纳米硒对局灶性脑缺血的保护作用及机制研究

目的研究纳米硒对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法用改良线栓法制备大鼠中动脉脑缺血再灌注模型,随机将120只雄性SD大鼠平均分为假手术组、模型组、纳米硒低、中、高剂量组。脑缺血再灌注24 h后进行神经功能缺损评分;TTC染色试验测定脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;心脏采血检测血清中SOD、MDA和NO含量变化;TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡情况,Western blot检测脑组织Bcl-2和Bax蛋白表达变化。结果与模型组相比,纳米硒治疗组脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损症状显著改善,脑梗塞体积和脑水肿程度显著降低,血清SOD活性显著提高,MDA和NO含量显著降低,脑组织神经细胞凋亡率显著降低,凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(P0.05或P0.01),且具有剂量依赖效应。结论纳米硒对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其机制可能与纳米硒能有效改善抗氧化酶活性、提高机体清除自由基能力、抑制脂质过氧化程度及抑制脑组织神经细胞凋亡相关。     

SIRT1信号通路在白藜芦醇保护脑缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探讨白藜芦醇(Res)对大脑缺血再灌注损伤后大鼠神经元凋亡的影响及其作用机制。方法采用线栓法制作短暂性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(MCAO组)、白藜芦醇低剂量(10 mg/kg)组(Res 10组)、白藜芦醇高剂量(30 mg/kg)组(Res 30组)。栓塞缺血2 h、再灌注24 h后对各组大鼠进行神经功能损伤评分、脑组织含水量及脑梗死体积评估,TUNEL染色检测细胞凋亡,同时测定缺血再灌注损伤缺血测脑组织中SIRT1、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果脑缺血再灌注后24 h,MCAO组脑梗死体积大于Sham组(P0.01),神经功能损伤评分、脑组织含水量、TUNEL(+)细胞数及Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达量均明显高于Sham组(P0.01),而SIRT1 mRNA表达量较Sham组明显降低(P0.01)。与MCAO组比较,Res 10组、Res 30组脑梗死体积明显缩小(P0.01),神经功能损伤评分、脑组织含水量、TUNEL(+)细胞数以及脑组织中Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达量明显降低(P0.01),SIRT1 mRNA表达明显增加(P0.01)。结论白藜芦醇可通过减轻缺血脑组织神经元凋亡对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥神经保护作用,其可能通过激活SIRT1信号通路从而抑制或逆转脑缺血再灌注神经损伤的发生。     

小檗碱通过激活SIRT1通路减轻脑缺血再灌注大鼠炎症及凋亡

目的研究小檗碱预处理对大鼠脑缺血再灌注(I/R)过程中炎症及凋亡的调节作用及分子机制。方法选择40只SPF级成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、I/R组、小檗碱预处理组(BP组)、BP+SIRT1抑制剂EX527处理组(BP+EX组),BP组在造模前给予小檗碱100 mg/(kg·d)灌胃、连续14天,BP+EX组在造模前给予小檗碱100 mg/(kg·d)灌胃及SIRT1抑制剂EX527 5 mg/(kg·d)腹腔注射、连续14天,而后采用线栓法建立脑I/R模型。采用神经功能缺损评分、TUNEL染色、Nissl染色评价神经功能损伤程度,检测SIRT1通路基因、线粒体途径凋亡基因、炎症因子的表达。结果 I/R组大鼠的神经功能缺损评分、TUNEL阳性率及脑组织中核因子κB (NF-κB)、P53、Bax、Caspase-9、Caspase-3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达水平均明显高于假手术组,Nissl阳性数目及脑组织中SIRT1、Bcl-xL的表达水平均明显低于假手术组(P0.05);BP组大鼠的神经功能缺损评分、TUNEL阳性率及脑组织中NF-κB、P53、Bax、Caspase-9、Caspase-3、TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1的表达水平均明显低于I/R组,Nissl阳性数目及脑组织中SIRT1、Bcl-xL的表达水平均明显高于I/R组(P0.05);BP+EX组大鼠脑组织中Bax、Caspase-9、Caspase-3、TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1的水平均明显高于BP组,Bcl-xL的表达水平明显低于BP组(P0.05)。结论小檗碱预处理能够通过激活SIRT1通路来减轻大鼠脑缺血再灌注过程中的炎症及凋亡。     

山楂叶总黄酮对脑缺血大鼠Caspase-3蛋白及炎症因子表达的影响

目的探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对慢性脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡及半胱天冬酶(Caspase)-3、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β表达的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备慢性脑缺血模型,通过TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELSIA)检测海马组织内TNF-α及IL-1β含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元凋亡数量明显增多(P0.05),Caspase-3阳性表达率显著升高(P0.05),脑组织TNF-α、IL-1β含量明显升高(P0.05)。而TFHL 140 mg/(kg·d)灌胃,银杏叶片组给予银杏叶提取物6.5 mg/(kg·d)灌胃,连续30 d后,与模型组比较,大鼠海马组织神经细胞凋亡数量明显减少(P0.05),Caspase-3阳性表达率显著降低(P0.05),TNF-α、IL-1β含量下降(P0.05)。TFHL组与银杏叶片组各项指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 TFHL对慢性脑缺血大鼠的神经功能具有保护作用,其机制可能与其减轻炎症反应,抑制慢性脑缺血诱发神经元凋亡有关。     

促红细胞生成素产生肝细胞配体B2对抑郁症模型大鼠海马神经元细胞的影响

目的研究促红细胞生成素产生肝细胞配体B2(Ephrin-B2)对抑郁症模型大鼠海马神经元细胞凋亡和氧化应激的减轻效果。方法 SPF雄性SD大鼠30只,将大鼠随机分为Control组、慢性不可预见性温和应激(CUMS)组和Ephrin-B2组(10μg Ephrin-B2-可结晶片段微渗透泵以1μl/h的速度向侧脑室注射),每组10只,后2组用CUMS建立大鼠抑郁症模型,建模21 d后,旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠行为学变化,大鼠处死取海马组织,ELISA检测海马组织5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)和5-羟色胺(5-HT)含量,苏木精-伊红染色、Nissl染色和TUNEL染色观察海马组织病理,Western blot检测凋亡标志物Bax、Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和谷胱甘肽(GSH)含量,RT-PCR和Western blot分别检测沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)基因和蛋白表达。结果造模后,与Control组比较,CUMS组旷场评分显著下降,水中静止时间上升,海马组织5-HIAA、5-HT含量降低(P0.05);出现海马神经元损伤及细胞凋亡,SOD活性、GSH含量下降,LDH含量上升,Bcl-2蛋白表达降低、Bax和裂解的Caspase-3蛋白表达升高(P0.05);SIRT1基因表达和蛋白表达明显下调(0.14±0.05 vs 1.00±0.00;0.02±0.01 vs 0.13±0.04,P0.05)。与CUMS组比较,Ephrin-B2组上述各项指标均明显改善(P0.05)。结论 Ephrin-B2可缓解抑郁症模型大鼠神经元损伤及细胞凋亡,降低氧化应激水平,其作用可能与SIRT1表达下调有关。     

原花青素对I型糖尿病大鼠血管内皮功能、氧化性损伤和凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究原花青素(procyanidins,PC)对糖尿病大鼠血管内皮细胞的作用,并在三种凋亡相关蛋白水平探讨作用机制。方法雄性SD大鼠,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造成1型糖尿病动物模型,随机分为糖尿病模型组,50 mg/kg原花青素治疗组和100 mg/kg原花青素治疗组,每组8只,另选8只健康雄性大鼠为正常对照组。各组大鼠灌服给药12周后,用血糖仪及专用血糖试纸现场检测各组大鼠空腹血糖;采用放射免疫分析仪检测血清内皮素1(ET-1)和前列环素(PGI2)水平;采用比色法检测血管内皮组织MDA含量和SOD活性;采用常规免疫组织化学染色方法对血管内皮细胞三种凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达进行检测;用Olympus成像分析系统高倍镜(×400)下观察和采集显微图像,采用美国显微镜图像分析测量软件Image-Pro Plus 6.0采集整个视野黄染灰度值并自动转化为光密度值,计算出单个内皮细胞平均光密度值(mean-density),分析三种凋亡相关蛋白的表达情况。结果糖尿病模型组大鼠,与正常对照组比较,大鼠空腹血糖水平明显增高,血清ET-1含量增高和PGI2含量降低(P0.01),血管内皮组织MDA含量提高(P0.01),血管内皮组织SOD活性降低(P0.01),血管内皮Caspase-3和Bax蛋白表达均增强(P0.01),Bcl-2蛋白表达及Bcl-2和Bax蛋白表达比值(Bcl-2/Bax)均减弱(P0.01);50 mg/kg原花青素治疗组和100 mg/kg原花青素治疗组,与糖尿病模型组比较,大鼠空腹血糖水平不同程度减低(P0.05和P0.01),血清ET-1含量降低和PGI2含量升高(P0.01),血管内皮组织MDA含量降低(P0.01),血管内皮组织SOD活性提高(P0.05和P0.01),血管内皮Caspase-3和Bax蛋白表达均减弱(P0.01),Bcl-2蛋白表达及Bcl-2和Bax蛋白表达比值(Bcl-2/Bax)均提高(P0.01),SOD含量均高于糖尿病模型组。结论原花青素对糖尿病大鼠血管内皮分泌功能和氧化性损伤有调节保护作用,同时可抑制血管内皮Caspase-3和Bcl-2蛋白表达水平,促进Bcl-2表达,提高Bcl-2和Bax蛋白表达比值。     

龙眼参黄酮对大鼠局灶性脑缺血损伤及抗氧化酶活性的影响

目的 探讨龙眼参黄酮对大鼠局灶性脑缺血损伤及抗氧化酶活性的影响.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),观察龙眼参黄酮对模型大鼠病理形态学的影响,并对其进行神经行为学评分,检测大鼠脑组织含水量、测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量.结果 与模型组比较,龙眼参黄酮各剂量组大鼠脑组织的病理改变不同程度减轻;局灶性脑缺血所致的大鼠神经行为学变化减轻(P＜0.05);脑组织的含水量减少(P ＜0.05,P＜0.01);血清SOD、GSH-PX 、CAT的含量升高(P＜0.05);血清MDA水平降低.结论 龙眼参黄酮能减轻脑缺血损伤,对脑细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化损伤有关.     

小牛血清去蛋白注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Caspase-12表达的影响

目的 探讨小牛血清去蛋白注射液(DCSI)对脑缺血再灌注后大鼠海马Caspase-12表达的影响.方法 健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组和DCSI组.DCSI组于术前1 w开始给药,每日大鼠尾静脉注射DCSI 80 mg/kg,末次给药5 h后建立脑缺血再灌注模型.分别在脑缺血再灌注后的5个时间点进行神经行为学观察,海马病理学、细胞凋亡、Caspase-12蛋白及mRNA表达指标的检测.结果 与假手术组相比,模型组大鼠脑缺血再灌注后的神经功能缺损明显,海马细胞呈明显凋亡表现,Caspase-12蛋白及mRNA表达上调,尤以24h时明显(P＜0.01);DCSI组与模型组相比,功能缺损评分和细胞凋亡相对较轻,Caspase-12蛋白及mRNA表达也相对下凋(P＜0.01,P＜0.05).结论 DCSI对缺血再灌注损伤大鼠大脑具有保护作用,其机制可能与其有效抑制脑组织Caspase-12 mRNA转录水平及蛋白表达、阻断内质网应激启动的凋亡通路有关.     

miR-145抑制NF-κB p65表达促进ROS产生诱导卵巢癌细胞凋亡的机制

目的探讨微小RNA-145(miR-145)诱导卵巢癌细胞凋亡的潜在作用机制。方法收集卵巢癌临床组织样本,采用RT-qPCR法检测miR-145表达。体外培养OVCAR3人卵巢癌细胞,使用活性氧(ROS)试剂盒、脂质氧化产物丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、流式细胞仪、Western印迹检测细胞中ROS、MDA、SOD水平,细胞凋亡和B-淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bax、含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达。Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和Western印迹法验证miR-145和核因子(NF)-κB p65的靶向关系。抑制或激活NF-κB信号通路,检测细胞中ROS、MDA、SOD水平和细胞凋亡。结果 miR-145在卵巢癌组织中的表达低于显著癌旁组织(P0.05)。在OVCAR3细胞中过表达miR-145,ROS和MDA水平显著升高(P0.05),SOD水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率显著增加(P0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P0.05),Caspase-3蛋白表达显著上调(P0.05)。miR-145可靶向调控NF-κB p65蛋白表达。抑制NF-κB信号通路,ROS和MDA水平显著升高(P0.05),SOD水平显著降低(P0.05);细胞凋亡率显著增大(P0.05);激活NF-κB信号通路可减弱miR-145对OVCAR3细胞凋亡的诱导作用(P0.05)。结论 miR-145能够通过抑制NF-κB信号通路,上调ROS水平从而诱导卵巢癌细胞凋亡。     

普拉格雷干预对脑梗死大鼠神经功能的影响及可能机制

目的考察普拉格雷对脑梗死大鼠神经功能的影响及可能机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和普拉格雷组3组,每组40只。假手术组与模型组灌胃给予生理盐水,普拉格雷组给予普拉格雷10 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续给药14 d。记录或检测各组行为障碍、组织病理学改变、脑内半胱天冬酶(Caspase)-3及程序化死亡基因(PDCD)-5表达情况,外周血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及S-100β蛋白表达情况。结果与假手术组比,模型组及普拉格雷组神经功能评分升高显著(P<0.05);与模型组比较,普拉格雷组神经功能评分显著降低(P<0.05)。假手术组脑组织细胞结构完整;模型组细胞排列紊乱,水肿严重,血管充血;与模型组比较,普拉格雷组脑组织结构较完整,且坏死及水肿程度降低。与假手术组比,模型组可见大量Caspase-3和PDCD-5细胞(P<0.05),SOD明显降低(P<0.05),MDA、NSE和S-100β明显增高(P<0.05);与模型组比,普拉格雷组Caspase-3和PDCD-5细胞显著降低(P<0.05),SOD明显增高(P<0.05),MDA、NSE和S-100β明显降低(P<0.05)。结论普拉格雷可以通过抑制Caspase-3及PDCD-5凋亡因子,调控SOD、MDA、NSE及S-100β表达从而改善脑梗死大鼠的神经功能障碍。     

黄连对糖尿病脑缺血再灌注模型大鼠Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨黄连对糖尿病合并脑缺血再灌注模型大鼠Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达的影响及其保护糖尿病合并脑缺血再灌注大鼠的脑损伤作用机制。方法本实验将SD雄性大鼠60只随机分为4组,即假手术组和糖尿病脑缺血再灌注黄连高、中、低(100 g/kg,50 g/kg,25 g/kg)剂量组,每组15只。黄连干预组给予佐链脲菌素(STZ)注射造糖尿病模型。连续监测血糖7 d,待血糖稳定后,用线栓法造脑缺血再灌注模型。观察黄连对糖尿病大鼠脑缺血再灌注120 min后脑组织Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达的影响。结果假手术组的Bax蛋白较其他各组低,差异有统计学意义(P0.05),而黄连低、中、高剂量组的Bax蛋白表达呈降低趋势(P0.05)。假手术组的Bcl-2蛋白表达亦较其他各组低,各黄连剂量组的Bcl-2蛋白表达随黄连剂量增加而增高(P0.05),降低血糖,可明确改善神经功能缺损症状(P0.05)。结论高剂量黄连能下调Bax蛋白、上调Bcl-2蛋白表达,降低血糖,改善神经功能缺损症状,抑制糖尿病合并脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡,从而对糖尿病合并脑缺血再灌注损伤起到保护作用。     

老年大鼠心肌组织中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达改变及可能意义

目的验证老年大鼠心肌细胞凋亡程度；测定老年心肌组织中内源性线粒体后凋亡调节蛋白Omi／HtrA2和XIAP的表达及其与心肌细胞凋亡的关系。方法分别选取雄性成年SD大鼠[体重（278±10）g，4-6个月]和老年SD大鼠[体重（525±8）g，22-24个月]。随机分为以下4组：正常成年组（40只）；正常老年组（40只）；老年ucf～101组（10只），腹腔注射ucf-101（1．5μmol／kg）；老年DMSO组（10只），腹腔注射DMSO（1．5μmol／kg）。采用Caspase-3活性测定法检测大鼠心肌组织中心肌细胞凋亡发生情况；用Western—blot蛋白印记法检测大鼠心肌组织中Omi／HtrA2和XIAP的表达水平。结果以成年大鼠caspase-3比活性（1．00±0．04）为1，老年大鼠的caspase-3的比活性（2．31±0．43，P〈0．01）显著增高。老年大鼠心肌组织中Omi／HtrA2表达明显增高，XIAP表达明显下降。给予特异性Omi／HtrA2的抑制剂ucf-101，可显著减少老年大鼠心肌组织caspase-3的表达。结论老年大鼠心肌组织中表达增多的Omi／HtrA2，可能导致了XIAP的降解以及随后的caspase-3活化和细胞凋亡。     

芒果苷对缺氧缺血性脑损伤大鼠氧化应激反应及神经细胞凋亡的影响

目的研究芒果苷通过PI3K/Akt/mTOR途径对缺氧缺血性脑损伤大鼠的氧化应激反应及神经细胞凋亡的影响。方法将144只SD新生大鼠按随机原则分为6组,空白对照组、模型组、阳性对照组、芒果苷低剂量组、芒果苷中剂量组和芒果苷高剂量组,每组24只。除空白对照组外其他各组复制缺氧缺血性脑损伤大鼠模型,造模后空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水,阳性对照组给予尼莫地平[0.4 mg/(kg·d)],芒果苷低、中、高剂量组分别给予芒果苷50、100、200 mg/(kg·d),连续给药4周。检测各组大鼠神经功能损伤评分;干湿重法检测各组大鼠脑组织含水量;HE染色观察大鼠脑组织的病理形态学改变;原位细胞凋亡检测(TUNEL)大鼠脑组织神经元凋亡情况;生化检测法测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)活力;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定大鼠脑组织内PI3K/Akt/mTOR mRNA表达;运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中Caspase-3、Bcl-2、Bcl-xL、Bad、Bax蛋白含量。结果模型组大鼠的神经损伤评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡数、MDA含量、PI3K表达及Caspase-3含量显著高于空白对照组,完整的神经元数量及脑组织中SOD、GSH-Px、T-AOC含量、Akt、mTOR表达及Bcl-2、Bcl-xL、Bad含量显著低于空白对照组(P0.01);各药物组大鼠的神经损伤评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡数、MDA含量、PI3K表达及Caspase-3含量显著低于模型组,完整的神经元数量及脑组织中SOD、GSH-Px、T-AOC含量、Akt、mTOR表达及Bcl-2、Bcl-xL、Bad含量显著高于模型组(P0.01)。结论芒果苷通过下调Caspase-3的表达、上调Bcl-2和Bcl-xL的表达,增强PI3K/Akt/mTOR通路的表达来增强神经保护作用,抑制神经细胞凋亡,提高神经细胞存活率。     

α-硫辛酸对氧化损伤大鼠肝细胞凋亡的保护作用

目的 研究α-硫辛酸(α-LA)对氧化损伤大鼠肝细胞凋亡的保护作用.方法 将正常大鼠肝细胞(BRL)分为正常对照组,在含有5％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养24 h;H2O2损伤组,在含有5％ FBS的DMEM培养基中培养24 h后,以0.2 mmol/L H2O2作用1 h;α-LA低、中、高剂量组,分别用含有50、100、200 μmol/L α-LA的培养液培养细胞24 h后,以0.2 mmol/L H2O2作用1h.测定各组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果 与正常对照组比较,H2O2损伤组的GSH-Px和SOD活性均降低,MDA含量和细胞凋亡率升高(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达量减少,Bax蛋白表达量增多(P＜0.05);与H2O2损伤组相比,α-LA各剂量组的GSH-Px和SOD活性均有所升高,MDA含量和细胞凋亡率下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达量增加,Bax蛋白表达量降低(P＜0.05).结论 α-LA可以通过抗氧化,上调Bcl-2的蛋白表达水平,下调Bax的蛋白表达水平,对氧化损伤引起的肝细胞凋亡起到保护作用.     

丹星通络汤治疗大鼠脑缺血再灌注Bax蛋白表达的影响

目的 观察丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤海马区细胞凋亡调控基因Bax蛋白表达的影响,探讨丹星通络汤预防与治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用.方法 SD大鼠40只,随机分成假手术组、模型组、尼莫地平组、丹星通络汤小剂量组、丹星通络汤大剂量组,每组8只.采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型.HE染色检测大鼠脑组织海马区的病理学变化,免疫组织化学法和医学图像分析法检测大鼠脑组织海马区Bax蛋白的平均光密度(OD)值.结果 与模型组比较,丹星通络汤大、小剂量组大鼠脑组织海马区Bax蛋白的OD值明显减低(P＜0.05),并且丹星通络汤大剂量组与尼莫地平组相比有统计学意义(P＜0.05).结论 丹星通络汤可能通过下调Bax蛋白的表达,从而抑制脑组织的凋亡机制发挥对脑组织的保护作用.     

补骨脂对慢性心力衰竭大鼠心肌损伤的影响

目的探讨补骨脂对慢性心力衰竭大鼠超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量以及细胞凋亡相关基因转录水平的影响。方法将SD大鼠(雄性)随机分为空白对照组、慢性心力衰竭模型组、地高辛组以及补骨脂组。采用阿霉素腹腔注射法建立慢性心力衰竭动物模型,6周后开始灌胃给药,连续给药7周。苏木精-伊红染色检测心肌组织病理损伤,紫外分光光度计法测定大鼠心脏组织中SOD活力及MDA含量。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法测定大鼠Bax、Bcl-2、Caspase-9及Caspase-3 mRNA表达水平。结果与模型组比较,地高辛组与补骨脂组心肌组织SOD活力升高,MDA含量下降,差异均有统计学意义(P<0.05);地高辛组与补骨脂组SOD活力、MDA水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组心肌病理损伤程度加重,Bax、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达均上升,而Bcl-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,补骨脂组心肌病理损伤程度减轻,Bax和Caspase-3 mRNA表达均下降,而Bcl-2和Caspase-9 mRNA表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补骨脂可提高大鼠心肌组织SOD活力,减少MDA含量,减轻体内氧自由基的聚集,可通过调控大鼠心肌细胞凋亡途径中关键基因的转录水平改善心肌损伤。     

miR-338-3p通过减轻炎症反应和神经细胞凋亡保护急性脑梗死脑损伤

目的 探讨miR-338-3p对急性脑梗死脑组织损伤的影响及其机制。方法 将48只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-NC组和miR-338-3p组,后3组采用线栓法构建急性脑梗死模型,miR-NC组和miR-338-3p组采用侧脑室注射激动剂阴性对照和miR-338-3p激动剂;术后48 h根据Zea-Longa评分标准评估大鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大鼠脑梗死体积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测大鼠脑组织神经细胞凋亡,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3水平测定试剂盒检测脑组织神经细胞Caspase-3活性,Western印迹检测脑组织中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠脑组织中miR-338-3p表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脑组织中炎症因子血管细胞间黏附分子(VCAM)-1和细胞间黏附分子(ICAM)-1表达。结果 与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑梗死体积和脑组织神经细胞凋亡率、Caspase-3水平、Bax蛋白表达...     

熊果酸抑制神经细胞凋亡降低局灶性脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨熊果酸不同剂量对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组及熊果酸低剂量组(20 mg/kg)、中剂量组(40 mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg),每组20只再灌注前30min腹腔注射给药,24 h后行盲法神经功能评分,测定各组脑组织含水量和脑梗死体积;观察神经细胞凋亡并计算凋亡指数(AI),检测脑组织中bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达及caspase-3、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果熊果酸中、高剂量组大鼠神经功能评分较模型组降低,神经功能症状明显改善,脑组织含水量和梗死体积均降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);熊果酸各剂量组神经细胞凋亡状况呈不同程度好转,中、高剂量组AI降低(P0.05或P0.01);熊果酸中、高剂量组脑组织Bax mRNA表达下调、bcl-2 mRNA上调、bcl-2/Bax比值升高,caspase-3、NF-κB蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论熊果酸中、高剂量可能通过抑制神经细胞凋亡而起到降低局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。     

miR-181a在脑缺血神经损伤与神经康复中的作用

目的探讨miR-181a在脑缺血损伤与神经康复中的作用机制。方法构建脑缺血大鼠模型和miR-181a过表达载体,通过尾静脉注射促进脑缺血大鼠脑组织中miR-181a的表达。RT-PCR检测24 h后脑组织miR-181a的表达水平。Tunel检测海马区细胞凋亡情况。对脑缺血大鼠模型进行神经功能评分。Western印迹检测大鼠脑组织中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6的表达水平。结果脑缺血处理的大鼠缺血组、对照组、促进组的miR-181a水平均明显高于正常组,促进组高于对照组和缺血组(P<0.01),对照组和缺血组无显著差异(P>0.05)。尾静脉注射的r AAV-miR-181a载体可以有效促进大鼠脑组织中miR-181a的表达。Tunel结果显示,促进组中脑组织海马区的阳性细胞比例高于对照组。促进脑缺血大鼠miR-181a的表达,脑组织中细胞凋亡率增高。促进组大鼠神经功能评分明显高于对照组(P<0.05),大鼠脑组织中IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.01)。结论 miR-181a在脑缺血组织中过表达,可以促进脑组织细胞凋亡和炎症的发生,加重神经损伤的严重程度。     

茶多酚对力竭运动大鼠骨骼肌组织中细胞凋亡的影响

目的研究茶多酚对力竭运动大鼠骨骼肌组织中细胞凋亡的影响。方法大鼠分为4组,分别为安静组、训练组与茶多酚安静组、茶多酚训练组,训练组、茶多酚训练组分别在力竭运动前给予运动训练,茶多酚安静组与茶多酚训练组给予茶多酚灌胃处理,安静组大鼠在力竭运动前不进行运动训练,不给予茶多酚灌胃,记录各组大鼠运动至力竭时间。取大鼠血液和骨骼肌组织,比色法检测血清中乳酸含量,TUNEL法检测大鼠骨骼肌组织中细胞凋亡水平,Western印迹检测骨骼肌组织中活化的Caspase-3(酶切Caspase-3)蛋白水平,比色法检测骨骼肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,黄嘌呤氧化酶法检测骨骼肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,钼酸铵比色法检测骨骼肌组织中过氧化氢酶(CAT)活性,比色法检测大鼠骨骼肌组织中羰基化蛋白含量,硫代巴比妥酸法检测大鼠骨骼肌组织中丙二醛(MDA)含量。结果与安静组比较,训练组、茶多酚安静组、茶多酚训练组大鼠运动至力竭时间升高,血清中乳酸含量降低,细胞凋亡率降低,骨骼肌中酶切Caspase-3蛋白水平降低,抗氧化酶GSH-PX、SOD、CAT活性升高,羰基化蛋白和MDA含量降低。与训练组、茶多酚安静组比较,茶多酚训练组大鼠运动至力竭时间也升高,血清中乳酸含量也降低,细胞凋亡率降低,骨骼肌中酶切Caspase-3蛋白水平降低,抗氧化酶GSH-PX、SOD、CAT活性升高,羰基化蛋白和MDA含量降低。结论茶多酚具有减少骨骼肌组织细胞凋亡、提高机体抗氧化酶活性、减少氧化损伤作用,对于力竭运动大鼠运动功能具有改善作用。