衡阳市2010年手足口病实验室检测结果分析

目的对衡阳市2010年4-12月手足口病（HFMD）实验室检测结果进行分析,了解衡阳市HFMD流行特征,为今后制定或调整HFMD防治措施提供参考。方法对2010年4-12月衡阳市各县区疾病预防控制中心（CDC）及各类医疗机构送检的625例临床诊断为HFMD患者标本,应用实时荧光（Real-time）RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒（HEV）、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CVA16）特异性核酸。结果 625例HFMD患者标本中,EV71阳性率为26.08%（163/625）,CVA16阳性率为8.80%（55/625）,其它HEV阳性率为19.84%（124/625）;95例HFMD重症病例中,EV71阳性率（67.80%,40/95）最高,并且男性阳性率（50.85%）略高于女性（27.78%）,未检出CVA16型;9例HFMD重症死亡病例中,6例为EV71型,阳性率为66.67%。4-7月为HFMD高发期,3岁以下为高风险年龄组,重症病例及重症死亡病例比其它年龄组高。结论衡阳市2010年HFMD发病率较高,EV71型是引起重症及重症死亡病例的优势病毒型,应加强监测,特别是3岁以下婴幼儿的监测。     

大连市2010年手足口病实验室检测结果分析

目的 对大连市2010年检测的手足口病(HFMD)结果进行分析,了解大连市手足口病流行特征.方法 应用Real time RT-PCR法对363份临床诊断为(HFMD)的患者标本进行人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)核酸检测.结果 363份标本中EV71阳性率为71.35％,CA16阳性率为0.28％,其它HEV阳性率为9.92％,重症病例占总数的89.81％,8月为HFMD高发期,1～3岁婴幼儿为易感人群,男性明显高于女性.结论 EV71是引起大连市2010年HFMD的主要病原体,重症发病率较往年明显升高.     

2010～2012年北京市顺义区手足口病病原学检测结果分析

目的 通过对2010～2012年北京市顺义区手足口病（Hand-foot-and-mouth disease,HMFD）实验室检测结果分析,了解顺义区手足口病病原学特征,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 对2010～2012年顺义区684例临床诊断为手足口病患者标本,应用实时荧光定量RT-PCR法检测标本中的肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CVA16）、非EV71和CVA16的其它肠道病毒（EV）特异性核酸.结果 684例HFMD患者标本中,肠道病毒阳性率为47.37％ （324/684）.病原谱构成以CVA16型为主,占55.56％（180/324）,其次为EV71占32.41％（105/324）,其他肠道病毒占12.03％ （39/324）;4～7月为HFMD检出高峰期;0～5岁为高风险年龄组;性别比1.49∶1,男性阳性率略高于女性,但差异无统计学意义（x2 =0.163,P＞0.05）;散居病例阳性检出率较高.结论 2010 ～2012年顺义区HFMD病例病毒阳性检出率较高,CVA16是优势病毒型别;每年春夏季节,应加强对流动人口聚居区5岁以下儿童的手足口病防控工作.     

2008年龙岩市手足口病标本病毒检测结果分析

目的了解手足口病的病原学特征，为手足口病的诊断提供科学依据。方法采用RT—PCR方法对2008年龙岩市手足口病患者及其密切接触者616人的893份标本进行EV71和COXA16检测。结果检测患者及其密切接触者616人，EV71阳性率为18．01％，COXA16阳性率为4．55％；检测标本893份，EV71阳性率为20．94％，COXA16阳性率为5．82％。咽拭、粪便（肛拭）、疱疹液EV71阳性率分别为22．69％、19．63％、16．13％（P〉0．05），COXA16阳性率分别为4．19％、6．37％、14．52％（P〈0．01）。结论2008年从手足口病患者及其密切接触者的咽拭、粪便（肛拭）、疱疹液中检出EV71和COXA16。     

泉州市2008年手足口病实验室检测结果分析

[目的]了解泉州市2008年5~10月儿童肠道病毒EV71和CoxA16的感染情况,为防控提供依据。[方法]用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及实时荧光RT-PCR法,对252例患者（36例重症病例）的咽拭子154份、疱疹液136份及重症患儿脑脊液36份共326份标本进行EV71和CoxA16检测。[结果]252例中129例检出肠道病毒EV71或CoxA16（51.2%）,其中EV71阳性率43.3%,CoxA16阳性率7.9%。咽拭子、疱疹液,脑脊液的检出率分别为49.3%、60.3%和2.8%,咽拭子和疱疹液检出率类似。重症病例均为EV71感染,1例脑脊液检出EV71。患儿男女比例分别为52.3%和48.7%。[结论]RT-PCR是手足口病快速、敏感、特异的检测方法。5~7月是EV71和CoxA16的高发期,3岁以下儿童是高危人群（80.6%）。     

实时荧光RT-PCR快速检测手足口病病原体结果分析

目的建立手足口病的实时荧光RT-PCR检测技术平台,开展手足口病病原学检测工作,为手足口病防控提供实验依据。方法用实时荧光RT-PCR法检测河池市2010—2011年手足口病EV、EV71和CA16病毒核酸。结果共检测578例手足口病临床诊断病例样本,421例EV阳性,阳性率为72.84%;其中EV71阳性109例(25.89%),CA16阳性198例(47.03%),其他肠道病毒阳性114例(27.08%);6岁以下儿童EV阳性占所有感染者的99.05%;2010和2011年儿童EV71、CA16、其他肠道病毒阳性率分别为47.86%、10.00%、18.57%和9.59%、42.01%、20.09%;重症病例EV71阳性率为65.38%。结论实时荧光RT-PCR法,适合于手足口病快速确诊及常规监测,特别是重症病例诊断的重要依据。该市不同年度手足口病感染型别有差异,2010年的主要病原体为EV71,其次是其他肠道病毒;而2011年的主要病原体为CA16,其次其他肠道病毒。6岁以下儿童是EV感染的高危人群;EV71是引起重症病例的主要病原体。     

176例儿童手足口病病原体检测结果分析

目的对惠州市部分手足口病病例进行流行病学特征调查和病原学分析,明确导致手足口病肠道病毒的主要型别和分布特征,为制定预防控制措施提供实验室依据。方法选取2009年惠州地区各大医院临床诊断为手足口病的病例为对象,采集患者发病1周内的咽拭子、肛拭子、粪便、脑脊液和疱疹液共计176份标本,采用Real—time PCR对患者标本进行总肠道病毒、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）和肠道病毒71型（EV71）特异性核酸检测,同时运用CoxA16型和EV71型的特异性引物,采用RT-PCR法进行平行核酸分型检测。结果实时荧光定量PCR法检测176份标本,肠道病毒通用型核酸阳性150份（85．2％）,其中CoxA16、EV71病毒核酸阳性分别为93、34份,分别占肠道病毒感染阳性总份数的62．0％（93／150）、22．7％（34／150）,另外NEV（非肠道病毒）占14．8％（26／176）。应用RT—PCR方法对Real-time PCR检测的150份肠道病毒阳性标本进行分型检测．分别检出EV71、CoxA16阳性33、91份,此结果与实时荧光定量PCR法的符合率达98％。总肠道病毒阳性病例数的男女比例为1．78：1（96／54）,EV71阳性者中以3岁以下幼童为多,占58．8％（20／34）。结论所检测儿童手足口病标本中以CoxA16感染为主。RT-PCR法与实时荧光定量PCR法检测肠道病毒的特异性与准确性相当,而实时荧光定量PCR可用于手足口病暴发疫情和临床病例的早期高通量快速诊断。     

宝鸡地区2009—2010年度手足口病病原体实时荧光法检测结果

目的了解宝鸡地区2009年及2010年手足口病流行的主要病原体。方法临床诊断为手足口病病例的咽拭子和疱疹液标本206份,运用实时荧光(RT-PCR)法对标本病毒RNA进行肠道病毒EV71、CA16和非EV71、CA16的其他肠道病毒检测。结果 2009年度阳性检出率为84.0%,其中EV71阳性率为76.0%;2010年度阳性检出率为68.0%,其中CA16阳性率为43.1%。综合两年的结果,重症以EV71为主;阳性者男女比例为1.55∶1;发病年龄以5岁以下儿童为主;收样较多月份为4—7月。结论 2009年宝鸡地区手足口病病原阳性以EV71为主,2010年宝鸡地区手足口病病原阳性以CA16为主。     

实时荧光PCR技术在手足口病病毒核酸检测中的应用

目的探讨实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测手足口病病毒核酸的应用价值。方法采集2009年5-8月奉贤区幼儿疑似肠道病毒感染者粪便和咽拭子标本,分别用实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对肠道病毒EV71、Coxsackie A16(CoXA16)病毒进行检测。结果在对38例疑似病例的粪便和咽拭子标本进行检测时,用实时荧光RT-PCR方法检测到EV71、CoXA16阳性标本为63份,阳性率为82.89%;而用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测到52份阳性标本,阳性率为68.42%。结论实时荧光RT-PCR技术具有特异性强、灵敏度高的特点,且能在采样后数小时内检测到病毒的RNA,从而达到快速诊断的目的。因此,该方法对肠道病毒的流行病学调查及控制起重要作用。     

重庆三峡库区2011年手足口病监测结果分析

目的:对重庆三峡库区2011年手足口病监测病例进行病原学及流行特征分析,为该病的防控提供科学依据。方法:采用real-time RT-PCR技术检测肠道病毒通用型、肠道病毒71型及柯萨奇病毒A组16型。结果:972份标本检出肠道病毒通用型阳性619份,咽拭子、肛拭子、疱疹液检出率分别为60.25%、72.99%、72.53%;同一病例咽拭、肛拭子检出率差别无统计学意义(χ2=0.4444,P=0.5050)。手足口病患病人群中各年龄组之间,男、女患病率差别无统计学意义;发病季节呈现两个高峰,第1个高峰为4月-6月,第2个高峰为11月-12月。结论:2011年引起重庆三峡库区手足口病流行的主要病原体为EV71和CoxA16病毒。手足口病病原学核酸检测阳性率与不同类型标本无明显相关性,与标本采集质量、数量成正相关。     

2009年山东省手足口病病例的病原学检测分析

目的了解2009年引起山东省手足口病（HFMD）的病原体型别及分布特征。方法采集HFMD临床诊断病例的粪便、咽拭子、疱疹液等标本,应用肠道通用引物和EV71、CoxA16特异性引物对其进行RT-PCR鉴定;使用RD、Hep-2细胞对部分肠道通用引物阳性的粪便标本进行病毒分离。结果共收集1604份HFMD临床诊断病例标本,实验室检测阳性标本990份,其中EV71阳性标本589份,CoxA16阳性标本29份,EV71和CoxA16同为阳性标本2份,EV71和CoxA16的检出率分别为36.72%和1.81%。从80份肠道通用引物阳性的粪便标本中分离出肠道病毒32株,其中EV71型病毒23株,CoxA16型病毒4株。结论引起山东省HFMD的病原体主要为EV71型肠道病毒,EV71感染占EV阳性标本数的59.50%。全省17个地市均有EV71感染的HFMD病例检出。     

大便标本的采集条件对EV71病毒核酸检测结果的影响因素分析

目的比较不同标本采集条件对EV71病毒核酸检测结果的影响,加强手足口病标本采集工作。方法对菏泽市11家手足口病治疗定点医院采集的标本做RT-PCR检测;依据不同条件对EV71阳性率做统计学分析。结果 EV71阳性率在不同病例年龄关系、病例所在地、是否重症3种情况下,差异无统计学意义;而在不同病例标本采集时间、采集地、病例性别差异三种条件下,EV71阳性率出现了明显的统计学差异。结论 EV71阳性率与病例标本的采集时间、采集地以及病例性别关系三者之间有明显的关系。     

海南省2008年手足口病样本核酸检测分析

目的 了解2008年海南省手足口病(HFMD)暴发的病原及主要的病毒型别,为HFMD病例诊断和防控措施提供科学依据。方法 依据卫生部《手足口病预防控制指南》提取HFMD临床诊断病例各种样本中的病毒核酸,用肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测基因片段大小。结果 274例临床诊断手足口病病例中EV71型核酸阳性、柯萨奇病毒A16核酸阳性、其他型别肠道病毒核酸阳性分别有102,12,35例;样本中疱疹液阳性检出率最高,为72.0%,肛拭子为40.0%,鼻咽拭子为34.8%,其余样本均阴性;54份直接提取病毒核酸进行RT-PCR检测,结果阴性但细胞培养出现细胞病理改变(CPE)的分离物;肠道病毒、EV71型、CoxA16型阳性分别有48,29,4份,阳性率分别为88.89%,53.70%,7.40%;其中1份样本EV71型和CoxAl6型均为阳性。结论 引起海南省2008年手足口病暴发流行的主要病原是肠道病毒71型,其次为CoxAl6型。     

2010～2012年上海市长宁区北新泾地区手足口病聚集性疫情特征分析

目的对上海市长宁区北新泾地区2010~2012年手足口病聚集性疫情特征进行分析,为有效的预防措施和控制方法提供参考。方法对2010~2012年北新泾地区的手足口病聚集性疫情的流行特征、处置情况、病原学检测结果进行分析。结果 2010~2012年北新泾地区共发生35起聚集性事件,包括1起暴发疫情和34起聚集性疫情,涉及病例占该地区报告病例的25.43%。发病高峰时间多在3~5月。所有疫情均进行了病原学检测,其中29起(83.69%)检出病毒阳性。以CVA16和EV71阳性为主。结论 2010~2012年北新泾地区聚集性疫情中的病毒阳性检出率较高,CVA16和EV71是主要病毒型别。3~5月是发病高峰,应加强对流动人口聚居区手足口病防控工作。     

2008年广东省手足口病实验室检测结果分析

目的对广东省2008年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2008年广东省手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2008年4—12月广东省各地送检的292例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本426份和98名手足口病病例接触者的粪便、肛拭子和咽拭子等标本98份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)。结果292例手足口病患者的426份各类样本中,检测到肠道病毒阳性267份,EV71病毒特异性基因片段阳性169份,CVA16特异性基因片段阳性36份,EV71和CVA16病毒核酸同时阳性3份。292例手足口病病例中,EV71的检出率较CVA16高,分别为50.68%(148/292)和11.99%(35/292),20例手足口病死亡病例均为EV71感染病例。手足口病病例粪便样本的肠道病毒、EV71和CVA16的检测阳性率最高,分别为76.72%(178/232)、45.26%(105/232)和14.66%(34/232),且在发病9 d后仍能检测到EV71病毒。98名手足口病病例接触者的各类样本中,分别检测...     

手足口病常规检测方法改进分析

目的 为提高RT-PCR的检出水平,进一步改进手足口病的检测方法提供参考依据。方法 同时采用RT-PCR和real-time RT-PCR方法检测2011年2-5月河南省新乡市各级医院临床诊断为手足口病患者的100份粪便标本及50份非肠道病人粪便标本中肠道病毒通用型(PE)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)和肠道病毒71型(EV71)核酸;改进引物,RT-PCR检测CVA16;在NCBI中对RT-PCR使用的各组引物进行BLAST比对,并使用Primer Premier 6.0及Oligo 6.62软件分析各引物。结果 Real-time RT-PCR法检出CVA16、EV71和PE阳性率分别为36%、33%和71%,常规RT-PCR法分别检出20%、27%和64%,2者的PE、EV71检出率无统计学差异,而CVA16 的检出率差异有统计学意义(χ²=6.349,P<0.05);改进引物后,RT-PCR法CVA16阳性检出率提高到35%(χ²=5.643,P<0.05),与临床诊断的符合率增加10%,接近real-time RT-PCR检测水平;2种方法的特异性、漏诊率及误诊率无明显差异。结论 常规RT-PCR法对CVA16的检出率较低,采用改进后的引物,其检出率达到real-time RT-PCR水平。