大鼠运动性动情周期抑制时卵巢结构的研究

以动情周期正常的纯系ＳＤ雌性大鼠为对象进行大负荷游泳训练。当动情周期被抑制时，取双侧卵巢，用中性福尔马林固定，石蜡切片，ＨＥ染色。研究动情周期抑制后卵巢中卵泡的生长发育、排卵及黄体形成等变化。结果：动情周期抑制组大鼠卵巢中新鲜黄体占黄体总数的百分比明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）；而囊状卵泡占全体卵泡的百分比２组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，大负荷运动不影响卵泡的发育。但对卵泡的成熟与排卵则有较大影响。     

Ets-1转录因子在大鼠糖尿病肾病中的作用

目的观察转录因子Ets-1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(TIMP-2)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)在实验性糖尿病肾病(DN)进程中的表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分成对照组(NC组,n=30);糖尿病组(DM组,n=40),腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病动物模型。STZ注射后第1、4、8、12、16周分别处死各实验组动物6～8只,采用免疫组化观察各组大鼠肾内Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA及ColⅣ表达,并进行免疫双染共定位分析。结果免疫组化表明,同NC组相比,DM组Ets-1在肾小球、肾小管间质的表达于STZ注射后第1周明显增加(P<0.05),至第4、8周分别达到高峰(P<0.05),随后呈下降趋势,16周降至最低(P>0.05)。MMP-2在肾小球内的表达与Ets-1在肾小球内的表达相似;DM组TIMP-2在肾小球及肾小管间质的表达于STZ注射后第1周开始增加,第16周升至最高(P<0.01);肾小球内MMP-2/TIMP-2比率于STZ注射后第1周显著性升高(P<0.01),第4周起明显下降(P<0.01),第12、16周时甚至低于相同时间点NC组大鼠,有显著性统计学差异(均P<0.01),而肾小管间质内MMP-2/TIMP-2比率于STZ注射后第4周开始明显降低(P<0.05),并且随病程进展进一步下降;DM组ColⅣ在肾小球及肾小管间质内的沉积于STZ注射后第1周开始增加,第16周达高峰(P<0.05)。α-SMA在肾小球内及肾小管间质的表达于STZ注射后第1周开始增加,并且随病程进展逐渐增加,第16周升至最高(P<0.05)。相关分析表明,DM组肾小球及肾小管间质内Ets-1表达与MMP-2的表达呈显著正相关(r=0.856,P<0.01;r=0.642,P<0.01),而与MMP-2/TIMP-2比率呈负相关(r=-0.549,P<0.01;r=-0.580,P<0.01);MMP-2/TIMP-2比率与ColⅣ的表达呈显著负相关(r=-0.701,P<0.01;r=-0.626,P<0.01)。免疫双染显示,Ets-1阳性的肾小球固有细胞及肾小管间质细胞同时出现MMP-2阳性表达,TIMP-2染色阳性的肾小球固有细胞及肾小管间质细胞同时具有α-SMA阳性表达。结论 Ets-1转录因子可能通过调节MMP-2/TIMP-2系统平衡而影响细胞外基质(ECM)沉积,对DN基质重塑起关键性作用。     

转录调节因子Ets-1在食管鳞癌的表达及其意义

目的:探讨转录调节因子Ets-1在食管鳞癌组织的表达及其意义。方法:采用免疫组化技术(SP法)检测Ets-1在68例食管鳞癌组织及癌旁组织中的表达。结果:Ets-1在食管癌肿瘤组织高表达,远高于癌旁组织(P<0.005);Ets-1在肿瘤组织阳性表达率在不同病理分级、TNM分期各组中,差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01),而且Ets-1阳性表达率与病理分级、淋巴结转移和TNM分期均呈正相关关系(P<0.05~P<0.01)。未发现Ets-1在食管癌肿瘤组织的阳性表达率与病理类型有关(P>0.05)。结论:Ets-1在食管癌组织高表达,并与病理学分级、淋巴结转移及TNM分期有关。     

人结直肠癌组织中转录调节因子Ets-1蛋白的表达

目的:检测结直肠癌组织中转录调节因子Ets-1蛋白的表达,以探讨其与结直肠癌浸润、转移等的关系.方法:取结直肠癌(男22例,女18例;腺癌29例,黏液腺癌11例;高分化15例,中低分化25例;浸润深度:深层28例,浅层12例;淋巴结转移:有16例,无24例)及其相应正常组织标本各40例,采用免疫组织化学SP法检测Ets-1蛋白的表达.结果:结直肠癌组织中Ets-1蛋白的阳性表达率高于正常组织(P＜0.05).结直肠癌组织中Ets-1蛋白阳性表达率与浸润深度有关(P＜0.05),与肿瘤的分化程度和有无淋巴结转移无关(P均＞0.05).结论:Ets-1蛋白的高表达可能与结直肠癌的发生及浸润转移有关.     

VEGF、VEGFR2(KDR)、MMP-1以及转录调节因子Ets-1在子宫颈癌组织中的表达及其意义

目的 从分子水平观察肿瘤血管生成因子VEGF、VEGF受体KDR、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其转录调节因子Ets-1(E26 tranformation-specific-1,Ets-1)在子宫颈癌中的表达并揭示其因子间相互关系,为判断患者预后和解释促血管生成因子间内在规律提供根据。方法 利用原位杂交和免疫组织化学染色法检测87例子宫颈癌组织中VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-l等因子mRNA和蛋白表达规律;患者生存曲线比较在阴性组和阳性组间进行;因子间分析利用Pearson相关分析法。结果 VEGF mRNA和蛋白主要分布在癌细胞胞质中,阳性率分别为78．6％(68／87)和70．4％(61／87);KDR mRNA和蛋白主要在内皮细胞上表达,其表达率与VEGF表达率间存在密切的相关关系,r=0．892;MMP-1在肿瘤细胞和间质血管内皮细胞中表达,尤其在血管新生处表达明显;Em-1主要分布在内皮细胞和肿瘤细胞中,其表达率与KDR和IVl／vtP-1表达率间的相关系数(r)分别为0．900和0．873;上述四因子表达与肿瘤分化度、淋巴结转移及5年存活率均有密切的相关性。结论 VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1是参与子宫颈癌血管生成的重要因子,且彼此间存在密切的相关性,检测其表达规律可为判断子宫颈癌生物学行为和解释促血管生成因子间内在联系提供理论根据。     

Ets-1在淋巴瘤病理组织中的表达及其意义

目的探讨淋巴瘤（lymphoma）患者病理组织中Ets-1的表达,探讨其与临床及预后的关系。方法采用免疫组织化学S-P法,检测了60例淋巴瘤、15例良性增生性淋巴结炎中Ets-1的表达。结果Ets-1蛋白在淋巴瘤和良性增生性淋巴结炎中表达于胞核,少见于胞浆。Ets-1在淋巴瘤中的阳性率为48.3%,高于良性增生性淋巴结炎的13.3%（P〈0.05）。Ⅲ、Ⅳ期淋巴瘤患者的Ets-1蛋白的表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0.05）;男性组Ets-1表达阳性率为35.9%,明显低于女性组的71.4%（P〈0.001）;淋巴结内组Ets-1表达阳性率为70.0%,明显高于淋巴结外病变组的26.7%（P〈0.001）;Ets-1表达与年龄、组织学类型、生物学行为均无关（P〉0.05）。结论①Ets-1在淋巴瘤病理组织中表达上调,提示Ets-1可能在淋巴瘤的发生、发展中起重要作用,提示它们可能成为淋巴瘤治疗的新靶点。②Ets-1在淋巴瘤病理组织中表达上调均与Ann Arbor临床分期有关,可能是预测淋巴瘤侵袭转移和预后的相关因素。③Ets-1的表达与年龄、组织学类型、生物学行为均无关。     

间歇饥饿对大鼠动情周期及卵巢代偿性肥大的影响

应用一种饥饿与复食相交替的间歇饥饿法,观察慢性饥饿对垂体性腺轴的影响。在间歇饥饿期间,大鼠的动情周期几乎完全停止,切除一侧卵巢也不能引起对侧卵巢的代偿性肥大,表明在间歇饥饿时性激素对垂体促性腺激素分泌的负反馈作用增强,而正反馈作用减弱或消失。     

转录因子Ets-1在2型糖尿病肾病中的表达及其意义

目的:观察转录因子Ets-1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(TIMP-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)在2型糖尿病肾病(DN)中的表达及探讨其意义。方法:糖尿病肾病组25例;轻微病变性肾病(MCD)20例设为对照组。采用免疫组织化学染色,观察各实验组肾组织内Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA、vimentin及ColⅣ的表达,并行免疫双染共定位分析。结果:25例DN患者中,男15例,女10例;年龄35～67岁。对照组20例MCD患者中,男12例,女8例;年龄18～46岁。与对照组相比,DN组肾小球内Ets-1表达显著性增加(P<0.05),肾小管间质纤维化区域内Ets-1表达亦明显增加(P<0.05);DN组MMP-2在肾小球及肾小管间质内的表达显著性增加(P<0.05);TIMP-2在肾小球及肾小管间质内的表达也明显增加(P<0.05),肾小球及肾小管间质内MMP-2/TIMP-2比值却显著性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,DN组肾小球内α-SMA、vimentin及ColⅣ表达明显增加(P<0.05),肾小管间质内α-SMA及ColⅣ表达亦明显增加(P<0.05),vimentin在肾小管间质内表达则显著性增加(P<0.01)。免疫双染显示,2型DN肾组织内大多数Ets-1阳性细胞同时出现MMP-2阳性表达,而α-SMA阳性细胞同时具有ColⅣ阳性表达。结论:Ets-1转录因子可能通过调节MMP-2/TIMP-2系统平衡,影响ECM沉积,在2型DN基质重塑过程中起关键性作用。     

Ets-1和Hif-1α在喉癌组织中的表达及其意义

目的 研究转录调节因子-1(E26 transformation specific-1,Ets-1)蛋白和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,Hif-1α)蛋白在喉癌组织中的表达,探讨两者在喉癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组化法(SP法)检测34例喉癌组织、癌旁组织及15例声带息肉组织中Ets-1、Hif-1α的表达情况.结果 (1)Ets-1、Hif-1α蛋白在喉癌组织中的表达量和阳性表达率明显高于癌旁组织和息肉组织(P<0.01);癌旁组织和息肉组织间的表达差异无统计学意义(P>0.05);(2)Ets-1、Hif-1α的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、临床分型无关(P>0.05),与病理分级、临床分期与淋巴结转移有关(P<0.05);(3)在喉癌组织中Ets-1和Hif-1α的表达有相关性(r=0.595 3,P<0.001).结论 Ets-1、Hif-1α的过表达在喉癌的发生、发展和转移中有重要作用,两者间还发挥协同作用,可作为喉癌基因诊断和治疗的新靶点.     

转录因子Ets-1表达载体的构建及调控小鼠成釉细胞MMP-20的表达

目的 构建转录因子Ets-1的pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体,转染小鼠成釉细胞,检测Ets-1调控小鼠成釉细胞MMP-20的表达,为研究Ets-1在牙釉质发育过程中的重要作用奠定基础.方法 以从小鼠成釉细胞中提取的总RNA逆转录所得cDNA为模板,用RT-PCR法扩增得出含有kpn Ⅰ和BamH Ⅰ的Els-1目的 基因连接到pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体上.将重组质粒瞬时转染到小鼠成釉细胞中观察,并通过实时定量RT-PCR的方法检测MMP-20 mRNA的相对表达量.结果 ①经过PCR引物扩增得到一约1399bp的基因片段,重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-1双酶切进行初步鉴定后,与GenBank登录基因对比显示生物公司测序结果完全正确.②重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-1转染小鼠成釉细胞后(以转染空载体pcDNA3.1/myc-HisA作为对照),实时定量RT-PCR检测MMP-20 mRNA的相对表达量上升明显.结论 成功构建了Ets-1的真核表达载体,初步研究证明小鼠成釉细胞核中Ets-1可以上调MMP-20基因表达水平.     

Ets-1在大鼠顺铂相关性肾病基质重塑中的作用

目的 观察Ets-1、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-1组织抑制剂(TIMP-1)和胶原Ⅲ在实验性顺铂相关性肾病中的表达,并探讨其意义.方法 6周雄性Wistar大鼠被随机分成两组:顺铂组(n=20).顺铂6 mg·kg-1腹腔内单次注射;对照组(n=12),同等剂量生理盐水注射.注射后1、3、7、14 d处死各组动物,每次顺铂组5只,对照组3只.结果 顺铂组在顺铂注射后第3、7、14天出现肾功能不全,在第3、7天肾小管上皮细胞出现变性、坏死、凋亡及间质内炎症细胞浸润,第14天可见明显肾间质纤维化形成.与对照组比较,Ets-1在肾小管间质内的表达在顺铂注射后第3天明显增加(P<0.05),第7、14天则明显减少(P<0.01);MMP-1表达呈现相似形式,顺铂注射后第3日明显增加(P<0.01);而TIMP-1表达在顺铂处理后第1、3天无明显变化,第7、14天则明显增加(P<0.01);MMP-1/TIMP-1在顺铂注射后第1天即明显升高(P<0.01),第3天升高更为明显(P<0.001),第7、14天则明显下降,与顺铂注射后第3天相比,差异有统计学意义(P<0.001);胶原Ⅲ沉积在顺铂处理后第7、14天则逐渐增加(P<0.05,P<0.01).统计学分析显示,肾小管间质内Ets-1表达同MMP-1的表达呈正相关(r=0.78,P<0.01),同TIMP-1的表达呈负相关(r=-0.639,P<0.01),而同MMP-1/TIMP-1呈正相关(r=0.925,P<0.001).肾小管间质内Ets-1表达与胶原Ⅲ的表达呈负相关(r=0.599,P<0.01);MMP-1/TIMP-1与胶原Ⅲ的表达呈负相关(r=-0.631,P<0.01).免疫双染结果表明,Ets-1阳性肾小管上皮细胞同时具有MMP-1阳性表达;肾小管上皮细胞TIMP-1表达增加处肾间质区域内同时存在胶原Ⅲ大量沉积.结论 Ets-1转录因子可能通过调节MMP-1与TIMP-1酶系统的平衡,对胶原蛋白在肾间质内沉积产生影响,在顺铂相关性肾病基质重塑过程中起关键性作用.     

Ets-1和MMP-9在淋巴瘤病理组织中的表达及其意义

目的探讨淋巴瘤（1ymphoma）患者病理组织中Ets-1和MMP-9蛋白的表达,并分析其相互关系与临床及预后的意义。方法采用免疫组织化学S-P法,检测了60例淋巴瘤和15例良性增生性淋巴结炎中Ets—l、MMP-9的蛋白表达。结果①Ets-1、MMP-9在淋巴瘤中的表达高于良性增生性淋巴结炎（P〈0．05）;Ⅲ、Ⅳ期淋巴瘤患者的Ets—1、MMP-9蛋白阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）;淋巴结内组Ets-1表达阳性率高于淋巴结外病变组（P〈0．001）。②淋巴瘤病理组织中Ets-1表达率与MMP-9表达率间存在相关性。结论Ets-1、MMP-9蛋白在淋巴瘤病理组织中表达上调,可能是预测淋巴瘤侵袭转移和预后的相关因素。     

Ets-1,MMP-9,VEGF在胃癌组织中的表达及意义

目的 观察胃癌组织中转录因子Ets-1、基质金属蛋白9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达,并探讨其与临床病理因素的关系及意义.方法 采用免疫组化法检测52例胃癌组织中Ets-1,MMP-9和VEGF的表达.结果 52例胃癌组织中,Ets-1,MMP-9和VEGF表达的阳性率分别为73.1％,69.2％,65.4％;Ets-1,MMP-9和VEGF在胃癌中的表达高于癌旁组织（P值均＜0.05）,并且与浸润深度、淋巴结转移及临床分期相关（P值均＜0.05）;胃癌组织中Ets-1与MMP-9,VEGF表达呈正相关（r=0.438,0.390,P值均＜0.05）.结论 Ets-1,MMP-9和VEGF在胃癌组织中的表达差异具有显著性,并且与胃癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关,三者协同促进胃癌的发生及发展.     

β3乙酰氨基葡萄糖基转移酶8(β3GnT8/β3Ga1T7)与转录因子Ets-1相关性的探索性研究

目的 初步探索β3GnT8的表达是否受到转录因子Ets-1的调控.方法 通过反义核苷酸技术使Ets-1在7种不同细胞株内的表达沉默,分别用RT-PCR和Western bot检测转染Ets-1反义核苷酸前后β3GnT8在mRNA和蛋白水平的表达变化.结果 转染Ets-1反义核苷酸后,发现Ets-1的mRNA表达明显受抑制,而β3-GnT8的表达也随之下降,结论 初步认为β3GnT8的表达与转录因子Ets-1具有一定的相关性.     

大肠癌Ets-1基因mRNA定量表达研究

目的：探讨原癌基因Ets-1的表达与大肠癌生物学行为的关系。方法：应用实时荧光定量PCR技术分别检测30例大肠癌组织及切端组织中Ets-1 mRNA转录水平。结果：全部大肠癌组织中可见Ets-1的阳性表达。大肠癌组织Ets-1 mRNA转录水平明显高于切端组织（P〈0．05）。Ets-1的表达与大肠癌的淋巴结转移、浸润深度和Dukes分期明显相关，差异具有显著性（P〈0．05）。而与大肠癌的病理组织学类型和分化程度无关，差异无显著性（P〉0．05）。结论：Ets-1在大肠癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。检测Ets-1的表达可作为判断大肠癌浸润、转移的良好参考指标。并可为将来大肠癌的诊断、分期和治疗开辟一个新的方向。