阿托伐他汀对淀粉样β蛋白诱导大鼠原代海马神经元损伤保护作用的研究

目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的体外培养原代海马神经元损伤保护作用。方法选用出生0~24hSprague-Dawley大鼠乳鼠,解剖显微镜下分离海马,进行海马神经元体外培养,培养10d后用于实验。将培养的海马神经元分为3组:(1)正常对照组:加入含有1%(质量浓度)DMSO培养基;(2)Aβ1-42组:加入1.25μmol/L Aβ;(3)Aβ(1.25μmol/L)+不同浓度阿托伐他汀组(0.1、0.5、1、2.5μmol/L)。应用CellTiter-GloTM荧光细胞活性试剂盒检测培养海马神经元ATP含量,用以反映神经元活力;通过CytoTox-ONETM试剂盒测定培养细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,用以测定神经元细胞膜的损伤程度;应用免疫荧光染色观察神经元突触素(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD-95)、bassoon蛋白表达。Western印迹法半定量检测海马神经元突触蛋白SYP、PSD-95、bassoon的改变。结果与正常对照组比较,培养10d海马神经元经1.25μmol/L Aβ1-42作用48h后,其ATP和LDH水平均明显降低(均P0.01),而0.5、1.0、2.5μmol/L Ato组能够明显抑制Aβ1-42引起的ATP和LDH水平降低(P0.01)。免疫荧光及Western blot结果显示,1.25μmol/L Aβ1-42可使海马神经元SYP、PSD-95、bassoon蛋白表达明显降低,而Ato能够明显抑制Aβ1-42引起的SYP、PSD-95、bassoon蛋白表达降低。结论 Ato对Aβ诱导的体外培养海马神经元毒性有保护作用,这种保护作用可能与Ato对抗Aβ1-42引起的海马神经元SYP、PSD-95、bassoon表达降低有关。     

钙敏感受体在创伤性颅脑损伤大鼠神经元凋亡中的作用

目的 探讨钙敏感受体（CaSR）在创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠神经元凋亡中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠54只,按随机数字表方法随机分为对照组、TBI组、抑制剂组,每组18只,每组再分为损伤后6、24、72 h3个亚组,每个亚组6只大鼠.TBI组和抑制剂组采用改良自由落体硬脑膜撞击法建立TBI模型,抑制剂组在模型建立前连续2d尾静脉注射CaSR阻滞剂NPS2390（1次/d,每次10 μmol/kg）,对照组只开骨窗不予打击.采用改良神经行为学评分（mNSS）评估各组大鼠的神经行为,实时定量PCR法检测损伤脑组织CaSR、Caspase-3 mRNA的表达,Westem blot法检测CaSR、Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测皮质神经元的凋亡.结果 建模后6、24、72 h,（1）神经行为学评分显示,TBI组与对照组和抑制剂组比较,各时间点mNSS评分均增高,差异均有统计学意义（均P〈0.01）,而抑制剂组各时间点评分均高于对照组（均P〈0.01）.（2）TBI组和抑制剂组不同时间点CaSR、Caspase-3的mRNA和其蛋白的表达,均为24 h达高峰（均P〈0.01）.与对照组和抑制剂组比较,TBI组各时间点CaSR mRNA及其蛋白的表达均增高（均P〈0.01）,Caspase-3的蛋白表达仅在24 h高于对照组和抑制剂组（P〈0.05）.（3）TUNEL法检测结果显示,TBI模型制作后24 h凋亡细胞达到峰值.各时间点TBI组比对照组和抑制剂组神经元凋亡细胞指数均增高（均P〈0.01）,而抑制剂组与对照组比较,各时间点凋亡细胞指数仍高（均P〈0.01）.（4）CaSR、Caspase-3蛋白的表达均与细胞凋亡指数存在正相关（r =0.300,P 〈0.05;r =0.371,P〈0.01）,CaSR蛋白的表达与Caspase-3蛋白的表达存在正相关（r=0.434,P〈0.01）.结论 大鼠TBI后,CaSR在抑制神经元凋亡中起着重要的作用.     

阿托伐他汀对脑缺血大鼠认知功能的影响

目的通过研究阿托伐他汀对血管性痴呆大鼠海马区突触结构的影响,探讨阿托伐他汀可能的保护机制。方法 830只SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(10只)、治疗组(10只),采用双侧颈总动脉永久结扎法制作大鼠血管性痴呆模型,治疗组给予阿托伐他汀5mg.kg-1.d-1(1ml)灌胃;假手术组及模型组予以等量生理盐水灌胃4w。采用Morris水迷宫法测试大鼠的主动学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马区细胞形态结构,透射电镜观察海马区超微结构的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠的学习记忆成绩明显下降(P0.05);治疗组与模型组大鼠相比较,逃避潜伏期缩短(P0.05),游泳时间百分比增高(P0.05),穿过平台次数增多(P0.05),表明学习和记忆成绩均显著升高。与模型组比较,治疗组突触数量明显增多(P0.05);突触截面积减小且变性程度减轻(P0.01);细胞形态学观察显示,治疗组大鼠海马区神经细胞损伤减轻,神经元、突触,线粒体及细胞器等数量增加。结论阿托伐他汀改善血管性痴呆大鼠学习和记忆能力的作用机制是保护海马CA1区突触功能。     

阿托伐他汀对脑梗死后抑郁症状的影响

目的 探讨阿托伐他汀对脑梗死后抑郁症状有无影响. 方法 回顾性分析云南省第一人民医院神经内科自2009年6月至2010年12月诊治的404例大动脉粥样硬化型脑梗死患者的临床资料,其中阿托伐他汀强化降脂组201例,阿托伐他汀标准降脂组151例,未给降脂组52例;降脂治疗男性组189例,降脂治疗女性组163例.随访观察3个月,评价治疗前后患者汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分并进行统计学分析. 结果 降脂治疗前后患者HAMD评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).强化降脂组、标准降脂组HAMD评分分别与未降脂组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);无抑郁症状、轻中度抑郁症状的脑梗死患者HAMD评分在强化降脂组、标准降脂组与未降脂组间比较差异亦无统计学意义(P.0.05).降脂治疗后3月女性患者HAMD评分明显高于男性患者,差异有统计学意义(P＜0.05),但2组间降脂治疗后胆固醇水平、胆同醇降低幅度、阿托伐他汀剂量等比较差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 阿托伐他汀降脂治疗不会影响脑梗死后抑郁症状.女性脑梗死后抑郁症状与胆固醇水平、胆同醇降低幅度、阿托伐他汀剂量无关.     

阿托伐他汀对脑组织血红素加氧酶的影响

目的研究阿托伐他汀对β淀粉样蛋白1-42诱导阿尔茨海默病大鼠模型大脑顶叶皮层和小脑血红素加氧酶(HO)的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、他汀对照组、模型对照组和他汀治疗组,每组10只。Western blot法检测顶叶皮层和小脑HO-1和HO-2的表达。结果顶叶皮层区他汀治疗组HO-1的表达增加与其他3组相比差异有统计学意义(P0.05),而4组HO-2的表达相比差异无统计学意义(P0.05);小脑区他汀治疗组HO-2的表达增加与其他3组相比差异有统计学意义(P0.05),而4组HO-1的表达相比差异无统计学意义(P0.05)。结论阿托伐他汀可以上调大脑不同部位HO-1和HO-2的表达,减轻神经细胞损伤。     

钙敏感受体抑制剂对创伤性颅脑损伤大鼠神经元凋亡的作用研究

目的探索钙敏感受体抑制剂在创伤性颅脑损伤大鼠模型中对神经元凋亡的影响。方法采用皮层定位精度撞击器进行大鼠的TBI造模;将大鼠随机分为对照组,TBI+溶剂组和TBI+钙敏感受体拮抗剂(NPS2390)组。通过mNSS对大鼠的神经功能进行评分;在TBI后24小时取脑,将全脑进行湿重与干重的称重,计算脑水肿程度;通过Western blot检测蛋白的表达水平。结果 TBI后溶剂组相比对照组,其脑水肿程度显著增加(80.03%vs 79.22%,P=0.018),神经功能评分显著下降(8.3vs 1.0,P=0.014),给予NPS2390后,可以降低TBI后脑水肿程度(79.38%vs 80.03%,P=0.029)及逆转神经功能评分下降(6.1vs 8.3,P=0.040)。TBI会导致神经元凋亡水平增加(55.3%vs 1.1%,P=0.006),cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(2.71vs1.0,P=0.033),而NPS2390可以降低TBI神经元凋亡水平(30.2%vs 55.3%,P=0.031),相比TBI+溶剂组显著降低cleaved caspase-3的表达水平(1.52vs 2.71,P=0.041)。TBI还会降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(0.42vs1.0,P=0.035),增加促凋亡蛋白Bax的表达水平(1.89vs 1.0,P=0.021),增加细胞色素C的释放到胞浆的水平(2.89vs 1.0,P=0.019),给予NPS2390后,与TBI+溶剂组相比,Bcl-2表达增加(0.65vs 0.42,P=0.042),Bax表达水平增加(1.22vs 1.89,P=0.033),释放到胞浆中的细胞色素C降低(1.41vs 2.89,P=0.022)。结论通过NPS2390抑制钙敏感受体可以减轻大鼠TBI后的神经元凋亡,对TBI起到保护作用。     

TGF-β1抑制大鼠创伤性颅脑损伤后海马神经元的凋亡

目的转化生长因子β1（TGF-β1）在星形胶质细胞增生和神经元的存活方面都发挥这重要作用,但是其在创伤性颅脑损伤（TBI）中的作用还未见报道。方法本课题组先前的研究利用大鼠模型发现在大鼠颅脑损伤后,TGF-β1的表达显著上调,表明TGF-β1参与到创伤性颅脑损伤修复的过程中。结果本研究聚焦在TGF-β1对TBI后海马神经元凋亡的影响,神经元的免疫荧光染色和Westernblot结果显示：对TBI后的海马神经元给予适当浓度及时程的TGF-β1处理,海马神经元的的凋亡明显降低。结论这些结果的发现,将有助于更好的理解TGF-β1在大鼠创伤性颅脑损伤中的作用,也有望使得TGF—β1成为临床上救治创伤性颅脑损伤的靶点。     

阿托伐他汀对家兔动脉粥样硬化血管细胞粘附分子-1基因表达的影响

目的 探讨家兔动脉粥样硬化病变中血管细胞粘附分子-l（VCAM-1）的表达和阿托伐他汀的抗动脉粥样硬化作用。方法 24只大耳白兔随机分为常规饲料组、胆固醇饲料组和阿托伐他汀组，饲养l6周。实验前后检测（血清胆固醇TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL），采用免疫组化和逆转录多聚酶链式反应（PCR）方法测定主动脉壁VCAM-1阳性表达百分比和mRNA的表达。结果 阿托伐他汀显著降低TC和LDL水平（P〈0．01）。胆固醇饲料组和阿托伐他汀组病变局部VCAM-1的阳性染色百分比和mRNA的表达量明显高于对照组（P〈0．01）,但阿托伐他汀组动脉粥样硬化病理改变较胆固醇饲料组明显减轻。VCAM-1阳性染色百分比及mRNA的表达量较胆固醇饲料组明显降低（P〈0．01）。结论 动脉粥样硬化的发生伴有血管细胞粘附分子的高度表达。阿托伐他汀不但有调脂作用，而且具有抑制粘附分子和抗动脉粥样硬化的作用。     

阿托伐他汀对进展性脑梗死神经功能的影响

目的探讨阿托伐他汀对进展性脑梗死神经功能的影响。方法 2009-02-2011-02收治的164例符合入选标准进展性脑梗死患者,对照组80例采取常规治疗,治疗组84例在常规治疗基础上加用阿托伐他汀。结果 2组患者入院时神经功能缺损评分比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;进展停止时、发病1周时神经功能缺损评分,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论进展性脑梗死应用阿托伐他汀能够有效改善患者神经功能,减少致残率。     

不同剂量阿托伐他汀对短暂性脑缺血发作转归的影响

目的：观察阿托伐他汀对短暂性脑缺血发作（T IA ）患者转归的影响。方法130例T IA患者随机分为高剂量（40 mg/d）阿托伐他汀治疗组（H组）和低剂量（10 mg/d）阿托伐他汀治疗组（L组）各65例,2组患者均给予相同的基础治疗。观察2组患者住院及随诊1 a期间T IA复发及形成梗死、新发冠脉事件、脑出血及死亡情况,并比较2组1 a点LDL水平。结果住院期间和随访期间,H组TIA复发率、梗死及新发冠脉事件发生率及LDL水平明显低于L组。结论高剂量（40 mg/d）阿托伐他汀能显著改善短暂性脑缺血患者的发作,值得临床推广。     

大鼠不同程度颅脑损伤模型的建立及评估

目的 探讨大鼠不同程度颅脑损伤（TBI）模型的制作方法。方法 将40只SD大鼠随机分为4组:对照组、轻型TBI组、中型TBI组及重型TBI组,每组10只。采用Feeney法自由落体颅脑损伤装置并进行适当改进,以不同致伤冲击力（200、600和1 000 g/cm）建立轻、中、重型TBI模型,对照组仅去骨瓣,不致脑损伤。伤后24 h观察各组大鼠行为学及病理组织学改变。结果 与对照组相比,行为学结果显示,随着致伤冲击力增加,平衡木试验得分越高（P<0.05）、神经损害程度评分越高（P<0.05）、水迷宫试验中逃避潜伏期越长（P<0.05）且经过平台次数越少（P<0.05）。组织病理学发现损伤程度及范围随致伤冲击力的增大而增加。结论 本研究参照Feeney法自由落体TBI装置并适当给予改进,成功建立不同程度大鼠TBI模型,其制作方法简单、可控性好、可重复性好,可用于TBI的动物实验研究。     

西维来司钠对小鼠颅脑创伤后神经保护作用的研究

目的 探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)特异性抑制剂两维来司钠(ONO-5046)在小鼠创伤性颅脑损伤(TBI)后的抗凋亡作用.方法 64只C57BL/6小鼠随机分为对照组、TBI组、TBI+ONO-5046低剂量组(30 mg/kg)以及TBI+ ONO-5046高剂量组(50 mg/kg),所有小鼠均于致伤后24h处死,分别应用实时聚合酶链式反应(PCR)、Westem blot检测挫伤灶周围皮层caspase3、bcl-2、bcl-xl的表达水平.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法( TUNEL)检测皮层神经元凋亡.结果 TBI后损伤灶周围皮层caspase3的mRNA及蛋白表达水平明显升高;bcl-2、bc1-xl的mRNA表达水平有轻度升高;TUNEL阳性细胞显著增多.施加ONO-5046治疗后,caspase3 mRNA及蛋白表达水平明显降低;bcl-2、bcl-xl的mRNA及蛋白表达水平显著升高;TUNEL阳性细胞显著减少,其中50 mg/kg剂量组阳性细胞数减少更为明显(P＜0.05).结论 ONO-5046能够明显抑制TBI后脑组织中caspase3的表达,并且促进bcl-2、bcl-xl的表达,有效抑制神经细胞的凋亡,减轻TBI后的继发性脑损害.     

亚低温通过抑制AIF核转位改善大鼠颅脑损伤

目的 探讨亚低温对颅脑损伤（TBI）大鼠脑组织凋亡诱导因子（AIF）核转位的影响。方法 将36只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、亚低温组,每组12只。采用控制性皮质撞击建立TBI模型,亚低温组大鼠给予亚低温处理。TBI后24 h,HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;免疫组织化学方法检测大鼠脑组AIF的表达部位;免疫印迹法检测损伤脑组织线粒体和细胞核AIF、caspase-3的表达情况。结果 HE染色结果显示,TBI后,损伤侧脑组织可见沿灰白质界面的挫伤和出血,亚低温组挫伤和出血灶明显减轻。免疫印迹法检测结果显示,TBI后,损伤脑组织caspase-3表达量明显增加（P<0.01）,细胞核AIF表达量明显增加（P<0.01）,而线粒体AIF表达量明显降低（P<0.05）;亚低温组损伤脑组织caspase-3表达量明显下降（P<0.01）,细胞核AIF表达量明显下降（P<0.01）,而线粒体AIF表达量明显升高（P<0.05）。免疫组织化学染色结果显示,假手术组AIF位于大脑皮质和海马神经元细胞核外;TBI组后,损伤侧皮质及海马区AIF从线粒体转移至细胞核内的阳性细胞数量明显增多（P<0.01）;亚低温组损伤侧皮质及海马区AIF发生核内转移的阳性细胞数量减少（P<0.01）。结论 亚低温可能通过抑制AIF的核转位减轻颅脑损伤后神经细胞凋亡,从而起到神经保护作用。     

[Gly14]-Humanin减轻大鼠颅脑外伤后氧化应激及细胞凋亡

目的探讨[Gly14]-Humanin(HNG)对大鼠颅脑外伤后脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和细胞凋亡的影响。方法 135只SD大鼠分为空白组(n=45)、对照组(n=45)及HNG组(n=45),其中对照组及HNG组建立颅脑外伤模型后前者予右侧股静脉注射生理盐水2 m L/kg,后者则予HNG 2μL/kg,此后各组每24 h予1次等量生理盐水/HNG,直至大鼠被处死;而空白组不予任何处理。根据处死时间随机分为1 h、3 d和7 d共3个亚组,每亚组各15只。比较损伤灶周围脑组织MDA、SOD、GSH含量水平及细胞凋亡情况。结果 HNG组大鼠脑组织中MDA含量水平及凋亡细胞计数在损伤后1 h即升高,3 d达到最高值,后开始降低,但7 d时仍高于损伤后1 h水平,均显著低于同一时间点的对照组及空白组(P均0.05);相反,SOD活性在损伤后迅速降低,3 d达到最低值,随后逐渐上升,但7 d时仍低于损伤后1 h水平,均显著高于同一时间点的对照组及空白组(P均0.05);GSH变化规律与SOD基本一致,与各时间点的对照组比较亦有显著性(P均0.05);HNG大鼠脑组织损伤后MDA含量水平与细胞凋亡数呈正相关(r=0.720,P0.05),而SOD及GSH的含量与细胞凋亡数呈负相关(r=-0.702,P0.05;r=-0.674,P0.05)。结论颅脑外伤后HNG抑制氧化应激反应,进一步减少细胞凋亡,从而发挥神经保护作用。     

颅脑损伤后不同剂量糖皮质激素应用对大鼠继发性脑损伤和死亡率的影响

目的 探讨颅脑损伤后早期应用不同剂量糖皮质激素对大鼠继发性脑损伤和死亡率的影响. 方法 将成年雄性Wistar大鼠220只按随机数字表法分为正常组、地塞米松正常给药组、甲基强的松龙正常给药组、创伤对照组、小剂量地塞米松组、中剂量地塞米松组、大剂量地塞米松组、小剂量甲基强的松龙组、中剂量甲基强的松龙组和大剂量甲基强的松龙组(后7组统称损伤组),每组各22只.损伤组通过液压打击方法制备成颅脑损伤模型且分别给予生理盐水或不同剂量不同类型糖皮质激素处理,并于伤后24 h进行改良神经功能缺损评分.采用TUNEL法于伤后24h、48h、7d和14d时检测各组大鼠损伤侧海马组织的细胞凋亡情况.观察伤后14d内各组大鼠的死亡率,并通过尸检和常规HE染色观察死亡大鼠脑组织、垂体、心脏和肺脏的变化. 结果 损伤组间伤后24h神经功能缺损评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).损伤组大鼠海马组织中凋亡细胞于伤后24h开始出现,48 h达到高峰,7～14d内降至正常,其中大剂量地塞米松组和大剂量甲基强的松龙组凋亡细胞数在伤后48 h时均明显高于创伤对照组,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.002).大剂量地塞米松组和大剂量甲基强的松龙组的大鼠死亡率也均明显高于创伤对照组,差异均有统计学意义(P=0.012,P=0.038).尸检发现大剂量地塞米松组和大剂量甲基强的松龙组的死亡大鼠均有不同程度的间质性肺炎及垂体淤血. 结论 颅脑损伤可以导致海马神经细胞凋亡,而伤后早期应用大剂量糖皮质激素可进一步加重其凋亡,同时增加死亡率,其原因可能为间质性肺炎和垂体淤血的发生.     

大鼠脑创伤后损伤区miRNA-21的差异表达及干预研究

目的 探讨大鼠脑创伤后损伤区miRNA-21表达的动态变化,以及外源性miRNA-21对大鼠脑创伤后细胞凋亡及神经功能的影响. 方法 84只大鼠采用随机数字表法分为假手术对照组、创伤组、空白干预组及miRNA-21干预组,每组21只.假手术对照组行头皮切开和磨除骨窗,不进行打击;另外3组按液压打击法制造创伤模型,空白干预组与miRNA-21干预组再分别注射空白阳离子脂质体及含有miRNA-21的阳离子脂质体.创伤后或干预后2h、12h、24 h、48 h、72 h、7d及14d进行神经功能学评分,而后取脑组织行实时定量PCR检测创伤区miRNA-21表达量,采用石蜡包埋切片原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞. 结果 miRNA-21干预组大鼠脑创伤后2 h miRNA-21表达开始升高,48 h达高峰后逐渐下降,伤后7d时仍高于假手术对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).伤后24h、48 h、72h时高于创伤组与空白干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).评分结果显示,miRNA-21干预组自干预后24 h开始,评分明显低于创伤组及空白干预组,差异有统计学意义(P＜0.05).TUNEL染色结果显示,miRNA-21干预组各时间点凋亡细胞数均较创伤组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 miRNA-21可能参与颅脑创伤后的修复过程,抑制创伤区的细胞凋亡.     

香芹酚通过抑制脑水肿与氧化应激反应保护大鼠 颅脑损伤

目的 探讨香芹酚对大鼠颅脑损伤（TBI）的保护作用及其机制。方法 SD大鼠50只,随机分为5组:假手术组、模型组、低剂量香芹酚（10 mg/kg）组、中剂量香芹酚（20 mg/kg）组、高剂量香芹酚（40 mg/kg）组,每组10只。Feeney氏自由落体法制备TBI模型,造模后1、3、7 d采用改良神经功能损害程度评分（mNSS）评估神经功能,干湿法测定脑组织含水量;ELISA法检测氧化应激因子丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）以及化学定量法检测一氧化氮（NO）含量及一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 香芹酚能显著改善大鼠TBI后神经功能,显著减轻TBI后脑水肿,显著降低损伤脑组织MDA、NO和NOS含量,显著增加损伤脑组织SOD、CAT和GSH含量。结论 香芹酚可通过减轻大鼠TBI后脑水肿、抑制氧化应激从而发挥神经保护作用。     

红花黄色素治疗颅脑损伤作用机制的生物信息学分析

目的 应用生物信息学方法分析红花黄色素（YS）治疗颅脑损伤（TBI）的作用机制。方法 通过GEO数据库查询检索基因表达微阵列芯片数据集GSE21854,筛选差异表达基因（DEGs）, 并与YS靶点基因互相印射取交集。采用DAVID/String数据库对共同靶基因进行GO分析和KEGG通路分析,构建PPI网络。结果 筛选出140个DEGs,与YS靶点基因互相印射后得到26个共同靶基因;进一步GO分析前5个基因功能富集为信号转导、DNA 转录调节、血小板活化、信号与聚集、免疫系统及转录调控区 DNA 结合,KEGG通路途径分析筛选出前5条信号通路包括MAPK信号通路、趋化因子信号通路、PI3K/AKT信号通路、EGFR1信号通路和肿瘤信号通路。PPI分析筛选发现节点最高的中心蛋白编码基因是MAPK3。结论 应用生物信息学方法,可有效获取YS治疗TBI靶向基因的生物学功能、相关信号通路及核心关键蛋白,为后续研究和临床治疗提供了依据。     

Relative effects of mannitol and hypertonic saline on calpain activity, apoptosis and polymorphonuclear infiltration in traumatic focal brain injury

The purpose of this study was to compare the relative effects of mannitol and hypertonic saline (HTS) on calpain activity, apoptosis and neuroinflammatory response induced by experimental cortical contusion. Four groups of 5 Sprague-Dawley male rats were submitted to focal brain injury produced by exposing the parietal cortex to dynamic cortical deformation. Groups were defined by rescucitation fluids administered 30 min post-injury as follows: group 1-0.9% normal saline 2 ml/kg; group 2-mannitol 20% 0.5 g/kg; group 3-HTS 2 ml/kg; group 4-HTS 4 ml/kg. At 72 h, animals were sacrificed. Paraffin-mounted sections of were stained for mu-Calpain, TUNEL, active caspase 3 and myeloperoxidase. There was no difference in the lesion size between the different groups. In contrast, there was a significant reduction in calpain and apoptosis activity and in the neuroinflammatory response in animals receiving HTS. Although mannitol proved to significantly decrease the neuroinflammatory response and calpain activity, it did not affect apoptosis, and its effect was significantly less than that of HTS. Importantly, the effect of HTS was mostly independent from the infused volume. Our results show that HTS promotes cell survival and reduces secondary brain damage following TBI. This protective effect was evidenced at rather small infused volumes, proved to encompass several cellular and molecular mechanisms involved in secondary cell death and could not be related to relief of intracranial pressure. These findings suggest that the high osmolality of HTS may have protective effects besides its impact on brain edema.     

颅脑损伤病人血浆D-二聚体变化的临床意义

目的 探讨颅脑损伤病人血浆D-二聚体变化及其临床意义。方法 回顾性分析2018月5年到2019年5月收治的100例单纯急性颅脑损伤的临床资料。采用免疫比浊法动态检测伤后1、3、5、7、9 d血浆D-二聚体水平。伤后3个月,采用GOS评分评估预后,4~5分为预后良好,1~3分为预后不良。另选取同期健康体检者50例作为对照组。结果 100例中,预后不良28例,预后良好72例。重型颅脑损伤28例中,伤后3个月死亡8例,存活20例。颅脑损伤病人伤后血浆D-二聚体含量先增高,后降低,伤后3 d达高峰。伤后1~9 d,颅脑损伤病人血浆D-二聚体含量明显高于对照组（P<0.05）,而且,随颅脑损伤程度加重,血浆D-二聚体含量明显增高（P<0.05）。伤后1~7 d,预后不良组血浆D-二聚体含量明显高于预后良好组（P>0.05）,伤后9 d,两组无统计学差异（P>0.05）。28例重型颅脑损伤中,死亡病人伤后1~3 d血浆D-二聚体含量明显高于存活病人（P<0.05）;伤后5~9 d,死亡病人和存活病人血浆D-二聚体含量无统计学差异（P>0.05）。结论 动态监测血浆D-二聚体有助于早期、快速判断颅脑损伤病人伤情及预后