哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡与Caspase-3及Bcl-2基因家族的关系

目的：探讨哇巴因凋亡诱导Jurkat细胞凋亡的机制。方法：四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用；应用流式细胞术、原位末端标记技术(TUNEL)等观察细胞凋亡；应用Western—blot测定Caspase-3的活性亚单位及Bcl-2、Bax蛋白表达水平；比色法检测Caspase-3活性。结果：哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡，细胞凋亡过程中，Bax蛋白表达增加，Caspase-3活性明显升高。结论：结论：哇巴因可能通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达从而激活Caspase途径诱导Jurkat细胞凋亡。     

Caspase3在哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 探讨哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡的机制。方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用；应用DNA片段分析、流式细胞术观察细胞凋亡；半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)基因表达水平；应用westernblot测定caspase3的活性亚单位；比色法检测caspase3活性。结果 哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡，在细胞凋亡过程中，caspase3活性明显升高。结论 caspase3活化参与了哇巴因诱导Jurkat细胞的凋亡过程。     

前列腺癌p53、bcl-2、bax基因表达与凋亡、增殖的关系

目的:研究前列腺癌组织中细胞增殖与细胞凋亡,及其相关蛋白表达意义。方法:采用原位细胞凋亡标记技术(TUNEL)及免疫组织化学ABC法对36例前列腺癌(Pca)和11例正常前列腺(NP)组织石蜡切片p53、bcl鄄2、bax、PCNA蛋白及细胞凋亡检测。结果:前列腺癌细胞的增殖指数和细胞凋亡指数较NP明显增高,且AI/PI比值较正常组织AI/PI低(P<0.01);随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平明显增加(P<0.01)。p53蛋白表达与前列腺癌细胞增殖水平相关;bcl鄄2蛋白表达与细胞凋亡水平相关(P<0.05);bax基因表达与凋亡无关,但发现它们的bcl鄄2/bax的比值与凋亡有关。表明高bcl鄄2/bax比值多见于低凋亡组,低bcl鄄2/bax比值多见于高凋亡组。结论:细胞增殖与细胞凋亡均参与了前列腺癌的发生、发展。p53基因与细胞增殖水平的调控有关。bcl鄄2和bax在细胞凋亡调节中起到重要作用,由于bcl鄄2蛋白过量表达引起bcl鄄2/bax失平衡,在前列腺癌发生、发展过程中起到重要作用。     

结肠癌及其癌前病变中bcl-2,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系

[目的 ]研究结肠癌及其癌前病变中bcl 2 ,bax蛋白的表达与细胞凋亡的关系 .[方法 ]用免疫组织化学S P法检测bcl 2及bax蛋白 ,TUNEL法检测细胞凋亡 .[结果 ]细胞凋亡指数在腺瘤中表达最高 ,与正常组织中的比较有非常显著性差异 ,而在腺癌中表达最低 ,与腺瘤中的比较有非常显著性差异 ;bcl 2蛋白在腺癌中的表达率最高 (34 / 40 ,85 % ) ,其次是腺瘤 (10 / 15 ,6 6 % ) ,两者与正常及息肉组织比较均有显著性差异 ;bcl 2阴性的腺瘤凋亡指数与bcl 2阳性的腺瘤凋亡指数比较有显著性差异 ;bax蛋白阳性的腺瘤及腺癌凋亡指数与bax阴性的腺瘤及腺癌比较均有显著性差异 .[结论 ]bcl 2蛋白的过表达在结肠癌发生发展过程中起重要作用 ;bcl 2蛋白对细胞凋亡起抑制作用 ,而bax蛋白对细胞凋亡起促进作用     

丹参诱导大鼠肝星状细胞凋亡作用的研究

目的 利用体外培养大鼠传代星状细胞为模型，观察丹参对星状细胞凋亡相关蛋白FasL、Fas、bax和bcl—2表达的调节作用，以进一步阐明丹参诱导星状细胞凋亡的机理。方法 大鼠星状细胞的分离采用胶原酶原位循环灌流法。星状细胞经20g／L丹参作用48h后，用免疫细胞化学法检测FasL、Fas、bax和bcl—2，用Western blot法检测bcl—2表达。结果 免疫细胞化学结果表明：星状细胞经丹参作用后FasL表达明显增强，Fas稍增加，bax明显增强，bcl—2减少；用Western blot法未能检出bcl—2。结论 丹参通过Fas途径及增加bax表达和减少bcl-2诱导肝星状细胞凋亡。     

β-淀粉样肽（25-35）对PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响

目的：观察β-淀粉样肽25-35（β-amyloid peptide 25-35,Aβ25-35）诱导PC12细胞凋亡和对bax及bcl-2基因表达的影响。方法：采用MTT法检测PC12细胞的存活率;DNA电泳法观察细胞凋亡时特异性梯状条带;Hochest33258-PI荧光染色观察细胞核形态学改变;RT-PCR检测bax和bcl-2基因mRNA表达变化,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达变化。结果：随着Aβ25-35浓度的增加,PC12细胞存活率逐渐降低;DNA电泳呈凋亡特异性梯状条带;荧光染色可见细胞核碎裂、核固缩等凋亡特征;bax mRNA及Bax蛋白表达增加,bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达降低。结论：在Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡过程中,Bax和Bcl-2可能起重要作用。     

木黄酮诱导T24细胞凋亡和bcl-2基因表达的研究

目的　研究木黄酮诱导膀胱癌T2 4细胞凋亡及与bcl 2基因表达的关系。方法　采用末端标记(TUNEL)法及流式细胞术 (FCM)研究T2 4细胞凋亡 ;采用FCM和RT PCR法检测bcl 2蛋白表达及mRNA表达水平的变化。结果　TUNEL法显示凋亡的T2 4细胞呈明显的形态学改变 ,FCM显示随木黄酮作用时间延长 ,T2 4细胞凋亡率逐渐增加 ,bcl 2蛋白表达逐渐下降 ;RT PCR法则显示bcl 2mRNA水平逐渐下降。结论　木黄酮能诱导T2 4细胞凋亡、下调bcl 2蛋白表达及bcl 2mRNA水平 ,且作用呈时间依赖性。     

姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡的机制

目的 探讨姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡作用及凋亡机制.方法 体外培养Jurkat细胞,用姜黄素处理12 h后,MTT法检测细胞存活率;流式细胞学检测细胞凋亡率;Western Blot检测凋亡相关蛋白和内质网应激蛋白的表达变化.结果 姜黄素显著抑制Jurkat细胞存活率.随着姜黄素浓度增加,Jurkat细胞凋亡率增加,并从早期凋亡发展为晚期凋亡.姜黄素降低Bcl-2蛋白表达,增加Bax蛋白表达,增加GRP78蛋白表达,活化Caspase-3表达增高.结论 姜黄素启动内源性凋亡途径和内质网应激途径诱导Jurkat细胞发生凋亡.     

哇巴因对多种白血病细胞株的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的:观察哇巴因对白血病细胞株Jurkat?U937?K562?NB4?HL-60及Raji的增殖和凋亡的影响,并检测哇巴因对Jurkat细胞膜电位的影响?方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测哇巴因对不同白血病细胞株生长存活的影响,计算不同浓度哇巴因处理多种白血病细胞株的细胞增殖抑制率;瑞氏染色观察哇巴因对肿瘤细胞生长状态及形态的影响;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测哇巴因分别处理多种细胞的凋亡率;用DiBAC4(3)标记不同浓度哇巴因处理的Jurkat细胞膜电位,流式细胞仪检测细胞膜电位的变化?结果:MTT检测增殖结果表明哇巴因对Jurkat?K562?HL-60?NB4等细胞株均表现出显著增殖抑制作用;细胞形态学观察和凋亡检测结果表明50 nmol/L哇巴因处理肿瘤细胞72 h大量细胞表现出凋亡的形态特征,Jurkat细胞凋亡率显著增高;DiBAC4(3)标记Jurkat细胞膜电位发现哇巴因没有引起细胞膜的去极化?结论:哇巴因对多种白血病细胞株具有很强的增殖抑制和凋亡诱导作用;哇巴因的增殖抑制和凋亡诱导作用并没有引起Jurkat细胞膜电位的改变,其作用的浓度未引起钠钾ATP酶的抑制?     

青蒿琥酯对不同急性白血病细胞株凋亡抑制的实验研究

[目的]观察青蒿琥酯对不同急性白血病细胞株的增殖抑制作用及凋亡机制探讨。[方法]应用不同浓度青蒿琥酯作用U937、HL60、Jurkat细胞株,MTT法检测抑制率;细胞形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术检测细胞凋亡;Western-blot法检测细胞凋亡过程中Bcl-2、Bax、Caspase 8和ICAD蛋白表达的变化。[结果]青蒿琥酯能够明显抑制U937、HL60、Jurkat细胞增殖;8μg/ml以上浓度青蒿琥酯作用三种细胞24h、48h、72h抑制率均为Jurkat〉HL60〉U937(均P<0.01);其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;随药物浓度的增高Bcl-2和ICAD蛋白表达量下降,而Bax蛋白表达上调,Caspase8蛋白出现明显的剪切激活带。[结论]青蒿琥酯既能通过线粒体途径又能通过外源性途径诱导急性白血病细胞凋亡,对Jurkat的抑制最强。     

茉莉酸甲酯诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用机制的实验研究

目的探讨茉莉酸甲酯诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡的作用机制.方法琼脂糖凝胶电泳检测HepG2细胞凋亡,RT-PCR检测HepG2细胞中Bcl-2、BaxmRNA表达,免疫细胞化学检测HepG2细胞Bcl-2、Bax蛋白表达.结果MeJA作用HepG2细胞48h后：DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显典型＂梯＂状条带;细胞Bcl-2mRNA表达水平明显下降（P〈0.05）而BaxmRNA表达水平明显增高（P〈0.05）;Bcl-2蛋白在胞浆中表达水平明显降低（P〈0.01）而Bax蛋白表达水平显著增加（P〈0.01）.结论茉莉酸甲酯通过降低抑凋亡相关基因Bcl-2mRNA及蛋白的表达,上调促凋亡相关基因BaxmRNA及蛋白的表达,从而诱导HepG2细胞凋亡的发生.     

乳铁蛋白抗菌肽抑制胃癌细胞增殖诱导其凋亡的体外研究

目的 探讨乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)对人胃癌细胞株MGC803细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法 用CCK-8法测定不同浓度LfcinB对胃癌细胞株MGC803 24、48和72 h细胞增殖影响.用流式细胞术检测胃癌MGC803细胞凋亡的变化.用RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3 mRNA的变化情况.用Western blot检测MGC803细胞中的Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达.结果 LfcinB对胃癌细胞株MGC803的增殖具有抑制作用,促进胃癌细胞株MGC803细胞凋亡,并且具有时间和剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);LfcinB能显著抑制胃癌细胞株MGC803 bcl-2 mRNA表达,同时促进bax和caspase-3 mRNA表达,并且随着LfcinB浓度的增高相关基因下降或上升越明显(P<0.05,P<0.01);Western blot结果也显示,LfcinB能抑制Bcl-2蛋白表达,促进Caspase-3和Bax蛋白表达,其变化规律与mRNA相同(P<0.05,P<0.01).结论 LfcinB通过调控相关基因,抑制胃癌细胞MGC803增殖,并诱导其细胞凋亡.     

Effect of snake venom of agkstrodon halys pallas in

Objective

To study the effect and mechanism of snake venom ofAgkistrodon Halys Pallas in Zhejiang in inducing human leukemic Jurkat cell apoptosis.

Methods

IC₅₀ and growth curve of Jurkat cells were detected by MTT; percentage of apoptotic cells was analyzed by flow cytometry (FCM) using Annexin V FITC/PI staining method; cell cycle was also detected by FCM and protein expression of Bcl-2 gene was detected by FCM and Western-blot.

Results

Zhejiang viper venom could inhibit the growth of Jurkat cells dose-dependently, induce the cell apoptosis, with the bcl-2 protein expression down-regulated. The strongest effect was shown at 48 hrs, it weakened gradually, and the Jurkat cells restored slowly in low concentration of snake venom.

Conclusion

Zhejiang viper venom could induce apoptosis of human leukemic Jurkat cell in dose-dependent manner, the effect is related to the down-regulation of Bcl-2 protein expression.     

Nimodipine Modulates Bcl-2 and Bax mRNA Expression after Cerebral Ischemia

In order to explore whether the member of Bcl-2 gene family, for example, Bcl-2 and Bax, are induced after cerebral ischemia, and whether expression of genes can be modulated by calcium-antagonist, the rat cerebral ischemic models were made by occluding left middle cerebral artery. The expression of Bcl-2 and Bax mRNA was measured by RT-PCR method. After middle cerebral artery occlusion (MCAO), the expression of both Bcl-2 and Bax mRNA were induced. Level of Bcl-2 mRNA increased steadily and level of Bax mRNA increased gradually at first, reached a peak after 24 h, then decreased slowly. After administration of nimodipine, Bcl-2 mRNA was up-regulated in the hippocampus 6 and 24h after ischemia, while Bax mRNA was down-regulated 6 and 24 h after ischemia. Focal cerebral ischemia can induce proto-oncogenes to express, which was associated with apoptosis. Calcium-antagonist can up-regulate Bcl-2 mRNA and down-regulate Bax mRNA.The increased ratio of Bcl-2 and Bax mRNA may contribute to the antiapoptic effect of nimodipine.The study indicates that pharmacological modulation of Bcl-2 family member expression could become a new stratehgy to manage neuronal damage.     

邻苯二甲酸二乙基己酯体外对大鼠卵巢颗粒细胞Bax和Bcl-2基因表达的影响

【目的】通过对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯（di-2-ethylhexylphthalate,DEHP）染毒,探讨DEHP体外对大鼠卵巢颗粒细胞Bax和Bcl-2基因表达及细胞凋亡的影响。【方法】体外分离和原代培养未成熟大鼠卵巢颗粒细胞,用不同浓度的DEHP（10、50、nnmol／L）染毒24h。荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2基因mRNA表达水平,Weas[ernblot检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率。【结果】与对照组比较,大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2基因mRNA和蛋白表达下降（P〈0．05）,Bax基因mRNA和蛋F1表达增加（P〈0．05）,同时细胞凋亡率增加（P〈0．05）,呈浓度依赖关系。【结论】DEHP可通过下调Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达而诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,进而影响卵巢功能。     

蟾蜍灵对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的:探讨蟾蜍灵(bufalin)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)凋亡的影响.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞.分为对照组、LPS刺激组和蟾蜍灵干预组,应用台盼蓝拒染法检测蟾蜍灵对GMC的细胞毒性作用,应用透射电镜观察系膜细胞超微结构的变化,采用逆转录PCR检测Bax和Bcl-2基因mRNA的表达.Western blot法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:透射电镜观察蟾蜍灵干预组可见凋亡早期形态学改变.逆转录PCR和Western blot结果显示蟾蜍灵组较脂多糖组Bax表达增多,Bcl-2表达减少,差异均具有统计学意义(P＜0.01),蟾蜍灵干预后,Bax较Bcl-2表达过量.结论:蟾蜍灵可能通过调节Bax和Bcl-2的相对表达量而诱导脂多糖作用后肾小球系膜细胞发生凋亡.     

Effect of Ginsenoside Re on Cardiomyocyte Apoptosis and Expression of Bcl—2／Bax Gene after Ischemia and Reperfusion in Rats

Development of thrombolysis and interven-tional therapy has minimized the degree of ischemicnecrosis by dredging occluded blood vessel andrestoring blood flow of infarct area in the earlierperiod. It has been proved that cardiomyocyteapoptosis plays a key role in ischemic reperfusioninjury[1] .The studies concerning control of coro-nary heart disease has been focusing on the inhibi-tion of cardiomyocyte apoptosis induced by is-chemia- reperfusion,reduction of cardiomyocyteloss and protection o…     

姜黄素联合多烯紫杉醇诱导PC-3细胞凋亡的实验研究

目的探讨姜黄素联合多烯紫杉醇对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将体外培养的PC-3细胞分为对照组(仅加培养基)、姜黄素组(5.0μmol/L姜黄素处理)、多烯紫杉醇组(2.5nmol/L多烯紫杉醇处理)及联合组(5.0μmol/L姜黄素与2.5nmol/L多烯紫杉醇联合处理),作用24h。用流式细胞仪分析PC-3细胞凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测Bcl-2及Bax mRNA和蛋白的表达情况。结果姜黄素和多烯紫杉醇均可诱导PC-3细胞凋亡,二者联合用药组的细胞凋亡率明显高于单药组(P<0.05);RT-PCR及Western blot显示姜黄素和多烯紫杉醇都可明显下调Bcl-2mRNA和蛋白的表达率,而上调Bax mRNA和蛋白表达率,且联合组细胞Bax与Bcl-2表达的改变更明显。结论姜黄素和多烯紫杉醇可能通过下调Bcl-2,上调Bax的表达协同诱导PC-3细胞的凋亡。