足细胞分子高表达致阿霉素肾病大鼠发生蛋白尿

目的 动态观察足细胞裂孔隔膜复合体分子nephrin、podocin、CD2AP及α-actinin-4在阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生发展中的表达变化，探讨其在蛋白尿发生发展中的分子行为及其机制。方法 尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型，3、7、14、28 d每组处死6只大鼠留取肾脏标本。应用间接免疫荧光染色、实时定量PCR、Western 印迹分别检测各个时间点nephrin、podocin、CD2AP、α-actinin-4的分布、mRNA和蛋白表达量的变化。结果 (1)14 d肾病组大鼠24 h尿蛋白显著高于对照组(P < 0.01)，增高持续到28 d。(2)透射电镜显示14 d肾病组足突不同程度变宽，28 d足突弥漫性融合。(3)与对照组相比，从第7天开始肾病组nephrin和podocin染色从沿肾小球毛细血管袢线样分布向不连续粗颗粒样的分布模式转变；CD2AP节段染色增强区逐渐扩大，有的区域呈斑片状和连续线状增强；α-actinin-4从沿肾小球毛细血管袢均匀的点线样分布向不均匀粗颗粒的分布转变，而且随时间进展这种转变逐渐加重。(4)与对照组相比，肾病组于7 d时nephrin mRNA表达显著增高(P < 0.01)；podocin mRNA表达14 d时显著增高(P < 0.05)，直至28 d(P < 0.05)；CD2AP mRNA表达28 d时显著增高(P < 0.05)。(5)与对照组相比，肾病组nephrin蛋白表达28 d时显著增高(P < 0.05)；podocin蛋白表达于7 d时显著增高(P < 0.05)，而28 d时又显著降低(P < 0.05)；CD2AP蛋白表达于14 d时显著增高(P < 0.05)，直至28 d (P < 0.05)。(6)α-actinin-4 mRNA与蛋白表达在实验过程中未出现明显变化。结论 nephrin、podocin和CD2AP的表达增加及分布异常是导致阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生发展的分子机制，而分子表达的增加是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。     

podocin基因敲低对小鼠足细胞nephrin和α-actinin表达与分布的影响

目的 研究足细胞分子podocin、nephrin和α-actinin之间的相互作用和联系。方法 将针对podocin分子设计的特异RNA干扰(RNAi)质粒导人体外培养的小鼠足细胞系(MPC5)；应用免疫荧光染色及双标记在共聚焦显微镜下观察nephrin、podocin和α-actinin的分布方式；半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测podocin、nephrin，α-actinin-4及内参照GAPDH／β-actin在mRNA水平和蛋白水平的表达量。结果 (1)干扰组podocin的荧光强度显著低于对照组，其mRNA和蛋白的表达量分别下降了65％和89％。免疫双标记显示podocin的分布发生了明显变化：对照组podocin不但分布在胞核的周围，而且在胞浆呈放射性沿着细胞骨架分布，以及主要在胞膜上呈连续性的线状分布；干扰组podocin呈点状分布在胞核周围。(2)干扰组nephrin的荧光强度亦明显减低，其mRNA及蛋白的表达量分别减少了70％和78％。免疫双标记显示nephrin的分布也发生了显著变化：干扰组nephfin亦呈点状分布在胞核周围；在对照组，nephrin和podocin的分布方式相同。(3)干扰组和对照组α-actinin的分布及在mRNA和蛋白水平上的表达量无明显差异，呈细丝状均匀分布于胞质内，亦呈放射性分布于足细胞伸出的突起中。结论 通过RNAi成功地使MPC5的podocin表达下调。Podocin和nephrin分子关系紧密，可能存在着直接的分子间反应；podocin与α-actinin无直接的作用和联系。     

三种不同药物作用下足细胞分子的变化

目的 从足细胞分子的角度探讨抗蛋白尿药物作用的细胞分子机制。方法 建立阿霉素肾病大鼠模型。注射阿霉素后次日分别给予利生普利、泼尼松以及全反式维甲酸(ATRA)干预蛋白尿。注射阿霉素后第3、7、14、28 天每组处死6 只大鼠，留取肾脏标本。应用间接免疫荧光染色、实时PCR、Western印迹分别检测各个时间点nephrin、podocin、CD2相关蛋白(AP)、α辅肌动蛋白(actinin)-4 的分布、mRNA 和蛋白表达量的变化。应用免疫沉淀检测nephrin 与podocin、nephrin与CD2AP 分子间作用以及nephrin 磷酸化水平。结果 与对照组相比，第14天时肾病组尿蛋白显著增加(P < 0.01)。与肾病组相比，利生普利、泼尼松和ATRA干预后均显著降低了蛋白尿( P < 0.05)， 减轻了足突融合。通过分析不同时间点足细胞分子的表达，显示3种干预药物均引起了nephrin、podocin、CD2AP 表达的变化，维持了正常的nephrin 磷酸化水平，而且利生普利和泼尼松首先抑制了podocin 分子，而ATRA首先抑制了CD2AP 分子的异常变化。与此同时，nephrin、podocin、CD2AP 和α-actinin-4 分子的分布在干预后也趋于正常。此外，无论在肾病组还是干预组大鼠，nephrin 与podocin、nephrin 与CD2AP 分子间一直保持着共沉淀关系。 结论 利生普利、泼尼松和ATRA 都通过稳定重要的足细胞分子nephrin、podocin、CD2AP 来发挥它们的抗蛋白尿作用。     

扶正祛风方对膜性肾病大鼠肾组织nephrin和TGF-β_1表达的影响

目的:探究扶正祛风方对膜性肾病大鼠肾组织nephrin、TGF-β_1表达的影响。方法:实验大鼠随机分为正常组和造模组,建立阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)肾炎模型,造模组分为模型组、扶正祛风方组,连续给药4周。免疫组化检测肾小球nephrin、TGF-β_1的分布及表达强度; Western blot检测肾组织nephrin、TGF-β_1的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组nephrin沿肾小球毛细血管袢分布减少,蛋白表达有所降低(P 0. 05),TGF-β_1沿肾小球毛细血管袢分布增加,蛋白表达有所升高(P 0. 05);与模型组比较,扶正祛风方组nephrin沿肾小球毛细血管袢分布增加,蛋白表达有所升高(P 0. 05),TGF-β_1沿肾小球毛细血管袢分布减少,蛋白表达有所降低(P 0. 05)。结论:扶正祛风方可调控膜性肾病大鼠肾组织nephrin、TGF-β_1的表达。     

血管紧张素Ⅱ灌注诱导nephrin表达改变与足细胞凋亡

目的 研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）灌注对大鼠足细胞裂隙膜分子nephrin表达及足细胞凋亡的影响，以及探讨AngⅡ引起蛋白尿及肾小球硬化的机制。方法 36只雄性Sprague Dawley大鼠分为AngⅡ灌注组(400 ng&#8226;kg-1&#8226;min-1)、生理盐水灌注组和正常对照组，测定28 d内大鼠血压及尿蛋白。分别于14、28 d处死动物取肾，观察组织学改变，并用免疫荧光、免疫电镜检测nephrin分布。RT-PCR及Western印迹法分别检测nephrin mRNA及蛋白表达。TUNEL法检测足细胞凋亡。结果 (1) AngⅡ灌注组大鼠血压升高，14 d达峰值并维持该水平至28 d；AngⅡ灌注7 d即出现蛋白尿，并持续增加。(2) AngⅡ灌注14 d时，足细胞裂隙膜变窄；灌注28 d时，足突增宽及节段性融合，部分足细胞有凋亡小体形成，少数肾小球出现节段性硬化。TUNEL法检测发现足细胞凋亡[（2.7±1.6）个/肾小球切面]，凋亡数与蛋白尿量呈正相关（r = 0.86，P < 0.01）。(3) AngⅡ灌注14 d时，肾皮质nephrin mRNA及蛋白表达上调（P < 0.05）。nephrin由正常的沿毛细血管袢线状分布向粗颗粒、团块状分布模式转变。AngⅡ灌注28 d时，肾皮质nephrin mRNA及蛋白表达下降（P < 0.05），且nephrin蛋白表达与足细胞凋亡数呈负相关（r = －0.63，P < 0.01）。 结论 AngⅡ灌注诱导的nephrin表达及分布改变可能导致了足细胞凋亡及肾小球硬化的发生与发展。     

1,25(OH)2D3抑制嘌呤霉素氨基核苷酸肾病大鼠足细胞凋亡

目的 观察1，25（OH）2D3对嘌呤霉素氨基核苷酸（PAN）肾病大鼠足细胞凋亡的影响。 方法 72只雄性SD大鼠随机分为健康对照组（NC）、PAN组和1，25（OH）2D3治疗组 [1，25（OH）2D3 0.2 μg·kg-1·d-1灌胃]。一次性尾静脉注射PAN 100 mg/kg体质量建立足细胞损伤的PAN肾病动物模型。于3、7、14、21 d分批处死动物，分别检测不同时间点尿蛋白量（24 h）和肾功能。光镜和透射电镜观察肾组织学改变。TUNEL法检测足细胞凋亡。RT-PCR、免疫荧光、免疫组化分别检测nephrin、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达。Western印迹检测磷酸化（p）-Smad2/3的表达。 结果 （1）PAN组各时间点BUN、Scr、尿蛋白量（24 h）[7 d时，（20.26±4.87） mg比（1.01±0.41） mg，P < 0.01]均高于同期的NC组，而肾小球足细胞显著减少[14 d时，(10.9±4.2) 个/肾小球切面比(31.9±6.2)个/肾小球切面，P ＜ 0.01]，且足突增宽融合。1，25（OH）2D3治疗组各时间点尿蛋白量（24 h）[7 d时（9.95±3.82） mg]和BUN、Scr显著低于PAN组（P < 0.05），且肾脏病理改变减轻。（2）PAN组7 d时nephrin mRNA和蛋白的表达显著降低，nephrin由正常的沿毛细血管襻线状分布向颗粒状、团快状改变，足细胞凋亡数显著增加[14 d时，（37.4±7.9）个/肾小球切面]。与PAN组相比，1，25（OH）2D3治疗组各时间段nephrin mRNA和蛋白的表达显著增加，且保持着正常的沿毛细血管襻线状分布，足细胞凋亡数显著减少[14 d时，(21.9±6.2) 个/肾小球切面，P < 0.01]。（3）PAN组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达均高于NC组（P < 0.01），1，25（OH）2D3治疗组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达低于PAN组（P < 0.01）。 结论 1，25（OH）2D3能有效地抑制PAN诱导的足细胞凋亡，减少尿蛋白，其对足细胞损伤的保护作用可能与抑制TGF-β1信号通路有关。     

复方积雪草防治局灶节段性肾小球硬化模型大鼠足细胞损伤的实验研究

目的:探讨复方积雪草对局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulo sclerosis,FSGS)模型大鼠足细胞裂孔膜蛋白nephrin、podocin表达的影响,阐述其延缓肾小球硬化的部分分子生物学机制。方法:采用左肾摘除+阿霉素重复静脉注射方法建立FSGS模型。复方组分别予高中低剂量复方积雪草膏剂灌胃;对照组予苯那普利混悬液;于第8周末留取24h尿蛋白定量,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和血浆蛋白(Alb);留取右肾标本,光镜标本行HE染色;用免疫组化法观察裂孔膜蛋白nephrin和podocin表达;RT-PCR法检测肾组织nephrin和podocinmRNA表达。结果:各复方组24h尿蛋白定量及血Scr、BUN、TC、TG较模型组有显著改善,且与西药组疗效相似。RT-PCR及免疫组化结果显示模型组足细胞裂孔膜蛋白表达较正常组明显降低(P<0.05)。而各治疗组表达较模型组均有明显增加(P<0.05),且与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方积雪草能通过上调模型大鼠肾小球内nephrin和podocin分子表达,减轻足细胞损伤,延缓肾小球硬化。     

厄贝沙坦治疗糖尿病肾病大鼠蛋白尿作用机制

目的 研究厄贝沙坦治疗糖尿病肾病(DN)蛋白尿作用机制.方法 应用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病肾病模型,成模大鼠随机分为模型对照组(M)、厄贝沙坦干预组(I),另设正常对照组(C).各组干预12周后,分别检测:①血糖、血肌酐、24h尿蛋白定量等;②肾脏病理、电镜以及免疫组化分析;③实时定量RT-PCR分析.结果 与正常组比较,模型组大鼠24h尿蛋白含量显著增加,肾小球基底膜增厚,足细胞nephrin、podocin表达显著减少,通过厄贝沙坦干预治疗,上述指标改善(P＜0.05),且蛋白尿的程度与nephrin、podocin表达呈负相关(P＜0.05).结论 厄贝沙坦可通过拮抗DN大鼠的足细胞损害;减少其尿蛋白.     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞的保护作用。方法：制备DN大鼠模型,将动物随机分为正常对照组、DN组和NAC组。8周后观察尿蛋白排泄量,免疫荧光方法和Western blotting检测肾皮质nephrin和podocin蛋白表达,透射电镜检测足细胞超微结构变化。结果：（1）与正常对照组比较,DN组和NAC组尿白蛋白排泄率增多（P〈0.01）,nephrin和podocin蛋白表达减少（P〈0.01或P〈0.05）和肾脏病理病变明显;（2）与DN组比较,NAC组尿蛋白排泄减少（P〈0.01）,nephrin和podocin蛋白表达较高（P〈0.01或P〈0.05）和足细胞的病变较轻。结论：NAC对DN大鼠肾脏保护作用,其部分机制与上调nephrin和podocin蛋白表达及改善足细胞病变有关。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠足细胞病变的影响

目的 探讨雷公藤多苷（TWP）对糖尿病肾病大鼠足细胞病变的影响。 方法 SD大鼠100只,按随机数字表法分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）与TWP治疗组（C组）。并将C组按4、8、16 mg?kg-1?d-1不同给药剂量分为3组（Ca、Cb、Cc）。糖尿病组与TWP治疗组大鼠分别给予链脲菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。12周后检测24 h尿蛋白量、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、外周血白细胞（WBC）、血糖（Glu）、肾质量/体质量（KW/BW）的变化;HE染色检测肾组织病理变化;透射电镜测量足细胞超微结构变化;免疫荧光法检测肾皮质nephrin和podocin蛋白表达。 结果 （1）与A组比较,B组及C组Scr、BUN增高（P ＜ 0.05）;Glu、KW/BW和24 h尿蛋白量显著增高（P ＜ 0.01）,除Cc组（3/20）出现肝酶（ALT、AST）增高及WBC下降外,各组ALT、AST、WBC差异无统计学意义;肾脏皮质nephrin和podocin蛋白表达减少,肾小球、小管间质及足细胞病变明显。（2）与B组比较,C组KW/BW和24 h尿蛋白量降低（P ＜ 0.01）,肾脏皮质nephrin和 podocin蛋白表达增高（均P ＜ 0.01）,肾小球、小管间质及足细胞病变明显减轻,并随雷公藤多苷剂量的增加而越加明显。 结论 TWP对糖尿病大鼠足细胞病变具有保护作用,并与剂量相关。其部分机制可能与上调nephrin和podocin蛋白表达有关。     

雷公藤内酯醇对IgA肾病大鼠蛋白尿和nephrin、podocin蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察雷公藤内酯醇(TP)对IgA肾病(IgAN)大鼠尿蛋白和足细胞nephrin、podocin蛋白及mRNA表达的影响。方法:采用牛血清白蛋白+四氯化碳+脂多糖的方法建立IgAN大鼠模型。将60只大鼠随机分为正常组、模型组、洛丁新组、TP剂量组、TP中剂量组、TP高剂量组,每组10只。于0,10,14周收集血尿标本,并处死大鼠留取肾组织标本。检测24 h尿蛋白定量,血生化指标,分别采用实时定量PCR及ELISA法检测肾组织nephrin、podocin mRNA和蛋白表达。结果:(1)实验前各组大鼠尿蛋白差异无统计学意义(P>0.05),第10周末各造模组蛋白尿均明显高于正常组(P<0.01),第14周末TP各剂量组及洛丁新组蛋白尿均较模型组明显减少(P<0.01),TP高剂量组Alt值高于其余各组(P<0.05);(2)与正常组相比,模型组nephrin、podocin蛋白、mRNA表达明显降低(P<0.01);TP各剂量组及洛丁新组nephrin、podocin蛋白、mRNA表达均较模型组明显增高(P<0.05);TP中、高剂量组较洛丁新组nephrin、podocin蛋白浓度显著增高(P<0.05);TP各剂量组与洛丁新组及TP各剂量组间nephrin、podocin mRNA表达均差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TP能够明显减轻IgAN大鼠的蛋白尿,且能明显提高肾组织nephrin、podocin mRNA及蛋白的表达。提示TP能调节IgAN足细胞相关分子nephrin、podocin基因及蛋白的表达,减少足细胞损害,减少尿蛋白。     

大鼠被动型Heymann肾炎早期足细胞相关蛋白表达的改变

特发性膜性肾病(IMN)是临床上成人肾病综合征常见的病理类型之一.但迄今发病机制仍不明.有关膜性肾病足细胞裂孔膜蛋白如nephrin、podocin、CD2AP以及骨架蛋白α-actinin-4表达的变化、特别是早期的改变及其在膜性肾病发生中的作用报道很少.大鼠Heymann肾炎(HN)模型的表现及病理改变与人类膜性肾病十分相似,已作为人类膜性肾病的动物模型广泛应用[1].我们通过建立大鼠被动型HN(PHN)模型,应用间接免疫荧光激光共聚焦显微镜观察肾小球足细胞nephrin、podocin、CD2AP以及α-actinin-4在PHN大鼠早期表达的变化,以探讨膜性肾病的发病机制.     

肾病综合征患者肾组织podocin的表达

目的 观察不同病理类型&#65380; 不同激素反应性肾病综合征(NS)患者肾小球足细胞中podocin的表达和分布特征&#65377;方法 肾组织作冰冻切片免疫荧光双染色, 以激光共聚焦显微镜采集图像&#65377;与定位标志Ⅳ型胶原α3链比较&#65377; 受检NS患者21例, 其中局灶节段性肾小球硬化(FSGS)12例(难治性7例, 非难治性5例)&#65380; 微小病变(MCD)5例&#65380; 膜性肾病(MN)4例;正常肾组织对照3例&#65377;采用LSM 510图像处理系统进行处理&#65377;荧光强度以吸光度表示&#65377; 结果 (1)podocin在正常肾组织沿肾小球基底膜呈连续&#65380; 线形分布&#65377;部分FSGS患者podocin的分布呈点状&#65380; 短线条状, 少数患者未见podocin沉积&#65377;(2)FSGS患者肾小球中podocin表达量(80.5±33.5)与对照正常肾组织(138.4±38.1)比较,显著减少(P=0.0211), 其中难治性FSGS(67.2±30.5)与正常肾组织的差异有统计学意义(P=0.0131); 非难治性FSGS患者(99.0±31.0)与正常肾组织的差异无统计学意义(P=0.1585)&#65377;(3)MCD(112.1±47.6)&#65380; MN(92.5±34.8)患者podocin的表达量亦降低,与正常肾组织比较,无统计学意义(P=0.4497, P=0.1570)&#65377;(4)不同病理类型各组NS患者肾小球中podocin表达量的差异均无统计学意义(P > 0.05)&#65377;结论 FSGS的NS患者肾小球中podocin的表达减少, 难治性FSGS患者尤为明显, 部分FSGS患者podocin分布发生改变&#65377;podocin的检测可能在FSGS激素疗效评价方面有一定价值&#65377;     

雷公藤多苷对阿霉素肾病大鼠Dicer酶的影响

雷公藤制剂被用于治疗肾小球肾炎已有30多年的历史,在减少尿蛋白方面,其疗效显著[1].目前已发现其抗蛋白尿作用与恢复nephrin、podocin表达有关.我们用阿霉素肾病大鼠模型进行研究,进一步探讨其抗蛋白尿作用机制.     

根据细胞周期序贯应用免疫抑制剂治疗大鼠阿霉素肾病

目的 观察3种根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的治疗效果.方法 以两次注射的方法制备阿霉素肾病大鼠模型,设正常对照组(8只)、肾病组(8只)、甲基泼尼龙(MP)+环孢素A(CsA)+霉酚酸酯(MMF)治疗组(8只)、MP+CsA+环磷酰胺(CTX)治疗组(8只)和MP+他克莫司(FK506)+雷帕霉素(Rapa)治疗组(8只).检测24 h尿蛋白量和血清总蛋白(TP)、白蛋白( Alb)、胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);观察肾组织病理变化;Western印迹法检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达;免疫组化和实时荧光定量PCR法检测nephrin和podocin的表达.结果 (1)2周末、4周末、8周末、12周末肾病组24 h尿蛋白量均显著高于对照组(均P＜0.01),治疗组大鼠24 h尿蛋白量在8周末、12周末均显著低于肾病组(均P＜ 0.05),治疗组之间差异无统计学意义.(2)肾病组TP、Alb显著低于对照组(均P＜0.01),TG、Chol显著高于对照组(均P＜0.01),治疗组TP、Alb显著高于肾病组(均P＜ 0.05),TG、Chol显著低于肾病组(均P＜0.05),治疗组之间各生化指标差异均无统计学意义.(3)3组治疗方案均可抑制CTGF蛋白的表达,其中尤其以MP+FK506+Rapa组合方案效果显著.(4)相比对照组,肾病组大鼠nephrin和podocin蛋白及其mRNA的表达均显著减少(均P＜0.01);治疗组nephrin、podoein的表达和分布均有所恢复.结论根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的病理损伤均有显著改善,可以有效减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白量;升高TP和Alb,减少TG和Chol;可以恢复nephrin、podocin在阿霉素肾病大鼠肾脏中的表达;并抑制CTGF蛋白的表达,明显改善肾脏纤维化.     

雷公藤多苷对阿霉素肾病大鼠Dicer酶的影响

雷公藤制剂被用于治疗肾小球肾炎已有30多年的历史,在减少尿蛋白方面,其疗效显著[1].目前已发现其抗蛋白尿作用与恢复nephrin、podocin表达有关.我们用阿霉素肾病大鼠模型进行研究,进一步探讨其抗蛋白尿作用机制.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗纤维连接蛋白肾小球病一例

患者为中年女性,因蛋白尿起病,有肾脏病家族史。肾组织病理检查电镜下见肾小球系膜区和毛细血管袢内皮下大量高电子密度的致密物沉积,免疫荧光染色示纤维连接蛋白阳性,颗粒状弥漫分布于系膜区及血管袢,纤维连接蛋白肾小球病诊断明确。有血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗后患者尿蛋白量逐渐减少至阴性。     

雷公藤多苷对阿霉素肾病大鼠Dicer酶的影响

雷公藤制剂被用于治疗肾小球肾炎已有30多年的历史,在减少尿蛋白方面,其疗效显著[1].目前已发现其抗蛋白尿作用与恢复nephrin、podocin表达有关.我们用阿霉素肾病大鼠模型进行研究,进一步探讨其抗蛋白尿作用机制.     

足细胞与Alport综合征蛋白尿的关系

目的 探讨足细胞与Alport综合征（AS）蛋白尿的关系。 方法 AS 患者21例,男13例,女8例,根据24 h尿蛋白量将患者分3组, 10例<30 mg/kg为轻度蛋白尿组, 4例30~50 mg/kg为中度蛋白尿组,7例>50 mg/kg为重度蛋白尿组。正常肾组织对照3例。电镜下根据平均足突宽度=л/4×（Σ基底膜长度/Σ足突个数）,计算每例患者足突宽度。分析足突宽度与蛋白尿关系。用免疫组化方法分析肾组织中裂孔隔膜分子nephrin、podocin和细胞骨架分子synaptopodin的表达。 结果 AS患者肾小球足细胞足突宽度（420~2270 nm）与24 h尿蛋白量呈正相关（r = 0.765,P < 0.01）。轻度蛋白尿组足突宽度[475（420~900 nm）]显著低于重度蛋白尿组[1520（480~2270） nm]（P < 0.05）。重度蛋白尿组患儿nephrin和podocin表达分布发生改变;表现为弥漫足突融合者synaptopodin表达分布发生改变。2例蛋白尿病程较短（1年）患儿无弥漫足突融合,synaptopodin分布正常,但nephrin和podocin分布异常。 结论 肾小球足细胞足突融合、裂孔隔膜及足细胞骨架分子参与AS患儿大量蛋白尿的发生,裂孔隔膜损伤似乎早于足细胞骨架改变。对蛋白尿早期干预可能有助于延缓疾病进展。     

益肾胶囊对高糖环境下小鼠足细胞nephrin、podocin表达的影响

目的:通过探讨益肾胶囊含药血清干预高糖环境下培养的小鼠足细胞nephrin、podocin的表达,以期为益肾胶囊防治糖尿病肾病提供理论依据。方法:将体外培养的小鼠足细胞随机分为7组:正常组、高糖组、等渗组、益肾低剂量组、益肾中剂量组、益肾高剂量组、贝那普利组;按照上述分组培养48 h后,用CCK-8法检测足细胞的增殖;免疫荧光方法检测足细胞nephrin、podocin的表达;用Western blot检测足细胞nephrin、podocin的表达。结果:与正常组相比,高糖组足细胞的增殖明显降低(P0.01),nephrin及podocin的蛋白表达明显下调(P0.01);与高糖组相比,益肾高剂量组与贝那普利组足细胞的增殖显著升高(P0.01),nephrin及podocin的蛋白表达明显上调(P0.01);与贝那普利组相比,益肾高剂量组足细胞的增殖、nephrin及podocin的蛋白表达无明显变化(P0.05)。结论:高糖环境下足细胞nephrin、podocin的表达明显减少;益肾胶囊含药血清可能是通过上调nephrin、podocin的表达,从而保护了肾小球足细胞,其具体机制有待进一步研究。