颗粒细胞凋亡对卵母细胞发育潜能的影响

未成熟卵体外培养成熟（IVM）是近十几年在辅助生殖领域新兴起来的一种助孕技术。其主要原理是模拟体内卵母细胞的发育成熟环境，使从卵巢采集的未成熟卵母细胞在体外培养成熟，然后予以受精，胚胎培养和移植，获得妊娠 。目前体外培养的卵母细胞的成熟率低及受精率低，形成的胚胎发育潜能差，常不能继续发育到囊胚阶段而导致着床失败。     

颗粒细胞凋亡对卵母细胞发育潜能的影响

未成熟卵体外培养成熟(IVM)是近十几年在辅助生殖领域新兴起来的一种助孕技术。其主要原理是模拟体内卵母细胞的发育成熟环境,使从卵巢采集的未成熟卵母细胞在体外培养成熟,然后予以受精,胚胎培养和移植,获得妊娠[1]。目前体外培养的卵母细胞的成熟率低及受精率低,形成的胚胎发     

颗粒细胞凋亡对卵母细胞发育潜能的影响

未成熟卵体外培养成熟(IVM)是近十几年在辅助生殖领域新兴起来的一种助孕技术.其主要原理是模拟体内卵母细胞的发育成熟环境,使从卵巢采集的未成熟卵母细胞在体外培养成熟.然后予以受精,胚胎培养和移植,获得妊娠[1].     

自然周期未成熟卵体外培养治疗多囊卵巢综合征性不孕症的临床研究

目的研究在自然周期获取未成熟卵母细胞体外培养成熟（IVM）治疗多囊卵巢综合征（PCOS）性不孕症的临床疗效。方法57例行体外受精一胚胎移植助孕的PCOS患者,共62个周期,获取434个未成熟卵母细胞进行体外培养,成熟后行单精子卵胞浆内注射,受精后取优质胚胎移植宫腔,统计获卵数、受精率、卵裂率和妊娠率。结果62个周期共培养出成熟卵子293个,成熟率为67．5％;271个卵子受精,受精率92．5％,卵裂率81．2％,其中52个周期进行胚胎移植,周期取消率为16．1％;17例患者妊娠,移植周期妊娠率32．7％。结论IVM是治疗多囊卵巢综合征性不孕症的有效方法。     

卵母细胞体外成熟治疗难治性PCOS的护理

目的总结未成熟卵体外培养成熟(IVM)治疗难治性多囊卵巢综合症(PCOS)过程中的护理经验。方法对25例PCOS患者行IVM治疗27个周期，加强对患者的心理护理，进行心理疏导，做好围手术期的护理。结果27个周期中，9例临床妊娠，其中1例胚胎停止发育，7例继续妊娠，1例足月妊娠分娩1双胎。结论IVM是治疗PCOS的一种新方法，加强患者的心理护理及围手术期的护理，可提高IVM成功率。     

人类未成熟卵母细胞的体外成熟培养研究进展

随着人类生育年龄的推迟及二胎政策的全面放开,不孕症、卵巢早衰、卵巢储备功能不足等女性生殖疾病罹患率也呈逐年上升趋势。人类未成熟卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养一直是国内外生殖医学领域研究者关注的热点。体外培养卵泡生长状态受获取卵泡途径、培养环境、培养方案等多种因素影响。文章就人类未成熟卵母细胞IVM培养的临床适应证、培养方案及影响因素作一综述,为相关研究人员和临床工作者提供参考。更多还原     

人类不成熟卵体外培养的应用

1935年Pincus和Enzmann在家兔的实验中发现,若将不成熟卵母细胞从卵泡中释放出来,它在体外适当培养基中可发育成熟.这一现象使人们开始联想到从体内抽取的不成熟卵母细胞可在体外培养成熟,并可用来挽救发育中即将退化的卵母细胞,同时可能应用于临床提供卵子用于体外受精.人不成熟卵细胞的体外成熟(in vitro maturation, IVM),由Cha[1]首先报道成功从手术穿刺卵巢获得不同成熟阶段的未成熟卵母细胞,在体外培养到成熟卵母细胞而进行体外受精和胚胎移植.随后Trounson等[2]报道在阴道B超引导下穿刺2～10 mm直径的卵泡,未接受促激素刺激的多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢获得不成熟卵进行体外培养并获得成功妊娠.     

体外成熟卵母细胞及畸形精子症体外受精方式的探讨

目的:为体外成熟卵母细胞(IVM)及重度畸形精子症选择有效、安全、经济的受精方式。方法:一组为拟接受常规体外受精(IVF)改为IVM的患者,另一组为重度畸形精子症患者(改良巴氏染色正常形态精子<5%,密度>20×106/mL,a b级精子≥50%)。如患者获未成熟卵母细胞数≥15,选择其1/3卵母细胞行常规IVF方式受精,余2/3卵母细胞行单精子卵胞浆内注射方式受精。比较同一患者同一周期不同受精方式的受精率、卵裂率、优质胚胎率。结果:两种受精方式的受精率、卵裂率、优质胚胎率均无明显差异,两组中共有4例临床妊娠。结论:(1)为防止超排卵发生的卵巢过度刺激而由常规IVF改为IVM时,若男方精液质量和形态均正常,可以选择常规IVF方式受精。(2)重度畸形精子症者若精液质量正常,亦可选择常规IVF方式受精。     

冷冻保存对人卵母细胞纺锤体及发育潜能的影响

背景:卵子冷冻技术的发展为人类辅助生殖技术带来重大的突破,但卵子冷冻的效果并不理想.目的:研究冷冻保存对不同成熟时期人卵母细胞纺锤体及发育潜能的影响.设计、时间及地点:随机对照细胞学体外实验,于2005-04/2006-05在重庆市妇幼保健院完成.材料:体外受精-胚胎移植和卵胞浆内单精子显微注射治疗周期中剩余的未成熟卵子(GⅤ期和MⅠ期).方法:将未成熟卵子随机分为对照组、MⅠ/GⅤ卵冷冻组和体外成熟后MⅡ卵冷冻组,用慢冻速融的方法对MⅠ/GⅤ卵和体外成熟的MⅡ卵进行冷冻和解冻,应用Polscope对卵子的纺锤体进行观察,并观察卵子的发育潜能.主要观察指标:不同组卵子的纺锤体可见率,体外成熟情况,冷冻不同时期卵子的复苏情况,及后期的受精、卵裂、可用胚胎情况.结果:对照组纺锤体可见率77.3%,明显高于MⅡ卵冻融组、MⅠ/GV卵冻融组(56.3%,53.8%,P<0.05),冷冻造成了纺锤体的损伤;冷冻后未成熟卵的体外成熟率下降,但无统计学差异;MⅡ期卵、MⅠ期卵和GⅤ期卵复苏率相似;对照组的受精率(81.8%)明显高于MⅡ卵冻融组、MⅠ/GⅤ卵冻融组(62.5%,59.0%,P<0.05),冷冻后的卵子受精能力受到损害;对照组的卵裂率与MⅡ卵冻融组差异无显著性意义(84.4%,72.7%,P>0.05),MⅡ卵冷冻组的卵裂没有受到明显影响;对照组的卵裂率与MⅠ/GⅤ卵冻融组差异有显著性意义(84.4%,52.9%,P<0.05),MⅠ/GⅤ卵冻融后卵裂率明显下降;冷冻组的胚胎质量下降,可用胚胎率明显降低.结论:控制性超排卵周期中剩余的未成熟卵子无论是直接冷冻还是先体外培养成熟后再冷冻,卵子的纺锤体都受到了一定的损伤,对卵子的发育潜能造成了影响.     

多囊卵巢综合征患者采用未成熟卵体外成熟培养技术取卵的手术配合

目的：探讨未刺激周期未成熟卵体外成熟培养/体外受精胚胎移植术（ IVM/IVF-ET ）在治疗不孕症中的手术配合。方法回顾分析2010年6月-2012年8月行体外受精胚胎移植的300例患者资料,其中多囊卵巢综合征患者行自然周期IVM治疗91例。充分掌握和了解IVM的治疗方案,给予手术前、手术中和手术后的护理配合以及良好的心理干预。结果91例患者情绪均相对稳定,顺利度过IVM治疗周期。结论规范掌握未成熟卵体外培养手术过程和配合,有助于患者顺利度过IVM治疗周期。     

时差成像干式培养与传统湿式培养应用于不同年龄胚胎发育的效果

【摘 要】 目的 评价时差成像技术(time—lapse,TL)干式培养与传统湿式培养对不同年龄组胚胎发育的影响。方法 回顾性分析2020 年 7月至2021年12月，2390例体外胚胎培养结果，其中TL组640个周期，传统湿式培养组(对照组，Control，C组)1750个周期，比较两组间正常受精率、正常卵裂率、有效胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、和优质囊胚率的差异。结果 (1)两组在女方年龄、不孕类型、不孕因素、促排卵药物（Gonadotropins，Gn）用量、受精方式差异均无统计学意义(P>O．05)，(2)在20-29岁组：与C组比较,TL组有效胚胎率 (75.39％vs 70.15％)、优质胚胎率(49.79％vs 41.98％)，TL组均显著升高(P＜0.01）；在30-34岁组：与C组比较，TL组优质胚胎率(46.70％vs 41.43％)也显著升高(P＜0.01），囊胚形成率（57.14％vs 52.74％）、优质囊胚率(35.82％vs 32.26％)明确改善差异有统计学意义(P<0.05)；≥40岁组：与C组比较，TL组优质胚胎率(44.05％vs 48.96％，P<0.05)、囊胚形成率（16.11％vs21.77％，P＜0．01）及及优质囊胚率均显著降低(16.11％vs 21.77％，P<0.05)。结论 与常规湿式相比，在低年龄组（20-34岁），TL培养可显著提高优质胚胎率；而在高年龄组（≥40岁）则显著降低优质胚胎率，囊胚形成率和优质囊胚率，可能与培养基渗透压改变有关。     

卵母细胞的体外成熟

卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation, IVM)是指将GV期或GV前期的卵母细胞在体外培养,达到次级卵母细胞(MII),能够正常受精、发育和着床,包括完整的卵泡培养[1]和单纯的卵丘复合体培养.目前应用于辅助生殖技术的主要限于后者.     

促性腺激素释放激素激动剂降调节后月经第3天血清黄体生成素值对体外受精-胚胎移植的影响

目的 经过促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)降调节后,在月经第3天使用促性腺激素(Gn)前对血清黄体生成素(LH)进行测定,探讨不同血清LH值与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的关系,以寻找合适的血清LH降调标准.方法 对2007年3月至2010年7月在海军总医院妇产科辅助生殖医学中心进行的254个取卵周期进行同顾性分析,按降调节后月经第3天血清LH值不同对254个周期进行分组,分析各组间实验室数据及临床妊娠率的差异.同时通过解冻周期胚胎存活率及临床妊娠率,进一步研究新鲜周期血清LH值对胚胎发育潜能的影响.结果 GnRHa降调节后,各组之间年龄、正常受精率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用胚胎率、移植胚胎数目没有统计学差异(P值分别为0.122、0.129、0.235、0.605、0.417、0.496),但各组间临床妊娠率差异有统计学意义(P=0.016).GnRHa降调节后不同血清LH值对胚胎的发育潜能无影响.结论 GnRHa降调节后,在月经第3天不同血清LH值对实验室数据及胚胎的发育潜能没有显著性影响,但对临床妊娠率影响显著,并初步认为当2 IU/L≤LH<4 IU/L时,可能会达到较为理想的新鲜周期妊娠结局.     

低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析

目的分析低胚胎评分患者行卵裂期(D_3)或囊胚期(D_5)移植的结局。方法选取接受IVF-ET治疗的低评分胚胎患者222例,根据患者意向分为卵裂期移植组(A组)和囊胚培养组(B组)。比较2组临床妊娠率、继续妊娠率及种植率。结果 2组的取卵周期临床妊娠率无显著差异(P0.05),2组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率有显著差异(P0.05)。结论继续囊胚培养能有效筛选出低评分胚胎中具有发育潜能的胚胎,降低无效移植。     

联合使用1-磷酸鞘氨醇和溶血磷脂酸对小鼠卵母细胞体外成熟和受精后胚胎发育的影响

目的通过在成熟培养液中联合添加或单独添加1-磷酸鞘氨醇(S1P)和溶血磷脂酸(LPA)研究对小鼠卵母细胞体外成熟和受精后胚胎发育的影响,以期为优化人卵母细胞的体外成熟系统和提高体外胚胎发育率奠定实验基础。方法 (1)成熟培养液中单独添加50~2 000 nmol/L S1P或1~100μmol/L LPA,体外成熟后的卵母细胞体外受精,得到的胚胎观察并统计卵裂率、8-细胞率、囊胚率。(2)成熟培养液中联合添加不同浓度组合S1P和LPA,体外成熟后的卵母细胞体外受精,得到的胚胎观察并统计卵裂率、8-细胞率、囊胚率。(3)对各组体外成熟得到的卵母细胞进行免疫荧光法染色,以评估MⅡ期卵母细胞纺锤体的完整性。(4)对各组得到的数据应用卡方检验进行分析。结果添加100 nmol/L S1P组的成熟率(81.0%)和8-细胞率(81.9%)显著高于0 nmol/L和2 000 nmol/L组;添加30μmol/L LPA的成熟率(81.8%)和8-细胞率(81.5%)显著高于0μmol/L和100μmol/L组;500 nmol/L S1P+30μmol/L LPA组的成熟率(90.7%)显著高于100 nmol/L S1P组、30μmol/L LPA组合和不添加组;500 nmol/L S1P+30μmol/L LPA组的囊胚率(77.6%)显著高于100 nmol/L S1P组和不添加组。结论联合添加S1P和LPA可能要比单独添加更能促进小鼠卵母细胞成熟,虽然在正常纺锤体百分率方面没有显示出优势,但通过体外受精得到的胚胎得到了较高的囊胚发育率。     

ICSI周期卵母细胞成熟率对卵胞浆内单精子显微注射助孕妊娠结局的影响

[目的]探讨卵母细胞成熟率对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)助孕临床结局的影响.[方法]回顾性分析 2010 年 1月至 2016年12 月在本院行ICSI 助孕的691个治疗周期,纳入病例均采用常规长方案促排卵,人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导排卵,女方年龄≤38岁,且获卵数≥5枚、卵母细胞成熟率≥30%.根据卵母细胞成熟率不同,分为5组,A组:30%≤卵母细胞成熟率<60%;B组:60%≤卵母细胞成熟率<70%;C组:70%≤卵母细胞成熟率<80%;D组:80%≤卵母细胞成熟率<90%;E组:卵母细胞成熟率≥90%.比较5组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、周期取消率及临床妊娠率等.[结果]各组女性患者年龄、不孕年限、内膜厚度、平均获卵数、精子来源比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性;A 组受精率为70.25%(111/158),明显低于D 组(81.43%,1605/1971)和E组(87.26%,3551/4069),其差异有统计学意义(P<0.05);A组优胚率为41.12%(44/107),显著低于E组(57.03%,2005/3516)(P<0.05);A 组临床妊娠率为45% (9/20),显著低于D 组(54.75%,98/179) 和 E 组(59.32%,191/322)(P<0.05);各组间卵裂率、移植胚胎数和种植率比较差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]卵母细胞成熟率较低时,可能会影响ICSI助孕周期患者的胚胎发育潜能及临床结局.     

冷冻胚胎解冻移植妊娠率的影响因素研究

[目的]探讨冷冻胚胎解冻移植妊娠率的影响因素.[方法]收集2009年1月至2013年12月在本院生殖中心冷冻胚胎解冻移植393个周期资料,分析冷冻胚胎解冻移植妊娠率的影响因素.[结果]393个冷冻胚胎移植周期,移植胚胎865个,种植胚胎148个,共有115周期妊娠,周期妊娠率29.26%(115/393),种植率为17.10%(148/865).妊娠组(115个周期)不孕年限低于未妊娠组(278个周期)(4.44±3.187 vs 5.39±4.244,P<0.05),妊娠组子宫内膜厚度厚于未妊娠组(9.84±1.981 vs 9.39±1.990,P<0.05),平均每次移植胚胎个数多于非妊娠组(2.31±0.552 vs 2.15±0.552,P<0.05),移植3个、2个、1个解冻复苏后优质胚胎的妊娠率分别为60.00%(9/15)、33.80%(48/142)和25.16%(40/159).是否搔刮子宫内膜,月经期子宫内膜不同病理分型、准备内膜方案、基础卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)值、体质量指数(BMI)及原发还是继发不孕均无统计学意义.[结论]不孕年限、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎的个数和质量是影响冷冻胚胎解冻移植能否成功的因素.     

玻璃化冷冻与程序化冷冻对小鼠MⅡ期的卵母细胞及经单精子卵胞浆注射得到的胚胎发育潜能的影响

目的评估两种冷冻方法对小鼠卵母细胞和单精子卵胞浆注射(ICSI)胚胎发育潜能的影响,以期为辅助生殖领域人卵母细胞的冷冻保存和胚胎发育潜能的研究提供实验依据。方法分别用玻璃化冷冻与程序化冷冻对小鼠MⅡ期的卵母细胞进行冷冻保存,解冻后存活的卵母细胞用于ICSI注射,然后将得到的胚胎体外发育并进行胚胎移植。用卡方和单因素的方差分析进行统计学分析,并比较两种方法冻存的卵母细胞解冻后的存活率,ICSI胚胎的2-细胞率、8-细胞率、囊胚率和妊娠率等。结果采用玻璃化冷冻法冷冻的MⅡ期卵母细胞存活率为81.6%,明显高于程序冷冻法组的70.7%。两组得到的胚胎在2-细胞形成率方面没有差异,但是8-细胞率和囊胚发育率差异均有统计学意义。两组假孕母体的妊娠率(63.6%和50.0%)和幼崽出生率(20.0%和12.4%)均没有统计学差异。结论与程序化冷冻相比,玻璃化冷冻对于小鼠MⅡ期卵母细胞的保存效果较好。解冻后卵母细胞用于ICSI,玻璃化冷冻组的胚胎得到较高的8-细胞率和囊胚发育率。但这两组的囊胚移植得到的妊娠率和出生率没有差异。     

不同分化状态的供体细胞对小鼠克隆胚胎发育的影响

目的:探讨不同分化程度的供体细胞对克隆胚胎发育潜能的影响.方法:采用"一步法"核移植技术将供体细胞核直接注入小鼠卵母细胞,成功构建克隆胚胎.颗粒细胞克隆胚胎经含有10 mmol/L的SrCl2和5 ug/mLCB的培养液中激活处理5～6 h,R1胚胎干细胞克隆胚胎经含有10 mmol/L的SrCl2的培养液中激活处理3h,然后移入CZB培养液中继续培养.结果:颗粒细胞克隆胚胎体外的激活率、卵裂率和囊胚率与胚胎干细胞克隆胚相比具有显著差异,克隆胚胎体内移植后胚胎干细胞克隆胎儿出生率稍高(2.3%vs.1.2%),但没有显著差异.结论:供体细胞分化程度越低,克隆胚胎体内外发育潜能越高.     

基础FSH/LH在预测年轻不孕女性卵巢储备功能及自然周期排卵率中的价值

目的探讨基础卵泡刺激素/黄体生成素(FSH/LH)在预测年轻不孕女性卵巢功能和评估自然周期卵泡发育及排卵情况中的价值。方法选择进行自然周期卵泡监测的302例不孕症患者,根据基础FSH/LH不同分成组1(基础FSH/LH2,共206例),组2(基础FSH/LH≥2,共96例)进行比较。分析两组的年龄、基础性激素水平、窦卵泡计数(AFC)、抗苗勒管激素(AMH)水平及自然周期排卵率。结果两组患者的年龄、基础FSH、基础雌二醇、基础泌乳素、基础睾酮、AFC比较,差异无统计学意义(P0.05)。组2的基础LH、AMH水平低于组1,差异有统计学意义(P0.05)。组2患者的排卵率(59.38%)低于组1(83.01%),差异有统计学意义(P0.05)。结论基础FSH/LH能准确评估年轻女性不孕患者卵巢储备功能,同时可以预测自然周期排卵的结局,可作为年轻不孕女性筛查指标,缩短不孕症治疗周期,提高治疗效率。