在高位水平;与模型组比较,降糖消脂片各剂量组小鼠体重、TG、INS及HOMA-IR水平明显降低(P0.05,P0.01);且高剂量组RBG降低更明显(P0.01);降糖消脂片高、低剂量组小鼠ISI明显升高(P0.05,P0.01)。胰腺病理HE染色结果显示,模型组胰岛萎缩,胰岛数目明显减少,分布稀疏,胰岛密度减低,胰岛细胞代偿性肥大,空泡变性,并可见凋亡细胞,表现为胞浆肿胀,核固缩。降糖消脂片高、中剂量组胰岛细胞数目明显增多,变性及凋亡细胞减少。免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组INS及InsR累积光密度(IOD)值明显降低(P0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组胰腺INS及InsR IOD值明显增加(P0.05,P0.01)。Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组InsRβ及IRS-1蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组InsRβ及IRS-1蛋白表达水平升高(P0.01),与吡格列酮组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论降糖消脂片对KK-A~y糖尿病肥胖小鼠有明显的降糖、降脂及改善胰岛素抵抗的作用,其机理可能是通过增加胰岛细胞InsRβ及IRS-1表达,促进INS与受体的结合,从而改善糖、脂代谢和IR状态。     

痰脂消汤调控PCOS-IR模型大鼠卵巢PI3K/Akt途径探讨

目的:观察痰脂消汤对来曲唑灌胃联合高脂膳食诱导的多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠卵巢胰岛素信号转导途径的影响。方法:来曲唑灌胃联合高脂膳食喂养SD大鼠建立PCOS-IR模型,大鼠随机分为模型组、痰脂消汤组(35 g·kg~(-1)·d~(-1))、二甲双胍组(200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续灌胃20 d;另设正常组。实验结束后,腹主动脉采血,测定血清空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠卵巢胰岛素受体(INSR),胰岛素受体底物(IRS)-1,酯酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织INSR,IRS-1,PI3K,Akt蛋白及其相应磷酸化水平表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠空腹胰岛素(FINS),HOMA-IR水平均显著升高(P0.01),FPG无明显升高;模型组大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平明显降低(P0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显降低(P0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显降低(P0.05)。与模型组比较,中药和二甲双胍治疗后大鼠FINS,HOMA-IR均显著降低(P0.01);大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平均明显升高(P0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显升高(P0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显升高(P0.05)。结论:PCOS大鼠存在IR,卵巢内PI3K/Akt信号途径转导存在异常。痰脂消汤能够显著改善大鼠胰岛素抵抗,可能与调控胰岛素信号转导通路中关键的蛋白表达有关。     

五苓散对高脂膳食诱导小鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察五苓散对高脂膳食诱导的小鼠胰岛素抵抗的影响,探讨其作用机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、罗格列酮组和五苓散低、中、高剂量组,每组10只。除空白组喂食普通饲料外,其他5组均喂食高脂饲料,造成胰岛素抵抗模型。空白组、模型组给予饮用水灌胃,罗格列酮组给予罗格列酮0.75 mg/kg;五苓散低、中、高剂量组给予五苓散药液1.23、3.69、11.07 g/kg灌胃,给药体积0.2 m L/10 g,每日1次。每周测量体质量、腹围。6周末,禁食12 h,摘眼球取血,测量体质量、体长,称量腹部及双肾部脂肪,HE染色制备石蜡切片;测量空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(IRI),检测总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)。结果五苓散各剂量组小鼠体质量、腹围均明显降低(P0.01,P0.001),肝脏脂肪变性改善,脂肪含量、脂肪细胞体积和数目、FPG、FINS、TC、TG、IRI水平明显降低,ISI明显升高(P0.05,P0.01)。结论五苓散具有改善小鼠胰岛素抵抗的作用。     

大丁草2种提取物对二甲苯所致耳肿胀炎症模型小鼠的抗炎作用

目的评价大丁草2种提取物的抗炎作用。方法采用水和75%乙醇2种溶剂分别对大丁草进行提取,所得水提物和醇提物通过二甲苯致小鼠耳肿胀实验、小鼠腹腔通透性实验评价大丁草的抗炎效果。结果抗炎实验结果显示,与生理盐水组比较,大丁草水和醇提取物低(3.2 g/kg)、高剂量组(6.4 g/kg)对二甲苯致小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用,差异具有统计学意义(P0.01,P0.05);高剂量组(6.4 g/kg)对小鼠腹腔通透性具有明显的抑制作用(P0.05)。结论大丁草具有较好的抗炎作用,水提物的效果略优于醇提物。