三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响。方法:大鼠分为正常对照组、模型组、地塞米松0.075 mg/kg组、三子养亲汤1.5 g/kg、3 g/kg和6 g/kg剂量组,采用卵清白蛋白(OVA)致敏,并雾化吸入卵清白蛋白激发复制大鼠支气管哮喘模型,给予不同剂量三子养亲汤进行干预,各组大鼠经末次激发24 h后,取肺组织进行HE染色观察病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠BALF中的IL-10、TGF-β和IL-17、IL-6的含量;采用免疫组化法检测肺组织中IL-10和IL-17蛋白的表达。结果:与模型组相比,三子养亲汤各组和地塞米松组明显减少大鼠BALF中IL-17含量、下调肺组织中IL-17蛋白表达,三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可降低哮喘大鼠BALF中IL-6含量,升高IL-10、TGF-β含量,上调肝组织IL-10蛋白的表达。结论:三子养亲汤能够抑制哮喘大鼠的气道炎症,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡失调有关。     

槲皮素通过抑制支气管哮喘大鼠miR-155表达重塑Th17/Treg细胞平衡的机制研究

目的 观察槲皮素对哮喘大鼠炎症介质水平、支气管病理形态、miR-155、Foxp3、RORγt表达的影响，探讨槲皮素通过抑制哮喘大鼠miR-155表达，以重塑Th17/Treg平衡的可能机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组（0.005 g/kg）、槲皮素低剂量组（0.75 g/kg）、槲皮素高剂量组（3.0 g/kg）、槲皮素高剂量组+miR155抑制剂组。卵蛋白（OVA）激发致敏建立大鼠哮喘模型。各干预组根据分组予以相应剂量药物灌胃或尾静脉注射，干预周期为2周。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞总数及分类；酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IgE及炎症介质[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)]水平；苏木精-伊红染色法（HE）观察支气管病理形态变化；免疫组化法（IHC）检测Foxp3、RORγt蛋白的表达；实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析检测miR-155、Foxp3、RORγt的mRNA水平。结果 与正常组相比，模型组血清IgE、IL-4、IL-5、IL...     

三子养亲汤含药血清对支气管上皮细胞中CysLTs介导的炎症通路的影响

目的:探究三子养亲汤含药血清对支气管上皮细胞中半胱氨酰白三烯(cysteinyl leukotrienes,CysLTs)介导的炎症通路的影响。方法:采用含药血清药理学的实验方法,以1.25%,2.50%和5.00%的三子养亲汤含药血清和空白血清来干预白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和CysLTs共同诱导刺激的支气管上皮细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养基上清液中嗜酸性粒细胞趋化因子-1(eotaxin-1,Eot-1)和Eot-3的浓度,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)法检测支气管上皮细胞中半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor 1,CysLTR1)和CysLTR2表达水平,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测支气管上皮细胞中CysLTR1和CysLTR2 mRNA表达水平。结果:2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组的细胞培养基上清液中的Eot-1和Eot-3含量明显低于同血清含量的空白组(P0.05);1.25%,2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组细胞中CysLTR2蛋白表达水平和CysLTR1 mRNA表达水平与同血清含量的空白组没有显著性的差异;2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组细胞中CysLTR1蛋白表达水平和CysLTR1 mRNA表达水平明显低于同血清含量的空白组(P0.05)。结论:三子养亲汤含药血清通过下调CysLTR1表达以及Eot-1和Eot-3表达和分泌,阻断CysLTs介导的炎症通路来治疗支气管哮喘。     

红景天含药血清对肿瘤坏死因子α 诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 （HFLS-RA）增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组（9.45 mg·kg-1）及红景天低、中、高剂量 组（1.05、2.1、4.2 g·kg-1）大鼠含药血清;体外培养HFLS-RA,以20 ng·mL-1 TNF-α 及10%不同组含药血清对 HFLS-RA 进行干预。采用MTT 法检测各组含药血清对HFLS-RA 细胞的增殖作用;ELISA 法检测细胞上清液 中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素17（IL-17）、转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素10（IL-10）的含量; PCR 法检测细胞中维甲酸受体相关孤儿受体γt（ROR-γt）、信号转导及转录激活因子3（Stat3）、叉头样转录因 子3（Foxp3）mRNA 表达;Western Blot 法检测细胞中ROR-γt、Stat3、Foxp3 蛋白表达。结果与空白组比较, 模型组培养HFLS-RA 24、48 h 后细胞增殖水平明显升高（P＜0.01）,ROR-γt、Stat3 mRNA 及蛋白表达上调 （P＜0.01）,IL-6、IL-17 水平升高（P＜0.01）,Foxp3 mRNA 及蛋白表达下调（P＜0.01）,TGF-β、IL-10 水平降 低（P＜0.01）。与模型组比较,红景天各剂量组HFLS-RA 细胞增殖水平降低（P＜0.01）,ROR-γt、Stat3 mRNA 及蛋白表达下调（P＜0.05,P＜0.01）,IL-6、IL-17 水平降低（P＜0.01）,Foxp3 mRNA 及蛋白表达上调 （P＜0.01）,TGF-β、IL-10 水平升高（P＜0.01）。结论红景天含药血清可抑制TNF-α 诱导的HFLS-RA 细胞 的异常增殖,其机制可能与下调ROR-γt、Stat3 表达及上调Foxp3 表达有关。     

复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中RORγt、Foxp3表达的影响

目的研究复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中RORγt、Foxp3表达的影响。方法复合法(三硝基苯磺酸+乙醇)制备溃疡性结肠炎大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪组(5%)及复方芩柏颗粒剂高、中、低剂量组(6%、12%、24%),灌肠给药3周。然后,评估大鼠饮食量、体质量、结肠组织损伤程度,ELISA法测定血清中TGF-β1、IL-17水平,HE染色观察病理变化,Western blot、RT-PCR法检测结肠组织中RORγt、Foxp3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,复方芩柏颗粒剂组大鼠饮食量、体质量、TGF-β1及IL-17水平、结肠组织损伤程度显著改善(P0.05,P0.01),同时可调节RORγt/Foxp3失衡,并呈一定量效关系。结论复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用可能是通过调控RORγt/Foxp3失衡,从而下调IL-17表达来实现。     

穴位注射对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg相关转录因子及细胞因子表达的影响

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜叉头状转录因子p3(Foxp3)和维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、血清白细胞介素-17(IL-17)表达的影响,从Th17/Treg平衡角度探讨穴位注射治疗AR的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组、非经非穴组,每组8只。采用卵清蛋白致敏法复制AR模型。穴位注射组每隔3d于"印堂"和双侧"迎香"注射地塞米松、转移因子和利多卡因混合液各0.1mL,共4次。非经非穴组同样方法于大鼠左右臀部"后海"与"环跳"连线中点和左(或右)前肢腋窝直下5cm处注射。采用叠加量化记分法进行行为学评分,采用免疫组织化学法检测鼻黏膜中Foxp3和RORγt的表达,酶联免疫吸附法检测血清中IL-17的表达。结果:模型组症状评分高于正常组(P0.05),穴位注射组症状评分低于模型组和非经非穴组(P0.05),非经非穴组症状评分略低于模型组,但差异无具统计学意义(P0.05)。模型组较正常组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率降低(P0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率增高、血清IL-17表达升高(P0.05),Foxp3/RORγt比值下降(P0.05)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率增高(P0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率、血清IL-17表达降低(P0.05),Foxp3/RORγt比值升高(P0.05)。大鼠鼻黏膜Foxp3表达与症状评分呈负相关(P0.05),鼻黏膜RORγt表达和血清IL-17表达与症状评分呈正相关(P0.05),鼻黏膜Foxp3/RORγt与症状评分呈负相关(P0.05)。结论:穴位注射可通过上调鼻黏膜Foxp3表达水平,下调鼻黏膜RORγt表达水平,纠正其失衡,并抑制IL-17产生,从而缓解鼻部炎性反应。     

三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠的作用机制研究

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th1/Th2平衡失调的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成6组,每组各10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松0.75mg组、三子养亲汤1.5、3、6g/kg组。采用卵清白蛋白(OVA)与氢氧化铝致敏,并OVA雾化吸入激发制备大鼠支气管哮喘模型。各组大鼠经末次激发24h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠BALF中的IFN-γ、IL-2和IL-5的含量;免疫组化法检测肺组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达。结果:三子养亲汤6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中IL-5含量;地塞米松组和三子养亲汤3 g/kg、6g/kg组显著升高IL-2含量;三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组显著升高IFN-γ含量。与哮喘模型组比较,三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中GATA-3含量;三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组显著升高Tbet含量。结论:三子养亲汤能够发挥抗支气管哮喘的作用,其机制可能与调控Th1/Th2平衡失调有关。     

艾灸对实验性RA家兔Th17/Treg平衡的影响

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)的抗炎作用,探索艾灸对Th17/Treg平衡的影响。方法:将日本大耳白兔按随机数字表法分为空白组、模型组、治疗组,分别于造模前后以及治疗第1、2、3周测量膝关节周长,用ELISA法测滑膜液的IL-10、IL-17含量,用RT-PCR法测滑膜组织中Foxp3、RORγt基因表达量。结果:与模型组比较,治疗组膝关节周长明显偏低。与空白组比较,模型组IL-10量偏低,IL-17量明显偏高,IL-10/IL-17值明显偏低;与模型组比较,治疗组IL-10量偏高,IL-17含量偏低,IL-10/IL-17值偏高。与空白组比较,模型组Foxp3mRNA表达存在下降趋势,但差异无统计学意义,RORγtmRNA表达升高,Foxp3/RORγt值降低;与模型组比较,治疗组Foxp3mRNA表达存在升高趋势,但差异无统计学意义,RORγmRNA表达降低,Foxp3/RORγt值存在升高趋势,但差异无统计学意义。结论:对于RA艾灸具有明显的抗炎效应,艾灸可显著调节RA家兔滑膜液IL-10、IL-17的含量,可调节滑膜组织中Foxp3、RORγt基因的表达,表明艾灸具有调节Th17/Treg平衡的作用,可能是艾灸治疗RA抗炎效应的重要机制之一。     

龙胆泻肝汤对变应性接触性皮炎模型小鼠Treg/Th17细胞平衡调节作用的实验研究

目的:观察变应性接触性皮炎Treg/Th17细胞平衡的变化,探讨龙胆泻肝汤治疗变应性接触性皮炎的部分干预机制。方法:将40只小白鼠随机分为4组:空白组、模型组、龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组,每组10只。采用DNCB皮肤涂抹方法制备小鼠背部ACD模型。模型复制成功后,龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组小鼠均按照成人2倍等效剂量灌胃,连续给药21 d,空白组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。实验结束后,取小鼠致敏部位皮肤,对皮肤组织中Foxp3、RORγt、IL-17 mRNA及蛋白的表达水平进行检测。结果:与空白对照组比较,模型对照组、西药组、龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型对照组比较,西药组和龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论:Treg/Th17细胞失衡可能是变应性接触性皮炎的发病机制之一,而龙胆泻肝汤可能就是通过作用于该靶点,调节Treg/Th17细胞平衡,而实现其对变应性接触性皮炎的治疗作用。     

苗药金乌健骨方对类风湿关节炎滑膜细胞IL-17-STAT3信号影响的研究北大核心CSCD

探讨苗药金乌健骨方总提物对类风湿关节炎成纤维滑膜细胞（RASF）IL^-17-STAT3信号的影响。培养原代RASF,分为正常血清组、金乌健骨方低、中、高剂量组（0.06,0.6,6.0 g·L^-1）和雷公藤多苷（0.03 g·L^-1）组,分别予相应浓度的金乌健骨方和雷公藤多苷干预24 h。PCR检测RORα,RORγt,STAT3 mRNA的表达,Western blot法检测IL-17R,p STAT3的蛋白活性。结果显示,与正常血清组比较,RASF中RORα,RORγt,IL-17R和STAT3 mRNA的表达量均有所下降,具有统计学意义（P〈0.01）,与雷公藤多苷组比较,金乌健骨方高、中剂量组均能下调RORα,RORγt,IL-17R和STAT3 mRNA的表达,具有统计学意义（P〈0.05）,金乌健骨方高剂量组作用更明显,具有统计学差异（P〈0.01）。与正常组比较,各给药组IL-17R,p STAT3的蛋白表达水平明显下降（P〈0.01）。与雷公藤多苷组比较,金乌健骨方高剂量组下调p STAT3蛋白表达的作用更强,具有统计学差异（P〈0.01）。由此可见,苗药金乌健骨方总提物能够下调RASF中RORα,RORγt,STAT3 mRNA的表达,抑制IL-17R,p STAT3的蛋白活性。     

苗药金乌健骨方对类风湿关节炎滑膜细胞IL-17-STAT3信号影响的研究

探讨苗药金乌健骨方总提物对类风湿关节炎成纤维滑膜细胞(RASF)IL~(-1)7-STAT3信号的影响。培养原代RASF,分为正常血清组、金乌健骨方低、中、高剂量组(0.06,0.6,6.0 g·L~(-1))和雷公藤多苷(0.03 g·L~(-1))组,分别予相应浓度的金乌健骨方和雷公藤多苷干预24 h。PCR检测RORα,RORγt,STAT3 mRNA的表达,Western blot法检测IL-17R,p STAT3的蛋白活性。结果显示,与正常血清组比较,RASF中RORα,RORγt,IL-17R和STAT3 mRNA的表达量均有所下降,具有统计学意义(P0.01),与雷公藤多苷组比较,金乌健骨方高、中剂量组均能下调RORα,RORγt,IL-17R和STAT3 mRNA的表达,具有统计学意义(P0.05),金乌健骨方高剂量组作用更明显,具有统计学差异(P0.01)。与正常组比较,各给药组IL-17R,p STAT3的蛋白表达水平明显下降(P0.01)。与雷公藤多苷组比较,金乌健骨方高剂量组下调p STAT3蛋白表达的作用更强,具有统计学差异(P0.01)。由此可见,苗药金乌健骨方总提物能够下调RASF中RORα,RORγt,STAT3 mRNA的表达,抑制IL-17R,p STAT3的蛋白活性。     

温阳振衰颗粒对miR-155/P38MAPK调控心肌细胞损伤的影响

目的观察温阳振衰颗粒含药血清对H9C2心肌细胞损伤模型miR-155/P38MAPK表达的影响。方法 H9C2心肌细胞分为正常对照组,正常+含药血清组,转染组,转染+含药血清组,阿霉素(ADR)组,ADR+含药血清组,ADR+转染组,ADR+转染+含药血清组。ADR组的培养基中加入2.67μmol/L的ADR,含药血清组培养基中加入10%的温阳振衰颗粒含药血清,共培养44h。检测实验末各组细胞miR-155和P38MAPK的表达水平。结果与正常对照组相比,ADR组可显著下调miR-155的表达,同时上调P-P38MAPK的表达,差异具有统计学意义(P0.05)。转染组和含药血清组可明显上调miR-155的表达,同时下调P-P38MAPK的表达,差异具有统计学意义(P0.05)。结论温阳振衰颗粒能上调miR-155的表达从而抑制P38MAPK蛋白的过度磷酸化,这可能是其治疗慢性心衰的重要机制之一。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

中药苦参水提取物抑制Th17细胞分化的研究

目的探讨苦参水提取物(Sophora flavescens aqueous extract,SFAE)对Th17细胞分化的影响。方法通过体外分离豚鼠淋巴结获取原代淋巴细胞,采用磁珠分选技术获得初始CD4^+T细胞。采用CCK-8法筛选SFAE对T细胞活力的最佳抑制浓度。通过白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)诱导建立初始CD4^+T细胞向Th17细胞分化的细胞模型,并以SFAE进行干预;采用流式细胞仪检测各组Th17细胞比例,采用qRT-PCR及Western Blot法检测各组细胞中视黄酸相关的孤儿受体γt(RORγt)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、白细胞介素-17A(IL-17A)和白细胞介素-17F(IL-17F)的mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,SFAE浓度在0.01 mg·mL^-1时对初始CD4^+T细胞的活力有抑制作用(P<0.01),选择该浓度作为后续实验浓度。与对照组比较,模型组能明显上调CD4^+IL-17A+T细胞的比例(P<0.001),上调RORγt、STAT3、IL-17A、IL-17F mRNA及蛋白的表达(P<0.01,P<0.001)。与模型组比较,SFAE干预后模型处理组的CD4^+IL-17A+T细胞比例明显下调(P<0.05),STAT3、RORγt、IL-17A、IL-17F mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论SFAE能够抑制Th17细胞分化,降低Th17细胞比例,其作用机制可能是通过抑制转录因子RORγt及STAT3的活性,降低IL-17A、IL-17F的表达。     

补阳还五汤通过调节血管平滑肌细胞Cx43作用于动脉粥样硬化的研究

目的:研究补阳还五汤抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导血管平滑肌细胞(HUVSMC)增殖的作用及其机制。方法:以14.9g/kg补阳还五汤剂量连续灌胃SD大鼠1周,提取补阳还五汤含药血清,并与胎牛血清(FBS)按一定比例,配置成20%(20%补阳)、10%(10%补阳+10%FBS)、5%(5%补阳+15%FBS)补阳还五汤含药血清组组。血管平滑肌细胞长满培养瓶或培养板后,用同型半胱氨酸分组造模,将细胞随机分为10组:空白组、模型组、乙酰半胱氨酸(NAC)组、20%、10%、5%补阳还五汤含药血清组、NF-kB阻断剂PDTC组、MAPK阻断剂SB20组、ERK阻断剂PD98组、PKC阻断剂Stau组。蛋白质印迹法(Western blot)测定血管平滑肌细胞Cx43蛋白的表达量;RT-PCR技术检测各组血管平滑肌细胞Cx43 mRNA水平;建立血管内皮-平滑肌细胞共培养体系,Western blot分别检测内皮细胞和平滑肌细胞内Cx43的表达;电镜检测血管内皮-平滑肌细胞共培养体系细胞缝隙连接的变化。结果:Western blot实验中,平滑肌细胞与共培养体系中的内皮细胞、平滑肌细胞的Cx43蛋白表达水平,模型组与空白组比较,模型组中Cx43蛋白表达量均显著升高;乙酰半胱氨酸组,20%、10%、5%补阳还五汤含药血清组与模型组比较,Cx43蛋白表达显著下调。RT-PCR实验中,模型组与空白组比较,模型组中Cx43mRNA表达量显著升高;乙酰半胱氨酸组、20%、10%、5%补阳还五汤含药血清组与模型组比较,Cx43mRNA表达量显著降低。电镜检测细胞缝隙连接实验中:模型组与空白组比较,内皮-平滑肌细胞之间形成的缝隙连接遭到破坏,而20%补阳还五汤含药血清组却能形成与正常组相似的连接。结论:补阳还五汤可能通过下调Cx43蛋白以及其mRNA的表达,改善细胞之间的缝隙连接,减少血管平滑肌细胞增殖而发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg平衡及相关细胞因子的影响

目的研究玉屏风颗粒对变应性大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响。方法采用OVA制备AR大鼠模型,大鼠随机分为正常组、模型组、氯雷他定组、玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)。各组干预后评估大鼠AR行为学总分,HE和AB-PAS染色观察鼻黏膜组织病变情况,ELISA检测AR大鼠血清中的IL-17、TGF-β1水平,RT-PCR检测鼻黏膜组织中RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达,Western blot检测鼻黏膜组织中RORγt、Foxp3蛋白表达。结果与模型组比较,玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)大鼠挠鼻次数、打喷嚏次数等行为学总分降低(P0.05);上皮细胞结构完整、少量炎症细胞浸润、杯状细胞化生明显减少;血清中的IL-17水平降低、TGF-β1水平升高(P0.05);鼻黏膜RORγt mRNA表达降低、Foxp3 mRNA表达升高(P0.05);鼻黏膜组织RORγt/Foxp3蛋白表达比例升高(P0.05)。结论玉屏风颗粒能明显改善变应性大鼠鼻黏膜炎性症状,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡及相关细胞因子有关。     

冠心康调控巨噬细胞miRNA-155与SOCS1-STAT3-PDCD4生物轴抗动脉粥样硬化研究

目的:探讨冠心康调控巨噬细胞信号及抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:RAW264.7细胞按随机数字表法分为对照组(空白血清)、微小RNA-155(miR-155)mimic组、miR-155 inhibitor组、含药血清高剂量组、含药血清低剂量组5组,分别给予药物和含药血清干预后,采用RT-PCR法和Western-blot法检测各组细胞中miR-155、细胞因子信号传导抑制剂l(SOCS1)、磷酸化转录激活子3(p-STAT3)、程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)mRNA和蛋白表达,Elisa法检测细胞分泌肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)等炎症因子水平。结果:与对照组比较,miR-155mimic组和含药血清组细胞中miR-155 mRNA、SOCSl mRNA和蛋白表达明显较高,miR-155 inhibitor组细胞中miR-155 mRNA、SOCSl mRNA和蛋白表达明显较低。与对照组比较,miR-155mimic组和含药血清组细胞中p-STAT3和PDCD4 mRNA和蛋白表达明显较低,miR-155inhibitor组细胞中p-STAT3、PDCD4 mRNA和蛋白表达明显较高。与对照组比较,miR-155mimic组和含药血清组细胞液中TNF-α、IL-6、IFN-γ水平明显较低,miR-155inhibitor组细胞液中炎症因子水平明显较高。结论:冠心康抗动脉粥样硬化的分子机制可能与调节miR-155进而调控SOCSl/p-STAT3/PDCD4信号通路有关。     

解毒化瘀汤对活动期溃疡性结肠炎Th17/Treg细胞及其细胞因子的影响

目的观察解毒化瘀汤对湿热蕴结型活动期溃疡性结肠炎临床疗效及对Th17/Treg细胞及其相关细胞因子的影响。方法选取符合诊断和纳入标准的溃疡性结肠炎患者48例,按照随机数字表法分为对照组和治疗组各24例。其中对照组给予美沙拉嗪肠溶片口服,治疗组在对照组的基础上给予解毒化瘀汤口服。两组疗程均为12周,分别观察两组患者临床疗效,ELISA法检测白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,Real-Time PCR法检测Th17/Treg细胞的核转录因子RORγt/Foxp3m RNA的表达。结果治疗组总有效率为91.67%,明显优于对照组(P0.05);两组治疗后IL-17较治疗前均明显降低(P0.01),两组治疗后IL-10、TGF-β较治疗前均明显升高(P0.01),治疗后治疗组明显优于对照组(P0.01);两组治疗后RORγt m RNA、RORγt/Foxp3比值较治疗前均明显降低(P0.01),两组治疗后Foxp3 m RNA较治疗前均明显升高(P0.01),治疗后治疗组明显优于对照组(P0.05或P0.01)。结论解毒化瘀汤能够明显改善湿热蕴结型活动期溃疡性结肠炎患者临床症状,降低IL-17,增加IL-10、TGF-β水平,调控RORγt、Foxp3 m RNA的表达,促进Th17/Treg细胞平衡,减少复发率,疗效显著。     

针灸治疗对狼疮性肾炎小鼠Th17/Treg细胞及其细胞因子表达影响的研究

目的:观察针灸治疗对狼疮性肾炎小鼠的影响,并探讨针灸对调节性T细胞(Treg)及辅助性T细胞17 (Th17)分化及其细胞因子表达的调控作用。方法:将MRL/lpr狼疮性肾炎模型小鼠随机分为针灸组、地塞米松组、模型组,每组10只。另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。采用HE染色法检测小鼠肾脏病理改变;PI单染流式细胞术检测各组小鼠肾脏组织中Th17/Treg比例;采用q RT-PCR和ELISA法检测肾脏中叉头样转录因子3 (Foxp3)、维A酸相关孤儿受体-γt (RORγt)及白细胞介素-17 (IL-17)的水平。结果:与正常组比较,模型组肾小球肾炎、间质性肾炎以及血管病变评分、Th17/Treg比值及RORγt、IL-17蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),Foxp3蛋白及mRNA表达水平均下降(P<0.05)。与模型组比较,地塞米松组、针灸组肾小球肾炎、间质性肾炎以及血管病变评分、Th17/Treg比值及肾脏组织RORγt、IL-17蛋白及m RNA表达水平均显著降低(P<0.05);Foxp3蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05)。结论:针灸能显著减少狼疮性肾炎小鼠肾脏RORγt及IL-17表达,增加Foxp3水平,调控Th17/Treg比例,改善肾脏病理改变,从而对MRL/lpr狼疮肾炎小鼠肾脏起到保护作用。