显示小鼠肠肌间神经丛铺片的方法

1　材料和方法1.1　材料　健康成年雄性昆明小鼠 5只 ,体质量 2 0～ 30 g,ip肌松药后以颈椎脱臼法通过腹部正中切口暴露腹腔 ,暴露的消化道器官不断用温和的 0 .0 1mol· L- 1 PBS(p H7.0 )清洗保持湿度 .食管、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠取材后用含尼莫地平 (10 - 6mol· L- 1 )的 0 .0 1m ol· L- 1 PBS冲洗 ,以 40 g· L- 1 的多聚甲醛充盈到最大程度后将各肠段两端扎紧 ,立即用 40 g· L- 1多聚甲醛液灌注固定 ,再放置其中固定6～ 8h(4℃ ) ,再移入 30 0 g·L- 1蔗糖液中 4℃过夜 .1.2　方法　各肠段沿肠系膜纵行剪开以 0 …     

人肝癌裸鼠转移模型的建立

1　材料和方法1.1　材料　 BAL B/ C- nu/ nu裸鼠 ,由中国生物药品鉴定所提供 ,鼠龄为 3～ 5 wk,雌雄兼用 ,其实验和饲养均在 SPF条件下的超净层流架中进行 ,灭菌水和饲料供动物自由摄入 .肝癌转移细胞株 HCC- 972 4- P由本实验自己建立 ,按常规方法培养于 RPMI- 16 40培养液中 ,(血清浓度为 10 0 m L· L- 1 ,青霉素 80万 IU· L- 1 ,链霉素 10 0万 IU· L- 1 ) ,单层培养于37℃ CO2 ,恒温培养箱中 .1.2　方法　 1原位移植动物模型的建立 [2 ] :取对数生长期的 HCC- 972 4- P肝癌细胞 ,用 0 .2 g· L- 1 EDTA和 1.2 5 g·L-…     

胰蛋白酶预处理在人角质形成细胞传代培养中的应用

1　材料和方法1.1　材料　 1KC的培养 :无菌条件下手术取人包皮 ,尽量剪除皮下组织 ,置于 1.5 g· L- 1 Dispase液中 4℃ 18～ 2 4h.将真表皮分离 ,取表皮分别置于 2 .5 g· L- 1胰蛋白酶 0 .1g·L- 1二乙胺四乙酸二钠 (EDTA)及含 10 0 m L· L- 1血清的DMEM中吹打成单细胞悬液 ,离心 30 0 g· m in- 1 ,10 min,弃悬液 ,KC无血清培养基 (Gibco BRL )重悬细胞 ,调整细胞数至1× 10 3· L- 1 ,接种至 6孔培养板 ,2 4h后换液 .当细胞生长至 80 %～ 90 %汇合时 1∶ 2传代 .1.2　方法　 1分组 :KC传代时分为两组 ,预处理组 :细胞约80 %…     

GnRH类似物对大鼠胃酸分泌的影响

1　材料和方法1.1　材料　阿拉瑞林 (Gn RH- A)由上海丽珠东风生物技术有限公司出产 ;ABL - 5 0 0血气分析仪由丹麦雷度公司出产 ;雄性 SD大鼠 13只 ,体质量为 2 5 0～ 30 0 g.实验前禁食 2 4h,任其自由饮水 .实验时以戊巴比妥钠 (4 g· L- 1 )按 40 m g·kg- 1 ip麻醉 .1.2　方法　 1胃腔直接给药 :大鼠 7只 ,分为 2组 ,实验组 4只 ,对照组 3只 .麻醉后剖开腹腔 ,分别在幽门、贲门结扎 .实验组胃腔内注射 1.2 5 mg· L- 1阿拉瑞林 2 m L;对照组注射生理盐水 2 m L,将胃送回腹腔 ,45 min后对胃做一切口 ,取出胃液 ,用 ABL- 5 0 0血气…     

龙胆苦甙抗鼠肝损伤的作用

目的　研究中药秦艽 ( Gentiana macrophylla,Pall)提取物龙胆苦甙 ( gentiopicroside,GPS)对化学性及免疫性肝损伤的保护作用 .方法　采用 CCl4,TAA ( thioethanolamine) ,D-Gal急性肝损伤、CCl4慢性肝损伤及豚鼠同种免疫性肝损伤模型 .各模型设正常对照组、药物模型组、阳性对照组和 2或 3个给药组 .每组按下列要求分别造模 :用CCl4小鼠为 1 0 m L·L- 1的豆油液 ,2 0 m L·kg- 1 ,大鼠为 4 0 0m L· L- 1 的豆油液 ,3 m L· kg- 1 ;用 TAA小鼠为 50 mg·kg- 1 ;用 D-Gal大鼠为 1 60 m L· L- 1 水溶液 ,5m L· kg- 1 ;各组均采用 ip.以 GPS小鼠 1 50 ,75,3 7.5mg· kg- 1 ,大鼠1 2 0 ,60 ,3 0 mg·kg- 1 ,豚鼠 1 2 0 ,4 8mg· kg- 1 ,肌肉给药治疗 ,测定其血清中 ALT,AST变化 ,以及肝脏形态学改变 ,评价 GPS对各种肝损伤的治疗效果并初步探讨其作用机制 .结果　GPS可明显降低多种急性肝损伤和慢性肝损伤动物的血清转氨酶 .使肝组织的片状坏死、肿胀及脂肪变性 ,有不同程度的减轻 ,且可促进肝脏的蛋白质合成 .结论　 GPS对多种肝损伤有一定的保护作用     

人增生性瘢痕组织中微血管内皮细胞的分离、纯化和培养

目的　微血管内皮细胞 (MEC)增殖和血管发生存在于很多生理和病理过程中 ,为体外重建人增生性瘢痕组织微血管内皮细胞 (HSMEC)生长模型 .方法　正常人包皮和增生性瘢痕经 1.2 5 g· L- 1 dispase和 1.2 5 g· L- 1 胰蛋白酶依次消化 4℃ 2 4h后 ,机械挤压分离组织内 HSMEC和人真皮微血管内皮细胞 (HDMEC) ,经 5 0 0 0 U· L- 1 b FGF,2 0 0m L· L- 1胎牛血清的 DMEM内培养和 0 .1g· L- 1胰蛋白酶 ,0 .15 mmol· L- 1 EDTA的 TE分离、纯化 ,组织学 HE染色和 因子相关抗原免疫组化染色 ,观察 MEC的阳性细胞百分数 .结果　 MEC在含 b FGF培养基中增殖旺盛 ,少量混生的成纤维细胞经 TE分离 MEC而被基本遗弃 ,3代 MEC能获得 97.0 %～ 98.0 %的纯度 ,明显高于原代培养 (P<0 .0 1) ,HSMEC形态学与 HDMEC无明显差异 .结论　低浓度b FGF和 TE细胞分离液分别对 MEC的培养和纯化有可靠作用 ,HSMEC的培养成功为烧伤创面愈合和瘢痕增生机制的研究扩展了空间 .     

益阳液的壮阳作用

益阳液系吉林省医药情报所在国外应用有效后引进研制的一种中西药复方制剂,由冬虫夏草、菟丝子、甲基睾丸素等中西药组成。临床上用于治疗性功能低下及性功能障碍等疾病。本实验对该复方制剂进行了与治疗作用有关的主要药效学实验,研究该制剂对大鼠交配能力及肾阳虚雄性小鼠的作用。1材料与方法1.1药物:益阳液由吉林省医药情报所提供,由冬虫夏草、菟丝子、甲基睾丸素等中西药组成(冬虫夏草0.8%、菟丝子0.5%、甲基睾丸素1.3%),批号为950717;阳春玉液由沈阳抗生素药厂生产,批号940909;黄体酮注射液由东北制药六厂生产,批号881101;苯甲酸雌二醇…     

裸鼠移植性肝癌局部注射丝裂霉素与乙酸比较

1　材料和方法1.1　材料　人肝癌细胞 (HCC)由本校病理学教研室提供 ,实验动物 BAL B/ c nu/ nu裸鼠 12只 ,4～ 6 wk,体质量 (2 0± 2 )g,雌雄兼有 ,在 SPF条件下饲养 ,由本校实验动物中心提供 ,乙酸由西安精细化工厂提供 ,分析纯 ,丝裂霉素日本产 .HCC细胞在 37.0℃ ,5 0 m L· L- 1 CO2 的孵箱内培养 ,于含 10 0m L· L- 1 小牛血清的 RPMI16 40培养液中贴壁生长 .将含有HCC悬液 (密度为 1× 10 7· L- 1 ) 0 .1m L注入裸鼠右大腿背侧皮下 ,2 0 d后肿瘤平均为 1.6 3cm× 1.0 6 cm,形成皮下移植瘤模型 [1 ] .1.2　方法　将已接…     

电镜测定神经细胞钙离子分布

1　材料和方法1 .1　材料　选用健康成年 SD雌性大鼠 75只 ,随机分为正常组、对照组、实验组 .实验组动物放入次声压力仓内 ,采用次声测量系统施以 1 6 Hz,90 d B,1 30 d B的次声作用 1 ,7,1 4 ,2 1次 ,共 8组 ,次声作用均为每次 2 h,1次· d-1 .对照组动物放入次声压力仓内不施加次声作用 ,放置时间及次数和观察时间点同实验组 .1 .2　方法　各组分别于次声作用后 0 .5,1 2 h后以 2 0 g·L-1戊巴比妥钠 ip麻醉后 ,迅速取出下丘脑组织 ,切成 1 m3小块 ,置入 30 ml· L-1戊二醛 - 90 mml· L-1草酸钾溶液中固定 2 h.经 75g· L-1蔗糖 90 …     

运脾复方对幼龄大鼠厌食症模型胃肠激素的影响

目的　研究运脾复方对小儿厌食症动物模型胃肠激素的影响 ,探讨运脾复方治疗小儿厌食症的机制 .方法　模拟小儿厌食症的主要病因制作幼龄大鼠厌食模型 ,用运脾复方儿宝颗粒灌胃 ,用放免分析法测定模型下丘脑、胃窦部和外周血 CCK- 8和 β- EP的含量 .结果　模型动物下丘脑和血浆CCK- 8浓度 (12 3± 32 ) pmol· g- 1 和 (5 0 7± 113) ng· L- 1 ,高于对照组的 (89± 18) pmol· g- 1和 (2 5 4± 95 ) ng· L- 1 (P<0 .0 5 ) ;模型动物胃窦部和血浆β- EP浓度 (1.4± 0 .6 )μg· g- 1和 (6 .3± 1.7) ng· L- 1 ,低于对照组的 (6 .3± 1.4) μg· g- 1 和(10 .2± 4.9) ng· L- 1 (P<0 .0 5 ) .运脾复方治疗组 CCK- 8恢复正常 ,β- EP浓度显著增加 .结论　儿宝颗粒能明显抑制模型动物中枢和外周 CCK- 8分泌 ,促进 β- EP分泌 ,从而达到促进动物摄食的目的     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。