人体对绿脓杆菌O多糖-A毒素结合菌苗的免疫应答

本文报道了人体对免疫5型绿脓杆菌O多糖(O-PS)-A毒素结合菌苗的免疫应答。绿脓杆菌PA103株的培养上清,经硫酸铵沉淀和DEAE纤维素及羟基磷灰石层析纯化制得A毒素,其纯度>95%。用酚水浸出法从绿脓杆菌W-18株获得脂多糖(LPS)后,用脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶和链霉蛋白酶处理纯化,继之以多次超速离心而得纯品。将氧化的O-PS与A毒素起反应偶联到己二酸二酰肼上,成为结合物,经分子筛层析,除菌过滤,冻干而成结合菌苗,内含29.8%O-PS和70.2%A毒素。对20名健康志愿者于0和28天作皮下免     

抗体结合反应的定性分析——一种评估和开发菌苗的体外方法

随着结合菌苗(conjugate vaccines)的发展,在体内试验前迫切需要建立一种能快速、有效地测定结合菌苗安全性和免疫原性的体外方法。本文作者将绿脓杆菌的血清特异性多糖(PS)抗原和其外毒素(Tox A)结合。应用对绿脓杆菌脂多糖(LPS)特异的小鼠和人单克隆抗体(McAb)与液相LPS和PS-Tox A作竞争结合抑制实验。根据在液相中的LPS或PS-Tox A的McAb与固相中的PA220株的LPS 50%抗体结合的抑制(I_(50)值)推算它     

志贺菌O特异性多糖与细菌类毒素结合菌苗的合成、特性及临床评估

以往曾报道1型痢疾志贺菌与破伤风类毒素(TT)结合菌苗的合成及在小鼠中的免疫原性。本文报道2a型福氏志贺菌和宋内志贺菌O特异性多糖(O-SP)与重组绿脓杆菌外蛋白A(rEPA)结合菌苗的合成及其在小鼠中的免疫学特性,并评估了这3种菌苗在成人志愿者中接种后的安全性和免疫原性。 用热酚抽提试验菌的LPS并进行纯化,通过酸水解和离心方法纯化O-SP。采用化学方法使O-SP与rEPA共价结合形成结合菌苗,其中2a型福氏志贺菌和宋内志贺菌O-SP与rEPA的摩尔比率均为4:1。     

QS-21对实验性大肠杆菌O18多糖菌苗的佐剂活性

本文报告了纯化皂苷佐剂QS-21对产生抗大肠杆菌O多糖（PS)、PS结合菌苗以及脱毒脂多糖（LPS）抗体应答的增强作用。 以热酚抽提法从大肠杆菌O18培养物中提取LPS;经酸水解获得PS;用碱处理纯化的LPS得脱毒LPS（dLPS）PS与白喉类毒素结合成PS-白喉类毒素结合菌苗（PS-DT）。分别将游离PS,PS-DT与dLPS单独或与QS-21联合接种小鼠,以检测其免疫原     

绿脓杆菌O多糖-A毒素结合菌苗

绿脓杆菌O多糖(O-PS)-A毒素结合菌苗是将9种血清型的绿脓杆菌O-PS与PA103株所产A毒素经共价结合制成。O-PS系用酚水法提取、并经DNA酶、RNA酶及链霉蛋白酶处理后,再以酸处理自LPS分离而得。A毒素系从培养物的上清液提取。共价结合系将O-PS加0.1M NaIO_4氧化、冻干。用碳二亚胺将己二酸二氢叠氮化合物(ADH)引入A毒素,形成A毒素-ADH。将氧化的O-PS与之等量混合,置22℃6小时后加NaCNBH_3,置于22℃5日,透析后过AcA_(34)柱,收集冻干。以NMRI系小鼠等作毒性试验,以新西兰家     

海带硫酸多糖的提取、纯化及其理化分析

目的研究海带硫酸多糖 (LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质。方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶 ,50℃水解 4h。取滤液加入氯化钙 ,离心去除海藻酸钙。取上清液加入十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)与LPS结合沉淀 ,离心收集CTAB LPS沉淀物。加入氯化钙溶液进行盐解 ,将LPS游离释放出来 ,加入乙醇使LPS析出。离子交换色谱和凝胶过滤色谱法分离纯化其多糖组分。结果酶解提取法的收率为 5‰ ,色谱法分离得到 4个主要多糖组分 ,测定其分子量分别为 2 1 0、1 2 0、40 0和 1 4 0kD。酶解法的提取收率高于水煮法。结论LPS的开发具有广阔的前景     

多价大肠杆菌O多糖-毒素A结合菌苗的合成及鉴定

本文报道了大肠杆菌O多糖(O-PS)与绿脓杆菌毒素A偶联的结合菌苗的合成及特性鉴定.自O1、O2、O4、O6、O7、O8、O12、O15、O16、O18、O25及O75等12个血清型大肠杆菌的脂多糖(LPS)中提取无热原的低分子     

绿脓杆菌脂多糖菌苗对肺炎的保护机理

绿脓杆菌所致肺炎的高死亡率促使人们研究在目前应用的抗菌素方案上加用免疫治疗的可能性。最近在豚鼠中的研究表明,用绿脓杆菌脂多糖(LPS)菌苗免疫可提供对急性肺炎的特异保护作用。本文分析了绿脓杆菌 LPS 菌苗对肺部的局部保护作用的免疫机理。     

用绿脓杆菌提纯的外膜蛋白F(Porin)制品作为小鼠保护性菌苗

作者采用两种方法从绿脓杆菌PA01株、ATCC27585株和ATCC27584株提取蛋白:(1)Hancock等法,从PA01株分离提取外膜,经Sephadex G150-120柱纯化,用改良的Lowry法鉴定,Droge法测定2-酮基-3-脱氧辛酮糖酸(KDO)。另外从PA01株提取脂多糖(LPS)制备兔抗LPS血清,将此血清     

板蓝根多糖对NF-кB活性的作用

观察板蓝根多糖对核因子-кB(nuclearfactor Kappa B,NF-кB)核结合活性的影响.以内毒素(LPS)刺激J744.a.1小鼠的巨噬细胞株,可诱生出较高的NF-кB与DNA结合活性,分别采用LPS预刺激、LPS后刺激和LPS与板蓝根多糖同时刺激等3种方法对其处理,分离核蛋白,进行NF-кB与DNA结合活性测定,结果用光密度扫描定量分析.板蓝根多糖在3种情况下均可降低LPS刺激所致的NF-кB与DNA的结合活性升高.     

破伤风类毒素对甲型副伤寒脱毒脂多糖的免疫增强作用

目的 增强多糖抗原在婴幼儿中的免疫原性,提供有效的免疫保护.方法 采用液体培养,收集菌体,脂多糖(LPS)提取,纯化脂多糖,活化脱毒多糖(O-SP)与破伤风类毒素(TT)共价结合.ELISA法检测O-SP及结合物的免疫效果.结果 单纯甲型副伤寒脱毒脂多糖未能诱导小鼠产生抗体,而与TT结合后,具有良好的免疫原性,能产生体液免疫反应,诱导小鼠产生较高水平的抗脂多糖抗体和抗破伤风抗体.结论 破伤风类毒类对甲型副伤寒脱毒脂多糖具有免疫增强作用.     

灵杆菌LPS的提取纯化与理化性质的初步研究

目的：从灵杆菌菌体中提取纯化脂多糖(lip polysaccharide LPS)类似物，应用于临床疾病治疗。方法：采用酚水法（phenol-water PW)工艺，并测定提取物中核酸、多糖与蛋白含量。结果：酚水法提取物多糖含量为83．31％， 蛋白含量为1．11％。结论：酚水法工艺可以有效提取灵杆菌LPS，提取物中糖类物质含量较高。     

O139型霍乱弧菌多糖与破伤风类毒素结合疫苗的制备及其对小鼠的免疫原性和保护力研究

作者将 O1 39型霍乱弧菌 MO4 5株培养物用热酚 -水抽提、酶促处理和超速离心制得脂多糖 ( LPS) ,然后用乙酸处理 L PS以水解脂质 A-核心连结得到 pm LPS。 L PS含 2×1 0 4内毒素单位 /μg,而 pm LPS仅含 1 0内毒素单位 /μg。用己二酸二酰肼 ( ADH)衍生pm LPS制得衍生 pm L PS,并用 1 -乙基 - 3- ( 3-二甲胺基丙基 ) -碳化二亚胺 ( EDAC)将衍生pm LPS与破伤风类毒素 ( TT)偶合制得pm LPS- TT。反应混合物由 CL - 6 B琼脂糖凝胶渗透层析分离 ,并通过测定 2 80 nm时的光密度测定 TT,通过测定折射率测定多糖。结果显示 ,在…     

人体对绿脓杆菌多糖菌苗的免疫应答

作者用免疫1型(IT-1)绿脓杆菌高分子量多糖菌苗接种人体,从志愿接种者收集其免疫前、后的血清。用定量放射活性抗原-结合试验检测抗体水平,抗原用7株Fishe气免疫型绿脓杆菌制备的1     

5型(免疫型)绿脓杆菌多糖-毒素A联合菌苗

毒素A和脂多糖是绿脓杆菌的重要的毒力因子和保护性抗原,所产生的抗体在抗绿脓杆菌感染中起主要作用。因此,人们设想研制一种包含这两种成份的菌苗,但是,以往努力都告失败。作者通过中介体己二酸二酰肼(ADH)的作用,研制联合菌苗获得成功。方法是从绿脓杆菌脂多糖制备多糖,用0.1M碘酸钠作用2小时加以氧化,然后加乙二醇,去除残留的碘酸钠。溶液用蒸馏水透     

钩端螺旋体脂多糖抗原对仓鼠的实验性免疫

作者用问号钩端螺旋体脂多糖(LPS)及其多糖部分(PS)分别免疫仓鼠和豚鼠,用显微镜凝集试验(MAT)检测抗体应答和获得免疫保护所需的最小抗原量,并探讨了LPS和PS作为菌苗的可能性.钩端螺旋体LPS和PS从哥本哈根血清型钩端螺旋体H_(45)株中提取,高压灭菌PS经121℃15分钟高压制备.把40～70g的金色仓鼠随机分成12组,每组4只,用2.5～100μg含有或不含有50μg胞壁酰二肽(MDP)的LPS或PS皮下免疫.用高压灭菌或未经     

太平洋牡蛎多糖的提取、分离和结构分析

目的　从太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)肉中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法　将牡蛎鲜肉制成丙酮粉,依次采用室温水,60 ℃热水和稀碱提取牡蛎粗多糖,对其总糖含量、蛋白含量和单糖组成进行分析。采用DEAE Sepharose FF阴离子交换和Sephacryl S-400凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对获得的纯化组分采用红外光谱 (IR)、甲基化、气质联用 (GC-MS)、电喷雾质谱 (ESI-MS) 和核磁共振波谱 (NMR) 等方法进行化学结构分析。结果　从牡蛎肉中提取得到了3种牡蛎粗多糖,单糖组成都只含有葡萄糖 (Glc)。对粗多糖进一步分离,得到了5种多糖纯化组分。对水溶性多糖纯化组分 MC-11 的结构进行了分析,表明其是以 →4)-α-D-Glc-(1→ 为主链,含有 →3,4)- β-D-Glc-(1→和 →2,4)- β-D-Glc-(1→ 分支的 D-吡喃型葡聚糖,相对分子质量为1299 kDa。结论　从太平洋牡蛎肉中分离纯化得到了5种多糖组分,并采用多种方法确定了1种纯化组分 MC-11 的结构,为牡蛎多糖结构与活性关系的深入研究提供了基础。     

含有磷酸乙醇胺基的脑膜炎球菌L2及L3,7,9免疫型寡糖-蛋白结合物的制备、特性及免疫原性

脑膜炎球菌B群多糖的免疫原性很弱,目前正研究用外膜蛋白或脂多糖(LPS)作候选菌苗。Jennings等曾将去磷酸化的寡糖(OS)与破伤风类毒素(TT)偶联,但得到的结合物免疫原性不好。本文作者报道了将含有磷酸乙醇胺(PEA)基的OS与蛋白偶联的方法,并对其免疫原性进行了研究。加佐剂Quil A与不加佐剂比较,结果无明显差异。作者首先用热酚水法提取脑膜炎球菌L2及L3,7,9型的LPS,用1%醋酸100℃加热水解,离心(20000g)20分钟去除脂类A,即得到OS,通过Bio-Gel P-2凝胶柱进一步纯化。OS在48%氟化氢中4℃处理48小时即     

用细菌多糖加佐剂口服免疫能提高肺分泌抗体应答和抗肺炎作用

住院的肺炎患者在临床治疗过程中,经常在出血或创伤后发生绿脓杆菌感染,促使病情加重,发病率和死亡率上升。为了确定提高肺内特异性抗原分泌IgA(sIgA)滴定是否能够增强对肺炎绿脓杆菌的抵抗作用,我们应用细菌多糖(Aerobacter Levanicum的果聚糖和绿脓杆菌Ⅰ型多糖)加佐剂(霍乱毒素和霍乱毒素β-亚单位)进行口服免疫,能提高特异性-细菌多糖肺分泌抗体滴度。口服     

传统百日咳菌苗中的脂多糖

用传统方法制备的百日咳全细胞菌苗可以有效地控制婴幼儿百日咳,但这种菌苗中含有能引起不良反应的百日咳杆菌脂多糖(LPS),而日本生产的百日咳无细胞菌苗中已除掉了大部分LPS。作者随机抽取了丹麦哥本哈根国家血清研究所按常规方法于1981～1986年制备的7批百日咳全细胞菌苗,经超声波处理后,用鲎变形细胞溶胞产物试验(LAL)测定菌苗中LPS含量。菌苗是由4个百日咳杆菌株(3803、3825、3843和3860)混合组成。测定结果表明,纯化后的3803株在十二