表面修饰对羟基磷灰石细胞相容性的影响

探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)多肽表面修饰对羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)细胞相容性的影响。以骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)复合精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽表面修饰的羟基磷灰石或单纯材料培养制备组织工程骨,观察骨髓基质干细胞的粘附和生长情况,检测细胞活力和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,流式细胞仪分析细胞周期。结果表明:骨髓基质干细胞在材料表面和孔隙内均可粘附和生长,粘附于RGD多肽修饰羟基磷灰石的细胞活力和碱性磷酸酶活性明显高于未经RGD多肽修饰组(P<0.01,P<0.05)。各组细胞周期未见明显变化,未见异倍体细胞。说明RGD多肽表面修饰对HA材料的细胞相容性有明显的优化作用。     

表面修饰对羟基磷灰石修复骨缺损的影响

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）多肽是介导种子细胞与支架材料黏附的多肽链．RGD序列可被固有黏附蛋白受体特异性结合．在生物材料表面自发形成一分子层．为与受体介导的种子细胞提供特异性位点而促进细胞的黏附和分化。笔者旨在应用RGD多肽对羟基磷灰石（hydroxyapatite．HA）材料进行表面修饰处理．以促进骨髓基质干细胞（marrow stromal cells．MSC）在其表面的黏附和生长．为骨组织工程提供一种支架材料的表面修饰手段。     

β-TCP／HA双相骨修复材料的Ames试验研究

目的通过鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）探讨组分比例分别为3：7和7：3的13磷酸三钙／羟基磷灰石（B—TCP／HA）双相骨修复材料的遗传毒性特征,以评价该材料的潜在致突变性。方法采用生理盐水（SC）和二甲基亚砜（DMSO）两种介质对试验样品浸提,采用平板掺入法进行试验,计数TA97、TA98、TA100和TA102菌株在活化和非活化条件下的回变菌落数,以检测其致突变比值。结果阴性对照和阳性对照结果成立。两种比例的材料采用SC或DMSO浸提,浸提液均未引起试验菌株回变菌落数超过阴性对照的2倍,即致突变比值MR均〈2。结论在本实验条件下,β-TCP／HA样品Sc浸提原液及DMSO浸提原液对标准试验菌株均无诱变性。     

羟基磷灰石生物陶瓷材料的研究概况

羟基磷灰石和β-磷酸三钙(β-TCP)作为最有代表性的生物活性陶瓷材料,在近代生物医学工程学科领域一直受到人们密切关注。本文主要从HAP及其复合材料的合成,特性和应用等方面对HAP生物陶瓷的研究进行综述。     

经羟基磷灰石涂层的外固定针与骨髓基质细胞生物相容性研究

目的探讨经羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)涂层的外固定材料与骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSc)的生物相容性。方法通过经HA涂层的外固定材料与BMSc体外细胞培养实验,进行细胞形态学观察和细胞增殖、碱性磷酸酶活性测定。结果扫描电镜观察:较空白组和对照组,实验组细胞在涂层表面细胞贴附良好,细胞伸出较多伪足;细胞生长良好;细胞增殖,第5,8,12天有显著差异(<0.05);ALP活性,第6天试验组间有显著性差异(<0.05)。该生物材料对BMSc增殖、分化及分泌功能无抑制作用。结论经HA涂层的外固定材料具有良好的生物相容性。     

多肽对生物材料表面修饰的研究现状

对生物材料进行表面修饰可以提高生物材料的细胞粘附性，用多肽对生物材料进行表面修饰是一种较好的表面改性方法。本文对生物材料表面修饰用多肽的种类的选择及多肽固定的方法研究现状进行综述。     

以β-磷酸三钙为支架组织工程骨在兔脊柱后外侧融合中的作用研究

目的探索兔骨髓基质干细胞﹙Bone marrow stromal cells,BMSCs﹚与-磷酸三钙﹙β-tricalcium phosphate,β-TCP﹚复合的生物相容性以及该组织工程骨的成骨效果。方法新西兰大白兔12只,雌雄不限,体重3±0.25kg。于L4∕5节段棘突两侧行脊柱融合手术,随机将2种材料﹙①单纯材料组:-TCP颗粒;②组织工程骨组:将BMSCs接种到-TCP材料上静态培养24小时﹚均匀植入打磨好的骨槽内。术后12周处死。利用MTT检测、扫描电镜、荧光染色等方式观察细胞的粘附及伸展情况,利用X线、显微-CT、组织学观察材料降解及骨长入情况。结果通过MTT、扫描电镜等方法观察发现BMSCs与-TCP复合24小时后,多孔的-TCP表面和内部均可见大量细胞粘附,细胞伸展和生长良好;术后12周影像学和组织学研究发现,组织工程骨组有明显的新生骨生成,而单纯材料组没有,2组材料均无明显降解。结论该组织工程骨无论在体内外均具有良好的生物相容性,与单纯-TCP相比能够更好、更快的成骨,具有更广阔的应用前景。     

骨组织工程支架材料表面修饰的试验研究

观察骨髓基质细胞 (BMSC)在吸附了多聚赖氨酸 (Poly -L -Lysine,PLL)的羟基磷灰石 (HA)上的生长情况。探讨改进材料表面活性 ,促进种子细胞黏附和生长的方法。利用组织工程学的方法 ,将体外培养的BMSC种植于吸附了多聚赖氨酸的HA上 ,立体培养一周 ,用环境扫描电镜和倒置相差显微镜观察细胞的生长情况。结果表明 ,细胞在体外可以立体培养成活 ,吸附了多聚赖氨酸的HA上细胞较多。多聚赖氨酸可以改善HA的表面活性 ,促进细胞的黏附和生长。     

组织工程中生物材料表面修饰的研究

为了提高生物材料的生物相容性和细胞亲和性，需对生物材料进行表面修饰。本对生物材料表面修饰的方法进行了综述，并提出今后尚待解决的问题和发展趋势。     

多肽对生物材料表面修饰的研究现状

对生物材料进行表面修饰可以提高生物材料的细胞粘附性,用多肽对生物材料进行表面修饰是一种较好的表面改性方法。本文对生物材料表面修饰用多肽的种类的选择及多肽固定的方法研究现状进行综述。     

组织工程中生物材料表面修饰的研究

为了提高生物材料的生物相容性和细胞亲和性 ,需对生物材料进行表面修饰。本文对生物材料表面修饰的方法进行了综述 ,并提出今后尚待解决的问题和发展趋势     

Sr+β-TCP+OCP材料对大鼠脂肪来源干细胞活性及成骨分化的影响

目的 探究锶/β-磷酸三钙/磷酸八钙（Sr+β-TCP+OCP）材料对大鼠脂肪肪来源干细胞（r ADSCs）活性及成骨分化的影响。方法 将SD大鼠安乐处死,进行r ADSCs原代培养后完成r ADSCs成骨诱导,制备Sr+β-TCP+OCP、β-TCP、OCP材料,随机分为1%Sr+β-TCP+OCP组、3%Sr+β-TCP+OCP组、5%Sr+β-TCP+OCP组、β-TCP组、OCP组、对照组（成骨诱导培养液）。甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测r ADSCs增殖,检测碱性磷酸酶（ALP）活性及钙离子含量,蛋白质免疫印迹（WB）检测r ADSCs成骨相关蛋白。结果 与对照组和3%Sr+β-TCP+OCP组相比,β-TCP组、OCP组、1%及5%Sr+β-TCP+OCP组第1天、3天、6天吸光值（A）均下降（P<0.05）。在d3、d6 5%Sr+β-TCP+OCP组A值均低于β-TCP组、OCP组、1%Sr-β-TCP组（P<0.05）。随着时间延长,各组A值均升高（P<0.05）。与对照组、β-TCP组、OCP组相比,1%、3%Sr+β-TCP+OCP组ALP活性...     

β-TCP植入人体骨缺损后的组织学观察

目的了解多孔β—TCP在植入人体后的的成骨变化及降解过程。方法对12例多孔β—TCP活检标本行不脱钙硬组织切片检查观察陶瓷周围和内部的新生组织、陶瓷的形态改变、降解颗粒及伴随的细胞吞噬反应。其中11例标本行组织形态计量。结果所有的β—TCP标本均可见新生骨组织，新骨与材料紧密接触；材料的结构变得稀疏，周围可见降解颗粒和吞噬细胞。新生骨组织（VPB）为21．83％，材料残余率为21．17％。结论多孔β—TCP是一种良好的骨传导材料，植入体内后能逐步降解并形成新生骨组织。陶瓷产生降解颗粒及诱发的细胞吞噬反应应引起注意。     

射频磁控溅射法制备羟基磷灰石/β-磷酸三钙生物涂层

目的以粉末冶金烧成的羟基磷灰石(HA)/-β磷酸三钙(β-TCP)陶瓷为靶材,采用磁控溅射法在钛合金(Ti6Al4V)基体上制备HA/β-TCP生物涂层。方法利用XRD研究了复合涂层的晶化程度,讨论了涂层成分与生物降解性及相容性的关系。结果HA/β-TCP生物涂层为非晶态,经700℃,3h大气处理可显著提高涂层的晶化程度,当涂层成分为50wt%HA/50wt%β-TCP时其细胞相容性最好。结论在钛合金基体上制备HA/β-TCP生物涂层,通过HA与β-TCP的复合来控制材料的降解速度,使它的降解速度与周围骨组织的生长速度相匹配,使植入体具有良好的生物降解性、生物活性和力学性能。     

表面修饰对羟基磷灰石异位成骨的影响

目的 了解精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)多肽表面修饰对羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)异位成骨的影响.方法 以骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)复合RGD多肽表面修饰的HA或单纯材料培养制备组织工程骨,将材料植入新西兰白兔脊柱旁的肌肉内,根据植入不同材料分为A、B、C和D组.A组植入MSCs复合RGD多肽表面修饰的HA培养制备的组织工程骨;B组植入MSCs复合HA培养制备的组织工程骨;C组植入RGD多肽表面修饰的HA;D组植入HA.术后4、8周取材,行组织学观察和计算机图像分析.结果 术后4、8周,各组异位成骨组织学评估,A＞B(P＜0.05),C和D组无异位成骨.结论 RGD多肽表面修饰对以HA为支架材料组织工程骨的异位成骨有明显优化作用.     

聚合物表面生物修饰对肌腱细胞黏附特性的影响

为了探讨增强肌腱细胞与聚合物材料黏附力学特性的措施 ,采用生物可降解聚合物—乳酸与羟基乙酸共聚物 85 / 15 ,制成透光的薄膜 ,在膜表面裱衬聚赖氨酸的基础上 ,表面裱衬细胞外基质 ( I型胶原蛋白、纤维粘连蛋白 ,以及相应的抗体 )和生长因子 (类胰岛素生长因子 1) ,接种转化人胚肌腱细胞后 ,利用微吸管实验技术测定转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力。结果显示 :在聚合物薄膜表面裱衬纤维粘连蛋白或 I型胶原蛋白 ,可明显提高转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力 ( P<0 .0 5 ) ,但若在此基础上进一步分别复合裱衬纤维粘连蛋白抗体或 I型胶原蛋白抗体 ,则引起转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力明显下降 ( P<0 .0 5 ) ;肌腱细胞对聚合物薄膜的黏附力与细胞外基质蛋白 (纤维粘连蛋白或 I型胶原蛋白 )的裱衬浓度有很好的依赖性 ;I型胶原蛋白和纤维粘连蛋白介导转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的特异性黏附作用 ;二者复合裱衬浓度达到一定比例时 ,可产生协同作用 ,增强黏附效果 ;这种特异性黏附作用可被相应的抗体分子所抑制 ;生长因子对转化人胚肌腱细胞有明显的促黏附作用。提示 ,材料表面生物修饰可促进转化人胚肌腱细胞与聚合物的黏附作用 ,这对构建组织工程化肌腱具有重要的指导意义     

羟基磷灰石表面修饰的人工角膜钛支架体外生物相容性研究

目的采用细胞培养法观察人工角膜纯钛支架经羟基磷灰石(HA)表面修饰后,其生物相容性是否增加。方法采用第4～6代兔角膜基质成纤维细胞直接接种于HA-Ti、Ti及盖玻片表面,培养3、24、48、72h后,用丫啶橙染色法观察材料表面细胞的黏附、伸展和增殖情况,在扫描电子显微镜下观察材料表面的细胞形态及细胞外基质产生情况。结果细胞接种3、24、48、72h后,HA-Ti表面的活细胞数多于其他材料表面(P0.05)。细胞接种3h,细胞扩展面积:HA-Ti盖玻片Ti。48h后扫描电子显微镜观察发现HA-Ti表面的细胞扩展面积最大,细胞张力丝最长。72h后,HA-Ti表面完全被胶原覆盖。结论HA表面修饰增加了人工角膜纯Ti支架的生物活性。     

骨髓基质细胞和壳聚糖/明胶共混材料生物相容性研究

目的:研究壳聚糖/明胶共混材料对离体培养的骨髓基质细胞粘附及增殖的影响,寻找骨髓基质细胞新的载体材料。方法:取2周龄幼兔的长骨采集骨髓,培养骨髓基质细胞,体外扩增1周后,种植于纯壳聚糖和壳聚糖/明胶共混材料的表面。在倒置光学显微镜、扫描电镜的辅助下,观察细胞的粘附和生长情况,种植7d后用透射电镜观察细胞功能状况,用MTT方法检测种植后2d、4d、6d、8d细胞的增殖情况。结果:壳聚糖/明胶共混材料和纯壳聚糖能促进骨髓基质细胞在材料表面粘附并保持其在机体内的形态。壳聚糖/明胶共混材料表面的骨髓基质细胞功能活跃。在材料表面和培养板表面培养的骨髓基质细胞均能持续增殖,而壳聚糖/明胶共混材料能显著促进骨髓基质细胞的增殖(P<0.01)。结论:壳聚糖/明胶共混材料保持了壳聚糖的某些生物活性,同时由于加入明胶,能促进骨髓基质细胞的增殖,可作为骨髓基质细胞的载体应用于组织工程。     

生物材料的表面修饰对细胞黏附性的影响

细胞与生物材料相互作用过程中,细胞黏附是首先发生的生物学行为,对后续发生的迁徙、增殖和分化具有重要影响.因此,如何改善细胞在生物材料表面的黏附特性,自然成为目前组织工程研究的一项重要内容,目前较多采用的是对生物材料进行表面修饰的方法.就生物材料的表面修饰对细胞在生物材料上黏附的影响进展作一综述.     

人瘦素基因过表达增强大鼠骨髓基质细胞成骨能力

目的探讨人瘦素(h LEP)基因修饰对大鼠骨髓基质细胞(r BMSCs)成骨能力的影响。方法以转染h LEP腺病毒载体(Ad5-h LEP-EGFP)的r BMSCs为实验组,空载体(Ad5-EGFP)转染的r BMSCs和未转染的r BMSCs为对照组。MTT法检测细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和碱性磷酸酶(ALP)mRNA的表达,茜素红染色检测矿化结节形成能力。同时,将各组r BMSCs与β磷酸三钙(β-TCP)复合后移植于裸鼠皮下培养8周,观察新骨形成情况。结果 Ad5-h LEP-EGFP能有效转染r BMSCs,转染后细胞增殖活性无明显改变,但Col-Ⅰ和ALP mRNA的表达较对照组有明显提高(P0.05),矿化结节形成能力也更强(P0.05)。而且,h LEP修饰后的r BMSCs能与β-TCP结合形成组织工程化复合物,并能在裸鼠体内形成更多的类骨样组织。结论 h LEP修饰的r BMSCs可增强细胞成骨能力,有望应用于骨及牙周组织再生研究。