一起副溶血性弧菌食物中毒调查

2005年5月6日和7日,温州市××集团公司部分职工出现胃肠道疾病爆发事件。217人到各医院就诊,最终确定207人符合病例定义。流行病学分析结果,疾病爆发与食用该公司中心食堂5月6日中午提供的盒饭有关,但未能进一步确定可疑食品。共采集了67份肛拭样本,1份和6日中餐内容相同的6日晚餐盒饭以及其他2份食物样本。通过临床的、流行病学和现场卫生学的调查以及对照食物中毒诊断标准,确认是一起副溶血性弧菌食物中毒事件。1资料与方法1·1一般资料××集团公司中心食堂向各××路线上工作的约2 000多位职工提供中餐、晚餐盒饭。2005年5月7日,温州市…     

副溶血性弧菌两种增菌方法的比较

目的 比较普通增菌法和摇床培养增菌法对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)的增菌效果.方法 采用测量吸光度值和菌落计数检测Vp数量,直接分离法和PCR法测定方法灵敏度.结果 普通培养增菌法可使菌量在3h增加200倍,摇床培养法可增加2000倍.1.3×102cfu/ml的Vp在普通增菌3h后可直接分离培养,3.8×101cfu/ml培养3h后可用PCR法检出;5×101cfu/ ml的Vp在摇床增菌3h后可直接分离培养,2.5×100cfu/ml增菌3h后可用PCR法检出.结论 摇床培养在短时间内快速增菌效果比普通增菌法好.     

双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌方法的建立

目的建立双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法。方法在Gen Bank数据库查找序列并比对后设计tdh和vvh A基因引物和探针。对PCR反应退火温度、引物、探针、Mg2+、Taq DNA聚合酶及d NTPs浓度进行优化,确定反应体系和反应条件,并对新建方法的特异性、灵敏度等方面进行分析,对模拟样品进行检测。结果建立了双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法。该方法的特异性较好,检测限为103 CFU/ml。结论建立的双重荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测副溶血性弧菌和创伤弧菌。     

1起副溶血性弧菌食物中毒的调查

2001年8月,某部驻岛进行海上游泳训练期间,3名官兵发生食物中毒.经流行病学调查,确诊为副溶血性弧菌食物中毒.现报告如下。     

一起副溶血性弧菌食物中毒的实验室检测

目的 对一起食物中毒的可疑病原菌进行相关的实验室检测.方法 按照g B/T4789.-2008、G B4789-2010,对食物中毒患者肛拭子24份、酒店厨师肛拭子、手表面涂抹样各4份、厨房间餐具等涂抹样17份进行致病菌检测.结果 24份患者肛拭子标本中检出副溶血性弧菌12株,检出率为50%,其他样本未检出致病菌.结论 综合流行病学调查、临床症状和实验室检测,证实本次食物中毒由副溶血性弧菌引起.     

一起副溶血性弧菌引起的食物中毒调查

2006年5月21日，文昌市龙楼镇某海鲜店发生一起食物中毒事件，聚餐者85人，中毒28人，罹患率为32．9％。6例症状严重者住院后，经用抗生素和对症治疗康复出院，无死亡病例。文昌市疾病控制中心接到报告后，迅速组织专业调查人员奔赴现场，与市卫生监督所执法人员一同进行现场调查处理，并对中毒者开展流行病学和对食品加工、销售现场开展卫生学调查。根据流行病学和现场卫生学调查及实验室检测，判定这是一起食用海虾而由副溶血性弧菌引起的食物中毒事件，现将调查情况报告如下。     

副溶血性弧菌食物中毒1例

1病例摘要2012年7月30日4时15分,Y市某疾病预防控制中心接到Y市某医院报告,6名外地游客在该院急诊科就诊,主要症状为发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。临床初步诊断为胃肠炎。该中心立即向卫生行政部门报告,接到开展事故调查的通知后,组织相关人员开展现场流行病学调查工作。基本情况:某省旅行社一行27人,男性9名、女性18名。7月29日晚18时许,27人由X市抵达Y市某饭店就餐。现有11人在Y市某医     

抗内毒素IgY-F(ab)2鉴定

目的 研究抗内毒素IgY用胃蛋白酶切后提取的F(ab)2片段，对其理化特性进行研究。方法 将抗内毒素igY用胃蛋白酶切后提取igY—F(ab)2段，光密度法测抗内毒素IgY—F(ab)2浓度和含量、ELISA检测抗内毒素IgY—F(ab)2效价，SDS-聚内烯酰胺凝胶电泳检测其分子量及纯度，免疫印迹法(Wescem—blotting)测定其特异性。结果 抗内毒素IgY—F(ab)2含量为1．04mg／mL蛋黄液，效价为1：25600，纯度为90％。分子量为24KD，与鸡血清中的IgG有相同的抗原性。结论抗内毒素IgY—F(ab)2产量大、效价高、特异性强。     

抗HLA-A*0201重链卵黄抗体的制备及初步鉴定

目的制备高效价特异性鸡卵黄免疫球蛋白(Yolk immunoglobulin,IgY)抗体。方法用纯化HLA-A*0201重链抗原加完全福氏佐剂免疫岭南黄鸡,经水稀释法初步纯化浓缩后,用ELISA鉴定其免疫学活性,测定纯化后蛋白含量,并用SDS-PAGE进行分析鉴定。结果获得ELISA效价为1×106的抗重链IgY抗体,蛋白含量为9.77 mg/ml。经SDS-PAGE分析,出现2条蛋白带,纯度达90%以上。结论用重链抗原加福氏佐剂免疫种鸡制备的IgY抗体产量多、效价高,为结合HLA-A*0201复合体诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞活化奠定了基础。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡,通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY,双紫外光测定抗体含量,SDS-APGE电泳检测抗体纯度,Western blot免疫印迹法测定该抗体来源,ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液,抗体纯度达到95%,Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性,其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体,通过WD水溶提取法可得到高产量,高纯度的特异性抗体IgY,证明其来源于鸡血清中的IgG,对热具有高度稳定性。     

抗HPV16L1 IgY抗体的制备及活性检测

目的 制备出高特异性的抗HPV16L1 IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法.方法 用纯化HPV16 L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法通过对转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中L1蛋白的检测评价IgY抗体的特异性.结果 3次免疫之后,IgY抗体效价达到1:10 240,同时可特异性与转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中EGFP-HPV16L1 结合.结论 采用HPV16L1蛋白免疫母鸡,成功获得了较高效价的特异性IgY抗体,并可用于HPV16L1蛋白的细胞学检测,为IgY抗体在免疫组织化学检中的应用提供实验依据.     

抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能.方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体.用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度.用Tris-tricine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,Western blot确定蛋白来源.以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性.ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价.结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%.提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性.提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合. ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1:12 000.结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低.在体外能够特异性地与白念珠菌结合.     

甘草地上部分总黄酮不同提取方法及其抗氧化活性研究

[目的]对比研究甘草地上部分总黄酮不同提取方法及其抗氧化性。[方法]以甘草地上部分总黄酮提取率为评价指标,对比不同提取方法及不同提取溶剂对甘草地上部分总黄酮提取率的影响;并通过体外抗氧化活性评价了甘草地上部分总黄酮的1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)清除能力及还原力。[结果]通过对比筛选出提取效果较好的提取方法为实验室超声或回流提取,提取溶剂为乙醇,且总黄酮提取物具有良好的DPPH清除能力及还原力,且存在剂量依赖关系。[结论]研究表明可以进一步研究甘草地上部分总黄酮提取物的抗氧化价值,为药食两用甘草植物资源的全面开发利用奠定理论基础,可逐渐将甘草的抗氧化性能广泛应用于其他相关领域。