补肾活血方加减对膝骨关节炎大鼠模型疼痛及软骨损伤的影响

目的探索补肾活血方加减对膝骨关节炎大鼠模型疼痛及软骨损伤的影响。方法取50只SD大鼠,随机分为空白组,模型组,补肾活血方加减低、中、高剂量组,每组10只。空白组不造模,余4组用碘乙酸向大鼠双侧膝关节注射进行KOA造模。造模后第2天,补肾活血方加减低、中、高剂量组SD大鼠分别予低、中、高剂量补肾活血方加减进行灌胃,空白组、模型组予0.9%生理盐水灌胃,连续灌胃4周。分别于造模后第2天和第4周测定各组大鼠的压痛值和热痛阈值。第4周痛阈值测定结束后处死大鼠,取双侧膝关节进行组织病理学观察并评定Mankin′s评分。结果灌胃4周后,与模型组比较,补肾活血方低、中、高剂量组大鼠压痛及热痛阈值较模型组均有提高,除补肾活血方低剂量组大鼠热痛阈值与模型组比较无差异性(P0.05),余各组间比较皆有明显差异性(P0.05),其中以高剂量组提高最为明显,中剂量次之,低剂量最末。大鼠膝关节软骨番红染色结果示,与空白组比较,模型组大鼠软骨表面缺损严重,软骨基质染色明显减轻、不均,而补肾活血方低、中、高剂量组的病理变化逐渐减轻,各组大鼠膝关节软骨Mankin′s评分结果显示,与模型组比较,各组大鼠Mankin′s评分均较低,补肾活血方低、中、高剂量组大鼠Mankin′s评分比较有明显差异性(P0.05),且呈剂量依赖性。结论补肾活血方加减能提高KOA模型大鼠疼痛阈值,修复软骨损伤,并与剂量呈正相关。     

不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠OPG/RANKL系统mRNA的影响

目的:观察不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠模型膝关节软骨组织OPG/RANKL系统的影响,分析本方对KOA骨破坏/重建的作用机制。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液法复制KOA模型,36只Wistar大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,观察不同浓度补肾通络方对KOA大鼠膝关节软骨组织OPG/RANKL系统mRNA表达水平的影响。结果:软骨OPG的mRNA水平是在模型组中含量最低(P0.05),正常组中含量最高(P0.05),中药中剂量组含量接近正常组,而在低剂量组中表达最少,且中剂量组与高剂量组之间差异无统计学意义(P0.05)。RANKL的mRNA表达情况是模型组最高(P0.05),正常组最低(P0.05),不同浓度的中药对其影响不同,但中药高、中、低三个剂量组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。二者的比值变化趋势与OPG相类似,以模型组最小,正常组最大,随着中药浓度的升高,其比值逐渐增加,且中剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络方能够提高KOA大鼠软骨OPG的mRNA表达水平,降低RANKL水平,具有双向调节OPG/RANKL轴的作用。既可促进成骨,又可抑制或延缓破骨,维持KOA大鼠模型中OB/OC活动的平衡,改善骨质代谢水平,缓解KOA病情进一步进展。     

仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎大鼠关节软骨损伤的修复作用及机制研究

目的观察仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨损伤的修复作用并探讨其机制。方法 SD大鼠100只,根据体质量随机分成5组:对照组、模型组、仙鹿健骨汤各剂量组;模型组、仙鹿健骨汤各剂量组构建KOA大鼠关节软骨损伤模型,并于造模成功第1天开始给予相应药物灌胃,持续给予3个月,对照组和模型组给予等体积0.9%氯化钠注射液。试验结束后,测定大鼠膝骨性骨关节炎软骨Mankin′s评分、p38m RNA、NF-κB mRNA、p38、NF-κB、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白水平。结果与对照组比较,模型组、仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-кB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P 0.05);与模型组比较,仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P 0.05),且随着仙鹿健骨汤给药剂量的增加,KOA软骨Mankin′s评分、p384、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平逐渐降低,剂量-效应关系明显(P 0.05)。结论仙鹿健骨汤能明显减轻软骨细胞损伤程度,对KOA关节软骨损伤具有一定程度的修复作用,其机制与仙鹿健骨汤组能通过抑制炎症信号通路p38、NF-κB m RNA、蛋白表达水平的表达进而抑制细胞因子MMP-9、MMP-13、IL-1β的表达有关。     

基于OPG/RANKL及Notch1信号通路探讨温针灸对膝骨性关节炎兔软骨下骨损伤的影响

目的：观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响，探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法：选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组。采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型。经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构，蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达，实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量。结果：与模型组比较，药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整，结构较为清晰，软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀。与空白组比较，模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较，药物组和温针灸组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显降低，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：温针灸可促进OPG表达，抑制RANKL及Notch1表达，通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路，减轻KOA兔软骨下骨的损伤，从而起到治疗KOA的作用。     

补肾祛痰方对肥胖肾虚型骨关节炎大鼠相关因子表达的影响

目的:通过荧光定量分析法研究补肾祛痰方对肥胖肾虚型骨关节炎(Osteoarthritis,OA)大鼠leptin、Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE_2、MMP-9、MMP-13与MMP-1的mRNA表达水平的影响。方法:大鼠分为正常组、模型组、补肾祛痰方低、中、高剂量组,硫酸氨基葡萄糖胶囊混悬液组。正常组与模型组ig生理盐水,各给药组按剂量ig给药,连续7d。末次给药后,处死大鼠,在无菌条件下获取大鼠双膝关节软骨碎片,经脱钙处理后,用荧光定量分析法检测大鼠膝关节软骨碎片中的leptin、Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE_2、MMP-9、MMP-13与MMP-1的mRNA水平。结果:与正常组比较,补肾祛痰方对肥胖肾虚型OA大鼠软骨组织中的Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE_2、MMP-9与MMP-1表达的影响均无统计学意义,而对肥胖肾虚型OA大鼠软骨组织中的leptin与MMP-13表达的影响有统计学意义;其中模型组中大鼠软骨组织中的leptin与MMP-13的mRNA表达水平都有明显增加(P<0.01);与模型组比较,补肾祛痰方组中、低剂量组与硫酸氨基葡萄糖胶囊混悬液组的LEP与MMP-13的mRNA表达水平均有降低(P<0.05),高剂量组中,LEP与MMP-13的mRNA表达水平均有明显降低(P<0.01)。结论:本试验所建立的肥胖肾虚型OA大鼠模型稳定,为国内OA大鼠的研究提供新模型;补肾祛痰方可显著降低肥胖肾虚型OA大鼠膝关节中leptin与MMP-13的mRNA水平,为该方后期的临床研究提供理论依据。     

补肾活血颗粒对去势骨质疏松大鼠OPG/RANK/RANKL系统的影响

目的:观察补肾活血颗粒对去势骨质疏松大鼠骨组织骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)mRNA表达及其骨密度的影响,探讨补肾活血颗粒治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症(OP)提供实验依据。方法:将雌性SD大鼠80只随机分为模型组、补肾活血颗粒治疗组、倍美力阳性对照组、正常对照组4组;除正常组外,其余各组大鼠行双侧卵巢去除术,正常组大鼠行假手术处理;各组大鼠给予相应处理12 W。采用双能X线骨密度仪测定大鼠右股骨上干骺端骨密度、HE染色观察骨组织形态改变、免疫组织化学染色方法及荧光定量PCR检测骨组织OPG、RANK、RANKL相关蛋白和基因的表达。结果:补肾活血颗粒能够显著增加去势骨质疏松大鼠的骨密度;提高其骨组织OPG、RANK mRNA及蛋白的表达水平,降低RANKL mRNA及蛋白的表达水平;作用与阳性对照组相当。结论:补肾活血颗粒可显著增强去势骨质疏松大鼠的骨密度,促进OPG、RANK mRNA和蛋白的表达及抑制RANKL mRNA和蛋白表达是其部分作用机制。     

独活寄生汤对膝骨关节炎模型大鼠中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响

目的?观察独活寄生汤（DHJSD）对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠中Wnt/β-连环蛋白（β- catenin）信号通路相关蛋白表达的影响，探讨DHJSD治疗骨关节炎（OA）的机制。方法?选取32只SD大鼠，按随机数字表法分为DHJS组、模型（M）组、硫酸氨基葡萄糖（GS）组和正常（NC）组。除NC组外，其余3组予双膝关节腔内注射0.2 mL 4%木瓜蛋白酶法建立KOA模型。造模后DHJS组予DHJSD灌胃，GS组予GS灌胃，NC、M组给予等体积纯净水灌胃。连续给药8周后进行双膝关节X线扫描，观察大鼠膝关节影像学变化并评分，ELISA法检测血清基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白介素-1β（IL-1β）含量，HE染色、番红O固绿染色法观察膝关节软骨病理改变并进行Mankin评分，采用实时聚合酶链式反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）及免疫组化法检测软骨组织中Wnt/β- catenin通路相关蛋白的mRNA及蛋白表达水平。结果?与NC组比较，M组大鼠膝关节间隙狭窄，软骨层损耗，X线评分、Mankin评分升高（P<0.05），DHJS组和GC组上述改变减轻，X线评分及Mankin评分下降（P<0.05）；DHJS组血清及软骨MMP-13含量减少（P<0.05）；下调软骨β-catenin、Wnt3a mRNA水平以及β-catenin、IL-1β蛋白表达水平（P<0.05），上调骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）mRNA 和蛋白表达水平（P<0.05）。结论?DHJSD能通过下调Wnt3a/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平，抑制MMP-13表达、促进BMP-2表达，从而改善大鼠KOA的影像学及病理学改变，发挥软骨保护作用。     

补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢MMP-9mRNA表达影响的实验研究

目的:探讨中药补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢MMP-9mRNA表达的影响。方法:选择健康育龄雌性恒河猴(6只)随机分为空白对照组、模型对照组、中药组,采用皮下注射丙酸睾丸酮和绒毛膜促性腺激素建立PCO模型,分别灌胃给予生理盐水、补肾活血方,采用原位杂交技术观察其卵巢局部MMP-9mRNA表达的变化。结果:空白对照组卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡膜细胞中均可检测到MMP-9mRNA的杂交信号;模型组卵泡的颗粒细胞、卵泡膜细胞MMP-9mRNA表达强度上超过空白对照组(P<0.05,P<0.01);中药组的作用与空白对照组相比无差异(P>0.05)。结论:恒河猴PCO模型卵巢局部MMP-9mRNA异常高表达;补肾活血方具有改善这种异常表达的作用,可能是其促进卵巢排卵的机制之一。     

舒筋活血止痛水外擦拍打对兔膝骨性关节炎软骨组织MMP-1表达的影响

目的:观察舒筋活血止痛水外擦拍打治疗对兔膝骨性关节炎(KOA)软骨组织MMP-1表达的影响。方法:随机将15只新西兰大白兔分为正常组、模型组、拍药组,采用前交叉韧带切断术(ACLT),制作KOA模型。术后6周拍药组进行舒筋活血止痛水外擦拍打干预。干预2周后处死动物,采用HE染色观察软骨形态学改变,并进行改良Mankin评分,免疫组化检测MMP-1的表达情况。结果:模型组改良Mankin评分明显增高,拍药组改良Mankin评分低于模型组,差异有统计学意义(P0.01);模型组MMP-1阳性表达显著增强,拍药组MMP-1阳性表达较模型组降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论:舒筋活血止痛水外擦拍打治疗可明显降低兔KOA软骨组织MMP-1的表达,延缓兔KOA的进展。     

补肾法与活血法对SD大鼠膝骨性关节炎滑膜IL-1β、TNF-α及软骨MMP-13、ADAMTS-5的影响

目的：探讨补肾活血法、活血法、补肾法、祛风法对SD大鼠膝骨性关节炎IL-1β、TNF-α及MMP-13、ADAMTS-5的作用及其机制。方法：取SD大鼠180只,随机分为活血组、祛风组、补肾组、补肾活血组、预防组及模型组,每组各30只,以4%木瓜蛋白酶行膝关节注射制作大鼠膝骨性关节炎模型。模型制作成功后连续给药,预防组在模型制作同时予以活血药。治疗以1个月为1疗程,6组大鼠分别于模型制作成功给药后30、60、90d分批处死。处死后取大鼠膝关节滑膜及软骨,分别运用免疫组化及反转录-多聚酶链反应（RT-PCR）测定SD大鼠膝关节滑膜IL-1β、TNF-α及膝关节软骨组织中MMP-13、ADAMTS-5mRNA含量的表达。结果：模型组与祛风组IL-1β、TNF-α及MMP-13、ADAMTS-5mRNA含量表达显著高于其他各组,且随着治疗进行降低不显著。早期,预防组比其他组降低显著（P〈0.05）;活血组与补肾活血组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但两者比祛风组、补肾组及模型组降低显著（P〈0.05）;晚期补肾活血组、补肾组与其他组比较降低显著（P〈0.05）,且补肾活血组与补肾组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：补肾法与活血法对SD大鼠膝骨性关节炎IL-1β、TNF-α及MMP-13、ADAMTS-5mRNA的影响在不同时期具有不同的作用,早期时活血法作用较补肾法显著,且预防性给予活血药治疗效果更佳;晚期补肾法较活血法显著,同时补肾活血法治疗效果最为明显。     

止痛健骨方对兔膝骨关节炎软骨MMP-1的影响及与MRI分级的相关性分析

目的观察止痛健骨方对兔膝骨关节炎软骨MMP-1的影响及与MRI分级的相关性分析。方法将90只白兔随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物组、止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组,每组各18只,采用木瓜蛋白酶制备兔膝骨关节炎模型,止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组分别给与止痛健骨方低剂量、高剂量药物灌胃,阳性药物组给与盐酸氨基葡萄糖片灌胃,0.0672g/kg,正常对照组和模型对照组则给与生理盐水灌胃。在模型验证、实验灌胃第4周、第8周三个时间点,各组随机选择6只白兔,进行膝关节MRI扫描,并检测软骨MMP-1表达水平,进行对比比较。结果在实验干预前、实验干预第4周、第8周,与正常对照组比较,模型对照组、阳性药物组、止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组软骨MMP-1表达、MRI软骨分级均上升,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组比较,阳性药物组、止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组第4周、第8周MMP-1表达下降,差异有统计学意义(P0.05)。采用等级Spearman等级相关分析发现软骨MMP-1表达增加,对应软骨MRI分级也上升,两者呈直线正相关(r=0.815,P=0.000)。结论止痛健骨方能降低兔KOA模型关节软骨MMP-1表达,降低软骨MRI分级,且两者成正向直线相关,这可能为其治疗KOA的作用机理。     

补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周膜OPG和RANKL影响的研究

目的 观察补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周组织及牙周膜骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨补肾活血固齿方治疗牙周炎的作用机制。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、牙周炎组、补肾活血固齿方组,每组8只。牙周炎组和补肾活血固齿方组大鼠采用牙周结扎联合喂食黏软食物和高糖水的方法建立牙周炎模型。造模成功后,补肾活血固齿方组给予补肾活血固齿方灌胃,空白组、牙周炎组给予等量生理盐水灌胃。连续灌胃4周后,切取各组大鼠上颌骨第一磨牙牙体牙周组织制作组织切片,HE染色观察牙周组织病理形态,免疫组化染色观察牙周膜组织中OPG和RANKL阳性表达情况。结果 HE染色显示：空白组大鼠牙周组织结构比较完整,牙龈组织无明显炎症细胞浸润,结合上皮无根方移位,破骨细胞少见,无牙槽骨吸收;牙周炎组大鼠牙龈上皮内炎症细胞增多,毛细血管扩张,牙龈结合上皮向根方移位,形成牙周袋,破骨细胞增多,牙槽骨有吸收;与牙周炎组比较,补肾活血固齿方组大鼠炎症细胞浸润减少,牙龈结合上皮部分恢复,牙周袋变浅,牙槽骨边缘破骨细胞数减少,有成骨细胞产生。补肾活血固齿方组OPG平均光密度值明显高于空白组...     

止痛健骨方对膝骨关节炎兔软骨TNF-α的影响及TNF-α与软骨评分的相关性分析

目的:观察止痛健骨方对膝骨关节炎兔软骨TNF-α的影响及TNF-α与软骨评分的相关性。方法:将90只白兔随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物组、止痛健骨方低剂量组、止痛健骨方高剂量组,每组18只,采用木瓜蛋白酶制备兔膝骨关节炎模型,止痛健骨方低剂量组、止痛健骨方高剂量组分别给予止痛健骨方低剂量、高剂量药物灌胃,阳性药物组给予盐酸氨基葡萄糖片灌胃(0.0672 g/kg),正常对照组和模型对照组予生理盐水灌胃。在模型验证、灌胃第4周、第8周,各组随机选择6只白兔,观察软骨Mankin评分,并检测软骨TNF-α表达水平。结果:在模型验证、实验干预第4周、第8周时,模型对照组、阳性药物组、止痛健骨方低剂量组、止痛健骨方高剂量组软骨TNF-α表达、软骨Mankin评分均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。第4周、第8周,阳性药物组、止痛健骨方低剂量组、止痛健骨方高剂量组TNF-α表达均低于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。Pearson直线相关性分析发现软骨TNF-α表达增加,对应软骨评分也上升,两者呈直线正相关(r=0.903,P=0.000)。结论:止痛健骨方能降低兔KOA模型关节软骨TNF-α表达,降低软骨Mankin评分,且两者成正向直线相关,这可能为其治疗KOA的作用机理。     

内热针疗法对兔膝骨性关节炎软骨下骨中骨保护素及核因子κB受体活化因子表达的影响

目的:观察内热针疗法对兔膝骨性关节炎(KOA)软骨下骨中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)表达的影响,探讨内热针治疗KOA的作用机制。方法:将30只新西兰兔随机分为空白组、模型组和治疗组,每组10只。采用Hulth法建立兔KOA模型。治疗组给予兔内热针治疗,1次/周,每次20 min,连续4周。干预前后采用改良版Lequesne量表对各组兔进行行为学评价。取各组兔左后膝关节标本行甲苯胺蓝染色,观察软骨下骨病理变化并分析骨组织形态计量学参数的差异;分别采用Western blot和实时荧光PCR法检测软骨下骨中OPG、RANKL、RANK蛋白和mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组Lequesne评分升高(P0.05),软骨下骨骨小梁面积百分比、骨小梁数目降低(P0.05),骨小梁分离度升高(P0.05),软骨下骨组织中OPG蛋白表达和mRNA均降低(P0.01,P0.05),RANKL、RANK蛋白表达和mRNA均升高(P0.01)。与模型组比较,治疗组Lequesne评分降低(P0.05),干预前后Lequesne评分差值升高(P0.05),软骨下骨骨小梁面积百分比、骨小梁数目升高(P0.05),骨小梁分离度降低(P0.05),软骨下骨组织中OPG蛋白表达和mRNA均升高(P0.05),RANKL、RANK蛋白表达和mRNA均降低(P0.05)。结论:内热针疗法治疗KOA的机制可能是通过上调兔KOA软骨下骨组织中OPG表达,下调RANKL和RANK的表达,从而抑制了骨吸收。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法 RA动物模型选用胶原诱导关节炎模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊低剂量组(BSL)、中剂量组(BSM)、高剂量组(BSH)和雷公藤组6组,每组7只大鼠。造模后13天开始给药,BSL、BSM及BSH组分别给予120、240及480 mg/(kg·d)的补肾通督胶囊灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷片24 mg/(kg·d)灌胃。各组每天灌胃1次,每次2 m L。正常对照组和模型组给予2 m L的生理盐水灌胃。共灌胃18天。于31天取材,制作踝关节TRAP切片,采用ELISA法检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、OPG巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节病理切片的阳性反应、炎症和骨破坏程度显著提高(P<0.01),血清RANKL和M-CSF水平皆有显著上升(P<0.01),而OPG和OPG/RANKL水平皆有显著降低(P<0.01)。与模型组比较,BSH组和雷公藤组阳性反应、炎症和骨破坏评分也显著下降(P<0.01);而BS各组和雷公藤组RANKL和M-CSF均显著下调,而OPG和OPG/RANKL均显著上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与雷公藤组比较,正常组M-CSF较低,而OPG和OPG/RANKL均较高,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组和BS各组RANKL和M-CSF均显著上调,而OPG和OPG/RANKL均显著下调(P<0.01)。结论补肾通督胶囊对于关节炎大鼠缓解骨破坏的机制,可能是通过对破骨细胞的调控起作用。     

火针对膝骨关节炎模型大鼠血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达的影响

目的 观察火针对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方法 将36只SD大鼠分为造模组23只和空白组13只,建立KOA模型。造模组和空白组随机抽取3只比较Mankin’s评分进行造模鉴定。将造模组剩余20只大鼠随机分为模型组和火针组,每组10只。火针组进行火针治疗,隔天1次,治疗4周。治疗前后对3组大鼠进行改良Lequesne MG行为学评分评估,治疗后检测3组大鼠血清IL-1β、TNF-α、MMP-13含量。结果 与空白组比较,造模组Mankin’s评分明显升高（P <0.05）。治疗前造模组改良Lequesne MG行为学评分高于空白组（P <0.05）;治疗后火针组Lequesne MG行为学评分低于模型组（P <0.05）。治疗后火针组血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达低于模型组（P <0.05）。结论 火针能通过降低血清IL-1β、TNF-α、MMP-13表达减轻软骨损伤。     

中药熏洗对膝骨性关节炎患者关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响

目的:观察中药熏洗治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效和对关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响。方法:膝关节骨性关节炎90例,分成治疗组和对照组。分别采用补肾活血汤熏洗和热开水熏洗加双氯芬酸钠乳膏外搽治疗,观察两组患者的临床症状、体征、Lysholm's膝关节评分以及关节滑液中MMP-3和MMP-13变化。结果:两组治疗后Lysholm's膝关节评分较治疗前明显升高(P<0.01),治疗组的评分值高于对照组(P<0.01),治疗组总体优良率为93.33%,对照组总体优良率为82.22%,治疗组疗效优于对照组(P<0.01),两组治疗后关节滑液MMP-3、MMP-13水平明显下降(P<0.01),治疗组MMP-3、MMP-13下降较对照组更为明显(P<0.01)。结论:补肾活血汤熏洗治疗膝骨性关节炎疗效显著,其作用机制可能通过降低MMP-3、MMP-13的水平,减轻滑膜炎症和关节软骨的破坏,从而发挥对骨性关节炎的治疗作用。     

补肾活血化痰方对脑出血大鼠脑组织MMP-9表达及血清NSE的影响

目的观察补肾活血化痰方对大鼠脑出血后脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响。方法采用自体不凝血注入尾状核法制备脑出血模型。将大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血化痰方组,假手术组和模型组每日给予生理盐水灌胃,补肾活血化痰方组给予补肾活血化痰方煎剂。各组分别在脑出血术后24、48、72、120 h各个时点取血,留取脑组织标本。于各时点观测大鼠脑含水量,用免疫组化法检测大鼠脑组织MMP-9的表达水平,用酶联免疫吸附法测定血清中NSE的含量。结果补肾活血化痰方组各时点脑含水量明显低于模型组(P0.05),各时点脑组织MMP-9阳性表达较模型组明显减少(P0.01),血清NSE水平在48、72、120 h时较模型组显著降低(P0.01)。结论补肾活血化痰方能减轻脑水肿,减轻脑组织损伤,其作用可能和有效抑制脑出血大鼠脑组织MMP-9表达,降低血清NSE水平有关。     

中等强度跑台运动对高脂饮食小鼠膝关节软骨MMP-13、LRP5的影响

目的探讨跑台运动对高脂饲料喂养小鼠膝关节软骨的作用机制。方法 30只雄性C57BL-6小鼠平均分为正常组、高脂组和跑台组。高脂组和跑台组以40%高脂饲料喂养8周后,跑台组进行为期4周、每周5次、每次45 min的中等强度跑台训练。采用HE、番红固绿染色并进行Mankin评分观察小鼠膝关节软骨形态变化,免疫组化分析膝关节基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)表达情况,RT-PCR法检测膝关节软骨MMP-13、LRP5、β-catenin水平。结果与高脂组比较,跑台组小鼠体质量、Lee’s指数下降(P0.05),但Mankin评分证实膝关节软骨退化明显(P0.05),关节软骨MMP-13 mRNA表达升高(P0.05);免疫组化结果也显示,跑台组小鼠膝关节MMP-13、LRP5表达较高脂组升高(P0.001)。结论中等强度跑台运动加剧高脂饲料喂养小鼠膝骨关节炎进程,关节软骨MMP-13、LRP5表达水平增高可能诱发膝骨关节炎。