蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌细胞株BXPC-3移植瘤DPC4 mRNA表达的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌细胞株BXPC-3移植瘤DPC4mRNA表达的影响。方法:采用右腋皮下接种胰腺癌(BXPC-3)肿瘤细胞,经腹腔注射PAMD,连续用药21d。采用荧光定量PCR(Real-timePCR)技术检测肿瘤DPC4基因表达的情况,结果:PAMD高、中、低剂量均能上调BXPC-3荷瘤小鼠瘤组织中DPC4mRNA表达量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P0.01),结论:PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用。     

蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌瘤组织中K-ras蛋白表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对胰腺癌（BXPC-3）荷瘤小鼠肿瘤组织中k-ras蛋白表达的影响。方法：采用蛋白印迹技术（Western-blot）检测肿瘤k-ras蛋白表达的差异。结果：PAMD高、中、低剂量下调BXPC-3荷瘤小鼠瘤组织中K-ras蛋白表达量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）;结论：PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能通过下调K-ras基因蛋白表达,影响TGF-β信号传导通路,从而抑制肿瘤生长。     

蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌瘤组织中DPC4蛋白表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对胰腺癌（BXPC-3）荷瘤小鼠肿瘤组织中DPC4蛋白表达的影响。方法：采用蛋白印迹技术（W estern-blot）检测肿瘤DPC4蛋白表达的差异。结果：PAMD高、中、低剂量上调BXPC-3荷瘤小鼠瘤组织中DPC4蛋白表达量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）;结论：PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能通过上调DPC4基因蛋白表达,影响TGF-β信号传导通路,从而抑制肿瘤生长。     

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p16表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法：通过实时定量PCR（Real-timePCR）技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BXPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p16mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果：PAMD能够显著升高胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p16mRNA表达量。结论：PAMD对胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因表达有关。     

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤裸鼠细胞凋亡相关基因P53蛋白表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对胰腺癌（BXPC-3）荷瘤裸鼠肿瘤组织中P53蛋白表达的影响。方法：通过蛋白印迹技术（Western blotting）观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53蛋白表达的影响。结果：PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53蛋白表达量。结论：PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因P53蛋白的表达有关。     

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p53表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-time PCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53 mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与凋亡相关基因表达有关。     

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3荷瘤小鼠抑瘤作用及外周血TNF-α含量的影响

目的:通过实验研究,探讨蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤小鼠的抑制作用及外周血TNF-α含量的影响。方法:采用体内实验法,按0.2mL.只-1(约含瘤细胞数1×106个)接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制备裸鼠胰腺癌模型,腹腔注射给药21d,停药后次日,称取小鼠体重,摘眼球取血处死小鼠,计算抑瘤率;采用ELISA法检测BXPC-3荷瘤小鼠外周血TNF-α含量。结果:PAMD高、中、低剂量组对BXPC-3荷瘤小鼠均有明显抑制肿瘤生长的作用,在一定剂量内对荷瘤小鼠免疫器官指数无明显影响,PAMD可明显增加荷瘤小鼠外周血TNF-α含量。结论:PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能通过调节机体免疫功能,充分调动细胞因子生物学活性有关。     

针灸对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖及Star5-Foxp3通路影响

目的探索针灸“大椎穴”调节肿瘤免疫抑制的作用机制。方法将48只雄性Balb／c小鼠随机分为电针组、艾灸组、荷瘤组和正常组,每组12只。在小鼠左腋皮下接种H22肿瘤细胞,建立肿瘤模型。分别采用电针、艾灸大椎治疗。观察生存率、抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数。AlamarBlue法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖,增殖能力以还原值表示。RT—PCR方法检测脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5b mRNA以及胸腺Foxp3 mRNA表达。结果艾灸组荷瘤小鼠生存率高于荷瘤组,但差异无统计学意义（P〉0．05）：艾灸组抑瘤率为39．3％：电针组与艾灸组荷瘤小鼠脾脏指数较荷瘤组升高（P〈0．05）：电针组与艾灸组荷瘤小鼠胸腺指数较荷瘤组胸腺指数升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）。AlamarBlue法检测电针组、艾灸组、荷瘤组小鼠脾淋巴细胞增殖还原值均高于正常组（P〈0．05）：艾灸组还原值高于荷瘤组（P〈0.05）：荷瘤组小鼠脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5b mRNA表达较正常组增高（P〈0．05）：艾灸组、电针组小鼠脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5b mRNA较荷瘤组表达降低（P〈0．05）：荷瘤组小鼠胸腺Foxp3 mRNA表达较正常组增高（P〈0．05）：艾灸组小鼠胸腺Foxp3 mRNA表达较荷瘤组降低（P〈0．05）：电针组小鼠胸腺Foxp3 mRNA表达较荷瘤组降低,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论艾灸治疗具有抑制H22荷瘤小鼠瘤体生长、提高H22荷瘤小鼠生存率的趋势：电针和艾灸治疗能提高H22荷瘤小鼠脾脏指数、增强H22荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力：针灸调节肿瘤免疫抑制效应与电针和艾灸下调H22荷瘤小鼠脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5b mRNA表达,胸腺Foxp3 mRNA表达有关。     

北豆根调控K-ras与DPC4蛋白表达的研究

目的:观察北豆根提取物蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤鼠肿瘤组织中k-ras与DPC4蛋白表达的调控作用,探讨其抗胰腺癌的相关机制。方法:蛋白印迹技术检测肿瘤组织中kras和DPC4的蛋白表达,探讨PAMD抗胰腺癌作用的相关靶点。结果:PAMD三个给药剂量组均能降低BXPC-3荷瘤鼠瘤组织中K-ras蛋白表达,增加DPC4蛋白表达,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:PAMD通过下调K-ras蛋白表达,上调DPC4蛋白表达,影响TGF-β信号传导通路,抑制BXPC-3肿瘤生长,从而达到对BXPC-3的治疗目的。     

朱砂七总蒽醌对S180荷瘤小鼠凋亡基因表达的影响

[目的]观察朱砂七总蒽醌对S180荷瘤小鼠凋亡基因c—mye、Bcl-2和突变型p53表达的影响。[方法]建立S180荷瘤小鼠模型,分成4组：模型对照组,阳性对照环磷酰胺组和朱砂七总蒽醌大、小剂量组,灌胃给药第11天,取各组小鼠的瘤组织,采用实时定量PCR法检测各组小鼠肿瘤组织c—mye、Bcl-2和突变型p53基因的表达。[结果]朱砂七总蒽醌1．2g／kg和0．3g,kg剂量组c—mye、Bcl-2和突变型p53mRNA表达量较模型组均显著降低,与模型组比较有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。[结论]朱砂七总蒽醌对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用可能是通过下调小鼠S180瘤组织c—myc、Bcl-2和突变型p53mRNA的表达而实现的。     

蝙蝠葛酚性碱对人胰腺癌荷瘤裸鼠移植瘤形态学的研究

目的: 观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠移植瘤的抑制作用及其病理形态学影响。 方法: 雌性的裸鼠40只,被接种人源性的胰腺癌细胞株BxPC-3于裸鼠的右腋皮下,主要用于建立人胰腺癌皮下异位移植瘤的实验动物模型。24 h后用随机法将其分为5组,每组8只,分别为PAMD高、低剂量组(20,10 mg ·kg^-1)5-氟尿嘧啶(5-FU)组(20 mg ·kg^-1),模型组和正常组。PAMD与5-Fu组ip给药,模型组与正常组则给予同体积的生理盐水,但正常组不接种瘤株,给药20 d后,按照相关的公式计算其抑瘤率;在光镜和透射电镜下,观察PAMD对移植瘤组织病理形态学的影响。 结果: 与正常组比较,模型组瘤重明显增加(P<0.01), 肿瘤组织的病理形态和超微结构瘤细胞胞体变大,核浆比例失调,病理性核分裂象增大,核浆比例增大;与模型组比较,PAMD高、低剂量组和5-Fu组对胰腺癌BxPC-3荷瘤裸鼠的瘤组织生长都有一定的抑制作用(P<0.05),其抑瘤率分别为51.67%,37.26%,33.58%,通过光镜和透射电镜显示,PAMD对肿瘤组织的病理形态和超微结构均有一定的改善作用。 结论: PAMD能够有效的抑制胰腺癌细胞株BxPC-3荷瘤裸鼠肿瘤细胞的生长,PAMD高、低剂量组对BxPC-3荷瘤裸鼠瘤组织的病理形态学变化,具有一定的改善作用。     

人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管的影响

目的探究人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成的影响。方法裸鼠背侧近右后肢处sc胰腺癌SW-1900细胞建立胰腺癌皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为对照组及人参皂苷Rg3低、高剂量(10、20 mg/kg)组。给药组ip人参皂苷Rg3,对照组ip0.9%氯化钠溶液,每2天1次,连续4周。给药结束3d后裸鼠脱颈椎处死,取瘤组织。采用免疫组化法检测各组裸鼠瘤组织中内皮细胞标记物CD31表达,计算微血管密度;采用qRT-PCR和Westernblotting法检测各组裸鼠瘤组织中血管内皮钙黏素(vascularendothelialcadherin,VE-cadherin)、络氨酸激酶受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,人参皂苷Rg3组胰腺癌裸鼠皮下移植瘤质量显著降低(P<0.05),微血管密度显著降低(P<0.05),VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可能通过调控VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达,从而抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成。     

消瘕方抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的实验研究

目的:研究消瘕方对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株裸小鼠移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:以体外培养的人乳腺癌MDA-MB-435细胞接种于裸小鼠右腋部位制造裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为生理盐水组、5-氟尿嘧啶组及消瘕方小,中,大剂量组,每组小鼠予以相应药物治疗6周后脱颈处死,称瘤重,计算肿瘤生长抑制率,并采用RT-PCR法、免疫组化法检测肿瘤组织中VEGFmRNA及蛋白的表达。结果:消瘕方可抑制乳腺移植瘤生长,降低瘤体内VEGFmRNA表达(P<0.05),下调相应VEGF蛋白表达(P<0.05),其中以中剂量组效果更明显。结论:消瘕方的抑瘤作用与其下调瘤体内VEGF表达密切相关。     

苦参素通过sHH信号通路抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力研究

目的:研究苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及机制。方法:在体外培养胰腺癌细胞株,不同浓度的苦参素在不同时间点干预胰腺癌细胞,在现象层面,应用MTT法检测胰腺癌细胞的增殖能力; 应用Transwell小室检测细胞的侵袭能力。在机制层面,应用Real time PCR和Western blot在转录水平和蛋白水平检测程度,并通过基因转染技术构建高表达sHH的胰腺癌细胞株,进一步验证苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及sHH通路的作用。结果:高浓度组(40 μmol/L)苦参素与低浓度组(20 μmol/L)相比,明显抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力。在mRNA和蛋白水平,苦参素可明显抑制肿瘤细胞sHH信号通路,降低sHH(P<0.05)和 GLI-1的表达水平(P<0.05)。构建高表达sHH的胰腺癌细胞株Panc-1-sh-sHH,苦参素对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的抑制程度明显强于高表达sHH的胰腺癌细胞Panc-1-sh-sHH。结论:苦参素通过抑制sHH信号通路,减弱胰腺癌细胞增殖和侵袭能力。     

乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤中血管内皮生长因子表达的影响

目的研究乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达及肺转移的影响。方法将体外培养的MA-891小鼠乳腺癌细胞接种于TA2小鼠右腋部皮下,造成小鼠移植瘤肺转移模型,同时予乳宁Ⅱ号治疗。结果乳宁Ⅱ号可抑制移植瘤生长,减少肺转移的发生(P<0．05),降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达(P<0．05)。结论乳宁Ⅱ号可通过降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达,发挥抑瘤和抗转移作用。     

清胰化积方在晚期胰腺癌治疗中可抑制MMP-2表达

目的:研究清胰化积方干预后MMPs的表达变化对胰腺癌肝转移的影响。方法:通过脾脏注射法建立裸鼠人胰腺癌SW1990HM肝转移模型,观察清胰化积方干预后对胰腺癌肝转移灶增殖的影响,通过检测MMPs mRNA表达的变化观察其与肝转移灶之间的关系,并通过免疫组化和western blot进一步验证。结果:①与NS组相比,QYHJ各组均可抑制肝转移灶的增殖生长(P<0.05);②与NS组比较,QYHJ干预后,大、中、小剂量组的肝转移灶肿瘤组织中MMP-1、MMP-7、MMP-9的mRNA表达无明显差异(VS NS,P>0.05);MMP-2的mRNA表达下调(VS NS,P<0.05)。结论:清胰化积方可能通过诱导MMP-2的表达下调抑制胰腺癌肝转移的发展。     

中药复方WCA-P及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞悬液裸小鼠皮下接种瘤的影响

目的:通过Bx PC-3细胞株悬液造成胰腺癌裸小鼠皮下接种瘤模型,研究中药复方WCA-P及其拆方对皮下瘤的影响。方法:以人胰腺癌Bx PC-3细胞株悬液对裸小鼠进行皮下接种成瘤,随机分为复方组、清热解毒组、健脾组、5-FU组和空白对照组,分别予以相应治疗药物,观察各组抑瘤率,并检测血清NK及CA199水平。结果:空白对照组小鼠非灌胃死亡率高,消瘦明显,中药干预小鼠非灌胃死亡率低,营养状况较好。实验结束时,空白对照组小鼠体质量明显轻于健脾组和复方组(P0.05);清热解毒组小鼠体质量轻于健脾组、复方组和5-FU组,健脾组小鼠体质量重于复方组和5-FU组,复方组小鼠体质量重于5-FU组,但差异均无统计学意义(P0.05)。空白对照组小鼠血清NK水平低于5-FU组、健脾组和复方组(P0.01),复方组血清NK水平最高。各药物干预治疗组血清CA199水平均低于空白对照组(P0.01)。结论:中药及腹腔化疗可以改善人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠的营养状况和体质量;中药,尤其是含有健脾作用的中药复方可提高人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠血清NK水平并降低CA199水平,并可能对人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠的带瘤生存期有延长趋势。     

熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用

目的探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用。方法选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型。随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组。连续给药14天,空白组给予0.9%Na Cl溶液。每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P0.01)。不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性。并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高。结论熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用。