PI3K／Akt信号通路对神经元机械性损伤诱导的自噬调节作用

目的研究机械性神经元损伤后自噬的发生情况以及磷脂酰肌醇3激酶（P13K）／蛋白激酶B（Akt,即PKB）信号通路对其发挥的调节作用。方法小鼠皮层神经元原代培养2W后,采用机械性神经元损伤模型,通过蛋白印迹法（Westernblot）定量分析损伤后不同时间点自噬相关分子微管相关蛋白轻链3（LC3）I／II、Beclin-1和Akt蛋白磷酸化的表达情况;使用不同浓度的P13K抑制剂LY294002预处理神经元1h后给予机械性损伤,通过Westernblot来研究自噬相关分子LC3I／Ⅱ和Beclin-1的表达情况。结果自噬相关分子LC311于机械性神经元损伤后3h表达开始逐渐增加,而Beclin-1无明显变化;p-Akt的表达于损伤后3h达到高峰,此后逐渐恢复到正常水平;用P13K抑制剂LY294002预处理神经元,可以使损伤后神经元的自噬相关分子LC3lI和Beclin-1的表达上调。结论机械性神经元损伤可以诱导自噬发生,且PI3K／Akt信号通路在其中可能发挥调节作用。     

白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探讨PI3K/Akt信号通路在白藜芦醇减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 将48只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、白藜芦醇组、LY294002组（Akt抑制剂）,每组12只。利用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,造模后24 h进行大鼠神经功能损伤评分和检测脑梗死体积、脑组织髓过氧化物酶（MPO）的活性,免疫印迹法检测脑组织p-Akt、t-Akt的表达水平,ELISA法检测脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果 与假手术组相比,模型组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量均明显增高（P<0.05）,缺血脑组织p-Akt表达水平也明显增高（P<0.05）;与模型组相比,白藜芦醇显著降低大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量（P<0.05）,也显著降低缺血脑组织p-Akt表达水平（P<0.05）;脑室内注射LY294002,显著抑制白藜芦醇的这些作用（P<0.05）。结论 白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

miR-221靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路调节细胞自噬参与帕金森病的机制研究

目的探讨微小RNA-221(miR-221)靶向磷酸脂酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)介导磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB也称AKT)信号通路调节细胞自噬参与帕金森病(PD)进展的机制研究。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)作用于肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞建立PD模型;转染miR-221模拟物或抑制剂来调节miR-221的表达;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测PC12细胞存活率;电镜观察自噬体;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析确定miR-221的表达;蛋白印迹法(Western blot)检测自噬蛋白标志物(LC3-II)和PTEN/PI3K/AKT信号蛋白的表达。结果在PD细胞模型中,miR-221的表达水平下降(P0.01),LC3-II蛋白表达水平上调(P0.01),自噬体增加;与6-OHDA组相比,过表达miR-221降低了LC3-II蛋白的表达水平(P0.05),并增加了细胞存活率(P0.001),而沉默miR-221增加了LC3-II蛋白的表达水平(P0.05),并降低了细胞存活率(P0.001);此外,与6-OHDA组相比,过表达miR-221降低了PTEN蛋白的表达(P0.01),增加了PI3K蛋白的表达(P0.001)以及AKT蛋白磷酸化程度(P0.01),而沉默miR-221增加了PTEN蛋白的表达(P0.01),降低了PI3K蛋白的表达(P0.05)以及AKT蛋白磷酸化程度(P0.05)。结论 miR-221在6-OHDA诱导的PC12细胞中表达降低,上调miR-221可靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路来调节自噬,从而发挥对PD细胞模型的保护作用。     

miR-24通过PI3K/AKT抑制脑梗死大鼠脑损伤的机制研究

目的 探究miR-24通过PI3K/AKT信号通路抑制脑梗死大鼠脑损伤的机制。方法 将大鼠分为对照组(n=10)、假手术组(n=10)、模型组(n=10)和试验组(n=10),采用大脑中动脉闭塞法建立大鼠脑梗死动物模型，假手术组大鼠进行手术同样操作，仅不进行中动脉闭塞，试验组大鼠在模型脑鼠脑室内立体定向注射miR-24 agomir。HE染色检测大鼠皮质区病理变化，TTC染色法检测各组大鼠的脑梗死面积，qPCR检测各组大鼠脑组织中miR-24表达水平，Western blot检测大鼠脑组织凋亡蛋白胱天蛋白酶3(caspase-3)、Bcl-2-Associated X的蛋白质(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)表达情况，并检测PI3K/AKT信号通路关键分子磷脂酰肌醇激酶(PI3K)及(蛋白激酶B)AKT表达情况，同时分析其磷酸化修饰水平。结果 与对照组相比和假手术组相比，模型组大鼠的神经功能损害及病理评分升高，miR-24组神经损伤降低并且病理评分降低，模型组大鼠的脑梗死面积升高，miR-24组脑梗死面积降低。qPCR结果表明模型组miR24显著降低，试验组显著上升...     

落新妇苷通过激活PI3K/AKT信号通路和抑制P38MAPK信号通路减轻H2O2诱导的PC12细胞损伤

目的 研究落新妇苷对H2O2诱导的氧化应激损伤的PC12细胞影响。方法 将PC12细胞分为5组:对照组、H_2O_2组及不同浓度(1μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)落新妇苷组。采用CCK8实验检测各组细胞的活力; Annexin V-FITC/PI细胞凋亡实验检测各组细胞凋亡率; Western blot检测PI3K、AKT、Caspase3和P38蛋白及其磷酸化激活蛋白的表达水平。结果 与H_2O_2组相比,落新妇苷组细胞的活力显著提高,细胞凋亡率明显降低,活化的凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3表达水平降低,PI3K/AKT途径相关蛋白p-PI3K和p-AKT的表达水平升高,P38 MAPK途径重要蛋白p-P38的表达水平降低。结论 落新妇苷对H_2O_2诱导的氧化应激损伤的PC12细胞有明显保护作用;这种保护作用可能是通过激活PI3K/AKT信号通路及抑制P38MAPK信号通路实现的。     

过表达Mfn2基因通过PI3K/AKT通路抑制鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡

目的 探讨过表达线粒体融合蛋白2(Mfn2)基因通过PI3K/AKT通路抑制鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡。方法 培养SH-SY5Y细胞并分组,对照组用不含药物及质粒的DMEM干预; 鱼藤酮组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预; 鱼藤酮+空白质粒组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预并转染空白的pcDNA 3.1质粒; 鱼藤酮+Mfn2质粒组用含有20 μmol/L鱼藤酮的DMEM干预并转染表达Mfn2的pcDNA3.1质粒; 鱼藤酮+Mfn2质粒+LY组用含有20 μmol/L鱼藤酮、10 μmol/L LY294002的DMEM干预并转染表达Mfn2的pcDNA3.1质粒; 检测细胞活力、凋亡率及线粒体凋亡基因、p-PI3K、p-AKT的表达水平。结果 鱼藤酮组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均低于对照组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均高于对照组; 鱼藤酮+Mfn2质粒组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均高于鱼藤酮组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均低于鱼藤酮组; 鱼藤酮+Mfn2质粒+LY组的细胞活力及细胞中p-PI3K、p-AKT的表达水平均低于鱼藤酮+Mfn2质粒组,凋亡率及细胞中caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平均高于鱼藤酮+Mfn2质粒组。结论 过表达Mfn2基因对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的细胞凋亡具有抑制作用,且该作用可能与抑制PI3K/AKT通路有关     

PI3K/AKT信号通路在偏头痛发病机制中的研究进展

偏头痛是一种临床常见的原发性头痛，因其发病率高、致残率高，对患者的生活质量造成巨大影响，但其发病机制尚不明确。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路参与营养代谢、增殖、生长、转录、炎症等细胞活动，在偏头痛的发病机制中具有重要作用。文中介绍PI3K/AKT信号通路在偏头痛发病机制中的作用，旨在为探讨偏头痛的发病机制及治疗靶点等方面提供更多帮助。     

黄连碱上调miR-146a-5p后通过PI3K/AKT通路减轻由MPP+诱导的帕金森病细胞模型损伤

目的探讨黄连碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞损伤的影响及其机制。方法用0.3 mmol/L的MPP+处理SK-N-SH细胞作为PD细胞模型,记为MPP+组,以正常培养的细胞作为空白对照组。用浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的黄连碱预处理4h后再用0.3 mmol/L的MPP+处理作为不同浓度黄连碱处理组。将miR-con、miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后再用0.3 mmol/L的MPP+处理记为MPP++miR-con组、MPP++miR-146a-5p组;将anti-miR-con、anti-miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后用20μmol/L的黄连碱预处理4h及0.3 mmol/L的MPP+处理记为MPP++Cop+anti-miR-con组、MPP++Cop+anti-miR-146a-5p组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Western blotting实验检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平。结果与空白对照组比较,MPP+处理后SK-N-SH细胞存活率显著降低,活化caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。黄连碱处理及miR-146a-5p过表达后MPP+诱导的SK-N-SH细胞中细胞存活率显著升高,活化caspase-3表达水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对SK-N-SH细胞增殖促进和凋亡抑制的作用。黄连碱处理后MPP+诱导的SK-N-SH细胞中p-AKT、p-PI3K表达水平显著升高,低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对p-AKT、p-PI3K表达水平的促进作用。结论黄连碱可促进细胞存活,抑制MPP+诱导的细胞凋亡,其机制可能与miR-146a-5p及PI3K/AKT信号通路有关。     

HECTD1调控PI3K/AKT信号通路对低氧诱导的脑微血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨低氧应激下HECT结构域E3泛素连接酶1 (HECTD1)对脑微血管内皮细胞(BMECs)的影响及其功能机制。方法 BMECs细胞在1%O₂的条件下培养以诱导低氧刺激。使用多种细胞生物学功能实验测定来评估BMECs中低氧诱导的损伤。乳酸脱氢酶(LDH)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(T-SOD)水平的检测以评估低氧诱导的氧化应激水平。Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。结果 在常氧条件下,过表达HECTD1可以提高BMECs的细胞活力。在低氧条件下,过表达HECTD1显著减轻了低氧诱导的细胞活力抑制作用。此外过表达HECTD1降低了低氧诱导的BMECs细胞凋亡和氧化应激。结论 HECTD1通过阻断PI3K/AKT信号通路来保护BMECs免受低氧应激诱导的损伤,这表明HECTD1在低氧相关的脑疾病中具有治疗价值。     

PTEN/PI3K/AKT信号通路与脑血管畸形血管生成的研究进展

PTEN是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,PTEN通过负调节PI3K/AKT细胞信号转导途径抑制VEGF的表达而抑制血管生成的作用,已经证实PTEN的缺失和突变能促进肿瘤的血管生成。PTEN在脑血管畸形血管生成中的作用已受到人们的广泛关注,本文主要综述PTEN/PI3K/AKT信号通路在脑血管畸形的血管生成中的作用,PTEN相关的抑制血管生成的生物制剂可能成为新型治疗脑血管畸形的分子药物。     

Quercetin attenuates neuronal autophagy and apoptosis in rat traumatic brain injury model via activation of PI3K/Akt signaling pathway

Objective: Neuronal autophagy and apoptosis play an irreplaceable role in brain injury pathogenesis and may represent a hopeful target for treatment. Previous studies have demonstrated that administration of quercetin-attenuated brain damage in a variety of brain injury models including traumatic brain injury (TBI). However, whether PI3K/Akt signaling pathway mediates the neuroprotection of quercetin following TBI is not well clarified. We sought to propose a hypothesis that quercetin could attenuate neuronal autophagy and apoptosis via enhancing PI3K/Akt signaling.

Methods: All rats were randomly arranged into four groups as follows: sham group (n = 25), TBI group (n = 25), TBI + quercetin group (n = 25), TBI + quercetin + LY294002 group (n = 25). Quercetin (Sigma, USA, dissolved in 0.9% saline solution) was administered intraperitoneally at a dose of 50 mg/kg at 30 min, 12 h, and 24 h after TBI. The neurological impairment and spatial cognitive function was assessed by the neurologic severity score and Morris water maze, respectively. Immunohistochemistry staining and western blotting was used to evaluate the expression of LC3, p-Akt, caspase-3, Bcl-2, and Bax.

Results: Quercetin treatment significantly attenuated TBI-induced neurological impairment (1–3 days, p < 0.05) and improved cognitive function (5–8 days, p < 0.05). Double immunolabeling demonstrated that quercetin significantly reduced the LC3-positive cells co-labeled with NeuN, whereas significantly enhanced p-Akt-positive cells co-labeled with NeuN. Furthermore, quercetin treatment reduced the expression of LC3、caspase-3 and Bax levels induced following TBI (p < 0.05), and increased the expression of p-Akt and Bcl-2 at 48 h (p < 0.05).

Conclusion: In conclusion, our observations indicate that post-injury treatment with quercetin could inhibit neuronal autophagy and apoptosis in the hippocampus in a rat model of TBI. The neuroprotective effects of quercetin may be related to modulation of PI3K/Akt signaling pathway.     

基于PI3K/Akt通路探讨氯吡格雷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用

目的基于磷酯酰激醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路探讨氯吡格雷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用.方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为模型组、氯吡格雷组、LY294002(PI3K抑制剂)组、氯吡格雷+LY294002组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组.分组处理后,所有大鼠进行神经功能缺损评分并尾静脉取血,处死大鼠,HE染色检测各组大鼠神经元病理情况;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠脑组织梗死面积;ELISA检测血清中中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法检测脑组织中PI3K/Akt通路蛋白表达情况.结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织神经元出现坏死、核收缩变小等病理变化,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均明显升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt明显降低(P<0.05);与模型组相比,氯吡格雷组大鼠神经元病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均降低(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt升高(P<0.05);LY294002组大鼠神经元病理损伤加重,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低(P<0.05).与LY294002组相比,氯吡格雷+LY294002组大鼠神经元病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均降低(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt升高(P<0.05).与氯吡格雷组相比,氯吡格雷+LY294002组大鼠神经元病理损伤加重,神经功能缺损评分、脑梗死面积、血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平均升高(P<0.05),脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt降低(P<0.05).结论氯吡格雷可通过激活PI3K/Akt通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,保护脑组织.     

PI3K/Akt通路在创伤性脑损伤中的表达及抗凋亡作用

目的 研究创伤性脑损伤(TBI)后脑组织中Akt 蛋白磷酸化激活情况及其在神经细胞凋亡中的作用.方法 24 只雄性Wistar 大鼠,采用自由落体颅脑损伤模型随机分成假手术组、外伤后1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d 组.于相应时间点处死后行蛋白免疫印迹法(western blot)检测磷酸化A...     

Resveratrol attenuates brain damage in permanent focal cerebral ischemia via activation of PI3K/Akt signaling pathway in rats

ABSTRACT

Objective: The aim of this study was to evaluate the potential molecular mechanism of resveratrol (RSV) that attenuates brain damage from focal cerebral ischemia.

Methods and materials: To investigate whether phosphatidylinositol 3-kinase/Akt (PI3K/Akt) pathway was involved in RSV anti-inflammatory and neuroprotective properties. Middle cerebral artery occlusion (MCAO) animal model was used in this study. Adult male Sprague–Dawley (SD) rats underwent MCAO, and then received treatment with RSV or vehicle after the onset of ischemia. PI3K inhibitor LY294002 was injected intracerebroventricularly to inhibit the PI3K/Akt signaling pathway. Neurological deficit scores and cerebral water content were assessed 24 h after MCAO. The inflammatory factors interleukin (IL)-1β, tumor necrosis factor (TNFα), and cyclooxygenase-2 (COX2) mRNA level were examined by real-time PCR. The enzymatic activity of myeloperoxidase (MPO) was measured 24 h after MCAO. The protein expression of phospho-Akt and COX2 in ischemic brain were determined by western blot.

Results: RSV significantly reduced neurological deficit scores, cerebral water content and the enzymatic activity of MPO, all of which were abolished by LY294002 administration. Real-time PCR showed that RSV significantly suppressed the upregulation of the inflammatory factors IL-1β, TNFα, COX2 mRNA levels. RSV significantly inhibited upregulated the protein expression of COX2 24 h after MCAO, which effect was abolished by LY294002 administration.

Conclusion: RSV attenuated ischemic brain damage induced by cerebral artery occlusion mainly through PI3K/Akt signaling pathway.

Abbreviation: MCAO: Middle cerebral artery occlusion; RSV: resveratrol; PI3K/Akt: phosphatidylinositol 3-kinase/Akt; TNF: tumor necrosis factor; COX2: cyclooxygenase-2; MPO: myeloperoxidase; IL: interleukin.     

PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,AKT)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)在脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义。方法 本院收治的43例脑胶质瘤患者为观察组,30例其他脑部疾病患者为对照组; 根据病理分级分为低级别组23例和高级别组20例; 计算各组PI3K、AKT、PTEN表达阳性率。结果 观察组PI3K、AKT阳性率显著高于对照组(P<0.05); 观察组PTEN阳性率显著低于对照组(P<0.05); 低级别组PI3K阳性率和AKT阳性率显著低于高级别组(P<0.05); 低级别组PTEN阳性率显著高于高级别组(P<0.05); Pearson相关性分析表明:PI3K与AKT呈显著正相关(r=0.882,P<0.05); PI3K、AKT与PTEN呈显著负相关(r=-0.753,-0.775,P<0.05)。结论 PI3K、AKT、PTEN可相互作用,能够反映脑胶质瘤病情进展。     

PI3K/AKT pathway mediates the antidepressant- and anxiolytic-like roles of hydrogen sulfide in streptozotocin-induced diabetic rats via promoting hippocampal neurogenesis

We have previously demonstrated that hydrogen sulfide (H₂S), the third endogenous gasotransmitter, ameliorates the depression- and anxiety-like behaviors in diabetic rats, but the underlying mechanism remains unclear. The present was aimed to investigate whether the hippocampal phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (AKT) pathway mediates H₂S-ameliorated depression- and anxiety-like behaviors in diabetic rats by improving the hippocampal neurogenesis. The depression-like behaviors were examined by Tail suspension test (TST), the anxiety-like behaviors were examined by Elevated plus maze test (EPM), and the locomotor activity was detected by Open Field Test (OFT). The expressions of doublecortin (DCX), neuron-specific nuclear protein (NeuN), glial fibrillary acidic protein (GFAP), p-AKT, and AKT in the hippocampus were determined by Western blot analysis. Results showed that NaHS, a donor of exogenous H₂S, not only activated the hippocampal PI3K/AKT pathway, as evidenced by the increase of phosphorylated AKT, but also favorably reversed streptozotocin (STZ)-disturbed hippocampal neurogenesis, as evidenced by the increases in the expressions of DCX and NeuN as well as the decrease in the expression of GFAP in the hippocampus of STZ-induced diabetic rats. Furthermore, inhibited PI3K/AKT pathway by LY294002 significantly abolished H₂S-exerted the improvement of hippocampal neurogenesis and the antidepressant- and anxiolytic-like effects in the STZ-induced diabetic rats. Taken together, these results uncover that the activation of hippocampal PI3K/AKT pathway plays an important role to restore hippocampal neurogenesis and subsequently to mediate the antidepressant- and anxiolytic-like roles of H₂S in STZ-induced diabetic rats and enhance our understanding of the robustness of H₂S as a therapeutic strategy for treatment of depression in diabetes mellitus.     

RIP1/3对创伤性脑损伤后神经元的作用及其机制研究

目的 探讨RIP1/3对创伤性脑损伤(TBI)后神经元的影响及其作用机制。方法 将体外培养的皮层神经元分为4组:siRIP组、Nec-1预处理组、阴性质粒转染组和对照组。通过慢病毒转染法分别干涉RIP1、RIP3表达,建立离体TBI损伤模型,通过流式细胞学检测划伤后神经元存活情况。对体外培养的皮层神经元敲除RIP1/3,建立谷氨酸诱导神经元损伤模型,通过流式细胞学检测谷氨酸刺激后神经元存活情况。结果 siRIP组及Nec-1预处理组机械性损伤后神经元存活率高于阴性质粒转染组和对照组。Nec-1预处理组谷氨酸损伤后神经元存活率高于对照组,而siRIP组存活率与对照组和阴性转染组比较未见显著差异。结论 RIP1和RIP3可能对TBI诱导后神经元死亡有作用,而RIP1抑制剂Nec-1可能对TBI具有脑保护作用。RIP1/3与谷氨酸兴奋毒性诱导细胞死亡无关,而Nec-1对于谷氨酸损伤具有潜在保护作用,并可能存在特异性靶点。