凋亡抑制蛋白Survivin在胃癌中的表达及其与bcl-2、p53蛋白相关性研究

目的：研究凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2、p53在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系，并探讨Survivin与bcl-2、p53蛋白表达的相关性。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（S-P）免疫组化方法，检测Survivin、bcl-2、p53蛋白在正常胃粘膜组织及胃癌组织中的表达。结果：Survivin蛋白在正常胃粘膜组织中无表达，而在58例胃癌中41例（70．7％）表达阳性，差异有统计学意义（P〈0．01）；Survivin蛋白表达与胃癌组织病理分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关，而与浸润程度不相关；胃癌bcl-2蛋白表达的阳性与阴性中，Survivin蛋白表达阳性率分别为81．0％（34／42）和43．8％（7／16），两者比较差异显著（P〈0．01）；p53蛋白表达的阳性和阴性中，Survivin蛋白表达阳性率分别为58．1％（18／31）和22．2％（6／27），两者比较亦有显著性差异（P〈0．05），Survivin蛋白的表达与胃癌组织中的bcl-2蛋白及p53蛋白表达密切相关。结论：Survivin蛋白异常表达可引起细胞凋亡抑制，在胃癌的发生中起一定作用，其过度表达提示胃粘膜细胞增生极度活跃；Sur-vivin蛋白表达与胃癌中bcl-2蛋白及p53蛋白的异常表达密切相关。     

端粒酶逆转录酶在食管癌中表达

目的：探讨食管癌组织中端粒酶逆转录酶（hTRT)的表达和端粒酶活性的关系。评价端粒酶hTRT表达检测在食管癌诊断中的价值。方法：用免疫组化和TRAP法分别观察58例食管癌和28例正常食管组织,比较分析它们的相关性。结果：58例食管癌hTRT阳性率83％（48／58）,端粒酶活性阳性率86％（50／58）,28例正常食管组织均为阴性。中低分化的食管癌端粒酶hTRT及端粒酶活性阳性高于高分化食管癌。结论：抗hTRT抗体在食管癌中具有癌细胞的特征性,并与端粒酶活性呈正相关。随组织学分级的增高,端粒酶hTRT及端粒酶活性阳性率增高。提示其检测有望成为预测舯瘤发生、肿瘤诊断的良好指标。用免疫组化法比TRAP法检测食管癌中端粒酶的活性将更为简便易行。     

子宫颈病变中端粒酶活性的表达

目的：探讨宫颈糜烂，宫颈上皮内瘤样变（CIN）及宫颈癌中端粒酶的表达及其意义，方法：采用TRAP法检测30例宫颈糜烂，16例CIN组织，20例宫颈癌及20例正常宫颈组织中端粒酶活性。结果：宫颈糜烂者端粒酶活性阳性率为3．0％（1／30），CIN端粒酶活性阳性率为56％（9／16），20例宫颈癌组织中端粒酶阳性表达率为805（16／20），正常宫颈组织中端粒酶表达阴性。恶性肿瘤与正常或良性病变组织中端粒酶活性差异有显著性（P＜0．05）。结论：端粒酶的活化在宫颈癌的发生过程中起重要作用，端粒酶活性检测可能成为宫颈癌及宫颈癌前病变早期诊断诊断和病情监测的指标。     

端粒酶hTRT在原发性肺癌中的表达

目的：探讨原发性肺癌组织中端粒酶反转录酶（hTRT)的表达和端粒酶活性的关系以及在肺癌分子生物学诊断的临床意义。方法：用免疫组化和TRAP法分别观察54例原发性肺癌和10例正常肺组织，比较分析它们的相关性；结果：hTRT阳性率83％（45／54）端粒酶活性阳性率85％（46／54），在肺癌组中3例术前化疗患者hTRT表达2例呈弱阳性1例阴性，肺癌淋巴结转移的hTRT阳性率达92％，5例小细胞肺癌hTRT均为阳性，10例正常肺组织均为阴性。结论：抗hTRT抗体在肺癌中具有癌细胞的特征性，并与端粒酶活性呈正相关，可作为肺癌诊断的灵敏性和特异性的指标，用免疫组化法比TRAP法检测肺癌中端粒酶的活性将更为简便易行。     

胃癌端粒酶活性与DNA倍体的关系及临床意义

目的：探讨胃癌组织中端粒酶活性与DNA倍体的关系及临床意义。方法：用端粒酶重复序列扩增法（TRAP）检测胃癌组织中的端粒酶活性,用DNA图像分析仪（ICM）检测肿瘤细胞核DNA倍体。结果：胃癌组织中端粒酶的阳性表达率为81．25％,早期胃癌病例的阳性率为55．5％,进展期胃癌的阳性率87．2％。48例中异倍体肿瘤33例,占68．7％。33例异倍体胃癌中91％（30／33）显示端粒酶活性。结论：胃癌组织中端粒酶活性与DNA异倍体率有明显的相关性,端粒酶的表达与胃癌的病程进展有关。     

前列腺衰老逃逸现象的实验研究

目的：了解良性前列腺增生腺体中不同组织的端粒酶阳性细胞分布情况，从端粒酶角度研究前列腺增生的机制。方法：采用TRAPHyb Kit测定端粒酶活性。实验分两步。第一步，测定正常前列腺与良性增生腺体的端粒酶阳性率。第二步，测定前列腺增生腺体中增生结节和包膜的端粒酶活性。结果：13例正常前列腺端粒酶阳性率为15．38％（2／13），35例前列腺增生组织端粒酶阳性率为25．71％（9／35）。增生结节、包膜各33管中端粒酶阳性率分别为42．42％（14／33）和3．03％（1／33）；前列腺增生组织中端粒酶阳性表达率显著高于正常前列腺组织，P〈0．01，增生结节阳性率高于包膜组织，P〈0．05。结论：前列腺增生组织中端粒酶活性升高，前列腺增生组织中端粒酶分布不均匀，增生结节含端粒酶阳性细胞高于包膜组织。提示前列腺的衰老逃逸可能与端粒酶活性有关。     

食管拉网细胞端粒酶活性检测及临床应用研究

目的：检测食管拉网细胞中端粒酶活性，探讨其在食管癌诊断及预测预后的临床应用价值。方法：应用端粒重复序列扩增法，对３０例食管拉网细胞标本及相应的癌组织和癌旁正常食管组织进行检测。结果：３０例食管拉网标本中端粒酶活性阳性率为８３．３％（２５／３０），相应癌组织中阳性率为９６．７％（２９／３０），１４例正常食管组织中阳性率为１４．３％（２／１４）。拉网细胞和癌组织中端粒酶阳性率与正常组织相比较差异有显著     

胆管癌组织及胆汁中端粒酶活性的检测及意义

目的：检测胆管癌组织和胆汁中的端粒酶活性，以研究与端粒酶与胆管癌的关系及对胆管癌的诊断意义。方法：用PCR—ELISA方法检测20例胆管癌的癌组织和胆汁中端粒酶活性，同时用相同的方法检测20例正常胆管组织和胆汁中的端粒酶活性以作对照。结果：20例胆管癌组织中，端粒酶活性阳性为80％（16／20），胆汁中端粒酶活性阳性率75％（15／20）。正常胆管组织端粒酶活性阳性表达率为0（0／20），胆汁中端粒酶活性阳性率为0（0／20）。结论：端粒酶可能参与了胆管癌的发生发展过程，检测胆汁中端粒酶活性可有助于胆管癌的诊断。     

胃癌发生过程中端粒酶活性测定及临床意义

目的：通过检测胃癌及癌前病变组织中端粒酶活性，探讨其在胃癌发生发展中的作用及临床意义。方法：采用SP免疫组化法检测40例胃癌和18例癌前病变（其中慢性萎缩性胃炎伴肠化生10例，非典型增生8例）端粒酶活性。结果：胃癌及癌前病变中端粒酶阳性率分别为92．5％（37／40）和33．3％（6／18），两者比较差异有统计学意义，P〈0．05。端粒酶激活与胃癌的分化程度、病理分期和淋巴结转移无明显相关性，P〉0．05。结论：端粒酶活性表达与胃癌的发生密切相关，利用免疫组化检测端粒酶活性可作为胃癌早期诊断的参考指标，并应对阳性病例进行跟踪随访。     

食管拉网细胞端粒酶活性检测及临床应用研究

目的 :检测食管拉网细胞中端粒酶活性 ,探讨其在食管癌诊断及预测预后的临床应用价值。方法 :应用端粒重复序列扩增法 ,对 30例食管拉网细胞标本及相应的癌组织和癌旁正常食管组织进行检测。结果 :30例食管拉网标本中端粒酶活性阳性率为 83.3% ( 2 5/ 30 ) ,相应癌组织中阳性率为 96 7%( 2 9/ 30 ) ,14例正常食管组织中阳性率为 14.3% ( 2 / 14)。拉网细胞和癌组织中端粒酶阳性率与正常组织相比较差异有显著性 (P <0 .0 0 5) ;食管拉网细胞端粒酶活性阳性率高于拉网细胞学癌细胞检出率( 73.3% ) ,但差异无显著性 (P >0 .0 5) ;端粒酶活性与食管癌临床病理因素无关。结论 :食管拉网细胞端粒酶活性检测结合细胞学检查将有助于食管癌的早期诊断     

端粒酶基因hTRT在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌中端粒酶基因hTRT mRNA表达与临床参数的关系，评价hTRT表达检测在胃癌诊断中的价值。方法 用原位杂交的方法检测端粒酶基因hTRT mRNA在胃癌、癌旁组织和胃良性病变中的表达和分布情况。结果 57例胃癌中hTRT基因表达阳性率为94.7%(54/57)；57例癌旁组织中hTRT基因表达阳性率为05（0／57）；69例胃良性病变中hTRT基因表达阳性率为2.9%(2/69)。胃癌组织中hTRT基因的表达与癌旁组织、胃良性病变比较差异有显著性（P均＜0.001)。胃癌组织中hTRT的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关（P均＜0.05)，但与肿瘤分期无相关性（P＞0.05)。hTRT表达的阳性分级与淋巴结转移相关（P＜0.01)。但与胃癌分化程度和分期无相关性（P均＞0.05)。结论 端粒酶基因hTRT表达检测在胃癌诊断中可能有一定的价值。     

非小细胞肺癌端粒酶活性与端粒酶RNA、端粒酶催化亚单位的相关性及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)端粒酶活性（telomerase activity,TA)、端粒酶RNA（telomerase RNA,hTR）端粒酶催化亚单位（telomerase catalytic subunit,hTRT/hEST2)编码基因的表达,彼此间相关性及其预后意义。方法 TRAP－PCR（telomerase repeat amplification protocol PCR)检测TA,RT－PCR检测hTR,原位杂交检测hTRT/hEST2mRNA表达。结果 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2 mRNA阳性率分别为68．4％（26／38）、55．2％（32／58）和74．1％（43／58）,TA与hTRT/hEST2阳性相关（r=0.84,P=0.01),与hTR无相关性（r=0.16,P=0.23）。低分化以及有淋巴结或远处转移者TA及hTRT/hEST2阳性率增高;TA及hTRT/hEST2阳性组中位生存期（10．4个月,7．5个月）低于阴性组（13．5个月,14．7个月;P＝0．074,P＝0．01）,hTR阳性组中位生存期（12．9个月）略高于阴性组（11．5个月,P＝0．23）,仅hTRT/hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2表达高于癌旁正常组织;hTRT/hEST2够能反应TA活性,二者为NSCLC恶性表型增高的标志;hTRT/hEST2具有独立的预后意义。     

不同病变胃粘膜端粒酶活性及其亚单位的检测

目的：探讨端粒酶及其亚单位（ＴＰ１、ｈＴＲ、ｈＴＲＴ）在胃粘膜癌变过程中的作用。方法：端粒酶的检测采用端粒末端重复序列扩增技术（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ　ｒｅｐｅａｔ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｐｒｏｔｏｃｏｌ,ＴＲＡＰ）,端粒酶亚单位的检测采用ＲＴ－ＰＣＲ法。结果：端粒酶阳性检出率在慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌中分别为２４．６％（１４／５７）、３８．９％（７／１８）、３７．５％（３／８）及９２．３％（６０／６５）,正常胃粘膜未检测到端粒酶活性,与以上各病变组织有显著性差异（Ｐ＜０．０５～０．０１）,而慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生和异型增生组织中端粒酶阳性率亦明显低于胃癌组织（Ｐ＜０．０１）;端粒酶的表达与临床病理指标无相关性;ＲＴ－ＰＣＲ定性检测发现端粒酶亚单位ｈＴＲ和ＴＰ１在大多数胃粘膜中都有表达,而ｈＴＲＴ主要在胃癌及部分癌前组织中表达,且在胃癌中ｈＴＲＴ的表达与端粒酶活性之间具有明显的相关性（Ｐ＜０．０１）。结论：端粒酶不仅在胃癌组织中高表达,在部分癌前组织中也有表达。提示端粒酶在胃癌的发生过程中可能具有重要作用;端粒酶亚单位ｈＴＲＴ不仅可能作为胃癌的诊断指标,而且还可能作为胃癌基因治疗的靶     

胃癌细胞中端粒酶活性的表达研究

Objective To study the relationship between telomerase activity and biological behavior in human gastric cancer cells and appraise the clinical significance of detecting telomerase activity. Methods The telomerase activity in 47 gastric cancer tissue samples, their matched normal tissues, 7 gastric ulcer and 2 gastric cancer cell lines was detected using a PCR-based non-radioisotopic telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay. Results None of the 47 samples from normal gastric tissues expressed telomerase activity. The 41 of 47 cases of gastric cancer presented telomerase activity with an 87.2% positive rate (P<0.001). 2/2 gastric cancer cell lines and 0/7 gastric ulcer line were also positive for telomerase activity. The activity of telomerase was associated with the pathological differentiation of gastric cancer. Conclusion Telomerase activity may be related to the biological behavior of gastric cancer and can help in assessing the malignant potential of gastric cancer. Telomeras activity will be a good diagnostic marker for the detection of gastric cancer.     

端粒酶调控蛋白(hTRT)在膀胱癌组织表达情况研究

目的研究膀胱癌组织中端粒酶hTRT蛋白表达情况.方法应用免疫组化方法对52例膀胱癌组织和30例膀胱正常组织进行hTRT蛋白表达研究,其中30例膀胱癌组织和30例膀胱正常组织同时进行hTRT蛋白western blot检测.结果免疫组化检测显示49例膀胱癌组织的hTRT蛋白表达阳性(94%),对照组正常膀胱粘膜阳性表达的只有1例(3.4%).两者有明显差异(P<0.01),肿瘤分级与肿瘤组织hTRT蛋白表达情况无相关性.western blot检测结果中膀胱癌组织阳性表达为25例(83%),正常膀胱组织粘膜均为阴性结果.结论膀胱癌组织hTRT蛋白有明确的阳性表达,其表达情况与肿瘤的分级无相关性;而正常膀胱粘膜则无hTRT蛋白表达.膀胱癌组织的hTRT蛋白与端粒酶活性表达可能相关.     

端粒酶基因与凋亡相关基因在乳腺导管非典型增生中表达的相关性研究

背景与目的:近年研究表明端粒酶的激活及凋亡抑制基因的过度表达与多种肿瘤发生有关,本研究观察端粒酶基因(hTR,hTRT)、凋亡相关基因(p53,bcl-2)在乳腺导管非典型增生中的表达及相互关系,旨在探讨端粒酶活性及凋亡相关基因的变化在乳腺导管非典型增生上皮癌变过程中的作用和意义。方法:应用原位杂交方法检测端粒酶基因(hTR,hTRT)和凋亡相关基因(p53,bcl-2)mRNA在44例乳腺导管非典型增生组织中的表达,应用免疫组化方法检测p53蛋白在上述病例中的表达,并与6例良性乳腺增生及26例乳腺癌病例进行了比较。结果:端粒酶基因(hTR,hTRTmRNA)在乳腺导管重度非典型增生组织中表达增强(60.9%,52.1%),其表达与在轻、中度非典型增生(22.2%,11.1%;33.3%,25.0%),乳腺癌(88.5%,80.8%)组织中的表达差异显著(P<0.05)。p53mRNA在乳腺导管非典型增生组织中的表达随着异型性的增加而下降(轻度:55.6%;中度:41.7%;重度:26.1%),而p53蛋白则相应增加(轻度:11.1%;中度:25.0%;重度:34.8%)。bcl-2在乳腺导管非典型增生组织中呈中度表达,其中以在重度非典型增生组织中表达明显。结论:端粒酶基因(hTR,hTRT)的表达与乳腺非典型增生细胞的恶性转化密切相关,同时可检测到p53mRNA的表达缺失、p53蛋白突变及bcl-2mRNA的过表达,且表达水平与端     

端粒酶活性在胃癌及其他胃疾病中的检测及其临床意义

目的：研究端粒酶在胃癌及其它胃疾病中的表达情况,以评价其临床诊断意义。方法：采用ＴＲＡＰ法检测３２例胃癌,３５例胃炎,８例肠上皮化生,８例胃溃疡,２例正常胃粘膜端粒酶活性。结果：７２％（２３／３２）胃癌组织,７１％（２５／３５）胃炎组织端粒酶呈阳性。肠上皮化生端粒酶呈阳性率为５／８。８例胃溃疡皆为端粒酶阴性。结论：由于大多胃炎组织（７１％）端粒酶呈阳性,这将影响端粒酶在胃癌临床诊断中的应用。