烧伤病房鲍曼不动杆菌耐药性及OXA基因型检测

目的:了解烧伤病房患者创面鲍曼不动杆菌的耐药性和OXA碳青霉烯酶基因携带情况,为预防和控制多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染提供依据.方法:收集2013年1月—2015年12月皖南医学院第一附属医院烧伤整形外科收治2572例患者创面分泌物进行细菌培养;使用VITEK2 Compact型全自动微生物检测仪鉴定鲍曼不动杆菌,通过药敏实验检测其对18种抗菌药物的敏感性;应用聚合酶链反应(PCR)方法检测4种OXA碳青霉烯酶基因(OXA-23-like、OXA-24-like、OXA-51-like、OXA-58-like)的携带情况,并对其中10株进行OXA-23-like基因测序.结果:分离出44株鲍曼不动杆菌,对亚胺培南耐药率为79.55%(27株),对米诺环素及替加环素的耐药率较低,分别为20.45%(9株)和31.82%(14株),对庆大霉素耐药率高达100%,对其他抗菌药物也具有较高的耐药率(59.09%~97.73%).所有菌株OXA-51-like基因均为阳性,共有35株OXA-23-like基因阳性(阳性率79.55%),均未检测到OXA-24-like基因和OXA-58-like基因.结论:鲍曼不动杆菌呈多重耐药现象,对米诺环素耐药率最低,我院创面鲍曼不动杆菌主要耐药机制可能与OXA-23-like基因有关.     

烧伤创面多重耐药鲍氏不动杆菌同源性和碳青霉烯酶基因型及整合子研究

目的 明确甘肃省人民医院烧伤病房多重耐药鲍氏不动杆菌的耐药性、同源性及与整合子的关系. 方法 31株多重耐药鲍氏不动杆菌分离自该院烧伤住院患者创面分泌物标本.采用琼脂稀释法测定鲍氏不动杆菌对11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性:PCR扩增I、Ⅱ、Ⅲ类整合酶及整合酶阳性菌株的整合子基因盒,进行序列分析;分析亚胺培南耐药菌株的碳青霉烯酶基因型. 结果 鲍氏不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为45.2%、48.4%、48.4%、41.0%,对头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素、氨曲南和哌拉西林的耐药率均在80.0%以上.所有菌株PFGE分型共分为A、B、C 3型,A克隆18株、B克隆7株、C克隆6株.20株细菌整合子扩增阳性,携带有aadA1、aadA5、aacA4、aac3、aacC1、aac(6')-Ib、catB8、drfA17和drf8基因,介导对氨基糖苷类抗生素、氯霉素、甲氧苄啶的耐药.14株亚胺培南耐药的菌株均产OXA-23型碳青霉烯酶. 结论 多重耐药鲍氏不动杆菌在该院烧伤病房播散,以A克隆为主;鲍氏不动杆菌整合子主要介导对氨基糖苷类抗生素及氯霉素的耐药性,碳青霉烯类抗生素耐药鲍氏不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶.     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因的携带情况.方法 连续收集2011年1月至2012年4月浙江省台州医院临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌75株.应用Vitek 2 Compact微生物鉴定仪进行细菌鉴定和药敏分析,并通过Hodge试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型.结果 75株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌均为多重耐药菌株,只对阿米卡星保持较高的敏感性,耐药率仅为13.3％ (10/75).其中,69株(92.0％)检测出OXA-23基因,67株(89.3％)检出OXA-51基因,未检出IMP、VIM和SIM酶基因.结论 产OXA酶是本组碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要耐药机制,其中OXA-23和OXA-51是主要基因型.     

烧伤病区病原菌分布及其耐药性调查

目的了解烧伤病区病原菌分布特点及其耐药情况，为临床治疗提供参考。方法回顾性分析笔者单位烧伤病区348例住院患者的创面、血液、静脉导管、痰液、尿液及脓液等标本分离而得的菌株，统计其病原菌分布情况及耐药性。结果共检出464株病原菌，其中革兰阴性杆菌244株占52、6％、革兰阳性球菌188株占40．5％、真菌32株占6．9％。主要检出菌株为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）对环丙沙星、青霉素G、苯唑西林等的耐药率已达100、0％，只对万古霉素敏感。铜绿假单胞菌对头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南、头孢吡肟的耐药率分别为15、8％、36、8％、33、3％。结论金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌是烧伤病区感染的主要病原菌；金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌对抗生素的耐药率较高。     

武汉市第三医院烧伤重症监护病房三年间鲍氏不动杆菌分布及耐药性变化

目的 了解烧伤ICU鲍氏不动杆菌临床分布特征及耐药性变化,寻找与其感染相关的危险因素,为制定防治该菌株感染的策略提供参考. 方法 2006年1月-2008年12月,收集笔者单位烧伤ICU 156例患者的血液、静脉导管、痰液、创面分泌物及咽拭标本,行细菌培养.分析3年间细菌分布情况,检测细菌耐药性,行鲍氏不动杆菌感染相关危险因素分析.用WHONET 5.3软件处理细菌耐药率数据,对其他数据行x2检验与Logistic回归分析. 结果 3年间共检出鲍氏不动杆菌92株,在2006、2007、2008年各年度检出总菌株数中比例分别为23.1%(30/130)、27.5%(25/91)、28.2%(37/131).菌株来源:来自创面分泌物41株占44.6%,咽拭、痰液标本均检出14株各占15.2%,血液标本检出13株占14.1%,静脉导管10株占10.9%.除头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南外,所获鲍氏不动杆菌菌株对临床常用的10种抗生素平均耐药率均达50.0%以上.烧伤总面积(x2=24.374,P=0.000)、机械通气(x2=8.968,P=0.003)、抗生素使用时间(x2=3.981,P=0.046)、深静脉置管(x2=9.170,P=0.002)是引起烧伤ICU鲍氏不动杆菌感染的危险因素,前二者为独立危险因素. 结论 笔者单位烧伤ICU鲍氏不动杆菌广泛耐药且检出率呈逐年增加趋势.严格执行无菌操作及隔离措施,规范性使用抗生素,避免气管切开及深静脉置管等侵入性操作或缩短其时间,对预防和控制鲍氏不动杆菌感染有重要意义.     

临床分离黄杆菌属细菌产β内酰胺酶及耐药性分析

目的　检测黄杆菌的耐药性和产 β内酰胺酶 (BLA)及超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)情况 ,为临床治疗提供理论依据。　方法　将临床分离的 6株黄杆菌属细菌分别以纸片法、双纸片协同法检测其产BLA和ESBLs;用K B法和梯度琼脂平板法检测黄杆菌对抗生素的敏感性 ,测定其最低抑菌浓度 (MIC)。　结果　 6株黄杆菌均为产BLA菌株 ,且 >80 %的黄杆菌产ESBLs;黄杆菌对 β内酰胺类抗生素耐药率高 (MIC为 32 2 5 6mg L),对氟喹诺酮类抗生素及加酶头孢菌素较敏感 (MIC为 0 .12 5 8.0 0 0mg L)。　结论　院内感染的黄杆菌多产BLA,并对BLA类抗生素高度耐药 ;由其导致的感染在治疗上建议优先选用氟喹诺酮类抗生素或加酶抑制剂BLA类抗生素。     

烧伤病房728株感染病原菌的分布特点及耐药性分析

目的了解笔者单位近5年烧伤感染病原菌的分布特点及耐药情况。方法收集2001-2006年笔者单位306例烧伤患者创面分泌物等标本中分离的病原菌，对其菌种分布特点及耐药性进行分析。结果革兰阳性菌378株，其中金黄色葡萄球菌的菌株数居首位，尤以甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌居多，表皮葡萄球菌和粪肠球菌的菌株数分别位居第2、3位。革兰阴性杆菌338株，其中鲍氏不动杆菌的菌株数居首位，阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌的菌株数分别位居第2、3位。检出真菌12株。结论笔者单位病原菌的分布情况，可能与甲氧西林耐药葡萄球菌呈多重耐药性以及鲍氏不动杆菌产生各种类型的β内酰胺酶有关。     

烧伤病房鲍氏不动杆菌质粒介导的16S rRNA甲基化酶基因及耐药性传递研究

目的 调查烧伤病房鲍氏不动杆菌临床分离株的耐药性,了解是否存在介导高水平氨基糖苷类抗菌药物耐药的16S rRNA甲基化酶基因,探讨传播机制.方法 收集2006年5月-2007年12月从甘肃省人民医院烧伤病房分离的40株鲍氏不动杆菌.采用纸片扩散法测定其对20种抗菌药物的敏感性;琼脂稀释法测定其对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、异帕米星和卡那霉素6种氨基糖苷类抗菌药物MIC;PCR扩增5种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD;阳性PER产物纯化测序;碱裂解法提取质粒;接合实验及质粒转化实验确定耐药性传递方式.结果 40株鲍氏不动杆菌对6种氨基糖苷类抗菌药物的耐药率分别为72.5%、72.5%、70.0%、67.5%、70.0%、70.0%;对6种氨基糖苷类抗菌药物全部耐药的菌株有25株占62.5%,其中armA基因阳性10株占40.0%,未检出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD阳性菌株.10株转化子、10株接合子对氨基糖苷类抗菌药物均高度耐药,MIC≥256 μg/mL者全部携带armA基因.结论 烧伤病房鲍氏不动杆菌临床分离株耐药率极高,从中检出16S rRNA甲基化酶基因armA且位于质粒染色体上.     

烧伤病人创面分离菌群耐药性分析

目的 研究烧伤创面分离菌群耐药性。方法 采用纸片扩散法,对２４１例烧伤病人创面细菌进行菌种鉴定及耐药性分析。结果 金黄色葡萄球菌感染率上升,３１９株细菌的耐药率为６０％,不动杆菌感染率及耐药率高,链球菌感染偶有发生。结论 创面分离菌中革兰氏阳性菌比例增加,各菌种对抗生素的耐药率上升。     

烧伤患者2748株病原菌分布特点及耐药性分析

目的 提供近年烧伤患者病原菌分布及耐药性状况的流行病学资料,以指导临床合理使用抗生素. 方法 选择2003年3月-2011年6月西南医院全军烧伤研究所478例患者1977份临床标本(血液、导管、创面分泌物等),共分离出病原菌2748株.用API细菌鉴定板条鉴定菌株;采用K-B纸片扩散法,选择庆大霉素、妥布霉素、哌拉西林、阿米卡星等55种常用抗生素进行药物敏感试验.采用WHONET 5.3软件统计分析如下项目:各年度不同类型、不同标本来源的病原菌分布情况,主要革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、真菌对多种抗生素的耐药率变化情况,铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、白色念珠菌对多种抗生素的敏感率变化情况. 结果 2748株病原菌中,革兰阴性杆菌1879株占68.38％、革兰阳性球菌628株占22.85％、真菌241株占8.77％.创面分泌物标本病原菌检出率最高(1022株占37.19％),其次是呼吸道(995株占36.21％)和血液(421株占15.32％),其他类型标本检出率较低.铜绿假单胞菌检出率最高,共996株占36.24％,其次是金黄色葡萄球菌和鲍氏不动杆菌,依次为495株占18.01％、395株占14.37％.鲍氏不动杆菌检出率呈逐年增加趋势,金黄色葡萄球菌呈逐年下降趋势,铜绿假单胞菌检出率较稳定.检出的葡萄球菌中以甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌为主,共484株占17.61％.铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌对多黏菌素E、多黏菌素B的耐药率低于30.00％,鲍氏不动杆菌对米诺环素的耐药率仅为39.68％,除此之外,这2种细菌对其他抗生素如第三代头孢菌素、β内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多药耐药,耐药率为57.91％～100.00％.2004-2011年,铜绿假单胞菌对喹诺酮类抗生素敏感率呈逐年增加趋势,鲍氏不动杆菌对米诺环素、奈替米星、亚胺培南、美罗培南、妥布霉素和头孢哌酮/舒巴坦敏感率呈逐年下降趋势.粪肠球菌、屎肠球菌和金黄色葡萄球菌对替考拉宁和利奈唑胺的耐药率低于10.00％.金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率均为0.金黄色葡萄球菌对奎奴普丁/达福普汀、米诺环素、夫西地酸和复方磺胺甲(晤)唑的耐药率较低,分别为0.82％、9.35％、2.21％和31.85％;该菌对红霉素、克林霉素、复方磺胺甲(恶)唑、四环素和米诺环素的敏感率呈逐年增加趋势.真菌感染率很低,且对药物的耐药率不高;白色念珠菌对5种抗生素的耐药率均低于15.00％,除对5-氟胞嘧啶的敏感率略呈下降趋势外,对其他4种抗生素的敏感率均呈逐年上升趋势. 结论 近年引发西南医院烧伤研究所患者感染的病原菌中,居前3位的依次为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和鲍氏不动杆菌.所有分离菌株中铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌的多药耐药性尤为突出,鲍氏不动杆菌将可能取代铜绿假单胞菌成为烧伤感染死亡的主要致病菌.     

2003-2005年积水潭医院烧伤感染常见细菌及耐药性分析

目的 了解笔者单位近期的烧伤感染细菌分布及耐药情况。方法 收集2003年1月-2005年12月从笔者单位492例烧伤住院患者创面分泌物、静脉导管、血液、尿液、粪等标本分离而得的菌株，对其菌种分布特点及耐药性进行分析。结果 送检标本中革兰阴性菌多于革兰阳性菌。革兰阳性菌292株，分离率最高者为金黄色葡萄球菌（16．7％），其中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌在金黄色葡萄球菌中占82．5％；革兰阴性菌372株，分离率较高的分别为铜绿假单胞菌（12．5％）、大肠埃希菌（11．1％）。3年中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对超广谱β内酰胺酶的耐药率分别为60．8％和42．9％。结论 笔者单位烧伤病区细菌耐药问题严重，仍需不断监测病区菌种变化及药物敏感情况，以有效地控制细菌感染和耐药菌株的播散。     

热带海岛地区某医院烧伤感染病原菌分布及耐药性调查

目的 了解热带海岛地区烧伤感染病原菌分布及耐药情况。方法 回顾性调查分析2000-2005年笔者单位烧伤病区392例住院患者的病原菌分布情况及其耐药性特点。结果 （1）共检出671株病原菌，其中铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌是主要菌种。最常见的铜绿假单胞菌检出率为27．7％，较20世纪90年代（33．6％）有下降趋势。（2）铜绿假单胞菌对亚胺培南／西司他丁及头孢吡肟的耐药率分别为32．2％和36．7％，对其余10种常用抗生素的耐药率均在80．0％以上。（3）141株金黄色葡萄球菌中，共检出89株甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌，检出率为63．1％；未检出对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论 铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌等是热带海岛地区烧伤感染的主要病原菌；前两者的抗生素耐药率较高。     

烧伤病房铜绿假单胞菌β内酰胺类抗生素耐药基因分析

目的 了解烧伤病房铜绿假单胞菌B内酰胺类抗生素耐药基因携带情况及耐药性。方法 采用K-B法检测来自烧伤创面和病房的铜绿假单胞菌对9种β内酰胺类抗生素的耐药谱。用PCR扩增法检出β内酰胺类抗生素耐药基因的阳性菌株，用他唑巴坦对哌拉西林阻断实验判断上述阳性菌株是否产超广谱β内酰胺酶（ESBL）。结果 12株检出β内酰胺类耐药基因的铜绿假单胞菌对所试的头孢菌素类抗生素和哌拉西林均耐药，其中7株对包括亚胺培南和氨曲南在内的9种抗生素耐药。他唑巴坦对哌拉西林耐药阻断实验提示，这7株耐药基因阳性菌株均产ESBL。本实验扩增出6种β内酰胺耐药基因，分别为VEB、IMP、PSE、FOX、OXA、VIM。结论 烧伤病房铜绿假单胞菌β内酰胺类抗生素耐药基因携带率较高，与细菌多重耐药有密切关系。     

烧伤病房细菌耐药性的分析

目的　分析笔者单位烧伤病房近 4年来的细菌耐药性。　方法　从本院 1996年～ 1999年烧伤患者血培养阳性及创面分离出的细菌 ,其中 5 0株以上者 5种 ,用纸片琼脂扩散法进行药敏试验。并以美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)公布的数值作为判断耐药标准。应用双纸片协同试验检测 45株肺炎克雷伯菌的超广谱 -内酰胺酶 (ESBLs)。　结果　仅万古霉素对金黄色葡萄球菌有效。亚胺培南对大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌有效 ,而仅多粘菌素 -B对铜绿假单胞杆菌有效。 45株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性者有 38株 ,ESBLs的发生率为 84.4%。　结论笔者医院烧伤病房的细菌耐药率甚高 ,这可能是由于 β -内酰胺酶的产生 ,特别是ESBLs发生率甚高所致 ,亚胺培南依然对ES BLs稳定 ,抗菌效能佳 ;但复合 β-内酰胺酶抑制剂的抗生素作用已日趋减弱。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率正逐年增高 ,可能是由于大量使用该药 ,引起菌株产生一种新的由质粒传递的金属 β -内酰胺酶 ,细菌外膜蛋白产生减少与通透性的改变 ,从而导致细菌耐药性增加     

Susceptibility and R plasmids conjugation tests for 44 strains of gram negative bacilli in a burn unit

44 strains of 9 species Gram negative bacilli were isolated and identified in a burn unit, among them 25 strains were from patients and 19 from ward environment. All strains were tested for susceptibility to antibiotics and R plasmids. Using both agar dilution and disc diffusion methods to test susceptibility to 12 kinds of antibiotics, namely, Streptomycin Chloramphenicol, Tetracycline, Ampicillin, Kanamycin, Gentamycin, Nalidixic acid, Amikacin Rifampin, Carbenicillin, Cefazolin and Polymyxin, we found that all 44 strains were susceptible to Rifampin and Polymyxin. To the other 10 kinds of antibiotics, the susceptibilities varied. 40 strains of bacteria (91%) were resistant to 3 kinds or more of antibiotics, i.e, multiple resistant bacteria, 2 strains resistant to 2 kinds of antibiotics (4.6%), and 2 strains susceptible to all 12 kinds of antibiotics (4.6%). The multiple resistant strains consisted of 9 strains (22.5%) of R plasmid-harboured bacteria, Pseudomonas aeruginosa 2 strains, Citrobacter 4 strains, Proteins 1 strain, Enterobacter aerogenes 1 strain and Escherichia coli 1 strain. All the R plasmids carried the marks of resistance to chloramphenicol, tetracycline, ampicillin, kanamycin, gentamycin, streptomycin, and carbenicillin, but no one carried marks of resistance to Cefazolin and Amikacin indicating that drug-resistance of the last two antibiotics might not be mediated by R plasmids. Two strains of Citrobacter freundii isolated from 2 patients and showing susceptibility to all antibiotics were induced to be Rifampin-resistance (Rif) strains without changing their original biological characters. They both could receive the R plasmids of the multiple resistance strains one from patient and the other from ward environment.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

烧伤病房鲍氏不动杆菌耐药性趋势和同源性分析

目的 监测烧伤病房鲍氏不动杆菌耐药性趋势和同源性情况.方法收集2008年11月-2009年2月、2010年6-9月笔者单位住院烧伤患者创面、血液和静脉导管分离的鲍氏不动杆菌26株,采用K-B纸片扩散法检测该菌对阿米卡星、庆大霉素等13种临床常用抗生素的耐药性,用重复序列PCR法检测基因分型.对细菌耐药率数据进行x2检验.结果 (1)26株鲍氏不动杆菌中多药耐药菌株16株、泛耐药菌株9株,菌株对庆大霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、亚胺培南和美罗培南的耐药率均高达90.00%以上;对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,为42.31%(11/26).26株鲍氏不动杆菌对13种抗生素的耐药率比较,差异有统计学意义(42.31%～100.00%,x2=97.371,P＜0.05).(2)26株鲍氏不动杆菌共分为7个基因型:A型17株,B型3株,C型2株,D、E、F、G型各1株.17株A型菌株中,2008、2009年各1株,2010年15株;创面来源11株、血液和静脉导管来源共6株.结论笔者单位烧伤病房近年来存在鲍氏不动杆菌同一克隆株A型的流行,对临床常用抗生素呈多药耐药或泛耐药趋势.目前头孢哌酮/舒巴坦是治疗烧伤患者鲍氏不动杆菌感染的首选药物.

Abstract：

Objective To monitor genotypes and drug-resistance trend of Acinetobacter baumannii (AB) isolated from burn wards. Methods Twenty-six strains of AB isolated from wound secretion, venous catheter, and blood were collected from burn patients hospitalized in our burn wards from November 2008 to February 2009, and June to September 2010. Homogeneous genotype analysis was performed with repetitive extragenic palindromic PCR, and drug-resistance rate to 13 antibiotics including amikacin, gentamicin, etc. , which were commonly used in clinic, was tested by K-B paper disk diffusion. The data of drugresistance rate were processed with chi-square test. Results ( 1 ) Sixteen AB strains were multi-drug resistant (MDR), 9 AB strains were pan-drug resistant (PDR). Among all strains, the resistance rate to gentamicin, piperacillin, piperacillin/tazobactam, cefuroxime, cefotaxime, ceftazidime, cefepime, ciprofloxacin, imipenem, and meropenem was respectively higher than 90.00%; the resistance rate against cefoperazone/sulbactam was the lowest (11/26, 42.31% ). There were obvious difference among the drug-resistance rates of AB strains to 13 antibiotics (with rates from 42.31% to 100.00% , x 2 = 97. 371, P ＜ 0.05 ). (2)There were 7 genotypes among 26 AB strains, respectively type A ( 17), type B (3), type C (2) , type D (1), type E (1), typeF (1), and typeG (1). Out of the 17 AB strains inAgenotype, 1 strain was from 2008, 1 strain was from 2009, 15 strains were from 2010, and among them 11 strains were collected from wound secretion and 6 strains were obtained from blood and venous catheter. Conclusions AB strains in A genotype are dominant in our burn wards in recent years, which are MDR or PDR to commonly used antibiotics. Cefoperazone/sulbactam is the drug of choice for burn patients with AB infection.