鱼肝油酸钠治疗肝癌的实验研究及其机制探讨--体外细胞培养及经皮瘤内注射实验

目的研究不饱和脂肪酸制剂--鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞的抗癌作用及其机制,并进一步探讨经皮瘤内注射该药物治疗肝癌的效果及其机制.方法(1)不同浓度鱼肝油酸钠处理Bel-7402人肝癌细胞,监测其对细胞的影像,并用病理染色及流式细胞仪等方法研究作用机制;(2)肝癌模型裸鼠随机分成两组,分别给予鱼肝油酸钠及生理盐水局部浸润注射治疗.治疗前后分别测肝、肾功能及白细胞计数.完成试验,对所有动物行解剖病理检查,明确有无内脏及淋巴结转移.结果(1)鱼肝油酸钠使肿瘤细胞活度明显下降,较对照组出现明显凋亡细胞;(2)治疗组肿瘤组织完全坏死、脱落,实验前后肝、肾功能及白细胞计数无变化.结论(1)鱼肝油酸钠对体外培养肝癌细胞具有显著的杀灭和抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一;(2)鱼肝油酸钠瘤内及瘤周局部注射后造成肿瘤血供障碍是重要作用机制.动物实验未发现骨髓抑制现象和肝肾功能损伤的毒副作用.     

超声引导瘤内注射亲细胞非均质分子脂质治疗肝癌新方法的临床应用

目的探讨超声引导下不饱和脂肪酸类药物--亲细胞非均质分子脂质(CHML)肝癌瘤内注射临床应用效果.方法总结经自动活检病理证实肝细胞肝癌15例注射CHML治疗后的临床疗效,观察治疗前后AFP、CDFI和CT局部肿瘤的改变,并计算半年生存率.结果15例肝细胞肝癌(22结节)用CHML瘤内注射后,瘤体体积均无增大或者明显减小,8例(8/9)AFP下降,7例行CT复查瘤体缩小,增强扫描无强化(7/7),9例注射CHML 2～3次后穿刺病理复查发现肿瘤细胞变性、坏死伴瘤周纤维组织增生,血管内血栓形成,但无血管扩张及增生.CHML注射治疗前后肝、肾、肺功能无明显改变(P＞0.05).结论CHML作为一种局部硬化剂具有明显的抗肿瘤作用,近期临床效果较好.其作用机制可能为造成肿瘤血管内血栓形成,导致肿瘤血供障碍,初步观察认为,CHML与无水乙醇混合应用效果可更佳.     

鱼肝油酸钠经皮瘤内注射治疗肝癌的实验研究及机制探讨

目的以肝细胞癌裸鼠动物模型为对象,研究鱼肝油酸钠经皮瘤内注射治疗肝癌的疗效及其机制.方法肝癌模型裸鼠28只,随机分成两组,分别给予鱼肝油酸钠及生理盐水局部浸润注射治疗.每隔2天局部注射1次,共3次.治疗前后分别测肝、肾功能及白细胞计数.第一次注射后两组各随机选取4只裸鼠,分别依次切取肿瘤组织进行病理组织学检查.完成实验,对所有动物行解剖病理检查,明确有无内脏及淋巴结转移情况.结果第一次注射后,治疗组病理切片报告较对照组有不同程度的血管内血栓形成.实验结束时,治疗组肿瘤全部坏死脱落,与对照组肿瘤体积比较有显著性差异(P＜0.001).治疗前后两组肝、肾功能检查及白细胞计数未见统计学差异(P＞0.05).结论鱼肝油酸钠瘤内注射治疗具有显著效果,肿瘤血供障碍是一重要作用机制.并且该药无明显肝、肾毒性.     

反义miR-21对荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤生长和凋亡的影响

目的 构建荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤模型,探讨干扰miR-21 表达对移植瘤生长、凋亡的影 响.方法 将人工合成的反义寡核苷酸ASODN(AS-miR-21)转染SiHa 细胞(抑制组),同时设阴性对照组和 空白对照组,对数生长期的SiHa 细胞分别接种于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长率.当肿瘤 体积达0.2 cm3 时采用AS-miR-21 多点瘤周注射,观察其对移植瘤的影响.应用免疫组化技术、荧光TUNEL 检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况.结果 (1)成功构建人宫颈鳞癌裸鼠皮下移植瘤模型,抑制组、阴性 对照组及空白对照组成瘤率分别为37.5%、75.0%、100.0%,瘤体平均体积为(732.80 ±56.32 ) mm3 、(1228.46 ±78.53)mm3 、(1301.26 ±80.63)mm3,平均生长率为18.32%、30.71%和32.53%,瘤重为(0.73 ± 0.05)g、(1.26 ±0.12)g 和(1.35 ±0.25)g,抑制组与阴性、空白对照组比较差异均有统计学意义(P <0.05); (2)免疫组化显示抑制组裸鼠瘤体Ki67 表达显著下降;荧光TUNEL 凋亡检测显示抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡 率明显增多;(3)注射治疗剂量AS-miR-21 两周后观察肿瘤组织局部坏死严重,胞核裂解、消失,凋亡明显增 加.结论 AS-miR-21 可下调裸鼠人宫颈鳞癌移植瘤中miR-21 的表达,抑制移植瘤生长和促进其凋亡.     

《临床技术操作规范——超声医学分册》出版

目的探讨超声引导下不饱和脂肪酸类药物--亲细胞非均质分子脂质(CHML)肝癌瘤内注射临床应用效果.方法总结经自动活检病理证实肝细胞肝癌15例注射CHML治疗后的临床疗效,观察治疗前后AFP、CDFI和CT局部肿瘤的改变,并计算半年生存率.结果15例肝细胞肝癌(22结节)用CHML瘤内注射后,瘤体体积均无增大或者明显减小,8例(8/9)AFP下降,7例行CT复查瘤体缩小,增强扫描无强化(7/7),9例注射CHML 2～3次后穿刺病理复查发现肿瘤细胞变性、坏死伴瘤周纤维组织增生,血管内血栓形成,但无血管扩张及增生.CHML注射治疗前后肝、肾、肺功能无明显改变(P＞0.05).结论CHML作为一种局部硬化剂具有明显的抗肿瘤作用,近期临床效果较好.其作用机制可能为造成肿瘤血管内血栓形成,导致肿瘤血供障碍,初步观察认为,CHML与无水乙醇混合应用效果可更佳.     

复方中药99-克星瘤内注射治疗裸鼠肝癌的实验研究

目的探讨超声引导瘤内注射复方中药99-克星(99-克星)治疗裸鼠肝癌的作用机制、抗癌效果及其对机体的影响.方法选取人肝癌SMMC-7721皮下移植的实验裸鼠及肝内原位移植的实验裸鼠模型各14只,随机分为3组,其中99-克星治疗组14只,无水乙醇与生理盐水治疗组各7只.全部裸鼠在接种10 d后每隔5 d向肿瘤内注入治疗药物共4次后处死,治疗前后分别采用高频超声测量肿瘤三径并计算肿瘤的生长指数.采用放射免疫法(RIA)测定治疗后荷瘤鼠血清白介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)对细胞凋亡现象进行原位观察并观察血清TNF-α水平与肝癌细胞凋亡的关系.治疗前后分别测血天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)及白细胞计数.实验完成后解剖取检28只实验裸鼠心、肝、肾、脾、肺、脑等器官行病理形态学观察.实验均在双盲条件下进行.结果治疗后克星组肿瘤生长指数(0.080±0.024)明显低于盐水组(4.842±1.293)(P＜0.01),并且低于乙醇组(0.083±0.026),但差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后克星组血清IL-2和TNF-α水平明显高于盐水组及乙醇组(P＜0.05);克星组凋亡指数(AI)高达(45.08±5.39)%,显著高于乙醇组(13.45±2.54)%和盐水组(12.38±3.91)%(P＜0.01);治疗前后ALT、AST、BUN及白细胞计数均无明显变化,3组间比较无统计学差异;血清TNF-α含量及肝癌细胞凋亡指数间呈正相关(r=0.494,P＜0.05);3组实验裸鼠心、肝、肾、脾、肺、脑等器官均无病理形态学异常改变.结论99-克星具有明显破坏和抑制肿瘤细胞生长的作用,而无抑制骨髓及损害肝肾功能等毒副作用,其作用机制不同于无水乙醇,主要通过提高血清细胞因子IL-2和TNF-α水平激发机体细胞免疫功能以及诱导癌细胞凋亡,从而达到抑制肿瘤生长的目的.     

hTERT反义寡核苷酸对HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对 HL-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用。方法用流式细胞术检测 hTERT ASODN 转染 HL-60细胞72 h 后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞 DNA 梯带;将转染及未转染寡核苷酸的 HL-60细胞分别接种BALB/c 裸鼠,观察成瘤情况,切片观察移植瘤组织形态;另取10只 BALB/c 裸鼠,改进成瘤方法使其均匀成瘤后分成两组,在瘤体局部分别注射 ASODN、磷酸盐缓冲液(PBS),经7d 治疗后测量瘤体并切片观察其细胞形态变化,采用 TUNEL 方法检测细胞凋亡。结果 hTERT ASODN 作用于 HL-60细胞72 h 后,流式细胞术检测出早期凋亡峰,琼脂糖凝胶电泳显示 DNA 梯形条带,SODN 组及空白对照组未检测出凋亡峰及 DNA 梯形条带 ASODN 转染的 HL-60细胞组 BALB/c 裸鼠接种后第16～17天成瘤,5只中2只成瘤,未转染组在第12～13天成瘤,5只中4只成瘤,成瘤后 ASODN 治疗组瘤组织间质及血管较少,PBS 治疗对照组瘤组织间质发达,血管丰富。成瘤后 ASODN 治疗前肿瘤体积为(100.9±24.6)mm~3,治疗后肿瘤与 PBS 对照组比较,生长明显减缓[瘤体积分别为(422.7±326.4)mm~3和(786.4±357.6)mm~3](P<0.05) 组织切片显示,ASODN 治疗组瘤组织中可见大量细胞呈现凋亡形态,PBS 治疗组则少见凋亡细胞 TUNEL 检测显示,ASODN 治疗组瘤组织中阳性细胞数较 PBS 治疗组明显增多(P<0.05)。结论 hTERT 基因 ASODN 能够诱导 HL-60细胞凋亡并降低其在 BALB/c 裸鼠体内的致瘤性,抑制移植瘤增长速度。     

低频超声辐照联合微泡抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的实验研究

目的 观察低频超声(20 kHz)辐照联合静脉注射微泡造影剂SonoVue对裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤的抑瘤效应,并探讨其可能的抑瘤机制.方法 通过细胞移植和瘤块移植方法建立24只裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤模型,随机分为超声微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组,每组6只.超声微泡组:尾静脉注射0.2 mL SonoVue的同时对瘤体行20 kHz超声辐照,辐照强度2 W/cm2,辐照2 min;单纯超声组:尾静脉持续缓慢推注生理盐水0.2 mL,同时超声辐照2 min;单纯微泡组:尾静脉持续缓慢推注SonoVue 0.2 mL同时行假照;对照组不做任何处理.各组均隔天治疗1次,共3次.治疗后测量瘤体大小,绘制瘤体生长曲线,计算抑瘤率.首次治疗后14 d剥离瘤体,通过光镜、电镜观察肿瘤组织病理改变.免疫组织化学法观察CD34阳性染色血管,计算肿瘤微血管密度(MVD),比较各组间MVD的差异.结果 24只裸鼠均成功植瘤.治疗后超声微泡组瘤体体积明显小于其他各组(P＜0.05),抑瘤率为62.70%.HE染色观察超声微泡组瘤体组织大部分损伤坏死,电镜下超声微泡组肿瘤内微血管的内皮细胞损伤,线粒体肿大,基底膜断裂.超声微泡组瘤体内CD34阳性染色微血管数减少,其MVD值显著低于其他各组(P＜0.05).结论 20 kHz低频超声辐照联合微泡造影剂SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生长,其抑瘤机制是超声空化效应破坏肿瘤的微血管.     

内皮抑素基因对ACHN RCC细胞增殖和凋亡的影响

目的利用已构建的带有内皮抑素基因真核表达载体质粒导入裸鼠ACHN肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）细胞中,研究内皮抑素基因对RCC细胞增殖和凋亡的影响。方法ACHN细胞浓度1×10^7个/L,经裸鼠右侧背部皮下注射0.2 ml,共注射24只裸鼠。荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只。治疗组：每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl（内含30μl梭华-SofastTM和30μg pSecES质粒）;对照组：每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl（内含30μl梭华-SofastTM和30μg pcDNA3.1质粒）;空白组：每只裸鼠瘤内3点注射生理盐水100μl。各组每只裸鼠间隔3 d注射1次,连续注射3次。以增殖细胞核抗原（PCNA）作为细胞增殖状态,按链霉亲和素生物素法（SABC）进行免疫组化染色。细胞凋亡检测用TUNEL法。结果内皮抑素真核表达质粒能显著抑制裸鼠ACHN RCC肿瘤体积增长,pSecES治疗组平均瘤重明显小于空白组和对照组（P〈0.01）,与空白组的肿瘤生长抑制率为34.48%,与对照组的肿瘤生长抑制率为40.68%。治疗组肿瘤细胞的凋亡指数（AI）明显高于对照组和空白组（P〈0.01）。pSecES治疗组肿瘤组织的AI/PI比值明显高于对照组和空白组（F=189.27,P〈0.05）。Spearman相关分析表明,肿瘤体积与细胞增殖之间无明显相关性（r=-0.041 2,P〉0.05）,肿瘤体积与细胞凋亡呈负相关（r=-0.734 6,P〈0.01）。结论内皮抑素基因治疗可使裸鼠ACHN RCC肿瘤细胞凋亡增加,肿瘤细胞的数量减少,在总体上表现为肿瘤的生长变慢、体积变小。     

替勃龙对去势裸鼠子宫内膜癌移植瘤的影响

目的 通过裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型的体内实验,探讨替勃龙应用于子宫内膜癌患者的安全性.方法 (1)体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞株;建立去势裸鼠子官内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘸动物实验模型;(2)将成瘤裸鼠随机分为替勃龙组(15只)和对照组(15只),分别予以替勃龙0.375mg·kg-1·d-1和对照治疗35 d;(3)比较给药前后两组肿瘤体积变化、肿瘤重量和肿瘤转移状况(体表、盆腹腔淋巴结、腹水);应用免疫组化SP法测定两组实验动物皮下移植瘤Ki67、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况,判断替勃龙对移植瘤的影响和对内膜癌细胞增殖及凋亡的影响.结果 (1)替勃龙组和对照组裸鼠两组子宫内膜癌皮下移植瘤体积变化无统计学差异[ (2.063±1.038) cm3饥 vs.(2.170±0.822) cm3,P=0.791];肿瘤重量无统计学差异[(0.699±2.02)gvs.(0.807±2.83)g,P =0.314];替勃龙治疗35 d后,没有引起子宫内膜癌肿瘤体表、盆腹腔转移和腹水发生;(2)替勃龙组和对照组两组裸鼠人子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤Ki67增殖指数、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况均无统计学差异.结论 替勃龙不刺激裸鼠子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤生长、转移和细胞增殖、凋亡.替勃龙应用于子宫内膜癌患者的术后激素补充治疗可具有一定的安全性.     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察

失眠症又称不寐，指入睡困难，或维持睡眠障碍（易醒、早醒和再入睡困难）导致睡眠时间减少或睡眠质量下降，不能满足身体生理需要，明显影响日间社会功能和生活质量。现将星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察总结如下。