灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞的细胞毒性中的相互作用

目的:灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分.本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用.方法:应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株.检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用,并用Chou and Talalay合用指数法判断合用的相互作用类型.结果:灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用.灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度,即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用,而当两种药物的作用相似时表现为协同作用.结论:灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用.     

黄芩素对人肺癌细胞A549耐顺铂株顺铂细胞毒性及Akt/NF-kB信号通路关系分析

目的:分析黄芩素对人肺癌细胞A549耐顺铂株(A549/CDDP细胞株)顺铂细胞毒性的关系,并探讨其作用机制。方法:选取人肺癌细胞A549细胞株和A549/CDDP细胞株,比较黄芩素联合顺铂组与单独顺铂组对A549/CDDP细胞株细胞存活率的影响;分别比较有无黄芩素作用下,A549/CDDP细胞株EMT相关指标差异;分析黄芩素逆转A549/CDDP细胞株EMT与Akt及NF-kb信号通路关系。结果:黄芩素与顺铂合用组A549/CDDP细胞株细胞存活率显著低于单独顺铂组细胞存活率,差异有统计学意义(P0.05);A549/CDDP细胞株发生细胞侵袭(206.3±43.1)个、转移(395.4±62.8)个,A549细胞株发生细胞侵袭(51.2±10.4)个,转移(104.3±21.2)个,两组相比,A549/CDDP细胞株细胞侵袭转移能力显著高于A549细胞株,差异有统计学意义(P0.05),发生了EMT;黄芩素作用于A549/CDDP细胞株,EMT发生逆转,p-Akt、Akt水平显著降低,且降低程度与黄芩素浓度呈正相关,差异有统计学意义(P0.05);黄芩素作用于A549/CDDP细胞株,NF-k B信号通路活性降低,且降低程度与黄芩素浓度呈正相关。结论:黄芩素能够增强人肺癌细胞A549/CDDP细胞株顺铂细胞的毒性,其机制可能是阻断细胞内Akt/NF-k B信号通路,从而抑制EMT的发生。     

灵芝注射液预防顺铂肾毒性的实验研究

灵芝是传统的扶正固本、延年益寿药物；灵芝注射液是人工栽培灵芝的乙醇提取液，内含较多的灵芝多糖、灵芝苷和嘌呤碱；顺铂为铂类抗肿瘤药物，临床常用，但由于其对肾脏的严重毒性作用，限制了顺铂的广泛应用。实验证明，顺铂与灵芝注射液合用后，大鼠尿蛋白减少，ＢＵＮ、ＳＣｒ正常，表明灵芝注射液能预防顺铂的肾毒性     

南蛇藤多萜对4种化疗药物增效作用的实验研究

目的:探讨南蛇藤活性组分南蛇藤多萜(TTC)与4种一线化疗药物的联用效果,为南蛇藤作为潜在化疗增敏剂的进一步开发利用提供科学依据。方法:采用MTT法测定TTC分别与氟尿嘧啶、吉西他滨、奥沙利铂、紫杉醇4种常用一线化疗药物联用对A549、H1299非小细胞肺癌细胞株增殖的抑制效果,采用Combenefit定量药理学软件的Loewe相加模型评价TTC与化疗药物间的潜在相互作用。结果:TTC普遍在亚半数抑制浓度sub-IC50(25～50μg/m L)下与4种化疗药物产生协同作用,在A549细胞中TTC与紫杉醇的协同抗肿瘤活性最强,而在H1299细胞中TTC与吉西他滨的协同抗肿瘤活性最强。结论:南蛇藤多萜与化疗药物联用体外能够增强化疗药物的抗肿瘤效应,从而有望被进一步开发利用成为肿瘤化疗增敏剂。     

四君子汤联合普鲁卡因、顺铂对肺癌A549模型小鼠的影响

目的：研究四君子汤、普鲁卡因对肺癌A549模型小鼠的影响，并观察与顺铂联合后的协同作用，为四君子汤、普鲁卡因在肺癌临床治疗中的应用以及对化疗药物顺铂增效减毒作用提供实验数据支持。方法：应用四君子汤、普鲁卡因单独作用及联合化疗药物顺铂协同作用于非小细胞肺癌A549模型小鼠，分为模型组、顺铂组、四君子汤组、普鲁卡因组、普+四组、普+顺组、四+顺组和三药组。计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数；HE染色观察小鼠脾脏组织；免疫组化法观察凋亡相关蛋白在脾脏中的表达；Western blot观察凋亡相关蛋白在瘤体中的表达。结果：与模型组比较，联合用药组肺癌小鼠的体质量有所增加，肿瘤重量减轻，三药组肿瘤重量最轻；分子生物学研究结果显示，四君子汤、普鲁卡因可诱导肿瘤细胞发生凋亡，三药组最为显著；联合用药组的脾指数、胸腺指数明显高于顺铂组；脾脏病理结果显示，三药组的情况比顺铂明显改善；免疫组化结果表明，三药组Bax表达较顺铂组降低，四君子汤组Bcl-2表达较顺铂组升高。结论：四君子汤、普鲁卡因与顺铂化疗对A549模型小鼠的瘤体有抑制作用，且联合用药具有协同作用；四君子汤对顺铂化疗A549模型小鼠的免疫系统有一...     

威麦宁体外杭肿瘤作用的实验研究浅探

目的:探讨威麦宁对人肺癌等6种不同肿瘤细胞株的体外抑制增殖作用及与化疗药物(顺铂)合用后的增效作用,并探讨其抗肺癌作用机制.方法:MTT法检测威麦宁单独及与顺铂(DDP)合用对不同肿瘤细胞体外增殖的影响;流式细胞术检测威麦宁对肺癌细胞株(PG、PAa)细胞周期的影响.结果:威麦宁对肺癌细胞株PG、PAa、A549、肝癌细胞株BEL-7402、胃癌细胞株MGC-803及黑色素瘤细胞株B16-BL6等均有不同程度的抑制作用(P＜0.01,0.001);并可明显加强化疗药物顺铂(DDP)抑制肿瘤细胞体外增殖作用(P＜0.001);可将PG、PAa细胞周期阻滞在S期.     

固本抑瘤Ⅱ号及其拆方对A549抑瘤及与化疗联合用药的实验研究

目的：探讨益气活血中药固本抑瘤Ⅱ号（全方）和各拆方组药物对A549肺癌细胞生长的影响及与化疗药物顺铂（DDP）联合应用的效果。方法：固本抑瘤Ⅱ号全方和根据功效拆分的益气组、行气活血组、培补肝肾组、散结消瘢组药物，分别制备水提物。采用MTT法检测各组药物对A549细胞生长的影响及与DDP联合作用的效果。结果：单独应用全方和行气活血组水提物对A549细胞生长表现为抑制作用，IC50分别为33．21mg生药／mL和9．55mg生药／mL；与DDP合用表现为增效作用，增效倍数分别为1．23和1．77，合并指数为1．05和0．83，表现出协同和相加作用。结论：固本抑瘤Ⅱ号在体外实验中能够抑制A549细胞生长，与DDP合用有一定的化疗增效作用；行气活血组药物也具有抑瘤和增效作用，且作用与全方接近。提示行气活血组中药为体外实验中全方抗肿瘤作用及化疗增效作用的有效组分。     

化疗药物顺铂和阿霉素联合应用体外研究

目的:定量分析抗肿瘤药物顺铂和阿霉素联合应用的协同、相加或拮抗作用,筛选顺铂和阿霉素联合应用的最佳配比。方法:不同配比的化疗药物顺铂和阿霉素处理HepG2细胞24h,MTT法测定HepG2细胞的增殖抑制作用,Cbou-Talalay法计算药物的联合指数和两种药物对HepG2细胞的敏感性,分析药物不同配比的相互作用,筛选顺铂和阿霉素联合应用的最佳配比。结果:顺铂、阿霉素单独和联合应用对HepG2细胞的抑制率呈剂量依赖性量效关系;两种药物以小差别比例配伍时,小剂量联合应用呈现拮抗作用,大剂量联合应用呈协同作用;两种药物以大差别比例配伍时,联合效应结果相反;综合药物联合指数和两种药物对HepG2细胞的敏感性,优选出顺铂和阿霉素联合应用的最佳配比为1∶15。结论:化疗药物顺铂和阿霉素不同配比联合应用均可产生增强互补、减毒增效的作用。     

薏苡仁注射液(康莱特)联合顺铂对人肺腺癌细胞A549抑制作用及机制

目的:探讨薏苡仁注射液(康莱特)联合化疗药物顺铂(CDDP)对人肺腺癌细胞A549抑制作用的机制.方法:体外培养人肺腺癌细胞系A549并以康莱特、顺铂进行处理,SRB法检测药物对各组细胞的抑制率;逆转录-聚合酶链反应法检测多药耐药因子MDR1、Bcl-2和Bax mRNA在各组中表达情况;Western blot法检测P-gp、Bcl-2、Bax蛋白水平表达;同时检测康莱特对正常细胞的作用.将各组结果进行比较.结果:康莱特组A549细胞存活率较对照组明显降低,康莱特联合顺铂导致细胞存活率进一步下降(均P<0.05),而康莱特对正常细胞无明显抑制作用(P>0.05);康莱特导致A549细胞MDR1和Bcl-2 mRNA水平、蛋白水平均较空白对照组降低(均P<0.05),而Bax mRNA和蛋白水平则升高(均P<0.05);康莱特与顺铂联合作用于A549细胞时这一变化更为显著(均P<0.01);康莱特对正常细胞系的耐药因子则无明显作用(均P>0.05).结论:康莱特可抑制肺腺癌细胞生长,该药具有明显的逆转肺腺癌多药耐药性的作用,与化疗药物联合使用可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.     

人肺腺癌A549干细胞的分离鉴定及益肺解毒方对其化疗耐药机制的调节

目的:研究无血清悬浮培养法分离人肺腺癌A549干细胞以及益肺解毒方对人肺腺癌A549干细胞化疗耐药机制的调控。方法:无血清悬浮培养法分离人肺腺癌A549干细胞;CCK8法检测顺铂、益肺解毒方药物血清、益肺解毒方药物血清协同顺铂对人肺腺癌A549的增殖抑制作用;流式细胞术检测人肺腺癌A549干细胞的ABCB1、ABCG2的表达。结果:无血清悬浮培养法可分离富集人肺腺癌A549干细胞,顺铂可抑制人肺腺癌A549、人肺腺癌A549干细胞的生长,呈量效关系;益肺解毒方药物血清能够抑制人肺腺癌A549干细胞的生长,呈量效关系;中剂量益肺解毒方药物血清协同顺铂对人肺腺癌A549干细胞的增殖抑制作用与顺铂组比较,P0.01,q值为1.22;高剂量益肺解毒方药物血清协同顺铂对人肺腺癌A549干细胞的增殖抑制作用与顺铂组比较,P0.01,q值为1.04;中剂量益肺解毒方药物血清协同顺铂作用于后人肺腺癌A549干细胞后,ABCB1、ABCG2的表达量下降,与顺铂组比较P0.01。结论:无血清悬浮培养法可分离人肺腺癌A549干细胞;益肺解毒方能够抑制人肺腺癌A549干细胞的生长,与顺铂具有协同增效效应,逆转其耐药,可能是通过降低人肺腺癌A549干细胞的ABCB1、ABCG2的表达实现的。     

蜂毒素与化疗药物的协同作用及其可能机制的实验研究

目的分别观察蜂毒素联合5-氟尿嘧啶（5．Fu）、顺铂（DDP）、多西紫杉醇（TXT）抗人胃癌细胞株BGC-823增殖的效果,并初步探讨其作用机制。方法运用中效原理进行统计分析,绘制5-Fu、DDP和TXT单药及分别与蜂毒素联合用药对该肿瘤细胞生长的剂量一效应曲线,确定联合用药时对肿瘤细胞的效应（FA）与合用指数（CI）的关系,判定药物间的相互作用。运用实时荧光定量PCR法检测蜂毒素分别联合5．Fu、DDP和TXT作用人胃癌细胞株BGC．823后对化疗药物相关基因表达的改变。结果（1）在一定的浓度范围内蜂毒素单药与3种化疗药物单药均对BGC-823细胞显示出了明显的生长抑制效果。（2）蜂毒素联合5-Fu作用于BGC-823细胞时,FA在0．35～0．75时,CI〈1。蜂毒素联合DDP作用于BGC-823细胞时,FA在O．55左右,CI=1;FA〈0．55,CI〈1。蜂毒素联合TXT作用于BGC-823细胞时,整个区间内均可见CI〈1。（3）蜂毒素分别与3种化疗药物联合作用于细胞后,化疗药物相关基因胸苷酸合成酶（thymidylatesynthetase,TS）、切除修复交叉互补基因1（excisionrepaircross—complementinggene1,ERCCl）、乳腺癌易感基因1（breastcancersusceptibilitygene1,BRCAl）、β微管蛋白Ⅲ（β—tubu-nⅢ,TUBB3）和微管相关蛋白tau（rrlicrotubule—associatedproteintau,MAPT）的表达明显低于空白对照组（P〈0．01）。结论蜂毒素具有增强5．Fu、DDP、T）（T对胃癌细胞BGC-823生长抑制效果的协同作用,其作用机制可能与下调化疗相关基因的表达有关。     

不同剂量和给药时程对名贵中药组合免疫调节作用的影响

目的：以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷为例,探讨不同剂量和给药时程联合用药的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响。方法：灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷按10∶10∶1.5比例组合,以SPF级昆明小鼠为实验对象,随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、低剂量持续给药组（C）、低剂量预防给药组（D）、高剂量持续给药组（E）和高剂量预防给药组（F）,C～F组灌胃相应剂量的受试组合物,A组和B组灌胃等量生理盐水。连续灌胃4周后,除正常对照组外其余各组小鼠均接种肉瘤S180细胞,持续给药组继续灌胃。接种3周后处死小鼠,检测各组荷瘤小鼠肿瘤大小、细胞免疫功能及血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α含量。结果：受试组合物低剂量持续给药和低剂量预防给药均能显著抑制S180实体瘤的生长（P〈0.05）,并明显延长荷瘤小鼠生存期（P〈0.05）,均能显著提高小鼠细胞免疫功能以及血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,以低剂量预防给药效果最为显著。高剂量预防给药可以抑制S180实体瘤的生长,延长荷瘤小鼠生存期,并能提高细胞免疫功能及血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,但与模型组相比无显著性差异（P〉0.05）。然而高剂量持续给药却能抑制ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,降低荷瘤小鼠的血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,显著缩短荷瘤小鼠生存期（P〈0.05）,具有促进肿瘤生长的趋势。结论：受试组合物在合适剂量和给药时程下可增强荷瘤小鼠的细胞免疫功能,延长荷瘤小鼠生存期,抑制肿瘤细胞生长,但是剂量过大且持续给药会抑制细胞免疫功能,缩短生存期,有促进肿瘤生长的倾向。     

旱生香茶菜中的三萜成分(英文)

目的:研究旱生香茶菜的化学成分。方法:采用多种色谱技术和方法进行分离,通过波谱分析鉴定化合物结构。采用MTT法进行人体肿瘤细胞毒体外活性实验。结果:从旱生香茶菜叶中分离并鉴定了10个三萜类化合物:齐墩果酸(1),乌苏酸(2),maslinicacid(3),2α-羟基乌苏酸(4),hederagenin(5),3β,23-dihydroxy-urs-12-en-28-oicacid(6),arjunolicacid(7),asiaticacid(8),2α,3α,24-trihydroxyolean-12-en-28-oicacid(9),2α,3α,24-trihydroxyurs-12-en-28-oicacid(10)。测试了10个化合物对3种(K562,MKN45,HepG2)人体肿瘤细胞株的细胞毒活性。结论:化合物1-10均首次从该植物中分离得到,并讨论了它们的生源关系。所有三萜化合物对上述三种人体肿瘤细胞株都没有细胞毒活性。     

雪灵芝总皂苷对胃肠平滑肌的作用

目的：观察雪灵芝总皂苷是否具有促进小鼠肠蠕动的作用以及对家兔离体肠肌活动的影响。方法：1．肠蠕动实验：先给雪灵芝总皂苷、甲基硫酸新斯的明、蒸馏水30min后,再给予碳末。给予碳末30min后测定碳末在肠中的推进率。2．兔子离体肠肌实验：测离体兔肠肌给药前和给药后的活动情况,研究雪灵芝总皂苷对离体肠肌活动的影响。结果：雪灵芝总皂苷高、中剂量组有明显的增加肠蠕动的作用（P〈0．05）,对家兔离体肠肌给药后与给药前比较,张力和振幅有显著差别（P〈0．05）。结论：雪灵芝总皂苷能增加小鼠肠蠕动,对离体兔肠肌有明显的收缩作用。     

KSC联合紫杉醇对人肝癌HepG-2细胞株的抑制作用研究

目的:研究硒酸酯多糖(KSC)与紫杉醇(TAX)联合对肝癌细胞株HepG-2的生长抑制作用,判断联合用药的效果。方法:采用MTT法测定药物的体外杀伤作用,应用金氏公式进行联合用药分析。结果:KSC与TAX单用均可抑制HepG-2细胞的生长,且呈时间—剂量依赖性,二者合用后对HepG-2细胞的抑制作用显著增强。两药合用的中效浓度分别为31.684mg/L和0.272nmol/L,较两药单用时的中效浓度低(KSC单用为46.632mg/L,TAX单用为1.684nmol/L)。两药合用的绝大多数q值在0.882～0.989,为相加作用。结论:KSC与TAX联用可显著增强对HepG-2细胞的抑制作用,二者具有协同相加抗肿瘤作用。     

峨眉山灵芝规范化种植标准操作规程

目的：对灵芝的整个生产过程进行有效监控,以达到优质高产无公害的目的。方法：按照《中药材规范化种植规程》要求,根据灵芝的生物学特性,结合产区农业生态环境,进行多年实践验证,探索灵芝的规范化种植方法。结果：峨眉山灵芝优质高产无公害,其种植规程具有可操作性、科学性、重现性及推广性。结论：该规程适用于峨眉山无公害灵芝的种植,若推广到其他地区并达到相同的效果,需根据当地环境等进行适当调整。     

姜黄素联合MMC对宫颈癌HeLa细胞生长抑制作用观察

目的：比较姜黄素分别和中、低剂量丝裂霉素C（MMC）联用与高剂量MMC单用对宫颈癌He—La细胞的抑制作用,探讨两药联用的效果是否等同甚至优于高剂量MMC单用的效果,为临床上开展较低剂量MMC与姜黄素联用治疗宫颈癌,以减少MMC用药剂量、降低其毒副作用提供实验依据。方法：将姜黄素与不同剂量的MMC联用或单独作用于体外培养的HeLa细胞,以MTT法检测给药后各组HeLa细胞的生长抑制情况。结果：MTT结果显示,姜黄素联合MMC对人宫颈癌HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用,并呈剂量一时间依赖关系。姜黄素联合低剂量MMC组与高剂量MMC单用组对HeLa细胞的抑制作用无显著差异（P〉0．05）,而姜黄素联合中剂量MMC组对HeLa细胞的抑制作用显著高于高剂量MMC单用组（P〈0．05）。结论：姜黄素与中剂量MMC联用能有效抑制宫颈癌HeLa细胞的生长,为临床上宫颈癌的化疗提供了一个新方法。     

高效液相色谱法测定灵芝提取物中尿苷和腺苷含量

目的:建立一种测定灵芝提取物中尿苷和腺苷含量的高效液相色谱法,测定不同产地灵芝提取物中的尿苷和腺苷的含量。方法:色谱柱:Diamonsil C18(2)(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-0.04 M KH2PO4=9∶91;流速:1 mL·min-1,检测波长:260 nm,柱温:35℃。结果:尿苷和腺苷分别在0.2~50μg·mL-1和0.1~20μg·mL-1范围内,峰面积与浓度的线性关系良好;尿苷和腺苷的平均准确度均在99.91%~102.12%之间;日内、日间精密度RSD均小于1.76%,样品回收率均在94.42%~100.50%之间。6个不同产地的灵芝提取物中,以福建灵芝中尿苷含量和吉林灵芝中腺苷含量最高,其他5个产地灵芝中尿苷和腺苷含量差异无统计学意义。结论:该方法特异性强、准确度高、重复性好,可用于测定灵芝提取物中的尿苷和腺苷含量,为灵芝提取物的评价提供参考和依据。     

纳米雄黄对肺癌A549细胞的凋亡诱导作用

目的:研究纳米雄黄对肺癌A549细胞的凋亡诱导作用。方法:采用机械研磨法制备纳米雄黄。以肺癌A549细胞株为靶细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活性,AnnexinV/PI双染色法检测A549细胞的凋亡,流式细胞术检测BAX蛋白和Bcl-2蛋白表达、Caspase-3活性、P53蛋白的表达。结果:纳米雄黄可显著抑制A549细胞的增殖,50μg/mL和100μg/mL的纳米雄黄处理48h后,A549细胞凋亡率显著增高为12.53%和69.19%;20μg/mL和50μg/mL的纳米雄黄作用24h,A549细胞中活性caspase-3由对照的(2.25±0.17)%增高到(3.84±0.63)%和(7.35±0.33)%;P53蛋白表达总体增高但加药48h高剂量组也有所降低;Bax蛋白表达由对照的(79.50±0.50)%增高到(92.45±0.35)%和(96.9±0.00)%;Bcl-2蛋白表达由对照的(77.85±2.15)%增高到(87.10±10.5)%和(83.1±4.6)%。结论:纳米雄黄可有效诱导肺癌A549细胞发生凋亡。