216例骨髓脱钙时间的探讨

骨髓活检不仅关系到造血系统疾病的诊断 ,而且影响治疗及预后 ,由于骨组织是由无机钙盐构成 ,骨盐主要是羟基磷灰石的结晶 ,即磷酸钙和碳酸钙。致组织质硬 ,难以直接制片。必须经过脱钙处理后 ,才能进行常规HE制片、特染及免疫组化检查。然而 ,在临床实践中常因脱钙不全或脱钙过度等原因 ,制作不出良好的组织切片而影响病理诊断。为此 ,笔者对 2 16例骨髓活检标本脱钙时间加以总结 ,并进行改良方法以寻求最佳的制片效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　骨髓活检标本 ,4 %盐酸脱钙液 ,70 %乙醇 ,密闭容器。1.2　方法　标本签收后立即…     

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法梁化印郭瑞峰杜双存刘颖成伟在常规病理切片中，骨组织的制片需在组织充分固定后，于脱水前用适宜的脱钙液脱钙。常规脱钙液品种较多，而脱钙方法并不多，且均耗时较长。特别是当被切制蜡块的软组织中有较大钙化灶时，极易损伤刀刃影响制片...     

骨髓活检标本脱钙方法的比较

在病理外检制片和科研工作中,血液科送检较多的是骨髓活检标本,也是较难制片的组织之一。骨髓石蜡切片需经完全脱钙,才能制成理想的石蜡切片。如何合理有效地选择脱钙液,这对于制片的完整,保存骨髓细胞结构使ＨＥ染色清晰,提高骨髓制片质量是非常重要的。我科从１９９７年初开始采用混合脱钙液代替传统的５％硝酸用于骨髓活检标本脱钙,经实际应用效果良好。１　　材料与方法①　混合脱钙液［１］：甲醛１００　ｍｌ,甲酸８０　ｍｌ,盐酸７０　ｍｌ,三氯化铝６０　ｇ,冰醋酸２５　ｍｌ,生理盐水１００　ｍｌ。②　经１０％甲醛固…     

一种用于制作骨骼组织切片的新脱钙液

在日常病理工作中,对某些骨骼组织需作薄切片观察其细微结构,这就要对骨骼进行脱钙处理.通常使用的脱钙液有以硝酸、盐酸、甲酸为主配制的脱钙液、还有以铬酸和螯合剂配制的脱钙液.     

表面脱钙法在骨髓组织病理诊断中的应用

<正>病理工作中常遇到骨或含骨的组织、伴大片钙化的组织,这些组织无法常规直接制片,传统方法是将这些组织固定后进行脱钙,使钙盐溶解组织变软后再脱水、透明、浸蜡、包埋制片。然而,常规脱钙处理往往导致组织染色效果欠佳、组织抗原丢失及DNA等核酸分子严重片段化等[1],有时     

两种脱钙液对骨髓穿刺组织DNA质量的影响比较

<正>骨髓穿刺组织是病理科常见的标本,随着精准医学的发展和个体化治疗需求的增加,除了进行常规HE染色和免疫组化检测外,还需辅助分子生物学检测。良好的DNA质量是分子生物学检测的前提,脱钙液的选择对DNA质量有重要影响^[1],因此进行分子生物学检测前需要评估脱钙后骨髓穿刺组织DNA质量。混合酸脱钙液和EDTA脱钙液是本科室两种常用的骨髓穿刺组织脱钙液,在常规组织学染色方面已经取得良好的效果,但其对DNA质量的影响尚不清楚。本实验通过提取两种脱钙液脱钙骨髓穿刺组织的DNA,从浓度、纯度、片段长度及RT-PCR检测Ct值比较两种脱钙液对DNA质量的影响,取得较好效果,现报道如下。     

介绍一种简便的组织切片脱汞方法

介绍一种简便的组织切片脱汞方法梁英杰，凌启波在进行某些特殊染色和免疫组化染色时，为了更好地保存组织成分或组织抗原，往往需要选择最佳的固定液。常用的固定液如Ｂ５固定液、Ｚｅｎｋｅｒ固定液，因含有汞盐，在染色前需经脱汞处理。本文介绍的方法是将脱汞的操作过...     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

<正>骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实     

石蜡包埋中骨髓标准化脱钙的应用

骨髓活检是用一支特制的穿刺针在患者髂前上棘或髂后上棘处取出1.0～2.0 cm长、直径0.1～0.2 cm的圆柱形骨髓.骨髓富含钙盐、一定量的脂肪及少许纤维支架,具有组织小而硬、脆、松的特点,必须经过脱钙后才能进行石蜡包埋,制成骨髓切片.本实验经过长期实践,总结出一套骨髓标准化脱钙处理方法,操作安全简便,不仅制成了高质...     

一种简便快捷的骨及钙化组织脱钙液

脱钙是骨组织制片染色技术的关键步骤.在实践工作中以硝酸、盐酸为主配制的脱钙液,脱钙迅速,但对组织破坏程度大,影响以后染色.螯合剂是一种缓慢的脱钙剂,脱钙后染色分化仍佳,酶也不受破坏,但脱钙需花费2周至几个月时间,不能满足病理科日常工作的需求[1].现介绍一种混合脱钙液,它既对组织损害小,又简便快捷.它可促进脱钙并加快脱钙速度,同时又防止纤维性组织过度膨胀,减少对组织的破坏及对染色的影响.经此脱钙液制成的组织切片薄厚均匀,平坦完整,组织形态和细胞清晰,着色鲜艳.     

介绍一种改良脱钙液在骨组织制片中的应用

骨、含有骨质的肿瘤及钙化组织和骨髓穿刺组织很坚硬,将其制成几微米切片相当困难,常用的方法是先经脱钙处理,使其变软后再切片,所以脱钙是这类组织制作病理切片的关键技术.脱钙液和脱钙方法很多,传统方法脱钙一般用硝酸,其效果不稳定,骨组织脱钙不足,切片破碎甚至切不成片且极易脱片;骨组织脱钙过度,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,造成细胞核不着色或着色很浅,从而影响对病变组织的病理诊断.已有学者对此进行了改进[1~4], 但目前尚无公认的理想方法.为此我们在工作中反复摸索,结合Plank-Rycho脱钙液总结出一套改良的脱钙液并获得了满意效果,现将此方法介绍如下.     

一种复合固定脱钙液在临床病理制片中的应用

临床病理检查经常遇到骨及钙化组织标本,常规处理方法是先固定,待充分固定后进行脱钙处理,然后进入常规制片程序,到完成病理诊断需要较长的时间。如何在较短时间内完成固定、脱钙处理,其速度快、效果好,同时制成的切片又和常规处理的不含骨组织的切片一样,不影响对病变组织     

一种简便的组织蜡块表面脱钙法

在常规组织制片中 ,我们经常会遇到含有钙化的组织蜡块或脱钙不全的骨组织蜡块 ,它们往往会使组织切片时破碎不全 ,影响切片的完整 ,给诊断造成困难 ,而且还将会给切片刀带来严重的缺口 ,影响切片刀的再次使用。我们在工作中 ,经过不断的摸索和实践 ,利用组织蜡块直接进行表面脱钙 ,弥补上述不足 ,效果良好 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 (1)常规制片中遇到的含钙化的组织蜡块或脱钙不全的骨组织蜡块。取 5ｍｏｌ/Ｌ盐酸 4 0 75ｍｌ,加水至10 0ｍｌ。 (3)卧式染色缸或培养皿 ,脱脂棉少许。1.2　方法1.2 .1　先将钙化的组织蜡块或…     

骨和牙切片的甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法

骨和牙体组织非常坚硬,将其制成几微米薄切片难度较大。常用的方法是先脱钙,使组织变软后再切片,所以脱钙是非常关键的技术。脱钙不好切片破碎甚至切不成片,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,染色不佳甚至染不上色,无法进行观察和研究。脱钙液和脱钙方法虽然很多,但目前尚无公认的理想方法,为此我们在骨和口腔疾病诊断及在大骨节病、氟中毒骨病和很多口腔疾病实验研究中,证明甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法效果优良。     

石蜡包埋组织块简易快速脱钙法

病理组织制片质量的优劣直接影响病理诊断，在临床病理活检和制片过程中，经常碰到骨组织脱钙不全或碎组织损伤刀口及病变软组织中夹带点状钙化灶，造成切片困难。笔者参考有关文献，在常规脱钙制片基础上不断改进，获得满意的效果，本法简便，快速易行，稳定可靠，有一定实用价值，现介绍如下。     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

介绍一种牙齿组织的制片方法

我们采用不同方法处理60例牙体组织,总结出一种既能较顺利地制成4μm牙齿切片,又能清晰显示牙髓微细结构而无损于细胞和组织的理想制片方法。     

完全脱钙骨基质与骨髓间充质干细胞体外诱导构建组织工程纤维软骨

背景:含有骨形态发生蛋白的完全脱钙骨基质可使骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化并维持其软骨细胞的特性,在软骨发生过程中发挥重要作用.目的:将骨髓间充质干细胞与完全脱钙骨基质在体外诱导培养成纤维软骨组织以及观察培养体系与支架材料对细胞凋亡的影响.方法:采用全骨髓培养法分离培养猪骨髓间充质干细胞,取第1代骨髓间充质干细胞均匀接...