吡格列酮对非乙醇性脂肪肝大鼠肝脏脂质沉积的影响

目的观察吡格列酮对非乙醇性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏内质网应激(ERS)的影响,为其在肝脏脂质代谢中的作用提供理论依据。方法 30只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和吡格列酮组,每组10只。生理盐水组和吡格列酮组大鼠用高脂饮食饲养12周成功建立NAFLD模型。吡格列酮组大鼠用吡格列酮治疗12周,生理盐水组大鼠给予生理盐水处理。肝脏病理切片行苏木精-伊红及油红O染色。测量大鼠体质量、肝湿质量,计算肝质量/体质量(肝/体比),检测血清谷氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及肝脏组织中TC、TG水平;Western blot法检测大鼠肝脏组织ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达情况。结果生理盐水组大鼠肝细胞均出现不同程度脂肪变性,伴小叶内、汇管区炎性细胞浸润;吡格列酮组多数肝细胞结构恢复正常,细胞质内脂滴空泡明显减少。生理盐水组与正常对照组比较大鼠体质量、肝脏质量、肝/体比、血清及肝脏组织中TC、TG水平、血清AST、ALT水平、肝脏组织GRP78表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);吡格列酮组与生理盐水组比较大鼠体质量、肝脏质量、血清及肝脏组织中TC和TG水平、血清AST和ALT水平、肝脏GRP78水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吡格列酮可能通过改善高脂饮食诱导大鼠肝细胞的ERS水平来纠正脂质代谢异常。     

The expression of endoplasmic reticulum stress in recovery of CCl4 induced liver fibrosis in rat

目的 探讨内质网应激(ERS)相关蛋白在大鼠肝纤维化形成与自发逆转过程中的作用.方法 建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,免疫组化法检测各组ERS标志性蛋白CHOP、GRP78的表达;RT-PCR法检测CHOP、GRP78 mRNA的表达;Western blot检测CHOP蛋白表达变化.结果 与正常组大鼠相比,模型组大鼠CHOP、GRP78的表达显著升高(P<0.05).与模型组相比,停止CCl4诱导4周和8周后CHOP、GRP78表达降低(P<0.05).结论 ERS存在于大鼠肝纤维化进程中,可能与肝纤维化的发生、发展和逆转存在密切联系.     

姜黄素对脂多糖/D-氨基半乳糖诱导大鼠急性肝损伤中内质网应激的影响

目的探讨姜黄素预给药对脂多糖/D-氨基半乳糖（D-GalN）诱导大鼠急性肝损伤中内质网应激（ERS）的影响。方法30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、肝损组、姜黄素组,每组10只。在造模前5d,姜黄素组按5ml/kg灌饲姜黄素溶液（姜黄素溶于0.5%羧甲基纤维素钠中）,正常对照组、肝损组按5ml/kg灌饲0.5%羧甲基纤维素钠溶液,1次/d,连续5d。肝损组、姜黄素组采取腹腔注射含脂多糖（8滋g/kg）+D-GalN（800mg/kg）的0.9%氯化钠注射液800滋l制作急性肝损伤动物模型,正常对照组大鼠腹腔注射800滋l0.9%氯化钠注射液;模型建立12h后处死大鼠并收集血清及肝组织,检测并比较3组大鼠血清肝功能指标、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,HE染色观察肝组织病理学变化,TUNEL染色观察肝细胞凋亡情况,Westernblot法检测肝组织内ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）表达量。结果正常对照组大鼠肝组织未见明显病变;肝损组大鼠部分肝细胞坏死,坏死的肝细胞核碎裂、胞质深染,坏死区可见较多炎细胞浸润;姜黄素组大鼠肝组织内坏死细胞较肝损组明显减少。与正常对照组比较,肝损组大鼠血清ALT、AST、MDA水平,肝细胞凋亡指数,GRP78、CHOP蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）,SOD水平明显降低（P＜0.05）;姜黄素组大鼠血清ALT、AST、MDA水平,肝细胞凋亡指数,CHOP蛋白表达水平也明显升高（均P＜0.05）,SOD水平、GRP78蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与肝损组比较,姜黄素组大鼠血清ALT、AST、MDA水平,肝细胞凋亡指数,GRP78、CHOP蛋白表达水平均明显降低（均P＜0.05）,SOD水平明显升高（P＜0.05）。结论姜黄素可能通过抑制ERS反应对脂多糖/D-GalN诱导大鼠的急性肝损伤起保护作用。     

栀子大黄汤对酒精性脂肪肝大鼠的保护作用

目的：制备酒精性脂肪肝（AFL）大鼠模型,探讨栀子大黄汤对AFL大鼠的保护作用及其用药剂量。方法：54只SD大鼠分为正常对照组10只和模型对照组44只;模型对照组大鼠采用乙醇灌胃（50%乙醇溶液6.0mL·kg^-1）+高脂饲料的方法制备AFL模型。4周后选取造模成功的40只大鼠随机分为模型组,辛伐他汀组（10.0mg·kg^-1）,低、高剂量栀子大黄汤组（所含生药剂量分别为5.0和10.0g·kg^-1）;每组10只。每隔2周测定大鼠体质量和血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和谷氨酸氢基转移酶（ALT）水平。给药后第4周称量大鼠体质量和肝脏质量,检测血清和肝组织中TC、TG、AST、ALT、乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶（ALDH）水平,检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和IL-1β的水平,采用苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理形态表现并进行病理学检查评分。结果：给药4周后,与正常对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG、AST、ALT、TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。给药4周后,与模型组比较,低、高剂量栀子大黄汤组大鼠血清TC、TG、AST和ALT水平降低（P<0.05或P<0.01）,高剂量栀子大黄汤组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低（P<0.01）,低剂量桅子大黄汤组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平降低（P<0.01）,低和高剂量栀子大黄汤组及辛伐他汀组大鼠肝组织中ADH和ALDH水平降低（P<0.05或P<0.01）。HE染色,与模型组比较,栀子大黄汤组AFL大鼠肝组织的病理损伤情况明显改善。结论：栀子大黄汤能明显改善由高脂联合酒精饮食引起的肝损伤和肝脏脂肪性病变。     

亚麻籽木脂素对大鼠前列腺增生的抑制作用及其机制

目的：研究亚麻籽木脂素(SDG)对丙酸睾酮诱导的大鼠前列腺增生的抑制作用,并阐明其作用机制。方法：50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(非那雄胺1.0 mg·kg-1)组及SDG（1.2和0.4 g·kg^-1）组。ELISA方法检测前列腺组织中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白细胞介素8（IL-8）的变化。结果：模型组大鼠前
列腺组织中NO、SOD和CAT水平均低于空白组（P<0.01）,TNF-α、bFGF和IL-8水平均高于空白组（P<0.01）;SDG 1.2 g·kg^-1组NO、SOD和CAT水平均高于模型组（P<0.01）,TNF-α、bFGF和IL-8水平均低于模型组（P<0.01）。结论：SDG抑制睾酮诱导的大鼠前列腺增生的机制可能与提高抗氧化酶活力、清除自由基及减少TNF-α、bFGF和IL-8相关因子含量有关。     

橄榄苦苷抑制丙烯醛诱导的HBE细胞内质网应激的机制研究

目的：探讨橄榄苦苷（oleuropein,OP）和丙烯醛（acrolein,ACR）对人支气管上皮样细胞（human bronchial epithelial cells,HBE）内质网应激（endouplasmic reticulum stress,ERS）相关的增殖与凋亡影响的可能机制。方法： OP与ACR联合处理HBE细胞,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法和流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA 表达;雄性Sprague-Dawley大鼠经ACR腹腔注射和(或)橄榄叶提取物（olive leaf extract,OLE）灌胃处理,取大鼠肺组织,Western blot法检测ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA 表达。结果：体外实验证实ACR可以抑制HBE细胞的增殖,诱导其凋亡;联合OP处理后,ACR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用明显受到抑制;同时,ACR上调HBE细胞中ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,联合OP可抑制GRP78和CHOP的表达;在mRNA水平上,ACR单独处理上调了ERS相关分子GRP78和CHOP 的mRNA表达水平,而联合OP处理,GRP78和CHOP的mRNA水平未见明显变化;Sprague-Dawley大鼠体内实验结果与体外细胞实验基本一致。结论：ACR抑制HBE细胞增殖,促发ERS,进而诱导HBE细胞凋亡。在蛋白质翻译水平上,OP可以通过抑制ERS途径,拮抗ACR诱导的细胞凋亡效应。     

大鼠肝纤维化进程中内质网应激相关蛋白的动态变化研究

目的探讨内质网应激(ERS)相关蛋白在大鼠肝纤维化形成与自发逆转过程中的作用。方法建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,免疫组化法检测各组ERS标志性蛋白CHOP、GRP78的表达;RT-PCR法检测CHOP、GRP78 mRNA的表达;Western blot检测CHOP蛋白表达变化。结果与正常组大鼠相比,模型组大鼠CHOP、GRP78的表达显著升高(P<0.05)。与模型组相比,停止CCl4诱导4周和8周后CHOP、GRP78表达降低(P<0.05)。结论 ERS存在于大鼠肝纤维化进程中,可能与肝纤维化的发生、发展和逆转存在密切联系。     

葱白提取物对非酒精性脂肪肝大鼠COX-Ⅱ表达的影响

目的观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠COX-Ⅱ表达的影响。方法采用脂肪乳灌胃法复制非酒精性脂肪肝大鼠模型,同时施加不同剂量的葱白提取物进行治疗,并与易善复胶囊、绞股蓝总甙片做对照,观察不同处理组大鼠肝脏病理形态学的变化,应用免疫组化法观察大鼠肝内COX-Ⅱ的表达情况。结果与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织可见重度脂肪变,炎症细胞浸润,肝细胞坏死,汇管区渗出,大鼠肝内COX-Ⅱ表达明显增高。与模型组相比,鲜葱白提取物低、中、高剂量组能显著减轻肝脏脂肪变性(P0.01),COX-Ⅱ表达明显下降(P0.01)。结论鲜葱白提取物可以减轻灌胃脂肪乳诱导的NAFLD大鼠COX-Ⅱ的表达,从而减轻NAFLD的炎症。     

硫化氢对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏炎性反应的作用

目的 观察硫化氢（H2S）对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠炎性因子水平的影响,探讨H2S防治NASH的可能机制。方法 2013年1月-2014年7月选用SPF级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为对照组、NASH模型组、硫氢化钠（NaHS）干预组,各20只。对照组给予普通饲料,NASH模型组给予高脂饲料,NaHS干预组给予高脂饲料的同时腹腔注射H2S供体NaHS（56 mg·kg-1·d-1）,对照组和NASH模型组每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。8周后处死所有大鼠,留取静脉血及肝脏组织。检测血清及肝脏生化指标〔血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）﹑天冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）及肝脏组织TG、TC〕﹑血浆及肝脏组织H2S水平、肝脏组织氧化应激指标〔丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）〕;HE染色观察肝脏组织病理学变化;检测肝脏组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6） mRNA表达水平及肝脏组织TNF-α、IL-6、核因子κB抑制因子α（IκBα）、核因子κB p65（NF-κB p65）表达水平。结果 NASH模型组和NaHS干预组血清ALT、AST、TG、TC水平及肝脏组织TG、TC水平均高于对照组,且NaHS干预组以上指标均低于NASH模型组（P＜0.05）。NASH模型组血浆H2S水平和肝脏组织H2S水平均低于对照组及NaHS干预组（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织MDA水平升高,SOD水平降低（P＜0.05）;与NASH模型组比较,NaHS干预组MDA水平降低,SOD水平升高（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组肝脏组织结构紊乱,呈弥漫性脂肪变性、肝细胞灶性坏死,并可见淋巴细胞和中性粒细胞浸润;NaHS干预组肝脏组织脂肪变性、坏死及炎性反应程度较NASH模型组明显减轻。NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织TNF-α、IL-6 mRNA表达水平和TNF-α、IL-6表达水平均高于对照组,且NASH模型组以上指标均高于NaHS干预组（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组和NaHS干预组细胞质IκBα表达水平均降低,细胞核NF-κB p65表达水平均升高（P＜0.05）;与NASH模型组比较,NaHS干预组细胞质IκBα表达水平升高,细胞核NF-κB p65表达水平降低（P＜0.05）。结论 H2S能够有效改善NASH大鼠肝脏组织病理变化,并抑制炎性反应,这可能是H2S发挥治疗作用的机制之一。     

异氟醚对β淀粉样蛋白诱导的大鼠PC12细胞凋亡和内质网应激的影响及其机制

目的：探讨异氟醚对β淀粉样蛋白（Aβ）25-35诱导的大鼠PC12细胞凋亡和内质网应激（ERS）的影响,并阐明其作用机制。方法：将PC12细胞随机分为正常对照组、10 μmol•L-1Aβ25-35组（Aβ组）、2%异氟醚组（Iso组）和2%异氟醚联合10 μmol•L^-1 Aβ25-35组（Iso+Aβ组）。MTT法检测各组PC12细胞存活率;Hoechst 33342核染色法检测各组PC12细胞凋亡形态;Western blotting法检测各组PC12细胞内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ERS相关凋亡信号蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)和caspase-12表达量。结果：与正常对照组比较,Aβ组和Iso组PC12细胞存活率明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率明显增加（P<0.05）,GRP78表达量明显上调（P<0.05）,ERS相关凋亡信号蛋白CHOP、p-JNK和caspase-12表达量均明显增加（P<0.05）;与Aβ组比较,Iso + Aβ组PC12细胞存活率明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率明显增加（P<0.05）,GRP78、CHOP、p-JNK和caspase-12表达量均明显增加（P<0.05）。结论：异氟醚能够促进Aβ25-35诱导的大鼠PC12细胞凋亡,其机制与激活ERS及其相关的凋亡信号通路有关联。     

微量元素锶改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制研究

目的探讨微量元素锶改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、18 mg/L锶组、36 mg/L锶组和辛伐他汀组。对照组进食普通饲料,其余4组进食高脂饲料,第6周起给予18 mg/L和36 mg/L锶组浓度分别为18 mg/L和36 mg/L含锶饮用水,第11周起进行灌胃,18 mg/L和36 mg/L锶组分别灌浓度为18 mg/L和36 mg/L含锶水3 m L/kg体重,辛伐他汀组灌辛伐他汀10 mg/kg体重,对照组与模型组灌生理盐水3 m L/kg体重。第14周末处死大鼠,检测血清TG、TC、LDL-C和肝组织TG、TC含量,并行肝组织油红O染色观察脂肪变性情况,免疫组化检测肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组的血清TC、LDL-C和肝TC、TG均升高(P0.05),与模型组比较,36 mg/L锶组血清TC、LDL-C和肝TC、TG均降低(P0.05)。油红O染色显示模型组肝组织含大量的红染脂质颗粒,18 mg/L锶组、36 mg/L锶组及辛伐他汀组红染颗粒均较模型组不同程度减少(P0.05)。免疫组化结果显示:模型组大鼠肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平,18mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2和LDLr蛋白表达水平,36 mg/L锶组大鼠肝组织LDLr蛋白表达水平及辛伐他汀组大鼠肝组织SREBP2和LDLr蛋白表达水平均明显高于对照组(P0.05)。36 mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2和HMGCR蛋白表达水平明显低于模型组,而LDLr蛋白表达水平明显高于模型组;辛伐他汀组大鼠肝组织GRP78和HMGCR蛋白表达水平明显低于模型组(P0.05);而18 mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平较模型组无显著差异(P0.05)。结论长期较高浓度锶摄入可改善脂代谢紊乱,减轻NAFLD,其作用机制可能与调节内质网应激、HMGCR活性和LDLr的功能等有关。     

鸡骨草提取物对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞TLR4/p38 MAP K信号通路作用

目的 研究鸡骨草提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的影响.方法 长期饲喂高脂饲料建立NAFLD模型,设空白对照组、模型组、辛伐他汀组、鸡骨草水提物高剂量组(15 g/kg)、鸡骨草水提物中剂量组(10 g/kg)、鸡骨草水提物低剂量组(5 g/kg)、鸡骨草50％醇提物高剂量组(15 g/kg)、鸡骨草50％醇提物中剂量组(10 g/kg)、鸡骨草50％醇提物低剂量组(5 g/kg),利用生化分析仪测定血脂、炎症因子指标,并采用PCR和Western blot法测定肝组织TLR4、p38MAPK蛋白表达.结果 与模型组比较,鸡骨草水提物与50％醇提物中、高剂量组大鼠肝组织三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)水平显著降低(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平升高(P<0.05或P<0.01);鸡骨草水提取物与50％醇提物中、高剂量组大鼠血清白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平降低(P<0.05或P<0.01);鸡骨草水提取物与50％醇提物中、高剂量组大鼠肝组织Toll样受体蛋白4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)mRNA表达量降低(P<0.05或P<0.01).结论 鸡骨草通过调节TLR4/p38MAPK信号通路,发挥抗炎和改善脂质代谢紊乱作用.     

冬凌草甲素对小鼠溃疡性结肠炎内质网应激的作用研究

目的 探讨冬凌草甲素对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的结肠上皮组织内质网应激(ERS)的影响.方法 利用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立小鼠UC模型组,设置冬凌草甲素及柳氮磺胺吡啶干预组;测定疾病活动指数(DAI),对结肠组织速行病理形态学评分(HPS),RT-qPCR检测结肠上皮组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录因子EBP同源蛋白(CHOP)、激活性转录因子6(ATF6)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及肌醇酶1α (IRE1α)mRNA表达变化.结果 与健康小鼠相比,模型组结肠上皮组织中TNF-α、IL-6、COX-2、GRP78、ATF6、CHOP、PERK及IRE1α mRNA表达均明显上调(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,冬凌草甲素干预组DAI与HPS均明显下降(P＜0.05,P＜0.01),疗效与柳氮磺胺吡啶干预组相当(P＞0.05,P＜0.01),除IER1α mRNA外,TNF-α、IL-6、COX-2、GRP78、CHOP、ATF6及PERK mRNA表达水平均明显下调(P＜0.05,P＜0.01).结论 冬凌草甲素能减轻DSS诱导小鼠结肠炎症,其机制可能与其调节结肠上皮组织ERS有关.     

银杏叶提取物对非酒精性脂肪性肝病肝组织TGFβ1、NF-κB、FN表达的影响

目的：观察银杏叶提取物（EGB）对糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的影响,并探讨其作用机制。方法：雄性SD大鼠30只随机均分成正常对照组、2型糖尿病组和EGB治疗组。采用高脂饮食加小剂量（30 mg/kg）链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病大鼠模型,EGB治疗组给予50 mg·kg-1·d-1的EGB连续灌胃12周。HE染色光镜下观察肝组织的形态学改变;VG染色光镜下观察肝脏组织的纤维化病变;免疫组织化学法检测肝组织核转录因子Kappa B（NF-κB P65）、转化生长因子β1（TGFβ1）、纤维连接蛋白（FN）以及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达;RT-PCR法检测肝组织NF-κB、TGFβ1、FN mRNA表达。结果：糖尿病大鼠肝细胞出现脂肪变性、气球样变、炎症以及肝纤维化等NAFLD的病理变化;免疫组织化学染色结果显示糖尿病大鼠肝组织出现较多的α-SMA阳性表达的活化的肝星形细胞（HSC）,NF-κB P65、TGFβ1、FN蛋白表达显著高于正常对照组（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05）,部分肝细胞NF-κB P65呈核阳性表达;RT-PCR显示糖尿病大鼠肝组织TGFβ1、FN基因mRNA表达显著高于正常对照组（P＜0.01,P＜0.05）。经EGB治疗后,肝细胞脂肪变性、气球样变及炎症现象得到明显改善,纤维化程度明显减轻;肝组织α-SMA阳性表达的活化的HSC数量明显减少（P＜0.05）;NF-κB P65、TGFβ1、FN蛋白表达明显下降（均P＜0.05）;TGFβ1、FN基因mRNA表达也明显下降（均P＜0.05）。结论：EGB可明显减轻糖尿病大鼠NAFLD的程度,其机制可能与抑制肝脏NF-κB、TGFβ1、FN的表达有关。     

Study on effects of Zhi Zi(Fructus gardeniae) on non-alcoholic fatty liver disease in the rat

OBJECTIVE:To investigate the effects of Zhi Zi(Fructus Gardeniae) on non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD) induced by a high-fat diet in the rat.METHODS:A rat model of NAFLD was established using a high-fat diet.Twenty one rats were randomly divided into a normal group,a model group and a Zhi Zi treatment group,7 rats per group.Drinking water and the drug were intragastrically administrated for 5 weeks.Samples were then taken to observe pathological changes of the liver tissue(HE staining);changes in the fat metabolism pathway e.g.triglyceride(TG) and free fatty acid(FFA) content;alterations in liver function,i.e.serum alanine aminotransferase(ALT) and aspartate aminotransferase(AST) activity;and differences in tumor necrosis factor α(TNF-α) and P-IkB protein expression in the liver tissue.RESULTS:Fatty degeneration and vacuole-like changes of different degrees occurred in hepatic cells of the model group.Markers for fat metabolism,serum ALT and AST activities,and expressionof TNF-α and P-IkB proteins in liver tissue significantly increased.Fat metabolism in the Zhi Zi group significantly reduced,as shown by a drop in marker levels.Serum ALT and AST activities,and expression of TNF-α,P-IkB proteins in liver tissue were also significantly decreased in this group.CONCLUSION:Zhi Zi has a very strong inhibitory action on lipidosis and inflammatory injury in the rat model of NAFLD.This mechanism may possibly be related to the inhibition of the free fatty acid metabolism pathway.     

基于GRP78-ATF6-CHOP通路研究雷公藤多苷对坏死性小肠结肠炎新生大鼠的影响

目的:观察雷公藤对坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)新生大鼠的影响,并探讨其通过调控葡萄糖调节蛋白78(GRP78)—激活转录因子6(ATF6)—增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路发挥作用的。方法:采用缺氧+冷刺激法建立新生大鼠NEC模型,分为模型组、雷公藤多苷低剂量组(9 mg·kg^-1)、雷公藤多苷中剂量组(18 mg·kg^-1)、雷公藤多苷高剂量组(27 mg·kg^-1),另设对照组。检测粪便肠道菌群变化,肠组织病理学改变,肠组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平及GRP78、ATF6、CHOP蛋白表达。结果:与模型组比较,雷公藤多苷低、中、高剂量组肠组织损伤评分、肠球菌总数、革兰氏阳性(G+)球菌比率、肠组织IL-1β和TNF-α水平及GRP78、ATF6、CHOP蛋白表达均明显降低(P<0.05),肠杆菌总数、杆/球菌比值、G+杆菌比率、肠组织IL-6水平均明显升高(P<0.05)。其中肠组织损伤评分、肠球菌总数、G+球菌比率、肠组织IL-1β和TNF-α水平及GRP78、ATF6、CHOP蛋白表达,雷公藤多苷低剂量组>中剂量组>高剂量组;肠杆菌总数、杆/球菌比值、G+杆菌比率、肠组织IL-6水平,雷公藤多苷低剂量组<中剂量组<高剂量组。结论:雷公藤多苷可改善NEC新生大鼠的肠道菌群紊乱现象,且可能通过抑制GRP78-ATF6-CHOP通路发挥肠道保护作用。     

大麻素受体-2对小鼠结肠炎作用机制研究

目的：观察大麻素受体-2( CB2)对急性实验性小鼠结肠炎的作用,探讨CB2对肠黏膜内质网应激( ERS)影响。方法32只SPF小鼠随机分为正常组、模型组、CB2激动剂组、CB2拮抗剂组,每组8只。记录小鼠疾病活动度及结肠组织病理学评分,ELISA法检测结肠组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)水平,免疫组化法检测结肠组织CB2及ERS相关蛋白GRP78、CHOP表达,RT-PCR法检测结肠组织中GRP78、CHOP mRNA水平。结果与正常组比较,模型组TNF-α水平显著上调、IL-10水平下降( P<0．05),GRP78、CHOP蛋白及mRNA显著增高(P<0．05)。与模型组比较, CB2激动剂组 CB2表达明显增多( P <0．05),TNF-α水平下降(P <0．05),IL-10水平增多(P <0．05),GRP78、CHOP 蛋白及 mRNA 显著下降(P <0．05)。CB2拮抗剂组TNF-α、IL-10、ERS标记物水平与模型组差异无统计学意义。结论实验性结肠炎小鼠肠黏膜存在剧烈的ERS,CB2激动剂激活CB2表达后缓解结肠炎小鼠肠道炎症,可能与CB2抑制肠黏膜ERS有关。     

电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清RBP4水平的影响及其脂质调节作用机制

目的：探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝X受体α (LXR-α)和肝脏固醇调节元
件结合蛋白-1c (SREBP-1c)表达的调节作用机制。方法：44只雌性SD大鼠适应性喂养7 d,随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组和电针组,每组11只。正常组大鼠用标准饲料喂养,其余各组大鼠用高脂高胆固醇饲料喂养。8周后电针组针刺“肝俞”、“脾俞”和“膈俞”进行治疗,电压9V,电流强度1~3 mA,频率为1.5~2.0 Hz,疏密波,留针15 min,每天1次,连续28 d。检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、血清游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）的变化,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清RBP4水平,采用Western blotting法检测大鼠肝组织中LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平。结果：与正常组比较,模型组大鼠的FBG、FFA、肝组织匀浆中TC和TG以及血清RBP4水平升高（P<0.01）,LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平也升高（P<0.01）;与模型组比较,电针组和东宝肝泰组大鼠FBG、FFA、肝组织匀浆TC和TG水平下降（P<0.05或P<0.01）,血清RBP4水平下降（P<0.01）,LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：电针“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”能降低NAFLD大鼠血清RBP4水平,调节脂质代谢,改善脂质沉积,对NAFLD有明显的治疗作用,其机制可能与抑制肝组织中LXR-α和SREBP-1c蛋白表达上调有关。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα的表达及其意义

目的观察PPARα在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）中的表达变化,以探讨其在NAFLD发生中的作用。方法16只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组和模型组。采用喂饲高脂饲料复制大鼠非酒精性脂肪性肝病模型。观察不同处理组大鼠肝脏病理形态学的变化。应用生化法检测大鼠肝内游离脂肪酸（FFA）含量。应用免疫组化法观察大鼠肝内PPARα蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,模型组所有的大鼠均出现重度脂肪变性（〉75%）和程度不等的小叶内灶性炎细胞浸润;肝内FFA明显升高（P〈0.05）,大鼠肝内PPARα蛋白质的表达明显增强（P〈0.01）,主要为核内表达增强。结论NAFLD时存在FFA和PPARα表达的异常,PPARα表达异常在非酒精性脂肪性肝病的发病机制中可能起一定的作用。