高浓度葡萄糖对乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α基因表达的影响

目的：观察高糖对不同状态下乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α（TNF—α）基因表达的影响,探讨TNF—α在糖尿病心肌病的非特异性炎症中的作用机制。方法：体外培养乳鼠心肌细胞,分别用不同浓度的葡萄糖（0、20、30、50mmol／L）干预正常心肌细胞、胰岛素抵抗心肌细胞,采用逆转录聚合酶链反应检测细胞TNF-α mRNA的表达水平,并在透射电镜下观察心肌细胞结构的变化。结果：（1）在50mmol／L葡萄糖作用下,正常心肌细胞TNF—α mRNA表达（0．58±0．03）明显高于20mmol／L（0．27±0．02）、30mmol／L（0．29±0．05）葡萄糖作用的正常心肌细胞,而后两组之间比较无统计学差异。（2）胰岛素抵抗心肌细胞在0、20、30、50mmol／L葡萄糖作用下,各组心肌细胞TNF-α mRNA表达均有显著性差异（P〈0．05）,并随着葡萄糖浓度的提高,TNF—α mRNA表达越高;在相同浓度葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞TNF—α mRNA表达明显高于正常心肌细胞。（3）在高浓度葡萄糖作用下,正常心肌细胞和胰岛素抵抗心肌细胞出现线粒体肿胀,髓样结构形成,胞内脂滴增多等细胞结构损伤性改变。结论：高糖作用下胰岛素抵抗心肌细胞TNF—α mRNA表达明显增加,引起胞内脂滴增多等细胞结构变化。     

高糖对体外培养的乳鼠心肌细胞脂代谢的影响

目的探讨高浓度葡萄糖对高胰岛素水平作用下乳鼠心肌细胞脂代谢的影响。方法用胰岛素抵抗心肌细胞模型,以不同浓度葡萄糖培养基和胰岛素为干预因素进行实验。以脂蛋白脂肪酶的表达来观察心肌细胞脂代谢的改变;用电镜观察心肌细胞的病理性损伤。结果80 mmol/L葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞的脂蛋白脂肪酶mRNA的表达及活性明显增强(P<0.05);加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,脂蛋白脂肪酶mRNA的表达及活性减弱;不同浓度葡萄糖作用下,相同状态心肌细胞脂蛋白脂肪酶活性及脂质含量无显著性差异(P>0.05);相同浓度葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞脂质含量明显增加(P<0.05),加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,细胞脂质含量减少。高浓度葡萄糖作用下,正常心肌细胞和胰岛素抵抗心肌细胞出现线粒体肿胀,髓样结构形成,胞内脂滴增多等细胞结构损伤性改变,加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,细胞线粒体无增多及肿胀,胞内脂滴减少。结论胰岛素抵抗心肌细胞脂蛋白脂肪酶表达上调,脂代谢加速,细胞内脂质含量增加,脂蛋白脂肪酶mR-NA表达强度增加,细胞结构发生变化,而较高胰岛素水平可逆转这些变化的发生。     

运动对胰岛素抵抗小鼠PPAR-y、Glut-4表达的影响

目的：观察运动对高脂饮食诱导的,产生胰岛素抵抗的小鼠骨骼肌组织过氧化物酶体增殖物激活受体-y（PPAR-y）、葡萄糖转运体-4（Glut-4）表达的影响,初步探讨游泳训练改善胰岛素抵抗的作用机制。方法：将30只8周龄健康雄性C57BL／6J小鼠随机分为三组：正常饮食组（10例）、高脂饮食组（10例）和高脂饮食＋运动组（运动组,10例,进行为期12周的游泳训练）。每周测小鼠体重和空腹血糖（FBG）。游泳训练12周后,以放射免疫法测空腹血胰岛素（FINS）,并计算胰岛素抵抗指数（IRI）;逆转录聚合酶链式反应法检测骨骼肌组织PPAR．7、Glut-4mRNA的表达。结果：与正常饮食组比较,高脂饮食组体重明显增加;运动组较高脂饮食组体重明显减轻（P〈0．05）。高脂饮食组和运动组FINS、FPG、IRI水平均较正常饮食组明显升高（P〈0．01）。与高脂饮食组相比,运动组FINS[（14．00±7．12）mmol／L比（10．17±3．88）mmol／L]、FPG[（9．49±1．28）mmol／L比（8．03±1．67）mmol／L]、IRI[（1．47±0．38）比（1．06±0．27）]水平明显降低（P〈0．05）,PPAR—y[（0．95±0．17）比（2．37±0．41）]、Glut-4 mRNA[（0．68±0．24）比（1.54±0.28）]表达明显增加（P〈0．01）。结论：运动可明显改善胰岛素抵抗,其机制可能与上调骨骼肌PPAR吖及Glut-4mRNA的表达,调节糖代谢,促进胰岛素信号转导有关。     

抑制p38MAPK对大鼠缺血再灌注损伤心肌中TNF—α表达及细胞凋亡的影响

目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法：将30只SD大鼠按随机数字法随机均分为空白对照组、缺血再灌注组和抑制剂组,各10只。检测各组p38MAPK mRNA表达,TNF—α水平及心肌细胞凋亡率,并进行比较分析。结果：与空白对照组比较,缺血再灌注组TNF-α[（3．68±0．16）μg／L比（5．02±0．09）μg／L3、p38MAPK mRNA的表达[（1．76±0．46）比（2．35±0．02）]和心肌细胞凋亡率[-（3．51±0．40）％比-（1．8±0．23）％]显著升高（P均=0．001）。抑制剂组p38MAPK mRNA的表达[（2．09±0．16）]、TNF-α水平[（4．15±0．11）μg／L]及心肌细胞凋亡[-（2．9±0．50）％]均较缺血再灌注组显著降低（P均=0．001）。结论：通过抑制大鼠心肌p38丝裂原活化蛋白激酶的表达能减少肿瘤坏死因子-α的生成,减少心肌细胞凋亡,进而减轻心肌细胞缺血再灌注损伤。     

金银花提取物对小鼠肝脏和人肝细胞PGC—1α表达及胰岛素抵抗的影响

目的检测金银花提取物对小鼠肝脏和L02细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体7（PPARy）共激活因子1α（PGC--1α）表达及对胰岛素抵抗（IR）的影响。方法分别将ob／ob小鼠、C57／B6J小鼠和L02细胞随机分为对照组和实验组,实验组给予金银花提取物,对照组给予生理盐水。给药后检测小鼠肝脏和L02细胞PGC-1α表达。结果与对照组相比,实验组ob／ob小鼠给予金银花提取物后肝脏PGC-1α mRNA和蛋白表达下调（P〈0．05或P〈0．01）;而实验组C57／B6J小鼠给药后肝脏PGC-1α mRNA表达与对照组比较无统计学差异。给药5d后实验组ob／ob小鼠FPG降低,但实验组与对照组组间胰岛素水平无统计学差异,实验组FPG／FIns比值显著降低。胰岛素耐量实验显示金银花提取物改善了ob／ob小鼠的IR。脂肪酸培养L02细胞,给予金银花提取物后PGC-1α mRNA表达下调（P〈0．05）,而正常培养I．02细胞PGC-1α mRNA表达无变化。结论金银花提取物可以下调PGC-1α在肝脏中的病理性高表达,降低血糖,改善IR。     

肿瘤坏死因子α诱导脑血管内皮细胞产生病理性一氧化氮的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF—α）作用于脑血管内皮细胞产生病理性一氧化氮（NO）的机制。方法体外培养肿瘤坏死因子受体（TNFR1）基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞（BVEC／RI）和野生型小鼠脑血管内皮细胞（BVEC）,分别给予5ng／ml TNF-α刺激24h后,应用PCR技术、Western blot方法、硝酸还原酶法,测定两种细胞的诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因mRNA和蛋白表达量以及所分泌的一氧化氮（NO）含量。结果①给予TNF—α刺激后,野生型BVEC的iNOS mRNA表达增加,BVEC／RI的iNOS mRNA表达未出现明显变化。②给予TNF—α刺激后,野生型BVEC的iNOS蛋白表达量（0．91±0．08）高于未给予TNF-α的BVEC（0．15±0．02）,差异有统计学意义,P〈0．05;BVEC／RI的iNOS蛋白表达量（0．21±0．06）与未给予TNF—α的BVEC／RI（0．30±0．05）相比,差异无统计学意义,P〉0．05。③给予TNF-α刺激后,野生型BVEC的NO含量[（58．6±2．6）μxmol／L]高于未给予TNF—α的BVEC[（18．1±4．3）μmol／L],差异有统计学意义,P〈0．05;BVEC／RI的NO含量[（21．2±3．5）μmol／L]与未给予TNF-α的BVEC／RI[（16．9±3．4）μmol／L]相比,差异无统计学意义,P〉0．05。结论TNF—α可能通过作用于脑血管内皮细胞TNFR1增加iNOS表达,从而增加病理性NO产生。     

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素表达的影响

目的观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素（visfatin）表达的影响和探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的机制。方法采用RT—PCR法检测不同浓度小檗碱和不同作用时间后，3T3-L1脂肪细胞内脂素mRNA的表达，并以Western印迹方法检测其蛋白水平的表达。结果0～10μmol／L小檗碱剂量依赖性地增加内脂素mRNA的表达，其中10μmol／L时最明显，是空白对照组的4．96倍，其后随着小檗碱浓度的进一步增加，内脂素mRNA的表达反而降低；10μmol／L的小檗碱作用3h后内脂素mRNA的表达开始明显增强，至作用12h时表达增强最明显，是基础组的4．57倍，随着作用时间的延长内脂素mRNA的表达虽然有所下降，但到48h时内脂素mRNA的表达仍比空白对照组明显增高；5、10、20μmol／L的小檗碱均可使内脂素蛋白的表达增加1．13、2．46、2．34倍，与空白对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论在一定浓度范围内小檗碱可剂量和时间依赖性地促进离体脂肪细胞内脂素mRNA及蛋白表达。小檗碱对内脂素表达的调节作用可能是其改善机体胰岛素抵抗、降低血糖的机制之一。     

阿托伐他汀通过PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌TNF-α表达的研究

目的：观察阿托伐他汀下调老年大鼠心肌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的作用及其与过氧化物酶体增殖物激活型受体β／δ（PPARβ／δ）信号通路之间的关系。方法：分离培养24个月龄大鼠的心肌细胞,将心肌细胞分为空白对照组、溶剂对照组、阿托伐他汀组、阿托伐他汀＋PPARβ／δ拮抗剂GSK0660组。各组细胞分别加入细胞培养液、二甲基亚砜（DMSO）、阿托伐他汀、阿托伐他汀＋GSK0660处理。用RT—PCR方法检测各组大鼠衰老心肌细胞的TNF-αmRNA表达水平,用westernblot方法检测各组TNF-α蛋白含量。结果：（1）与空白对照组相比,溶剂对照组大鼠衰老心肌细胞的TNF-α mRNA和蛋白水平均无显著差异;（2）与空白对照组相比,阿托伐他汀组的TNF-α mRNA和蛋白水平含量均显著降低（P〈0．01）;（3）阿托伐他汀＋GSK0660组的TNF-α mRNA表达水平及蛋白含量均显著高于阿托伐他汀组,但仍低于空白对照组（P〈0．05）。结论：阿托伐他汀可通过激活PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌细胞TNF—d的表达。     

pSS—CAD—Proins载体的构建与细胞水平功能鉴定

目的构建可随ATP浓度变化而在内质网与葡萄糖反应蛋白78（GRP78）可逆性结合与解聚的人胰岛素原基因表达载体,并研究其在HepG2细胞中的表达及葡萄糖对其分泌的影响。方法人工合成含胰岛素信号肽（ss）及条件结合／解聚区域（CAD）的多聚核苷酸链,将其与人胰岛素原基因相连,构建SS—CAD-人胰岛素原表达载体（pSS-CAD-Proins）,将其经脂质体转染HepG2细胞,于不同浓度葡萄糖的培养液中培养,检测培养液中的胰岛素浓度并提取细胞总RNA。结果成功构建pSS-CAD-Proins表达质粒。转染HepG2细胞后48h,在葡萄糖浓度分别为5、15及25mmol／L的培养基中,胰岛素分泌量分别为（4．73±0．52）、（8．84±0．43）及（14．15±0．32）mU／L,不同葡萄糖浓度诱导的胰岛素mRNA表达量明显不同。结论pSS—CAD-Proins载体能够在HepG2细胞中成功表达,并且胰岛素的分泌及转录受葡萄糖的调控。     

叉头状转录因子O1与吡格列酮干预对肝癌HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响

目的研究叉头状转录因子O1（FoxO1）及吡格列酮干预对高胰岛素诱导的肝癌HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响及机制。方法1×10^-6mol／L胰岛素培养HepG．2细胞24h后,诱发培养基葡萄糖消耗减少建立细胞模型,将细胞分为对照组、空白质粒组、FoxOlsiRNA载体组、1×10^-5mol／L吡格列酮组。以普通培养基培养的细胞作为空白对照组。37℃、5％CO2培养箱中孵育24h,葡萄糖氧化酶法检测培养基中葡萄糖含量,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测FoxO1mRNA和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）mRNA表达,Westernblot法检测PPAR-γ蛋白表达。将FoxO1mRNA、PPAR-γ mRNA、PPAR-γ蛋白表达与葡萄糖消耗量进行相关分析和曲线拟合。采用单因素方差分析及多样本均数两两比较进行统计学分析。结果高胰岛素培养24h较未诱导细胞培养基的葡萄糖消耗降低[分别为（1．36±0．03）和（2．93±0．05）mmol／L,P〈0．01],细胞Fox01mRNA升高（分别为0．513±0．016和0．425±0．011,P〈0．05）,PPAR-γmRNA降低（分别为0．260±0．025和0．441±0．012,P〈0．05）,PPAR-γ蛋白降低（分别为0．312±0．032和0．600±0．046,P〈0．05）。在抑制FoxO1和吡格列酮干预后此趋势有所缓解,逐渐接近于空白对照组。FoxO1mRNA、PPAR-γ mRNA和PPAR-γ蛋白表达与葡萄糖消耗量高度相关。结论FoxO1表达升高或降低对葡萄糖代谢产生不利影响;增强PPAR-γ表达可有效恢复高胰岛素诱导的高糖,增加肝细胞的胰岛素敏感性。     

高血糖对缺氧及非缺氧条件下培养的大鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达的影响及机制

目的 探讨血糖对缺氧状态及非缺氧状态下大鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的作用及机制. 方法 体外培养新生大鼠的心肌细胞,给予不同的处理因素培养6h,具体分组为:(1)正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖);(2)氯化钴(Cocl_2)模拟缺氧组(5.5mmol/L葡萄糖+400μmol/L Cocl_2);(3)高葡萄糖组(11.1、22.2、33.3 mmol/L葡萄糖);(4)Cocl_2(模拟缺氧)+高葡萄糖组(11.1mmol/L葡萄糖+400μmol/L Cocl_2,22.2mmol/L葡萄糖+400mmol/L Cocl_2>,33.3mmol/L葡萄糖+400μmol/Lcocl_2);(5)高葡萄糖+抗氧化剂α-tocopherol组(33.3mmol/L葡萄糖+100μmol/L α-tocopherol);(6) Cocl_2(模拟缺氧)+高葡萄糖+α-tocopherol组(33.3mmol/L葡萄糖+400μmol/L Cocl_2+100μmol/L α-tocopherol).观察高葡萄糖、Cocl_2、高葡萄糖合并氯化钴对HIF-1α mRNA及蛋白表达的影响,以及给予α-tocopherol阻断氧化作用后,高葡萄糖、高葡萄糖合并Cocl_2对HIF-1α mRNA及蛋白表达影响的变化.结果 (1)与正常对照组相比,Cocl_2模拟缺氧后,大鼠心肌细胞HIF-1α的表达增加;(2)在非缺氧状态下,随着葡萄糖浓度(5.5、11.1、22.2、33.3mmol/L)的增加HIF-1α的表达逐渐增加;(3)Cocl_2合并高葡萄糖培养条件下,随着葡萄糖浓度(5.5、11.1、22.2、33.3mmol/L)的增加,大鼠心肌细胞HIF-1α的表达逐渐减弱;(4)高葡萄糖合并α-tocopherol(33.3mmol/L Glu+100 μmol/L α-tocopherol)培养条件下,大鼠心肌细胞HIF-1α的表达较单纯高葡萄糖(33.3mmol/L)时减弱;(5)Cocl_2合并高葡萄糖及α-tocopherol(33.3mmol/L Glu+400 μmol/L Cocl_2+100μmol/L α-tocopherol)的培养条件下,HIF-1α的表达较同样氯化钴合并高葡萄糖(33.3mmol/L Glu+400μmol/L Cocl_2)时增加. 结论 葡萄糖对非缺氧状态下培养的大鼠心肌细胞HIF-1α的作用是增强其表达,而对缺氧状态下培养的大鼠心肌细胞HIF-1α的作用是减弱其表达,其机制可能涉及活性氧(ROS)信号转导系统及氧化应激反应.     

胰岛α细胞胰岛素抵抗与炎症通路激活的关系及机制

目的探讨高脂饲养大鼠胰岛α细胞炎症通路分子基因的表达变化及吡格列酮干预的影响。方法8周龄雄性SD大鼠随机分为3组（每组15只）：正常饲养组（NC）、高脂饲养组（HF）、高脂＋吡格列酮组（HP）。喂养20周后检测空腹血胰岛素（Fins）、胰高血糖素（Glc）、游离脂肪酸（FFA）、高敏C反应蛋白（hsCRP）水平;正常血糖高胰岛素钳夹试验评价外周胰岛素抵抗程度;离体胰岛细胞表面灌注检测高糖状态Glc分泌的动态变化,同时3组大鼠各随机人组8只给予大剂量链脲菌素去β细胞处理,分为正常去β细胞组（NC-B）,高脂去β细胞组（HF-B）,高脂＋吡格列酮去母细胞组（HP—B）,采用定量PCR方法比较3组去母细胞大鼠α细胞NF-κB、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）mRNA表达的情况。结果（1）HF组葡萄糖输注率（GIR）明显低于NC组,血Fins、Glc、FFA及hsCRP水平均显著高于NC组;而HP组以上各项指标较HF组均明显改善。（2）胰岛细胞表面灌注,HF组基础Glc的分泌高于NC组（P〈0．01）,16．7mmol／L葡萄糖灌注后HF组胰岛的Glc分泌未受抑制,HP组与NC组比较差异无统计学意义。（3）与NC-B组相比,HF-B组α细胞NF-κB mRNA的表达增高20．5％,IκBα mRNA表达降低24．3％（P值均〈0．01）。HP-B组较HF．B组NF-κB、IκBα mRNA分别改善78．3％、58．8％。（4）HF组血FFA水平与GIR呈负相关（r=-0．675,P〈0．01）;与NF-κB mRNA表达呈正相关（r=0．775,P〈0．05）。结论高脂饲养导致胰岛α细胞胰岛素抵抗,同时激活了α细胞炎症通路基因的表达且与FFA升高有关。吡格列酮干预能改善上述变化。     

高浓度葡萄糖、脂肪酸和糖皮质激素对PDX-1表达和胰岛素分泌功能的影响

SD大鼠胰岛细胞分别在含5.6mmol／L葡萄糖、33mmol／L葡萄糖、0．6mmol／L软脂酸或20nmol／L地塞米松培养液中培养3d，RIA测定基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌量，免疫组化法测定细胞内胰十二指肠同源盒蛋白1（PDX-1）蛋白表达和原位杂交法测定细胞内PDX-1 mRNA表达。结果显示高浓度葡萄糖、脂肪酸和糖皮质激素对PDX-1蛋白表达和胰岛素分泌均有抑制作用。     

白细胞介素1β和干扰素γ对小鼠胰岛素瘤βTC-6细胞胰岛素分泌功能的影响

目的探讨炎性细胞因子白细胞介素1β（IL-1β）、干扰素γ（IFN-γ）对小鼠胰岛β细胞株βTC-6胰岛素分泌功能的影响。方法将βTC-6细胞培养于高糖DMEM培养基,48h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min,分别于含0、1．38、5．50和11．10mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平（GSIS）。在BTC-6细胞中分别加入不同浓度的IL-1β（0．15、1．50μg／L）和（或）IFN-γ（10、100U／m1）,24h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min,在含1．38mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平。多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间数据比较采用t检验。结果βTC-6细胞在1．38mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌达高峰,与无葡萄糖刺激时相比差异有统计学意义[（151±14）对（120±4）mU／L,t=-4．215,P=0．006];5．50、11．10mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌较1．38mmol／L葡萄糖刺激时明显下降（均P〈0．05）。与单纯1．38mmol／L葡萄糖刺激组相比,IL-1β（0．15μg／L）组[（85．53±5．06）mU／L对（103．11±0．27）mU／L,t=4．897,P=0．039]、IL-1β（1．50μg／L）组[（62．62±0．64）mU／L对（103．11±0．27）mU／L,t=212．66,P〈0．001]葡萄糖刺激下胰岛素分泌水平显著下降,下降程度与IL-1β的剂量呈正相关;与单纯葡萄糖刺激组相比,IFN-γ（100U／m1）组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降[（73．2±1．6）对（105．2±1．8）mU／L,t=19．52,P：0．003];与IL-1β（0．15μg／L）组及IFN-γ（100U／m1）组相比,IL-1β联合IFN-γ组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降（F=77．38,P〈0．001）。结论IL-1β和IFN-γ对13TC-6细胞的胰岛素分泌功能有抑制作用,且两者间具有协同效应。     

TNF-α和IL-6血清检测在儿童急性病毒性心肌炎诊断中的价值

目的探讨急性病毒性心肌炎患儿血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）水平变化及其临床价值。方法应用放射免疫法（RIA）和酶联免疫法（EIISA）,检测53例急性病毒性心肌炎患儿及20名健康儿童血清中TNF—α及IL-6含量。结果心肌炎组血清TNF—α和IL-6水平分别为（526．7±32．9）mg／L和（3．23±0．53）mg/L,而健康组分别为（383．1±27．5）mg／L和（1．63±0．22）mg／L,二者相比差异有统计学意义（P〈0．05）;临床治愈后,心肌炎组TNF—α及IL-6分别降至（407．3±34．4）mg／L和（1．97±0．29）mg／L,与正常组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论检测TNF—α及IL-6血清水平及其变化,有助于判断急性病毒性心肌炎患儿病情及心肌损害程度。     

运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：研究游泳运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗和血清脂肪因子及TNF-α和IL-1的作用。方法：雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常饮食组（RD）、高脂饮食组（HFD）和高脂饮食后运动组（HFDE）,游泳运动训练前后检测大鼠胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和血清脂肪因子及TNF-α、瘦素（leptin）与IL-1的水平。结果：与HFD组相比,游泳运动降低了HFDE组的HOMA-IR（14．2±1．2vs7．9±0．8,P〈0．05）,降低了血清脂肪因子及TNF-α和IL-1的水平（FFA：0．4±0．1vs0．6±0．2mmol／L,leptin：1．6±0．8VS2．9±0．9ng／ml,TNF-α：92．0±18．8VS101．3±23．8pg／ml,IL-1：45．8±10．4 vs72．1±13．7pg／m1,P均〈0．05）。结论：运动降低了高脂饮食诱导的肥胖大鼠的血清脂肪因子以及leptin、TNF-α和IL-1水平,改善了胰岛素抵抗。     

粉防己碱对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞前炎症因子的影响

目的：研究粉防己碱对离体培养的大鼠心肌细胞在缺氧／复氧条件下对前炎症因子：肿瘤坏死因子（TNF—α）、自细胞介素-1（IL-1G）、白细胞介素-6（IL-6）的影响。方法：乳鼠心肌细胞体外培养心肌细胞成功后,随机分为三组：对照组、缺氧／复氧（A／R）组、粉防己碱（Tet）组。对照组：不进行A／R处理,正常情况下持续培养26h;A／R组：在高纯度氩气,无糖无血清培养基条件下培养2h,复氧开始时加入0．9％盐水,再复氧培养24h;Tet组：预先给予终浓度为30μmol／L的Tet孵育60min,再在无血清低糖DMEM培养基缺氧孵育2h,然后继续复氧培养24h;检测各组在复氧24h后的TNF-α、IL-1β、IL－6的水平。结果：试验24h后A／R组、Tet组前炎症因子TNF－α[（682．65±32．59）、（388．94±17．22）],IL～1β[189．11±8．29）,（109．46±7．62）],IL－6[（78．45±2,74）、（40．91±1．53）]水平（pg／ml）均较对照组的[（211．44±14．20）,（59．64±2．43）,（23．99±3.24）]显著升高（P〈0．01）,Tet组前炎症因子TNF—α、IL-1β、IL-6水平均分别显著低于A／R组的（P〈0．01）。结论：Tet可以抑制IKB—α磷酸化,显著减少前炎症因子TNF—α、IL-6的产生,减轻心肌缺血／再灌注损伤。     

缬沙坦改善高血压合并糖耐量异常患者内皮功能和炎症因子水平

目的：观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦治疗对原发性高血压（EH）合并糖耐量异常（IGT）人群血浆一氧化氮（NO）、内皮素（ET）及血浆炎症因子影响。方法：42例EH合并IGT患者口服缬沙坦80mg,1次／d,选择40例正常人作为正常对照组。检测治疗前后血糖,餐后2h血糖（2hPG）,胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）,血清炎症因子和NO水平的变化。结果：与正常对照组比较,EH＋IGT组血压、2hPG、HOMA—IR、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,内皮素水平明显升高,NO水平明显降低（P〈0．01）;与治疗前比较,缬沙坦治疗8周末血压[（163．95±8．0）／（99．10±11．8）mmHg比（132．93±10．7）／（82．14±9．5）mmHg]、2hPG[（9．10±1．10）mmol／L比（7．85±1．15）mmol／L]和HOMA-IR[（3．90±2．11）比（2．73±1．71）]、血浆ET[（47．84±7．79）ng／L比（31．84±4．5）ng／L]、TNF-α[（32．30±5．49）ng／L比（26．83±4．83）ng／L]和IL-6[（112．70±24．79）ng／L比（77．224-11．53）ng／L]水平显著下降,血浆NO显著上升[（38．1±7．36）μmol／L比（43．38±7．52）μmol／L],P均〈0．01。结论：缬沙坦可降低原发性高血压合并糖耐量异常患者血压、血糖、胰岛素抵抗、血浆内皮素、炎症因子水平,升高一氧化氮水平,改善血管内皮功能,抑制炎症反应。     

增龄对Wistar大鼠胰岛b细胞胰岛素受体的影响

目的观察增龄对大鼠胰岛β细胞胰岛素受体的影响,探讨老年糖耐量受损的机制。方法将Wistar大鼠30只分为青年组（15只）和老年组（15只）,观察空腹血糖、空腹胰岛素、血清游离脂肪酸（FFA）、血脂的变化,同时进行高胰岛素．正葡萄糖钳夹实验观察胰岛素敏感性。两组大鼠胰腺石蜡切片,免疫荧光双标染色,标染胰岛β细胞上胰岛素受体,利用软件进行荧光强度分析。结果青年组和老年组的大鼠体重分别为（490．6±7．72）g和（728．9±7．57）g,有明显统计学意义（P〈0．01）;两组大鼠空腹血糖无明显差异,空腹胰岛素青年组为（0．59±0．14）ng／ml,老年组为（2．37±0．04）ng／ml,差异有统计学意义（P〈0．01）;空腹血清FFA水平青年组为（0．76±0．14）mmol／L,老年组为（1．51±0．04）mmol／L,有统计学差异（P〈0．01）;高胰岛素-正葡萄糖钳夹结果显示青年组大鼠葡萄糖输出速率为（26．02±2．83）mg／（kg·min）,老年组为（10．73±0．72）mg／（kg·min）,差异有统计学意义（P〈0．01）;使用稳态模型评估胰岛素分泌指数（HOMA—β）随年龄增长呈递增趋势,未达到统计学差异;而胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）在青年组和老年组分别为3．09±0．80和13．14±1．59,差异有统计学意义（P〈0．01）：免疫荧光染色显示老年组胰岛13细胞上胰岛素受体荧光强度减弱,荧光强度分析值青年组为63．55±5．20、老年组为23．26±2．50,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论随着年龄的增长,老年大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,同时胰岛13细胞胰岛素受体减少,可能存在胰岛p细胞自身胰岛素抵抗。     

β-catenin基因在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用及机制

目的研究β—catenin基因对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法建立特异性敲除β—catenin基因小鼠及部分肝脏缺血再灌注损伤模型,检测部分肝脏缺血再灌注后血清学指标ALT、AST及肝脏病理学改变,应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）技术测定β—catenin。一组和野生型组小鼠再灌注6h后肝组织内缺氧诱导因子（HIF）10t、肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）1β的mRNA表达水平。分析数据组间比较采用t检验或方差分析。结果β—catenin^-／-组小鼠再灌注后病理损伤较野生型（WT）对照组严重,血清中ALT、AST水平明显高于WT组,（8178．61±78．76）vs（891．83±23．73）U／L,t=24．296;（7348．94±141．99） vs （873．50±20．27）,t=27．854,P均〈0．001。β—catenin^-／-组肝组织HIF-1α的mRNA表达水平显著低于WT组,（0．31±0．04） vs （1．004-0．22）,t=3．949,P〈0．01。而TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著高于WT组（3．14±0．37）V8（1．00±0．19）,t=3．676;（3．72±0．33） vs （1．00±0．24）,t=4．017,P均〈0．01。结论β—catenin基因缺失可通过影响HIF-1α表达加重肝脏缺血再灌注损伤。