偶氮氯膦I测定血清钙

目的：建立灵敏度高、选择性好、试剂稳定的血清钙测定方法。方法：在pH9.6的2－氨基－2－甲基－1，3－丙二醇（AMP）缓冲介质中，以偶氮氯膦I作显色剂，8－羟基喹啉－5－磺酸为掩蔽剂，分光光度法测定血清钙。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果：该方法显色络合物最大吸收波长为580nm，线性血清钙。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果：该方法显色络 的最大吸收波长为580nm，线性范围达5．0mmol/L，回收率为98．8％－99．1％，平均99．0％。批内变异系数（CV）和批间变异系数（CV）分别为0．95％和1．74％。与邻甲酚酞络合酮（OCPC）（X1）比较：Y＝1．003X1－0．036，r=0.996;与偶氮肿Ⅲ（X2）比较：Y＝1.001X2-0.030,r=0.997；与酶速率（X3）法比较：Y＝0.999X3-0.045,r=0.998。在血清胆红素高达412μmol/L,血红蛋白7g/L，镁2．59mmol/L及Intralipid高达8g/L时均对该法无显著干扰。结论：该法具有简便、快速、试剂稳定和灵敏可靠的优点，适合血清钙的手工测定和自动分析。     

连续监测法测定腺苷脱氨酶

目的 建立连续监测法测定腺苷脱氨酶的方法。方法 用连续监测法对 pH值、腺苷浓度等反应条件进行实验研究，并对所建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含α－酮戊二酸6mmol/L,NADH 0.35mmol/L,ADP0.8mmol/L,EDTA-Na2 0.1mmol/L，谷氨酸脱氢酶1000U／L，试剂Ⅱ：腺苷12mmol/L,均用磷酸盐缓冲液（0．1mol/L);pH7.2。线性范围达97U／L，批内CV＝4．90％，批间CV＝6．53％。与波氏显色法有良好的相关性（r=0.9902)。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

乙醇氧化酶法测定血清中乙醇含量

目的：建立血清中测定乙醇浓度的的乙醇氧化酶法。方法：基于乙醇氧化酶氧化乙醇产生乙醛和H2O2，偶联Trinder反应生成醌亚胺，可在500nm波长比色测定，通过优化反应体系中各主要成分和测定条件，建立了本法。结果：本法的灵敏度0．5g/L时，A500nm,1cm＞0．08／线性范围0．125－5．0g/L；批内CV为1．02％，批间CV为2．76％；本法（Y）与气相色谱法（X）比较；Y＝1．06X＋0．12，γ＝0．989。结论：本法的灵敏度较高、线性范围宽、精密度和准确性均较好，适合临床实验室急诊测定用。     

2—氯—4—硝基苯—β—D—半乳糖—麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

目的 建立2－氯－4－硝基苯－β-D－半乳糖－麦芽二糖苷（GalG2-CNP）作底物测定淀粉酶的方法。方法 用连续监测法对pH值，Km值及最适底物浓度等反应条件进行实验研究，并对建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含KSCN 200mmol/L,CaCl26.7mmol/L,NaCl400mmol/L；试剂Ⅱ：含GalG2-CNP20mmol/L；均用pH6.0 50mmol/L MES缓冲液。线性范围达1200U/L批内CV＝2.77％，批间CV＝3.56％，与参考方法（BPS－G7）有良好的相关性。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

应用化学抑制剂和酶偶联比色法直接测定LD1

本文应用1－6已二醇作为LD分子中M亚基的专一抑制剂，采用双试剂法，由自动生化分析仪直接将一定浓度的1．6－己二醇溶液（第一试剂）与血清样品同时加入反应比鱼池（加人1．6已二醇的最终浓度为1．16mol／L），于30C保温5分钟后再加入第二试剂，用酶偶联比色法测定LD；。LD同工酶电泳图谱表明在上述条件下，LD2～LDs的活性全部被抑制。用本法同常规电泳法平行检测51例血清LD，结果相关良好．r＝0．9885，Y＝0．87X＋189；平均回收率104.4％，线性范围至少可达到470U／L；批内CV（％）为3．83～4．08。     

固蓝B单一试剂显色法测定血清总胆红素的探讨

用固蓝B、HCl、尿素已制单一试剂测定血清总胆红素。方法学评价结果：线性范围0～342．0μmol／L，批内CV1．52％，批间CV2．10％，回收率98．2％～102．9％，表观摩尔消光因数K630＝1．0007×105cm2／mol，Hb≤2．5g／L，NaN3≤2．0g／L基本不影响胆红素测定，与改良J－G法比较，γ＝0.999，Y（本法）＝0．99X＋0．15。     

血清氯葡萄糖苷酶动力学分析法

葡萄糖苷酶动力学法测定血清氯，在70～140mmol／L间线性良好，精密度试验批内变异系数为2．10％，批间变异系数为2．26％；平均回收率为99．2％，与电极法相关试验r＝0．9525，Y酶法＝3．4＋0．98X电极法，差异不显著（P＞0．05）．TBIL84μmol／L，TG2．1mmol／L．Cho9．6mmo／L对测定结果无影响，试剂在4℃冰箱保存10d内起始吸光度不高于0．150．     

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的　建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法　对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果　用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论　本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。     

应用尿素酶和亮氨酸脱氢酶测定血清或尿中尿素的动力学方法

本文介绍一种采用尿素酶（EC3．5．1．5）和亮氨酸脱氢酶（EC．1．4．1．9）测定血清或尿液中尿素氛（UN）的新的连续监测分析法。原理血清或尿液中的内源性氨离子能与2一酮异己烯酸、NADH和亮氨酸脱氢酶（LED）起反应，而NADH被氧化成NAD+的反应速车取决于内源性氨离子的生成是。反应原理如下试剂试剂1：为在100mmol／I，N，N-二乙醇胺基乙酸缓冲液（pH8．75）中含2-酮基异乙烯酸3．0mmol／L，β-NADH0．3mmol／L和亮氨酸脱氢酶1．5ku／L。试剂2：为在试剂1中加入尿素酶70ku／L。标准波：为含有17．86mmol／L的UN和不含有UN…     

酶法测定糖化血清蛋白浓度

目的：了解酶法测定糖化血清蛋白（GSP）的实验特点。方法：采用酶法测定GSP，并对其方法学进行初步研究及评价。结果：线性41．0－1829．0μmol/L，达正常值8倍；平均回收率98．2％；精密度：批内CV0．99％－1．89％，批间CV2．23％－3．41％；该法（Y）和NBT法（X）比较：Y＝0．395X＋20．7，r=0.953;干扰影响小。结论：该法线性宽，精密度好，所受干扰小，是理想的GSP测定方法。     

New enzymatic assay for serum urea nitrogen using urea amidolyase

We established an enzymatic assay for measurement of serum urea nitrogen using urea amidolyase (EC 3.5.1.45) from yeast species. The method is based on hydrolysis of urea by the enzyme. In this assay, we eliminated endogenous ammonium ion by use of glutamate dehydrogenase (EC 1.4.1.4). Then in the presence of urea amido-lyase, ATP, bicarbonate, magnesium, and potassium ions, ammonium ion was produced proportionally to urea concentration in serum. The concentra-tion of ammonium ion formed was determined by adding GLDH to produce NADP(+) in the presence of 2-oxoglutarate and NADPH. We then monitored the change of absorbance at 340 nm. The inhibitory effect of calcium ion on this assay was eliminated by adding glyco-letherdiamine-N, N, N', N'-tetraacetic acid to the reaction system. The with-in-assay coefficient of variations (CVs) of the present method were 1.80-3.76% (n = 10) at 2.8-19.0 mmol/L, respectively. The day-to-day CVs were 2.23-4.59%. Analytical recovery was 92-115%. The presence of ascorbic acid, bilirubin, hemoglobin, lipemic material, ammo-nium ion, or calcium ion did not affect this assay system. The correlation be-tween values obtained with the present method (y) and those by another enzy-matic method (x) was 0.997 (y = 1.02x - 0.10 mmol/L, Sy/x = 0.841, n = 100), with a mean difference of -0.18 +/- 0.86 mmol/L [(values by reference method - that of present method) +/- SD] using the Bland-Altman technique. J. Clin. Lab. Anal. 17:52-56, 2003.     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根(HCO3-)。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法,可满足全自动和手工测定,用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50 mmol/L,批内变异系数(CV)为2.48%,批间CV为3.24%,平均回收率102.8%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=1.019X-0.745,r=0.990 3,黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响,健康人静脉血HCO3-浓度为21.5~32.3 mmol/L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定,适用临床检测。     

脲酶结合邻甲酚酞络合剂显色检测血清及尿液尿素含量

目的　建立一种实用的血清和尿液中尿素含量的比色测定方法。方法　脲酶水解尿素产生氨(NH3),使溶液pH升高,以邻甲酚酞络合剂(OCPC)作为pH指示剂,波长570nm吸光度变化与尿素浓度成正相关。结果　该法线性范围血清1.00～200mmol/L,尿液10.0～1000mmol/L;检测界限血清0.36mmol/L,尿液2.19mmol/L。精密度分析血清批内CV1.13%～2.78%,批间CV1.81%～3.91%,总CV2.13%～4.80%。尿液批内CV0.68%～1.72%,批间CV0.96%～2.24%,总CV1.17%～2.82%。平均回收率血清100%,尿液102%。该法(Y)与酶速率法(X)比较相关性良好(血清Y＝1.048X+0.511,r＝0.998,S     

脲酶传导速率法测定血清尿素

目的 了解脲酶传导速率法测定血清尿素的实验特点。方法 采用脲酶传导速率法测定血清尿素，并与酶偶联法进行比较。结果 批内精密度为2.67%,2.06%和1.17%，批间精密度分别为3.02%，2.19%和1.82%，线性范围达46.80mmol/L，平均回收率100.71%，脲酶法（Y）与酶偶联法（X）比较：Y=1.0872X-0.4893,r=0.9995，且两者差异无显著意义（P＞0.05)。结论 脲酶传导速率法测定尿素特异、快速、干扰因素少，适合临床应用。     

自制双试剂测定血清胆红素的探讨

目的；建立准确的自动生化分析测定血清胆红素的方法。方法：采用双试剂测定，以尿素咖啡因及Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００组成的加速剂作为第一试剂，重氮试剂为第二试剂测定总胆红素，以对氨基苯碘酸溶液为第一试剂，亚硝酸钠浓度为１．４５ｍｍｏｌ／Ｌ的重氮试剂为第二试剂测定直接胆红素。结果：总胆红素回收率为９９．８５％，批内艰０．８２％，批间ＣＶ为１．５４％，与咖啡因法比较ｒ＝０．９９９９。ｔ＝１．３２３，Ｐ〉０．２     

糖化血清蛋白测定的自动分析

目的建立双试剂测定糖化血清蛋白的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用双试剂酶法直接测定.结果该法180 s达反应终点,线性达1 306μmol/L(y=0.983 5X+0.124,r=0.999 7);批内CV＜1.45%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%;平均回收率100.3%;加入TG＜7.6mmol/L,BIL＜456 μmol/L,Hb＜200g/L,UA＜1 240 μmol/L,GLU＜75.2 mmol/L时无显著干扰.结论该法适合全自动分析.     

邻苯二甲醛法测定血清尿素的研究

目的：建立简便，灵敏和稳定的血清尿素邻苯二甲醛测定法，方法；用邻苯二甲醛作显色剂，４－氨基安排比林作加速剂，钒酸铵作转色剂，在酸性体系中以分光光度法测定血清尿素。与二乙酰一肟法比较相关性良好，ｒ＝０．９９９。结论：该法灵敏，稳定和低成本，明显优于二乙酰一肟法。适用于血清尿素的常规手工和自动分析。     

以N-甲基葡胺为磷酸化受体测定血清碱性磷酸酶的实验探讨

目的评估以N-甲基葡胺作为磷酸化受体缓冲液测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性的方法。方法通过对试剂的合理组合和实验条件的优选,建立基于N-甲基葡胺的血清ALP测定方法,并与基于其他缓冲液的推荐方法进行对比。结果精密度,批内:CV=0.62%,批间:CV=2.3%;线性范围至少可达到2 073 U/L;分别与以2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP,X1)和二乙醇胺(DEA,X2)为磷酸化受体的ALP测定法比较:Y=1.29X1 13.25,r=0.999;Y=0.65X2 19.19,r=0.998。健康成人参考区间为44~133 U/L[(80.33±20.97)U/L]。结论N-甲基葡胺可替代AMP或DEA作为磷酸化受体缓冲液用于临床血清ALP活性的常规测定。     

Simple and sensitive determination of urea in serum and urine.

In this method for serum and urinary urea determination, the same reagent is used without predilution of urine samples. The method is based on the pH increase resulting from the ammonia released by urease hydrolysis of urea. o-Cresolphthalein complexone is used to monitor the pH change colorimetrically. Urea concentration and absorbance at 570 nm are linearly related for concentrations as great as 600 mmol/L for urine samples and 100 mmol/L for serum. There are no clinically significant interferences from physiological substances or drugs, and precision and accuracy are excellent (CV approximately 2%, except at very low concentrations in serum; analytical recovery was 99% in urine, 100% in serum). Results by this method (y) and by the Astra method (x) for urine correlated well (y = 0.991x - 2.87, Sy/x = 9.21, r = 0.994), as did the results by this method and by the total enzymatic method (x') for serum (y = 1.002x' + 0.192, Sy/x' = 0.598, r = 0.997). This method is applicable to automated as well as manual instruments, and one-reagent or two-reagent formats can be used.     

酶法测定血清钠离子的评价

目的评价酶法测定钠离子的性能。方法评价血清钠离子酶法试剂的准确性、精密度、开盖稳定性、线性、与电极法的相关性、回收率及抗干扰性。结果酶法测定钠离子的变异系数(CV)<2%,定标周期能够维持5 d,准确度满足朗道质控品要求,线性范围达到100～160 mmol/L,与电极法具有很好的相关性[相关系数(r)=0.989 9],回收率为100.9%,在胆红素≤600μmol/L、甘油三酯≤20 mmol/L、维生素C≤0.5 g/L、血红蛋白≤10 g/L、铵离子≤25 mmol/L、钾离子≤10 mmol/L、镁离子≤5 mmol/L、钙离子≤5 mmol/L、锌离子≤50 mmol/L、铜离子≤50 mmol/L对钠离子测定无明显干扰。结论钠离子酶法试剂有较好的重复性、准确性和稳定性,线性良好,抗干扰能力强,能满足临床使用要求。