FK506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的免疫病理学研究

目的 研究角膜移植免疫排斥反应的免疫病理学变化及免疫细胞和某些相关免疫分子在角膜移植免疫排斥反应中的作用,阐明了ＦＫ５０６的免疫抑制机理。方法 应用免疫组织化学染色方法检测ＦＫ５０６,环胞霉素Ａ及对照组角膜植片中ＣＤ＾＋４,ＣＤ＾＋８,巨噬细胞,白细胞介素－２受体,Ⅱ类主要组织相容性抗原,细胞间粘附分子－１及淋巴细胞功能相关抗原－１的表达。结果 排斥的角膜组织大表达上述免疫细胞和分子,ＦＫ５０６可     

重视角膜移植术后免疫排斥反应的防治

角膜移植术是角膜病盲人复明的最主要手段,但术后的免疫排斥反应仍是手术失败的最主要原因.随着我国医疗水平的不断提高,开展角膜移植手术的医院也不断增加.而如何减少术后的并发症和提高植片的长期透明率,是摆在众多从事角膜移植医师面前的一个重要问题.保持角膜移植术后植片长期透明的核心问题是重视术后随诊和免疫排斥反应的防治.本文主要从我国角膜移植的现状、存在的问题及如何减少免疫排斥反应的措施三个主要方面进行分析,并对目前角膜移植术后存在的一些普遍问题提出相应的处理措施和建议,以达到减少角膜移植术后由免疫排斥反应导致植片混浊的再次致盲问题.     

角膜移植术后免疫排斥反应34例分析

目的 探讨角膜移植术后发生排斥反应的相关因素。方法 我院1999年5月～2003年5月间行角膜移植手术80例(84只眼)，对术后发生排斥反应的34例(36只眼)进行回顾性总结分析。结果 84只眼中发生排斥反应36只眼(42．5％)。角膜新生血管者为20只眼，儿童患者4只眼。发生排斥反应的时间为术后20天～2年。术后3～6月发生率最高。上皮型10只眼，上皮下型1只眼。基质型8只眼，内皮型17只眼。角膜移植片透明愈合28只眼，半透明愈合6只眼，移植片完全混浊2只眼。结论 高危角膜移植、儿童术后随诊不及时、用药不科学等，都是角膜移植病人术后发生排斥反应的因素。     

Leflunomide抑制大鼠角膜移植排斥反应的免疫病理学研究

目的：研究角膜移植排斥反应的免疫病理学变化,阐明Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ的免疫抑制机理。方法：应用免疫组织化学染色方法检测环孢霉素Ａ、Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ及对照组角膜移植片中ＣＤ４＾＋细胞、ＣＤ８＾＋细胞、白细胞介素－２受体及主要组织相容性Ⅱ类抗原的表达。结果：排斥的角膜组织大量表达上述免疫细胞和分子,Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ可以对这些细胞和分子产生明显的抑制作用。结论：迟发型超敏反应和细胞毒性Ｔ细     

雷帕霉素缓释片防治兔高危角膜移植免疫排斥反应和新生血管增殖的研究

目的探讨雷帕霉素(RAPA)缓释片防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖的疗效及其作用机制。方法RAPA缓释片制作:RAPA与载体乙交酯-丙交酯-己内酯三元共聚物(PGLC)制成RAPA缓释片(W/W=50/50),每粒缓释片含RAPA0·5mg。65只健康新西兰大白兔,其中45只兔(45只眼)采用缝线法诱导角膜新生血管生成,选择大于3个象限、新生血管长入角膜超过3mm的40只兔按照随机数字表法分为对照组(A组)、1mgPGLC载体前房植入组(B组)、1%RAPA滴眼液组(C组)及0·5mgRAPA缓释片前房植入组(D组),每组10只兔;余20只兔为供体。对4组兔行右眼同种异体穿透性角膜移植术,术后观察90d,记录排斥指数(RI,为植片水肿、混浊及血管长入评分合计)和新生血管指数(NI,为血管长入植片评分)。定期检测C、D组兔房水中RAPA浓度;术后3周,原位杂交法对4组兔角膜植片中白细胞介素(IL)-2R、单核细胞化学吸引蛋白质(MCP)-1、Fas/FasL进行检测,采用免疫组化法对肿瘤坏死因子(TNF)α和血管内皮细胞生长因子(VEGF)进行检测。术后90d,病理组织学检查视网膜、肝肾结构变化。结果(1)免疫排斥:A、B、C及D组兔发生免疫排斥反应的平均时间分别为(16·5±2·5)、(16·0±2·6)、(47·1±13·2)、(87·6±5·8)d(P=0·000)。术后2周,4组兔植片RI分别为4·9±2·2、3·9±0·9、0·8±0·4、0·3±0·6(P=0·000)。术后12周分别为10·4±0·8、10·0±0·0、7·2±2·2、2·0±3·3(P=0·000)。(2)角膜新生血管:术后2周,4组NI数分别为2·4±0·7、2·1±0·5、0·6±0·5、0·3±0·5(P=0·000)。术后12周分别为3·8±0·5、3·8±0·4、0·8±0·7、0·4±0·8(P=0·000)。(3)房水中RAPA浓度:术后第2、4、8、12周,D组房水中RAPA浓度分别10·7、12·0、9·2、7·0ng/ml,C组房水中RAPA浓度检测不出。(4)细胞因子表达:A、B组植片大量表达IL-2R、MCP-1、TNF-α、VEGF细胞因子,C、D组不表达上述细胞因子,4组植片中Fas/FasL均不表达。(5)组织病理:4组兔视网膜、肝肾组织结构正常。结论局部应用RAPA可以防治兔高危角膜移植术后免疫排斥反应和角膜新生血管增殖,RAPA缓释片疗效优于滴眼液。     

全角膜移植术后免疫排斥反应的探讨

目的：评价对严重全角膜病变行带环形板层巩膜瓣全角膜移植术（CST）后免疫排斥反应的临床疗效。方法：对用药无法控制的严重全角膜病变患者10例进行回顾性研究，其中化脓性角膜溃疡9例，大泡性角膜病变伴全角膜白斑1例，全部病人均行CST。结果：随访1-23个月，平均10.2个月，10例视力均有不同程度提高；8例植片透明，2例植片半透明；5例术后3-4个月出现角膜新生血管（其中2例植片半透明）；2例术后半年出现免疫排斥反应。结论：CST是治疗严重角膜病变的有效方法，不但挽救眼球且能恢复一定的视力。     

角膜移植术后免疫排斥反应的探讨

目的：为有效控制角膜移植术后免疫排斥反应的发生，探讨角膜移植术后免疫排斥反应发生的因素。方法：对角膜手术后发生排斥反应者进行分析，总结发生的原因、时间，程度等，结果：123眼中发生免疫排斥反应46眼（37．4％），其中17眼发生不可逆的排斥反应，占排斥反应的36．96％；有角膜新生血管发生排斥反应41眼，占89．13％，内皮型排斥反应20眼，上皮型12眼，基质型3眼，混合型11眼，排斥反应发生时间为术后3周－3年，术后3－6月发生率最高，占46．48％，结论：免疫排斥反应的发生是多因素参与的复杂过程，与角膜新生血管的数量，角膜受损及感染的程度，植片的大小，手术的次数以及手术的时机和方式密切相关。     

角膜移植排斥反应的铺片免疫组化研究

目的 探讨角膜移植排斥反应的发生机制及其参与细胞的表型。方法 制备正常大鼠和穿透性角膜移植鼠的角膜和虹膜睫状体铺片,用８种单克隆抗体,于铺片上进行免疫组化染色。结果 正常周边角膜及角膜缘可见少量的Ｔ细胞（ＣＤ３）、辅助／诱导性Ｔ细胞（ＣＤ４）、抑制／细胞毒Ｔ细胞（ＣＤ８）、巨噬细胞、树突细胞、主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原阳性细胞及β转化生长因子阳性细胞;同种角膜移植术后７及１２天角膜和虹膜睫状体中     

鸵鸟角膜对兔板层角膜移植的排斥反应

目的：角膜穿孔属眼科急症，角膜外伤、感染和化学伤都可引起角膜穿孔，用角膜移植治疗穿孔效果较好，但角膜供体资源在我国目前仍较为缺乏。角膜移植排斥反应是造成移植失败的主要原因。为探索异种角膜移植材料，本实验研究鸵鸟对兔板层角膜移植的植片存活时间及排斥反应特点，以便评价鸵鸟角膜的应用前景。方法：将24只≤8周龄的健康新西兰白兔随机分成两组：A组12只兔为兔一兔同种异体板层移植组；B组12只兔为鸵鸟一兔异种角膜板层移植组，治疗及观察时间均为6wk。两组术后均予结膜下注射地塞米松。术后每日在裂隙灯显微镜下观察植片存活情况和排斥反应指数；术后每周测量新生血管面积；术后1，3，5wk各组取1只兔的术眼角膜行病理检查。结果：鸵鸟板层角膜植片的平均存活时间为23d。驼鸟一兔异种板层和同种板层角膜在1，2wk排斥反应指数及角膜新生血管面积无显著差异，第3wk起差异显著。结论：鸵鸟角膜植片在移植早期能保持透明，且有较好的生物相容性。鸵鸟角膜植片后期因新生血管生长和排斥反应加重而混浊，说明单独应用地塞米松不能完全控制异种植片的排斥反应。     

角膜移植免疫排斥反应防治研究进展

角膜移植术后发生免疫排斥反应是导致移植手术失败的主要原因。角膜移植与其他器官移植相比，不易发生免疫排斥反应，主要原因：前房的相关免疫偏离状态；血．房水屏障；角膜缺乏血管、淋巴组织；角膜中央区不含成熟抗原提呈细胞；房水中有大量免疫调节分子；眼前节有Fas配基表达等。角膜移植免疫排斥反应是一个复杂的反应过程，一般包括宿主对异体组织抗原的致敏和宿主对异体组织抗原的反应两方面。相应的治疗措施应围绕三方面：（1）阻断宿主对异源组织抗原的敏感性；（2）诱导免疫耐受，使淋巴不激活或活性减低；（3）降低或阻断免疫效应因素对角膜植片的破坏。随着对角膜移植排斥反应机制的深入研究，将有新的治疗措施出现，特别是诱导免疫耐受防治角膜移植排斥反应的研究前景乐观。     

Differences in leukocyte phenotype and interferon-gamma expression in stroma and endothelium during corneal graft rejection

Critical to the success of human corneal transplants is prevention of corneal endothelial rejection, yet little is known about the endothelial infiltrate. To examine the endothelium, a method for removal and processing this layer as a flat sheet was used and the infiltrate was compared with stroma and epithelium. LEW or PVG strain rat corneas were transplanted to PVG strain recipients. Clinical changes after transplantation were monitored by slit lamp and animals sacrificed at a range of time points during rejection. Clinically defined rejection, accompanied by an epithelial rejection line and endothelial cell infiltration, occurred between days 10 and 15. There was some infiltration of leukocytes in the stroma of isografts at these time points, but significantly more in allografts (p<0.003 for all subsets). There was no infiltration of isograft endothelium at any time and no infiltration of allograft endothelium on day 10. On day 15, there were similar numbers of all major subsets except B cells in the stroma, while on the endothelium macrophages, MHC class II(+) cells and CD8(+) cells predominated (p<0.001 CD4(+) vs CD8(+) cells). T cells and NK cells predominated in the epithelial rejection line. While TNF-alpha and IFN-gamma-producing cells were numerous in stroma and epithelium, no IFN-gamma-producing cells were found on endothelium. Distinct differences in infiltrative profile within layers of the cornea suggest that the mechanisms of rejection may also differ. The restricted endothelial cell profile and lack of IFN-gamma suggests that the anti-endothelial response may be modulated by the anterior chamber environment.     

Immunology of corneal allograft rejection. Associated human leucocyte populations

Human serum samples and peripheral blood mononuclear leucocytes (PBML) were collected from ten corneal transplant recipients over a two-year period at intervals before and after surgery, and during and after episodes of immunologic (rejection) reaction. Serum was monitored for the development of antibodies to histocompatibility antigens and PBML were stained with a panel of monoclonal reagents specific for T cell and for monocyte populations using indirect immunofluorescence. Patients who demonstrated an elevation in the Leu 2a+ (suppressor/cytotoxic) T cell population following an immunologic reaction ultimately accepted their grafts, whereas patients whose Leu 2a+ population was unaffected developed irreversible graft clouding. Additionally, a direct positive correlation between the development of elevated levels of lymphocytotoxic antibodies and helper T cells was noted in some patients during immunologic reactions. Neither DR-positive nor monocyte population changes demonstrated any consistent correlation with rejection episodes or final graft outcome.     

重视角膜移植植片内皮细胞慢性失功的研究

随着配型技术及新型免疫抑制剂的临床应用,器官或组织移植术后早期急性免疫排斥反应发生率明显下降,慢性移植物失功则成为导致远期移植失败的主要原因之一。研究表明角膜移植术后和全身器官移植术后同样存在角膜植片慢性失功的过程,且角膜植片慢性失功已经成为再次角膜移植的主要原因之一。因此,重视角膜植片慢性失功对其临床防治及延长角膜植片的存活率有着重要的意义。     

Outcome of corneal transplant rejection: a 10-year study

PURPOSE: To study the incidence of graft rejection and the predictive factors for its reversibility. METHODS: It is a retrospective study of 1927 consecutive penetrating keratoplasties performed between January 1990 and January 2000 with more than 6 months follow up. A total of 224 rejection episodes were noted in 183 patients. Of these, 184 first rejection episodes were included in this study. RESULTS: The incidence of first rejection episode was 9.55%. Of patients 87% were symptomatic during the episode with vision loss being the commonest. The average time of onset of rejection was 15.25 +/- 14.4 months (median 11.7 months). In total, 53.3% of rejections occurred within 1 year after surgery. Of the patients who completed minimum 3 months follow up after the rejection episode, the rate of reversibility was 63.3%. Major predictive factors for a poor outcome after rejection were repeated grafting and associated anterior vitrectomy during surgery. The reversibility of the episode did not differ significantly with the modality of treatment used, but treatment with intravenous steroids within 7 days of onset of rejection may have a role in reducing the recurrences of rejection episodes, thus increasing the graft survival. CONCLUSION: Regrafts and associated anterior vitrectomy were significant risk factors for a poor outcome following rejection episode.     

角膜共焦显微镜早期诊断兔高危角膜移植排斥反应的价值

目的:角膜共焦显微镜检查对兔碱烧伤角膜移植排斥反应进行研究,找寻排斥反应早期诊断的客观指标。方法:制作兔角膜碱烧伤模型,36d后行穿透性角膜移植,于角膜移植术后4,9,14,21~28d诊断排斥反应时,角膜共焦显微镜检查角膜。结果:排斥反应时角膜共焦显微镜检查见角膜植片炎性细胞浸润,角膜细胞丢失,新生血管生长。结论:角膜共焦检查有助于早期诊断排斥反应。     

选择性角膜内皮移植术

长期以来,治疗角膜内皮病变标准的方法为穿透性角膜移植术(PK)。虽然总体上说,PK手术成功率高,但由于术后视力恢复时间长,且可出现多种并发症,如高度散光／不规则散光、植片排斥反应以及与缝线和切口愈合相关的并发症等,因此并非一种理想的手术方式。过去十几年内,出现了多种选择性角膜内皮移植术,如经角膜瓣途径的内皮移植术、经角巩膜袋途径的内皮移植术及带活性内皮细胞的Descemet’s膜移植术等。与PK手术相比,这些新的手术方法理论：有着多方面的优势,初步的临床结果亦令人鼓舞,有可能成为替代传统PK手术治疗角膜内皮病变的更有效的方法。     

角膜移植排斥反应中调节性T细胞的发展及应用

角膜移植术是角膜盲的有效治疗方式,是角膜盲患者复明的唯一希望。角膜无血管、无淋巴管,被称为免疫赦免器官,因此角膜移植术的成功率明显高于其他器官移植术,但角膜移植术后的排斥反应仍然是角膜移植术失败的主要原因。器官移植术后的免疫反应主要是免疫细胞向淋巴组织、炎症部位的定向移动,而调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在免疫调节中起着关键性作用,其可以通过调节和抑制效应T细胞的活化来诱导免疫耐受,从而减轻角膜移植术后的排斥反应。据此,文章对在角膜移植术后发生免疫排斥反应中Treg的来源、作用机制以及治疗等多方面做简单综述,同时也探讨了应用冬虫夏草提取物FTY720增强Treg的有效性,以期为后续针对性开展临床应用转化及基础研究提供一定的参考。     

角膜上皮在大鼠穿透角膜移植排斥反应中的作用

目的研究角膜上皮在大鼠穿透角膜移植排斥反应中的作用。方法近交系F344和Wistar大鼠为研究对象，建立穿透角膜移植模型。实验动物随机分为6组，分别为保留供体上皮、去除供体上皮和保留受体上皮的同基因及异基因组。术后观察排斥发生时间，并行苏木精-伊红染色及VEGF、CD4、CD8、RT1B的免疫组织化学染色。结果同基因移植组均未发生排斥反应，去除供体上皮组VEGF表达较保留供受体上皮组增多（P〈0．01）。异基因组均发生排斥反应，保留受体上皮组植片存活时间较其他两组延长（P〈0．01）；植片中CD4、CD8和RT1B抗原的表达亦较其他两组少（P〈0．01）。结论上皮在诱导排斥反应发生中具有重要作用，保留受体上皮可以明显延长穿透角膜移植植片的存活时间。     

加强我国角膜移植免疫研究

通过角膜移植更换混浊或病变的角膜,是帮助角膜盲患者恢复视力的有效措施,但植片排斥反应的发生是导致角膜移植手术远期失败的主要原因,如何减少因植片排斥引起的再次致盲是角膜病研究的重点。本文分析了我国角膜移植免疫研究存在的问题：（1）没有建立标准的抗排斥治疗方案;（2）缺乏安全、有效的抗排斥反应治疗药物;（3）忽视围手术期的并发症处理;（4）角膜移植免疫基础研究薄弱。针对上述问题产生的原因,提出了相应的处理措施和建议,以增强角膜病专科医生对角膜移植免疫临床和基础研究的重视,促进我国角膜盲的防治工作取得更大的发展。     

单纯基质型角膜植片排斥1例

患者,男,65岁,因中央角膜白斑性角膜混浊而行穿透性角膜移植术。术后3wk发现单纯基质型角膜植片排斥,并经组织学证实。6mo后再次行穿透性角膜移植术,单纯基质型角膜植片排斥再次发生。单纯基质型角膜植片排斥的诊断和处理是一个棘手问题。