组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞系U251细胞增殖的影响。方法应用不同浓度的MS-275作用于U251细胞,分别培养24、48和72h,采用细胞计数试剂盒检测其对U251细胞增殖的抑制作用,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态变化,碘化丙啶单染法检测细胞周期变化,膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法经流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western-blot检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)经天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)3作用后的裂解产物。结果 MS-275对U251细胞增殖的抑制作用在相同作用时间下随药物浓度的增加而增大,在同一浓度作用下随作用时间延长而增大,其最佳浓度为10nmol/L。MS-275作用后U251细胞呈现凋亡,胞质和胞核浓缩或碎裂。10nmol/mlMS-275分别作用24、48和72h后细胞凋亡率分别为(2.1±0.4)%、(11.7±0.5)%和(29.0±2.3)%,三者差异显著(P<0.05);随作用时间延长,G1期细胞所占比例逐渐减少,G2期细胞所占比例先增多后减少,药物作用24h所占比例最高,S期细胞所占比例变化不明显,作用48h后开始出现亚G0凋亡峰,且逐渐增大,而对照组没有出现该峰;PARP被caspase3剪切。结论 MS-275对胶质瘤细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间双重依赖性;这种作用是通过激活caspase3信号通路诱导细胞凋亡实现的。     

肉桂醛对神经胶质瘤U251细胞生物学行为的影响

目的 探讨肉桂醛对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法 体外培养胶质瘤细胞系U251细胞,分为对照组、低剂量肉桂醛组（40μmol/L）和高剂量肉桂醛组（80μmol/L）。采用平板克隆和CCK-8试验检测细胞增殖水平;流式细胞术分析细胞凋亡率;Transwell小室实验和细胞划痕试验评估细胞迁移和侵袭水平;免疫印迹法分析凋亡相关蛋白、PI3K/Akt和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达。结果 肉桂醛明显抑制胶质瘤U251细胞增殖、侵袭、迁移能力（P<0.05）,促进细胞凋亡（P<0.05）;抑制Bcl-2、p-PI3K、p-Akt、cycling D、C-Myc、β-catenin表达（P<0.05）,促进Cleaved-Caspase-3、Bax表达（P<0.05）;而且,随剂量增大,肉桂醛的作用明显增强（P<0.05）。结论 肉桂醛抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭、迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与下调PI3K/Akt和Wnt/β-catenin信号通路有关。     

辛伐他汀对高糖高脂诱导人骨髓间充质干细胞凋亡的影响

背景：研究表明,他汀类药物能够促进骨髓间充质干细胞的增殖与黏附能力,抑制高糖高脂培养下骨髓间充质干细胞的凋亡。 目的：观察辛伐他汀对高糖高脂诱导条件下人骨髓间充质干细胞凋亡的影响。 方法：将0.001,0.01,0.1,1.0 μmol/L辛伐他汀分别与高糖高脂诱导条件下人骨髓间充质干细胞培养48 h,以正常培养骨髓间充质干细胞及高糖高脂诱导条件下培养的骨髓间充质干细胞为对照。倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法比较不同浓度辛伐他汀对高糖高脂环境下骨髓间充质干细胞存活率的影响,应用流式细胞术检测细胞凋亡,加入PI3K/Akt信号转导通路抑制剂LY294002后辛伐他汀对骨髓间充质干细胞凋亡的影响。 结果与结论：与高糖高脂诱导组比较,辛伐他汀0.01,0.1,1.0 µmol/L组骨髓间充质干细胞存活率均升高(P < 0.01),其中辛伐他汀浓度在0.1 μmol/L时骨髓间充质干细胞存活率升高最显著(P < 0.01);同时流式细胞仪检测结果显示,辛伐他汀0.01,0.1,1.0 µmol/L组细胞凋亡率下降(P < 0.01),其中0.1 µmol/L组凋亡率下降最显著(P < 0.01)。0.1 µmol/L辛伐他汀对骨髓间充质干细胞的影响可被LY294002阻断。说明辛伐他汀能抑制高糖高脂诱导条件下骨髓间充质干细胞的凋亡,其机制可能与PI3K/Akt信号途径有关。     

TRAIL对原代培养胶质瘤细胞的凋亡诱导作用

目的研究TRAIL对原代培养的胶质瘤细胞的凋亡诱导作用，探讨其临床应用的实际价值。方法对22例脑胶质瘤和5例正常脑组织进行原代培养，用流式细胞仪检测TRAIL作用后肿瘤细胞和正常肢质细胞的凋亡率。结果成功培养出18例胶质瘤细胞和4例正常胶质细胞。800ng／ml,TRAIL作用48h后，凋亡率在80％以上的5例，50％。80％ 9例。50％以上14例．占总数的77．78％，50％以下的4例；正常胶质细胞无明显凋亡发生。结论TRAIL能有效地选择性地杀死某些胶质瘤细胞，对正常胶质细胞则无损害作用，TRAIL为肢质瘤的安全治疗提供了一个新的备选方法。     

瘦素对氧糖剥夺/复糖复氧后原代神经元的影响及相关机制北大核心CSCD

目的探讨瘦素预处理对原代培养神经元氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation and reoxygenation,OGD/R)后的神经保护作用及相关机制。方法体外培养、纯化及鉴定Sprague-Dawley乳鼠皮层神经元,采用OGD/R模型,在体外模拟脑缺血/再灌注损伤。将培养7 d的神经元随机分为4组:正常组、OGD/R组、瘦素组和LY+瘦素组。采用细胞计数试剂测定细胞存活率;通过透射电镜观察各组神经元的内质网超微结构;应用细胞免疫荧光、蛋白印迹技术及RT-PCR法检测磷酸化蛋白激酶B(phsphorylated protein kinase B,p-Akt)及内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)和半胱氨酸蛋白酶12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,Caspase12)的表达。结果与OGD/R组比较,瘦素组细胞存活率明显升高(43.04%±1.17%vs.68.61%±1.42%,P<0.001),细胞的形态损伤与内质网肿胀明显减轻,p-Akt(0.65±0.10 vs.1.10±0.21,P<0.05)和GRP78(1.04±0.06 vs.1.57±0.19,P<0.01)表达显著增加,CHOP(1.00±0.21 vs.0.59±0.11,P<0.01)和Caspase12(1.20±0.10 vs.0.86±0.10,P<0.01)表达明显减少;与瘦素组比较,LY+瘦素组细胞存活率显著降低(68.61%±1.42%vs.51.97%±2.05%,P<0.001),细胞的形态损伤与内质网肿胀明显增加,p-Akt(1.10±0.21 vs.0.76±0.23,P<0.05)和GRP78(1.57±0.19 vs.1.19±0.18,P<0.05)表达减少,CHOP(0.59±0.11 vs.0.65±0.33,P<0.05)和Caspase12(0.86±0.10 vs.1.03±0.06,P<0.05)表达显著增加。结论瘦素对OGD/R诱导的神经元损伤具有神经保护作用,其可能机制是瘦素激活PI3K/Akt信号通路,减轻内质网应激,从而促进原代神经元存活。     

人原代胶质瘤起始细胞的生物学行为初步研究

目的研究人原代胶质瘤起始细胞（GICs）的表型、自我更新能力、成瘤能力和耐药性等生物行为学特性。方法运用常规培养法和条件培养法对来自手术切除的同一胶质母细胞瘤组织分别进行培养,同时获得贴壁生长的人原代胶质瘤细胞（AGCs）和GICs;通过免疫荧光染色法测定其神经胶质酸性蛋白（GFAP）、CD133和巢蛋白的表达,通过单克隆形成实验和梯度密度成瘤实验检测其成球和成瘤能力,利用细胞计数药盒-8检测两种细胞在嘧啶亚硝脲（ACNU）和长春新碱（VCR）作用下的增殖曲线。结果 GICs呈神经球样生长且表达CD133和巢蛋白;47.8%±5.6%的GICs能够自我更新,而可表达GFAP的AGCs中仅有4.3%±1.6%能形成单克隆;ACNU对GICs的IC₅0=1×10^-3.1mol/L,对AGCs的IC₅0=1×10^-3.9mol/L,两者相比较,相差显著（P<0.05）;VCR对GICs的IC₅0=1×10^-4.3mol/L,对AGCs的IC₅0=1×10^-5.5mol/L,两者相比较,亦相差显著（P<0.05）。结论利用条件培养法可以获得具有明显干性的GICs,与分化的AGCs相比具有更强的自我更新能力和成瘤能力,且GICs对ACNU和VCR较AGCs更为耐药。     

TRAIL对原代培养胶质瘤细胞的凋亡诱导作用

目的研究TRAIL对原代培养的胶质瘤细胞的凋亡诱导作用,探讨其临床应用的实际价值。方法对22例脑胶质瘤和5例正常脑组织进行原代培养,用流式细胞仪检测TRAIL作用后肿瘤细胞和正常胶质细胞的凋亡率。结果成功培养出18例胶质瘤细胞和4例正常胶质细胞。800ng mlTRAIL作用48h后,凋亡率在80%以上的5例,50%～80%9例,50%以上14例,占总数的77.78%,50%以下的4例;正常胶质细胞无明显凋亡发生。结论TRAIL能有效地选择性地杀死某些胶质瘤细胞,对正常胶质细胞则无损害作用,TRAIL为胶质瘤的安全治疗提供了一个新的备选方法。     

PI3K/Akt信号通路在脑缺血神经元凋亡中作用的研究进展

脑缺血发生早期的神经元凋亡与PI3K/Akt信号通路密切相关,通过多种途径干预此信号通路可调控神经元的凋亡,为脑缺血的治疗研究提供靶点,本文就其可能的调控神经元凋亡机制作一综述.     

银杏内酯B对体外培养神经干细胞内HIF-1α及PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨银杏内酯B(GKB)对体外培养神经干细胞(NSCs)内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/Akt信号通路表达的影响。方法在建立谷氨酸对神经干细胞损伤的模型基础上,给予银杏内酯B、PI3K/Akt特异性抑制剂wortmannin进行干预,将实验分为两大组:即正常细胞组、谷氨酸损伤组,各组下又分为4个小组:(1)GKB组;(2)对照组;(3)wortmannin+GKB组;(4)wortmannin组。采用Western blot印迹来检测各组NSCs中HIF-1α、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平的表达。结果无论正常细胞组还是谷氨酸损伤细胞组,NSCs经GKB处理后HIF-1α、p-Akt表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);经wortmannin处理后HIF-1α、p-Akt蛋白表达受抑制,较对照组明显减弱(P<0.05);wortmannin+GKB组和wortmannin组比较,HIF-1α、p-Akt表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCs经谷氨酸处理后,HIF-1α、p-Akt表达较未受损的NSCs表达增强(P<0.05)。结论银杏内酯B是神经干细胞保护作用机制之一,可能与激活PI3K/Akt信号通路、进一步上调HIF-1α表达有关。     

PI3K／Akt信号通路对神经元机械性损伤诱导的自噬调节作用

目的研究机械性神经元损伤后自噬的发生情况以及磷脂酰肌醇3激酶（P13K）／蛋白激酶B（Akt,即PKB）信号通路对其发挥的调节作用。方法小鼠皮层神经元原代培养2W后,采用机械性神经元损伤模型,通过蛋白印迹法（Westernblot）定量分析损伤后不同时间点自噬相关分子微管相关蛋白轻链3（LC3）I／II、Beclin-1和Akt蛋白磷酸化的表达情况;使用不同浓度的P13K抑制剂LY294002预处理神经元1h后给予机械性损伤,通过Westernblot来研究自噬相关分子LC3I／Ⅱ和Beclin-1的表达情况。结果自噬相关分子LC311于机械性神经元损伤后3h表达开始逐渐增加,而Beclin-1无明显变化;p-Akt的表达于损伤后3h达到高峰,此后逐渐恢复到正常水平;用P13K抑制剂LY294002预处理神经元,可以使损伤后神经元的自噬相关分子LC3lI和Beclin-1的表达上调。结论机械性神经元损伤可以诱导自噬发生,且PI3K／Akt信号通路在其中可能发挥调节作用。     

sEHi对颈动脉狭窄患者内皮祖细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探讨可溶性环氧化物水解酶抑制剂(sEHi)AUDA 调控颈动脉狭窄(CS)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖的分子机制。方法 从CS患者外周血分离、培养内皮祖细胞,收集培养至第7 d的细胞,分为未处理组、AUDA组、PI3K抑制剂(LY294002)组和AUDA+ LY294002组,取无颈动脉狭窄患者的EPCs作为对照组,MTT法检测EPCs的增殖能力,Western blot法检测EPCs Akt磷酸化的水平。结果 对照组EPCs增殖能力较未处理组增强,AUDA组较未处理组、AUDA+ LY294002组、LY294002组EPCs增殖能力增强,未处理组、AUDA+ LY294002组较LY294002组内皮祖细胞增殖能力增强; Western blot结果显示AUDA可以促进EPCs P-Akt蛋白的表达,而LY294002可以抑制上述作用。结论 AUDA可能通过活化PI3K /Akt信号通路来促进内皮祖细胞的增殖。     

过表达Mfn2基因通过PI3K/AKT通路抑制鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡

目的 探讨过表达线粒体融合蛋白2(Mfn2)基因通过PI3K/AKT通路抑制鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡。方法 培养SH-SY5Y细胞并分组,对照组用不含药物及质粒的DMEM干预; 鱼藤酮组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预; 鱼藤酮+空白质粒组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预并转染空白的pcDNA 3.1质粒; 鱼藤酮+Mfn2质粒组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预并转染表达Mfn2的pcDNA3.1质粒; 鱼藤酮+Mfn2质粒+LY组用含有20 μmol/L鱼藤酮、10 μmol/L LY294002的DMEM干预并转染表达Mfn2的pcDNA3.1质粒; 检测细胞活力、凋亡率及线粒体凋亡基因、p-PI3K、p-AKT的表达水平。结果 鱼藤酮组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均低于对照组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均高于对照组; 鱼藤酮+Mfn2质粒组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均高于鱼藤酮组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均低于鱼藤酮组; 鱼藤酮+Mfn2质粒+LY组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均低于鱼藤酮+Mfn2质粒组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均高于鱼藤酮+Mfn2质粒组。结论 过表达Mfn2基因对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡具有抑制作用,且该作用可能与抑制PI3K/AKT通路有关     

胶质瘤干细胞外泌体通过PI3K/Akt信号通路促进胶质瘤U87细胞侵袭、迁移

目的 探讨胶质瘤干细胞（GSCs）外泌体（exo）对胶质瘤U87细胞侵袭、迁移的影响。方法 取对数生长期U87细胞,应用干细胞培养液分离、培养胶质瘤U87细胞中GSCs并提取、鉴定GSCs-exo。取对数生长期U87细胞随机分为4组:对照组和高、中、低GSCs-exo浓度组（分别加入20、40、80 μg/ml的GSCs-exo）。Transwell实验检测U87细胞侵袭能力,划痕实验检测U87细胞迁移能力,免疫印记法检测U87细胞磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、L1CAM的表达水平。结果 成功分离GSCs并获得GSCs-exo。GSCs-exo组U87侵袭细胞数、细胞迁移率明显高于对照组（P<0.05）,L1CAM、PI3K及p-AKt/Akt表达水平明显高于对照组（P<0.05）,而且均呈浓度依赖性（P<0.05）。结论 GSCs-exo可促进胶质瘤侵袭与转移,其机制可能与上调L1CAM、PI3K表达,促进Akt磷酸化有关。     

Geranylgeranylacetone exerts neuroprotective roles through medicating the phosphatidylinositol-3 kinase/Akt signaling pathway in an intracerebral hemorrhage rat model

Aim: Previous studies have demonstrated that geranylgeranylacetone exerts neuroprotective effects in experimental intracerebral hemorrhage. This study is designed to explore the underlying mechanism.

Materials and Methods: One hundred and eighty male Sprague–Dawley rats were subjected to intracerebral hemorrhage by stereotactic injection of collagenase and were pretreated without or with different doses of geranylgeranylacetone. At 6 h, 24 h, 48 h, 72 h and 7 days after the operation, the neurological deficits were examined with the scoring scale method. To explore the underlying mechanism, wortmannin (Wort), a specific phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) inhibitor, was used. The protein expression of Akt was determined by Western blotting. The brain water content and the hematoma volume assessment were measured and compared among the different groups.

Results: We first found that geranylgeranylacetone pretreatment significantly reduced neurological deficit in intracerebral hemorrhage rats, indicating its neuroprotective role. Then, we found wort treatment significantly decreased the geranylgeranylacetone-induced Akt expression level in intracerebral hemorrhage rats. Besides, wort not only reversed the effects of geranylgeranylacetone on neurological function, but also reversed the effects of geranylgeranylacetone on reducing brain edema and decreasing hematoma volume in intracerebral hemorrhage rats.

Conclusion: Geranylgeranylacetone exerts neuroprotective roles, at least partially, through medicating the PI3K/Akt signaling pathway in an experimental intracerebral hemorrhage rat model.     

白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探讨PI3K/Akt信号通路在白藜芦醇减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 将48只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、白藜芦醇组、LY294002组（Akt抑制剂）,每组12只。利用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,造模后24 h进行大鼠神经功能损伤评分和检测脑梗死体积、脑组织髓过氧化物酶（MPO）的活性,免疫印迹法检测脑组织p-Akt、t-Akt的表达水平,ELISA法检测脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果 与假手术组相比,模型组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量均明显增高（P<0.05）,缺血脑组织p-Akt表达水平也明显增高（P<0.05）;与模型组相比,白藜芦醇显著降低大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量（P<0.05）,也显著降低缺血脑组织p-Akt表达水平（P<0.05）;脑室内注射LY294002,显著抑制白藜芦醇的这些作用（P<0.05）。结论 白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

吉非替尼对表达PTEN的胶质瘤细胞株U87细胞增殖活性的影响

目的探讨表皮生长因子受体抑制剂吉非替尼对表达磷酸酶一张力蛋白同源物（FrEN）的胶质瘤细胞株U87细胞增殖活性的影响。方法将人脑恶性胶质瘤细胞株U87细胞（PTEN缺失）置人DMEM中培养,根据转染质粒不同分为空白组（不转染任何质粒）、空载体组（转染pCDNA3．1载体）和PTEN组（转染pCDNA3．1-PTEN质粒）,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）,碘化丙碇双掺入法分析细胞DNA合成水平,采用流式细胞仪分析细胞周期,采用蛋白免疫印迹法分析蛋白表达。结果与空白组和空载体组相比,PTEN组PTEN蛋白表达水平明显升高,而磷酸化Akt蛋白表达水平明显降低。PTEN组BrdU阳性细胞比例[（13．5±2．7）％]明显低于空白组[（39．5±4．2）％;P〈0．05]和空载体组为[（40．7±5．1）％;P〈0．05]。PTEN组GJG。期细胞比例[（80．2±6．6）％]明显高于空白组[（43．2±5．2）％;P〈0．05]和空载体组[（41．1＋4．7）％;P〈0．05],而s和G2,M期细胞比例[分别为（35．7±3．7）％和（21．1±2．1）％]明显低于空白组[分别为（36．5±4．1）％和（22．4±1．9）％;P〈0．05]和空载体组[分别为（12．7＋2．O）％和（7．1±1．1）％;P〈0．051。结论高表达PTEN蛋白能够增强胶质瘤细胞株U87细胞对吉非替尼的敏感性。     

PI3K/Akt通路在创伤性脑损伤中的表达及抗凋亡作用

目的 研究创伤性脑损伤(TBI)后脑组织中Akt 蛋白磷酸化激活情况及其在神经细胞凋亡中的作用.方法 24 只雄性Wistar 大鼠,采用自由落体颅脑损伤模型随机分成假手术组、外伤后1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d 组.于相应时间点处死后行蛋白免疫印迹法(western blot)检测磷酸化A...     

Quercetin attenuates neuronal autophagy and apoptosis in rat traumatic brain injury model via activation of PI3K/Akt signaling pathway

Objective: Neuronal autophagy and apoptosis play an irreplaceable role in brain injury pathogenesis and may represent a hopeful target for treatment. Previous studies have demonstrated that administration of quercetin-attenuated brain damage in a variety of brain injury models including traumatic brain injury (TBI). However, whether PI3K/Akt signaling pathway mediates the neuroprotection of quercetin following TBI is not well clarified. We sought to propose a hypothesis that quercetin could attenuate neuronal autophagy and apoptosis via enhancing PI3K/Akt signaling.

Methods: All rats were randomly arranged into four groups as follows: sham group (n = 25), TBI group (n = 25), TBI + quercetin group (n = 25), TBI + quercetin + LY294002 group (n = 25). Quercetin (Sigma, USA, dissolved in 0.9% saline solution) was administered intraperitoneally at a dose of 50 mg/kg at 30 min, 12 h, and 24 h after TBI. The neurological impairment and spatial cognitive function was assessed by the neurologic severity score and Morris water maze, respectively. Immunohistochemistry staining and western blotting was used to evaluate the expression of LC3, p-Akt, caspase-3, Bcl-2, and Bax.

Results: Quercetin treatment significantly attenuated TBI-induced neurological impairment (1–3 days, p < 0.05) and improved cognitive function (5–8 days, p < 0.05). Double immunolabeling demonstrated that quercetin significantly reduced the LC3-positive cells co-labeled with NeuN, whereas significantly enhanced p-Akt-positive cells co-labeled with NeuN. Furthermore, quercetin treatment reduced the expression of LC3、caspase-3 and Bax levels induced following TBI (p < 0.05), and increased the expression of p-Akt and Bcl-2 at 48 h (p < 0.05).

Conclusion: In conclusion, our observations indicate that post-injury treatment with quercetin could inhibit neuronal autophagy and apoptosis in the hippocampus in a rat model of TBI. The neuroprotective effects of quercetin may be related to modulation of PI3K/Akt signaling pathway.     

基于PI3K/Akt通路探讨氯吡格雷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用

目的基于磷酯酰激醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路探讨氯吡格雷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用.方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为模型组、氯吡格雷组、LY294002(PI3K抑制剂)组、氯吡格雷+LY294002组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组.分组处理后,所有大鼠进行神经功能缺损评分并尾静脉取血,处死大鼠,HE染色检测各组大鼠神经元病理情况;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠脑组织梗死面积;ELISA检测血清中中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法检测脑组织中PI3K/Akt通路蛋白表达情况.结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织神经元出现坏死、核收缩变小等病理变化,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均明显升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt明显降低(P<0.05);与模型组相比,氯吡格雷组大鼠神经元病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均降低(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt升高(P<0.05);LY294002组大鼠神经元病理损伤加重,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低(P<0.05).与LY294002组相比,氯吡格雷+LY294002组大鼠神经元病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均降低(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt升高(P<0.05).与氯吡格雷组相比,氯吡格雷+LY294002组大鼠神经元病理损伤加重,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低(P<0.05).结论氯吡格雷可通过激活PI3K/Akt通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,保护脑组织.