幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的为了探讨幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞动力学的影响。方法应用免疫组织化学和切口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），检测了１６例正常胃粘膜者和３１例幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关慢性胃炎患者治疗前后胃粘膜上皮细胞增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ％）、细胞凋亡指数（ＡＩ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达。结果Ｈｐ阳性患者的ＰＣＮＡＬＩ％为１３．９４±１．６４，正常对照组为６．７１±０．９２，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＥＧＦ－Ｒ表达与ＰＣＮＡＬＩ％呈正相关（ｒ＝０．４４８７，Ｐ＜０．０１）：Ｈｐ阳性患者组的ＡＩ为７．１±１．６，正常对照组为１．３±０．６，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；抗Ｈｐ治疗后，２１例Ｈｐ根除者的ＰＣＮＡＬＩ％和细胞ＡＩ分别降至８．２１±１．３２和１．２±０．６，与治疗前相比差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１），而１０例Ｈｐ持续阳性者则无明显降低（Ｐ＞０．０５）：ＰＣＮＡＬＩ％、ＥＧＦ－Ｒ表达及细胞ＡＩ与胃粘膜炎症程度无显著相关（Ｐ＞０．０５）。结论上述结果提示，Ｈｐ感Ｈ能引起胃粘膜上皮细胞过度增殖和凋亡。这为Ｈｐ感染胃癌发病中的作用机制提供了一些线索。     

幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡的影响

为研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染对胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡的影响，探讨胃粘膜上皮细胞增殖与细胞凋亡之间的关系，采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学染色对Ｈｐ阳性患者Ｈｐ根除前后及Ｈｐ阴性者胃粘膜上皮中增殖细胞、凋亡细胞进行原位观察和比较。结果Ｈｐ阳性患者胃粘膜细胞增殖指数、凋亡指数均显著增加，Ｈｐ根除后，上述指标均显著降低，而Ｈｐ仍为阳性者上述指标则无显著性变化。胃粘膜细胞增殖指数与凋亡指数呈显著正相关。提示Ｈｐ诱导胃粘膜上皮细胞凋亡可能是刺激胃粘膜上皮细胞过度增殖的机制之一，使胃粘膜的不稳定性增加，从而增加患胃癌的危险性。     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜增殖细胞核抗原表达的关系

目的探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染对胃粘膜细胞增殖活性的影响．方法采用免疫组化法，观察３４例Ｈｐ阳性的慢性胃病患者（男１９例，女１５例）胃窦粘膜增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡＬＩ），同时以１２例Ｈｐ阴性的慢性胃病患者作对照，并对Ｈｐ阳性患者进行抗Ｈｐ治疗，４周后复查ＰＣＮＡＬＩ．结果Ｈｐ感染胃窦粘膜ＰＣＮＡＬＩ较无Ｈｐ感染显著增高（２９０２±１０２３比１４３１±６８７，Ｐ＜００１）；Ｈｐ根除（ｎ＝２４）后胃窦粘膜ＰＣＮＡＬＩ由２８１１±１１５降至１７６８±９６５（Ｐ＜００１），而Ｈｐ未根除（ｎ＝１０）时则无显著降低（２９１７±８１４→２４４２±７４４，Ｐ＞００５）．Ｈｐ感染时胃粘膜ＰＣＮＡＬＩ与炎症程度正相关（Ｐ＜００５），但与Ｈｐ菌量无相关（Ｐ＞００５）．结论Ｈｐ感染可增加胃粘膜细胞增殖活性，从而增加胃癌发生的危险性，根除Ｈｐ后可纠正这一变化，对预防胃癌发生可能有重要意义．     

幽门螺杆菌相关胃溃疡的细胞增殖与凋亡研究

目的观察Ｈｐ感染对胃溃疡（ＧＵ）患者胃粘膜上皮细胞增殖与凋亡的影响,进而对溃疡发生机制进行探讨．方法标本取自内镜下胃粘膜活检,细胞凋亡检测采用Ｔｕｎｅｌ方法,细胞增殖检测采用免疫组化ＬＳＡＢ方法测定增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）．结果ＧＵＨｐ＋患者细胞凋亡指数（ＡＩ）明显高于Ｈｐ－患者（Ｐ＜００５）,但比较两者的增殖细胞指数（ＰＣＮＡＬＩ）,无显著性差异（Ｐ＞００５）;慢性浅表性胃炎Ｈｐ＋患者ＡＩ,ＰＣＮＡＬＩ明显高于Ｈｐ－患者（Ｐ＜００５）,ＧＵＨｐ＋患者的ＡＩ／ＰＣＮＡＬＩ比值为１５４１,明显高于其他各组（Ｐ＜００５）．结论Ｈｐ感染能诱导ＧＵ患者胃粘膜上皮细胞凋亡增加,出现细胞凋亡与细胞增殖平衡失调,促进溃疡形成     

幽门螺杆菌感染对胃病细胞动力学的影响

目的　观察 Ｈｐ 感染在正常粘膜演变为胃癌过程中对细胞增殖动力学的影响,以探讨 Ｈｐ 的致癌机制．方法　研究对象为正常胃粘膜的消化不良患者（ ＮＳ,ｎ ＝ １４） 及慢性浅表性胃炎（ ＣＳＧ, ｎ ＝ ５６） 、慢性萎缩性胃炎（ ＣＡＧ,ｎ ＝ ２０） 、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生（ＣＡＧＩＭ ,ｎ ＝ １６） 、不典型增生（Ｄｙｓ ,ｎ ＝ １８） 、胃癌（ ＧＣ,ｎ ＝ １７） Ｈｐ 阳性与阴性患者．应用Ｋｉ６７ 免疫组化技术评价胃幽门窦上皮细胞增生,并用标记指数百分率（ＬＩ％ ） 来表示．结果　Ｈｐ 阳性患者（ ｎ ＝ ７５） 的Ｋｉ６７ ＬＩ％ 为１７ ±５ , Ｈｐ 阴性患者（ ｎ ＝ ５２ ） 的 Ｋｉ６７ ＬＩ％ 为 １３ ±６ , 差异有 显著 性（ Ｐ＜ ０－０５） ;伴有 Ｈｐ 感染的ＣＳＧ 与ＮＳ 或 Ｈｐ 阴性的ＣＳＧ 患者相比ＬＩ％ 增加（ Ｐ＜ ０－０１） ;ＣＡＧ,ＣＡＧＩＭ ,Ｄｙｓ ,ＧＣ 的 Ｈｐ 阳性与阴性患者的ＬＩ％ 相比无显著差异;五种胃病无论 Ｈｐ 阳性或阴性患者与正常者相比,ＬＩ％ 明显增加（ Ｐ＜ ０－０１） ． ＬＩ％ 与胃粘膜炎症程度无关．结论　Ｈｐ 感染促进胃上皮细胞过度增殖主要发生在胃粘膜病变的早期,并不影响在癌前病变或胃癌患者中所     

氨对大鼠胃上皮细胞凋亡和白介素1β-转化酶mRNA表达的影响

探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染诱发胃上皮细胞凋亡的机制。方法： ３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成实验组和正常对照组，实验组大鼠饮用氨水３个月，造成胃粘膜损伤模型。采用ＴＵＮＥＬ方法检测鼠胃上皮细胞凋亡情况；采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测胃粘膜白介素１β－转化酶（ＩＣＥ）ｍＲＮＡ的表达。结果：与正常对照组大鼠相比，实验组大鼠胃粘膜肉眼观察见充血、水肿，病理检查示炎症和轻度萎缩改变。实验组胃粘膜上皮细胞凋亡指数（６．９±１．３）显著高于对照组（１．２±０．５， Ｐ＜０．０１），实验组ＩＣＥ ｍＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ后的电泳条带用自动图象仪处理测得相对值为０．８３±０．２０，而正常对照组为０．４７±０．１０，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：氨所致的胃粘膜损伤可能与其诱发ＩＣＥ ｍＲＮＡ表达，引起胃粘膜上皮细胞凋亡有关。     

幽门螺杆菌清除前后胃粘膜C-myc蛋白和表皮生长因子受体的变化

目的　了解幽门螺杆菌（ Ｈｐ） 感染对胃粘膜Ｃｍｙｃ 基因蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ） 表达的影响．方法　应用流式细胞术和免疫荧光染色技术,对Ｈｐ 清除前后胃粘膜Ｃｍｙｃ 基因蛋白和ＥＧＦＲ 进行定量测定,用免疫组化法研究增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 在组织中的表达．结果　Ｈｐ 阳性患者胃粘膜细胞Ｃｍｙｃ 蛋白和ＥＧＦＲ 的阳性细胞百分率和平均荧光强度显著高于 Ｈｐ 阴性患者,经治疗Ｈｐ转阴者上述指标显著下降,而Ｈｐ 仍为阳性者上述指标则无明显变化． 胃粘膜ＰＣＮＡ 标记指数与Ｃｍｙｃ 蛋白和ＥＧＦＲ 呈一致性改变．结论　Ｈｐ 感染导致的Ｃｍｙｃ 蛋白和ＥＧＦＲ 的过度表达,可能对细胞增殖和癌变具有促进作用．     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜上皮细胞凋亡关系的研究

采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术，对幽门螺杆菌（Ｈｐ）阴性患者及Ｈｐ阳性患者抗Ｈｐ治疗前后胃粘膜上皮细胞凋亡进行了原位观察。结果表明，Ｈｐ阳性患者胃粘膜上皮细胞凋亡指数（１７０１％）明显高于Ｈｐ阴性者（３５２％）（Ｐ＜００１）；胃粘膜上皮细胞凋亡指数与Ｈｐ感染程度明显相关（Ｐ＜００５）；Ｈｐ根除后凋亡细胞指数由１７８７％降至４１９％（Ｐ＜００１），而持续阳性者无明显降低。提示Ｈｐ感染能诱导胃粘膜上皮细胞凋亡，这可能是Ｈｐ引起胃癌和溃疡的重要机制之一。     

幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞凋亡的影响

为进一步探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）的致病机制，应用切口末端标记方法前瞻性观察了１６名正常人胃粘膜标本和３１例Ｈｐ阳性胃炎患者抗Ｈｐ治疗前后胃窦上皮细胞凋亡指数（ＡＩ）的变化。结果表明，正常胃窦上皮细胞ＡＩ为１．３±０．６，Ｈｐ阳性胃炎ＡＩ为７．１±１．６，明显高于正常（Ｐ＜０．００１）；根除Ｈｐ后，ＡＩ显著下降至正常水平，Ｈｐ未根除的Ｈｐ阳性胃炎ＡＩ无明显下降；Ｈｐ阳性胃炎的ＡＩ与炎症程度无关。提示Ｈｐ感染能引起胃上皮细胞凋亡，这可能是Ｈｐ损伤胃粘膜的重要机制。     

根除Hp对增殖细胞核抗原P53蛋白表达的影响

目前认为，幽门螺杆菌（Ｈｐ）并非胃癌直接致癌物，而是通过对胃粘膜的损伤，促进病变发展的条件因素使胃癌危险性增高［１］．我们通过对Ｈｐ感染的胃疾病进行根除治疗，采用ＰＣＲ技术及免疫组化技术观测治疗前后对胃粘膜上皮增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及Ｐ５３蛋白表达的影响．探讨Ｈｐ可能的致癌机制．１　材料和方法１．１　材料　胃粘膜活检标本２０７例，取自辽宁省庄河市胃癌高发现场，每例取新鲜胃粘膜４块（胃窦及病灶部），其中１块行Ｈｐ＿ＰＣＲ检测，另外３块胃粘膜用中性福尔马林固定，石蜡包埋，制成５μｍ切片，行ＨＥ及…     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜增生细胞核抗原及细胞凋亡关系的研究

为探讨胃粘膜幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染与胃癌发生的关系，采用快速尿素酶法及免疫组织化学方法，检测１００例胃粘膜活检组织中Ｈｐ感染、增生细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和细胞凋亡的状况。结果显示：慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、异型增生和腺癌，Ｈｐ感染率逐渐升高。定量分析发现，随病变加重，单位面积内ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数逐渐升高，而细胞凋亡变化不明显。在同一类型病变中，Ｈｐ感染者细胞增生指标ＰＣＮＡ明显高于Ｈｐ阴性者，而凋亡指数却低于Ｈｐ阴性者。提示Ｈｐ感染在胃癌变过程中有重要的生物学意义。     

PCR法诊断幽门螺杆菌感染的评价

目的系统评估聚合酶链反应扩增尿素酶Ａ基因（ＰＣＲ法）对幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染的诊断价值．方法采用金标准及ＰＣＲ法检测６９例患者（慢性胃炎５２例、消化性溃疡１２例、胃癌５例）胃粘膜内Ｈｐ．结果金标准诊断有Ｈｐ感染３４例，ＰＣＲ法诊断３５例Ｈｐ阳性；金标准诊断３５例无Ｈｐ感染，ＰＣＲ法诊断３４例Ｈｐ阴性．故ＰＣＲ法敏感度为１００％，特异度为９７１％，粗一致性为９８５％，调整一致性为９８６％，误诊率（假阳性率）为２９％，漏诊率（假阴性率）为０，正确诊断指数（ｒ）为１０，阳性预测值（＋ＰＶ）为９７１％，阴性预测值（ＰＶ）为１００％，阳性似然比（ＬＲ＋）为３５，阴性似然比（ＬＲ）为０．结论ＰＣＲ法对胃粘膜Ｈｐ感染的诊断价值高于细菌培养、组织病理学，尿素酶试验各单项方法．     

胃粘膜肠化中幽门螺杆菌感染与PCNA,c-erbB-2的表达

目的研究肠化胃粘膜幽门螺杆菌（Ｈｐ）阳性率与ＰＣＮＡ,ｃｅｒｂＢ２表达率之间关系,以探讨Ｈｐ感染在胃肠化发生、发展中作用．方法经病理检查证实的慢性胃炎伴肠化１１６例,对照组非溃疡性消化不良．应用改良ＷａｒｔｈｉｎＳｔａｒｙ法检测Ｈｐ,免疫酶组化ＳＰ法检测ＰＣＮＡ,ｃｅｒｂＢ２的表达,比较Ｈｐ阳性组和阴性组间ＰＣＮＡ,ｃｅｒｂＢ２的阳性表达率．结果胃粘膜肠化者Ｈｐ感染率增高（５８６％ｖｓ１８８％,χ２＝１０７９,Ｐ＜００１）,肠化胃上皮内少见Ｈｐ粘附,Ｈｐ阳性组ＰＣＮＡ,ｃｅｒｂＢ２表达高于阴性组（４８／６８ｖｓ１２／４８,χ２＝９０５,Ｐ＜００５;３６／７４ｖｓ２／４２,χ２＝１３２８,Ｐ＜００１）．结论Ｈｐ感染促进胃粘膜肠化,并使肠化胃粘膜细胞增殖迅速而启动恶性变,故Ｈｐ感染可能促进胃癌的形成．     

PCR诊断幽门螺杆菌感染的临床价值

目的探讨ＰＣＲ法在诊断胃粘膜幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染中的临床价值．方法用ＰＣＲ方法对１５４例胃病患者胃粘膜Ｈｐ尿酶基因ＤＮＡ片断进行扩增，同时与尿酶试验及血清ＨｐＩｇＧ测定方法进行比较．结果ＰＣＲＨｐＤＮＡ的阳性率达９１％，与尿素酶试验（７４％）及血清ＨｐＩｇＧ（８１％）测定相比有显著差异（Ｐ＜００５）．Ｈｐ感染率随受检者年龄增长而增高．Ｈｐ感染与胃窦（９３％）及胃体（８４％）腺癌关系密切，而与食管癌及贲门癌（８０％）关系不大．结论ＰＣＲ法可明显提高Ｈｐ诊断的敏感性和特异性，也为Ｈｐ感染的深入研究开拓了新的研究思路和手段     

胃液氨含量与幽门螺杆菌相关性胃炎炎症程度的关系

为了探讨胃液氨含量与幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关性胃炎炎症程度的关系，对３９例Ｈｐ（＋）及２３例Ｈｐ（－）慢性胃炎患者胃液氨含量进行测定，同时对其胃窦粘膜的炎症程度用中性粒细胞（ＰＭＮ）及单个核细胞（ＭＮ）计数方法予以评价，研究发现，Ｈｐ（＋）胃炎组胃液氨含量（８４．１０±３３．０７ｍｇ／Ｌ）显著高于Ｈｐ（－）胃炎组（２２．５９±１３．１２ｍｇ／Ｌ）（Ｐ〈０．０１），ＰＭＮ及ＭＮ计数在Ｈｐ（＋）胃炎组显     

胃癌及胃癌前病变患者中医证型与病理及Hp感染的关系

目的研究胃癌及胃癌前病变患者中医分型与病理组织学及Ｈｐ感染的关系．方法选取资料完整的慢性胃病患者之病理及临床资料２０３例进行中医分型、Ｈｐ检测和ＰＣＮＡ染色，对胃癌前病变（ｎ＝１３４）胃癌（ｎ＝３３）及对照组（浅表性胃炎，ｎ＝３６）等各组进行比较分析．结果中医分型与病理改变有一定的相关性，在浅表性胃炎中以寒热夹杂型为主，胃癌及胃癌前病变中以脾胃虚寒为主，而寒热夹杂型较少，在胃癌及胃癌前病变患者中未发现Ｈｐ感染与中医分型有明显关系，胃癌及癌前病变组Ｈｐ感染率（６２４％，６６７％～７９８％）明显高于对照组（３４１％），且发病年龄Ｈｐ阳性者明显低于Ｈｐ阴性者（４９９％ｖｓ５６７，４６１～５３８ｖｓ５３８～６２０，Ｐ＜００５），ＰＣＮＡＬＩ随病变程度的加重而升高（γ＝０９５１，Ｐ＜００２５）．结论Ｈｐ感染与胃癌及胃癌前病变的发生有密切关系．ＰＣＮＡＬＩ是反应胃粘膜病变严重程度的较客观的定量指标     

幽门螺杆菌flaA基因的变异

目的鞭毛是幽门螺杆菌（Ｈｐ）的重要侵袭因子,本研究拟检测Ｈｐ鞭毛素Ａ基因的变异性,进而研究其与Ｈｐ致病性的关系．方法我们对５２例胃粘膜活检标本和１８株Ｈｐ临床分离株进行Ｈｐ特异的１６ＳｒＲＮＡ基因和鞭毛素Ａ基因ＰＣＲ扩增和ＰＣＲＲＦＬＰ及ＰＣＲＲＦＬＰＳＳＣＰ分析．结果对４３例Ｈｐ（＋）的ｆｌａＡ基因ＰＣＲＲＦＬＰ（ＨｉｎｄⅢ）大约可分７个型（变异检出率为１６３％）,而ＰＣＲＲＦＬＰＳＳＣＰ可分３７个型（变异检出率为８６０％）,两者有非常显著性差异．结论ｆｌａＡ基因变异性极大,ＰＣＲＲＦＬＰＳＳＣＰ优于ＰＣＲＲＦＬＰ,是检测其变异的有效方法．     

细胞凋亡与增殖在幽门螺杆菌感染致胃癌中的重要作用

０　引言流行病学研究及动物实验已表明,幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染是胃癌发生的因素之一［１,２］．目前已提出许多致癌机制,其中一个重要机制是Ｈｐ刺激胃上皮细胞增殖及诱导胃上皮细胞凋亡［３］．Ｈｐ,特别是毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）阳性菌株感染与癌前病变如胃粘膜萎缩和肠上皮化生关系密切［４－８］．在本期中,卢世云ｅｔａｌ［９］的研究表明,Ｈｐ阳性的慢性浅表性胃炎患者胃上皮细胞增殖显著高于无胃粘膜病变及Ｈｐ阴性浅表性胃炎患者,而在癌前病变阶段Ｈｐ感染与非感染的患者胃上皮细胞增殖虽均高于无胃粘膜病变患者,但两…     

慢性糜烂性胃炎的临床病理学及免疫组织化学研究

目的观察慢性糜烂性胃炎（ＣＥＧ）的临床病理特征及粘膜上皮的ｐ２１，ＣＥＡ表达和上皮细胞增生活性．结合粘膜Ｇ细胞数，探讨胃粘膜泌酸状态与病变的关系．方法ＣＥＧ４０例粘膜活检材料经光镜观察其组织病理学特征及Ｈｐ的感染．对其中３１例采用免疫组化ＬＳＡＢ法标记ｐ２１，ＰＣＮＡ，ＣＥＡ及胃泌素．结果ＣＥＧ病变８７５％（３５／４０）见于胃窦粘膜，７５％伴有不同程度的萎缩改变．粘膜上皮轻中度不典型增生率为２００％（８／４０），肠化率为２７５％，２５０％伴活动性炎；４００％病例可见Ｈｐ感染．ＣＥＧ粘膜上皮ｐ２１表达阳性率为６７７％，ＣＥＡ表达为２９０％；明显高于对照的慢性浅表性胃炎组．ＰＣＮＡ表达以及Ｇ细胞数目，ＣＥＧ组与对照组无显著差异（Ｐ＞００５）．结论ＣＥＧ具有一定恶性转化趋势，胃窦Ｇ细胞数、泌酸状态与ＣＥＧ的发病无明显关联．     

胃癌HP感染与PCNA表达的关系

采用尿素酶法、ＰＣＲ法检测了８０例胃癌患者的幽门螺杆菌（ＨＰ）感染率，采用免疫组化ＡＢＣ法检测了其增殖细胞核抗的（ＰＣＮＡ）表达，并与对照组比较。结果显示，胃癌组的ＰＣＮＡ－ＬＩ表达明显高于对照组，ＨＰ感染阳性胃癌组的ＰＣＮＡ－ＬＩ表达高于阴性组，说明ＨＰ感染与胃癌发生有密切关系，ＰＣＮＡ监测有助于胃癌的早期诊断。