成年大鼠脑内具有神经生发功能的脑室下区细胞核三维数字化形态观察

目的 研究成年大鼠脑内具有神经生发功能的侧脑室外侧壁脑室下区（subventricular zone, SVZ）和室管膜（ependymal layer, EL）各种细胞的形态学特征及其空间排布规律.方法 采用半薄切片染色技术和计算机三维重建技术,利用3D Slicer工具软件构建SVZ-EL区各细胞核三维表面模型,并建立相应的数据库.结果 ①在EL,主要是体积较大且呈球形的成熟室管膜细胞核;另有体积更大的球形细胞核贴近室管膜细胞深方;此外,还有体积较小而形状不规则的细胞核散在镶嵌于室管膜细胞之间.②在SVZ,可见特异性的同型细胞核聚集现象,此类细胞核体积较大且都呈椭圆体,具有迁移中成神经细胞核特征,故称之为成神经样细胞核.它们有的邻近EL、有的邻近纹状体,其周围的细胞核分属不同类型;另有散在分布的大而似球体的未分化细胞特征性细胞核,它们与聚集的成神经样细胞核间无特定空间位置关系.此外,还有大量散在分布的中、小型不规则细胞核.结论 在SVZ-EL区含有不同类型细胞核,其中成神经样细胞核呈聚集分布,但其周围没有特定结构包裹现象.此外,本研究实现了成年哺乳动物脑内神经生发区SVZ细胞核形态及其空间位置的数字化,可作为进一步研究SVZ神经生发的基础.     

SD大鼠成熟与未成熟心肌细胞超微结构及增殖细胞核抗原免疫组化的研究

０引言成熟与未成熟心肌细胞在结构、功能和能量代谢上均存在着差异;因此,心肌缺血再灌注损伤的机制和保护措施也有各自的特点．增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）是一种晚期生长相关基因,其主要表达在细胞循环Ｇ１－Ｓ期的增殖细胞中,是真核细胞ＤＮＡ合成所必须的一种核蛋...     

什么叫“核左移”?有何临床意义?

中性粒细胞核的分叶数目及其结构特点与细胞成熟程度有关:成熟胞核有2～5叶,分叶多,染色质浓深,表示细胞衰老;而幼稚细胞核则不分叶,呈杆状、肾形、椭园及园形。健康人的周围血液中,杆状核占3～5%,无其他幼稚型。血液中出现大量不分叶的幼稚中性粒细胞,称粒细胞“核左移”。“核左移”表示造血机能旺盛,机体对微生物防御力增强。而分叶多的衰老细胞增多,称“核右移”,表示细胞衰老,造血功能衰退。     

应用GFP质粒构建及转染技术探讨Syk(L)核移位机制

【目的】通过研究Syk(L)在乳腺癌细胞亚细胞器中的分布和移位机制,探讨Syk(L)抑制乳腺癌的可能性机制。【方法】采用细胞胞核、胞浆分离技术和Westernblot的方法,检测乳腺癌细胞系BT474中两种Syk蛋白异构体在细胞内的分布。构建绿色荧光蛋白(GFP)和Syk(L)核移位相关功能域融合蛋白质粒,转染入Cos7细胞内,荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的分布。【结果】BT474细胞的细胞浆中可检测到Syk(S)和Syk(L)的表达,细胞核中只检测到Syk(L)的表达。在Cos7细胞中,GFP与Syk(L)的缺失域(deletiondomain,DEL域)融合蛋白均匀分布于细胞内,GFP与Syk(L)的IDB域融合蛋白聚集于细胞核中;将DEL域上的294K、300K、及305K突变域非碱性氨基酸后构建成GFP-IDB(L)-M,突变的融合蛋白则失去核聚集现象。【结论】在乳腺癌细胞中,Syk(L)可从细胞胞浆移位到细胞核内。Syk(L)的IDB域具有完整的核移位功能,能将融合的胞浆蛋白GFP转移到细胞核内;DEL域的碱性氨基酸具有核定位信号功能。Syk(L)在乳腺癌细胞中的抑癌功能与其核移位有关。     

线粒体DNA与人类肿瘤相关性的研究进展

线粒体普遍存在于除哺乳动物成熟红细胞以外的所有真核细胞中。细胞生命活动所需能量80％是由线粒体提供的，所以它是细胞进行生物氧化和能量转换的主要场所；同时线粒体也是细胞核外唯一具有基因组，且能不依赖于核DNA(moclear DNA nDNA)进行复制、转录和翻译的细胞器。有研究证实线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)突变与人类     

线粒体DNA与人类肿瘤相关性的研究进展

线粒体普遍存在于除哺乳动物成熟红细胞以外的所有真核细胞中。细胞生命活动所需能量80%是由线粒体提供的,所以它是细胞进行生物氧化和能量转换的主要场所;同时线粒体也是细胞核外唯一具有基因组,且能不依赖于核DNA (nuclear DNA nDNA)进行复制、转录和翻译的细胞器。有研究证实线粒体DNA (mitochondrial DNA,mtDNA)突变与人类衰老、神经退行性疾病、心肌病、肿瘤及糖尿病等多种疾病密切相关,近年来,mtDNA与人类肿瘤的关系越来越受到     

穿心莲致小鼠嗜多染红细胞和成熟红细胞微核的实验研究

目的:动态观察穿心莲水煎液对小鼠嗜多染红细胞和成熟红细胞微核的影响。方法:20只小鼠随机分为对照组和实验组,每组10只,分别连续灌胃蒸馏水和穿心莲水煎液15 d,观察嗜多染红细胞和成熟血细胞,比较细胞微核率的差异。结果:实验组嗜多染红细胞和成熟血细胞微核率呈阳性,微核率≥5‰,但成熟红细胞的微核数量明显比嗜多染红细胞低(P<0.05)。结论:穿心莲对小鼠骨髓细胞具有潜在致染色体断裂效应;外周血涂片是观察成熟红细胞微核简单、有效的方法。     

第五讲 生命的基本单位——细胞

三、细胞核细胞核是细胞内一个极重要的构造,所谓“核”就是核心的意思。细胞通常只有一个核,但也有两个核的,如人的肝细胞;也有乡个核的,如骨骼肌细胞核达数百     

激光聚焦显微镜同步呈现听神经瘤单个细胞周期蛋白与merlin

目的研究听神经瘤组织中merlin的穿梭运动及其与细胞周期蛋白表达水平间的相互影响。方法4例听神经瘤组织石蜡包埋标本,用免疫荧光法同时标记各种细胞周期蛋白和merlin,并在激光共聚焦显微镜(CLM)下同步观察标记物在单个细胞中的表达。结果可同步呈现听神经瘤组织中单个细胞的各种细胞周期蛋白和merlin的表达及分布。当肿瘤细胞处于G1期时,merlin表达以细胞核为主,核周次之,细胞浆较少;G1/S过度期,merlin表达以核周为主,细胞核和细胞浆次之;G2/M期,merlin表达以均匀分部于细胞核为主;而G2/M晚期时,merlin表达以核周为主。结论用免疫荧光和CLM可以同步呈现听神经瘤组织中各种周期蛋白与merlin在单个瘤细胞中的表达。随细胞周期进程的变化,merlin在细胞核、核周和细胞质间进行穿梭运动。     

激光聚焦显微镜同步呈现听神经瘤单个细胞周期蛋白与merlin

目的 研究听神经瘤组织中merlin的穿梭运动及其与细胞周期蛋白表达水平间的相互影响.方法 4例听神经瘤组织石蜡包埋标本,用免疫荧光法同时标记各种细胞周期蛋白和merlin,并在激光共聚焦显微镜(CLM)下同步观察标记物在单个细胞中的表达.结果 可同步呈现听神经瘤组织中单个细胞的各种细胞周期蛋白和merlin的表达及分布.当肿瘤细胞处于G1期时,merlin表达以细胞核为主,核周次之,细胞浆较少;G1/S过度期,merlin表达以核周为主,细胞核和细胞浆次之;G2/M期,merlin表达以均匀分部于细胞核为主;而G2/M晚期时,merlin表达以核周为主.结论 用免疫荧光和CLM可以同步呈现听神经瘤组织中各种周期蛋白与merlin在单个瘤细胞中的表达.随细胞周期进程的变化,merlin在细胞核、核周和细胞质间进行穿梭运动.     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在兔脑神经细胞中的形态与形态发生

目的：研究单纯疱疹病毒Ⅰ（HSV－Ⅰ）在兔脑神经细胞（RNC）中的形态与形态发生。方法：用电子显微镜观察超薄切片,并拍照记录。结果：RNC感染HSV－Ⅰ6h后,细胞核中即可见散在核衣壳,12h后细胞核和细胞质内均可见到,但以核内多见,24h后病毒量达高峰。胶质细胞内的核衣壳多于神经元,胶质细胞和神经元的细胞质内和胞外可见少量有包膜的完整完毒。病毒颗粒为圆形或椭圆形,核心直径38－54nm,核衣壳77－100nm,成熟病毒115－129nm。结论：RNC对HSV－Ⅰ高度敏感,HSV－Ⅰ在兔脑神经元和胶质细胞中的形态发生有一定的差异。     

应用GFP质粒构建及转染技术探讨Syk（L）核移位机制

【目的】通过研究Syk（L）在乳腺癌细胞亚细胞器中的分布和移位机制，探讨Syk（L）抑制乳腺癌的可能性机制。【方法】采用细胞胞核、胞浆分离技术和Western blot的方法，检测乳腺癌细胞系BT474中两种Syk蛋白异构体在细胞内的分布。构建绿色荧光蛋白（GFP）和Syk（L）核移位相关功能域融合蛋白质粒，转染入Cos7细胞内，荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的分布。【结果】BT474细胞的细胞浆中可检测到Syk（S）和Svk（L）的表达，细胞核中只检测到Syk（L）的表达。在Cos7细胞中，GFP与Syk（L）的缺失域（deletion domain，DEL域）融合蛋白均匀分布于细胞内，GFP与Syk（L）的IDB域融合蛋白聚集于细胞核中；将DEL域上的294K、300K、及305K突变域非碱性氨基酸后构建成GFP—IDB（L）-M，突变的融合蛋白则失去核聚集现象。【结论】在乳腺癌细胞中。Syk（L）可从细胞胞浆移位到细胞核内。Syk（L）的IDB域具有完整的核移位功能，能将融合的胞浆蛋白GFP转移到细胞核内；DEL域的碱性氨基酸具有核定位信号功能。Syk（L）在乳腺癌细胞中的抑癌功能与其核移位有关。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在兔脑神经细胞中的形态与形态发生

研究单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV-Ⅰ)在兔脑神经细胞(RNC)中的形态与形态发生。方法 用电子显微镜观察超薄切片,并拍照记录。结果RNC感染HSV-Ⅰ6h后,细胞核中即可见散在核衣壳,12h后细胞核和细胞质内均可见到,但以核内多见,24h后病毒量达高峰。胶质细胞内的核衣壳多于神经元,胶质细胞和神经元的细胞质内和胞外可见少量有包膜的完整病毒。病毒颗粒为圆形或椭圆形,核心直径38～54nm,核衣壳77～100hm,成熟病毒115～129nm。结论RNC对HSV-Ⅰ高度敏感,HSV-Ⅰ在兔脑神经元和胶质细胞中的形态发生有一定的差异。     

髓鞘相关蛋白Nogo-A在纯化细胞核中的表达

目的：检测Nogo-A蛋白在纯化后的大鼠脊髓和小脑细胞核中的表达。方法：通过差速离心法得到大鼠脊髓和小脑样本的各亚细胞成分,利用非离子性去污剂NP-40纯化细胞核组分,采用Western blot方法检验核纯度并检测Nogo-A在各亚细胞成分中的表达。结果：纯化的细胞核抽提物中检测到特异的Nogo-A反应条带。结论：Nogo-A在纯化的细胞核中仍有明确表达,进一步证明了Nogo-A蛋白在中枢神经元的细胞核中有定位,并提示Nogo-A很可能以全长形式入核。     

磷酸化 mTOR 及其下游分子4EBP1和 S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的定位表达研究

目的：研究磷酸化 mTOR 及其下游分子4EBP1和 S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的表达部位。方法随机选取于2005年3月-2009年9月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院的285例乳腺癌患者,挑选乳腺癌组织及癌旁组织蜡块,重新切片,使用免疫组化方法检测磷酸化 mTOR 及其下游分子4EBP1和 S6K1在细胞中的表达部位。结果在285例癌组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和 p-S6K1的染色阳性例数分别为279例、161例和226例;在285例癌旁组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和 p-S6K1的染色阳性例数分别为239例、81例和136例。p-mTOR 在癌组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有270例,核浆共表达有8例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有0例,细胞浆有234例,核浆共表达有5例,癌组织与癌旁组织差异未见明显统计学意义（P ＝0．554）;p-4EBP1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有45例,核浆共表达有113例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有6例,核浆共表达有74例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义（P ＝0．001）;p-S6K1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有28例,核浆共表达有195例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有6例,细胞浆有0例,核浆共表达有130例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义（P ＝0．000）。结论 mTOR 信号通路中磷酸化4EBP1和 S6K1在浸润性乳腺癌细胞浆中表达增高与乳腺癌相关。     

Ⅳ.葡萄胎恶性趋势与Ag-NORs的研究

对3组葡萄胎的2种滋养细胞核内的Ag-NORs进行了定量研究。结果表明,葡萄胎、侵蚀性葡萄胎首次刮宫组和侵蚀性葡萄胎组的细胞滋养细胞核内Ag-NORs均数,在各组间的差异均有显著性意义(P<0.01),且依次增高,核内Ag-NORs数目的离散程度也依次增大;合体滋养细胞核内Ag-NORs均数,在各组间差异无显著性意义。结果提示,合体滋养细胞可能是滋养细胞发展过程中的最后成熟阶段;细胞滋养细胞核内Ag-NORs均数及离散程度可做为预测葡萄胎恶性趋势的指标。     

胆囊腺瘤细胞中survivin与P53蛋白定位表达及其病理意义

目的:观察Survivin以及P53蛋白在胆囊腺瘤以及胆囊腺癌细胞中的形态特点以及定位表达,探析其在病理和鉴别诊断中的临床意义。方法:选择2011年3月～2012年7月我院30例胆囊腺瘤以及60例胆囊腺癌患者为研究对象,采用免疫组化法对患者腺瘤和腺癌细胞中Survivin和P53蛋白的表达进行检测,分析其所具有的病理意义。结果:30例胆囊腺瘤患者中,P53在胆囊腺瘤中无表达,28例患者Survivin蛋白表达于细胞浆内,阳性率为93.33%,其中25例患者表达于细胞核上,包括21例"核上核样"和3例"核上泥沙样"以及1例弥漫表达于细胞浆;在60例胆囊腺癌患者细胞中46例P53蛋白表达于细胞核内,在核内的表达率为76.67%,44例患者Survivin蛋白在细胞浆内呈弥漫性表达,阳性率为73.33%,Survivin蛋白在胆囊腺癌和胆囊腺瘤中表达的阳性率存在显著差异(P<0.05),同时其形态特征以及表达的部位也具有明显的差异(P<0.05)。结论:Survivin蛋白在胆囊腺瘤组织中呈"核上泥沙样"和"核上核样"表达,且特异性较强,是临床诊断胆囊腺瘤的一种特异性抗体,与P53蛋白在胆囊腺瘤患者组织中无表达,在胆囊癌组织细胞核中呈阳性表达的结果进行结合分析,构成了两种蛋白在分子形态学上表达的差异,是临床上病理鉴别诊断胆囊腺癌和胆囊腺瘤的一种比较可靠的分子学方法,并结合病理HE切片,能基本解决临床上对胆囊癌和胆囊腺瘤的相关病理诊断以及鉴别诊断的问题。     

42例急性白血病骨髓细胞形态学检查体会

骨髓检查是诊断白血病的主要方法 ,绝大部分病例可据骨髓变化而肯定诊断。急性白血病骨髓中原始细胞及幼稚细胞不仅有数量的增加 ,更主要的是有质量的异常。其中细胞形态异常成熟障碍是其突出特点。1　形态异常1.1　细胞大小不均及形态异常 :白血病细胞大小上有明显改变 ,多数原始或幼稚细胞体积增大 ,核大、浆少 ,核浆比值大。有部分病例的细胞体积小于正常 ,但细胞核仍相对较大。有的出现明显大小不均现象。1.2　胞核异常 :胞核形态不规则 ,常扭曲、折叠、分叶、凹陷、核染色质比较粗糙 ,分布不均。1.3　核仁异常 :核仁可大而且多 ,且显著…     

正常与恶性细胞的结构和功能

肿瘤的良、恶性决定于细胞的良、恶性,因此,从细胞生物学和分子生物学的角度来了解肿瘤细胞,对于肿瘤的良、恶性的理解是十分有帮助的。一、核Lebert(1851)最先注意到恶性细胞的核大于正常细胞核,Virchow(1863～1867)进一步说明细胞核大于正常可作为诊断肿瘤的重要指标。恶性肿瘤细胞核增大,胞体却不随着其增大的比例而增大,因此,核浆比例大于正常(Koller,1963)。在细胞涂片上鉴别细胞良、恶性主要是依靠细胞核的形态,因此,重点介绍恶性细胞核的改变。(一)核仁。核仁在电镜下是由纤维状和细颗粒状两种成分组成。细纤维约5～8毫微米横径,颗粒约15毫微米直径,均为rRNA。细纤维是颗粒的前     

β-catenin和cox-2在大鼠毛囊隆突区细胞中的表达及意义

目的通过观察Β-CATENIN和COX-2在体外培养的毛囊隆突区细胞中的表达,探讨其对隆突区细胞增殖的作用及相互关系。方法在体外分离培养毛囊隆突区细胞的基础上,采用免疫细胞化学方法分别检测不同时相Β-CATENIN和COX-2在毛囊隆突区细胞中的表达。结果Β-CATENIN和COX-2在毛囊隆突区细胞呈强表达,并表现出与培养时间的相关性;同时Β-CATENIN可见于细胞质与细胞核中,而COX-2仅见于细胞核。结论Β-CATENIN和COX-2对毛囊隆突区细胞具有促增殖作用,COX-2可能是Β-CATENIN途径发挥作用的核内靶基因。