婴幼儿龋病与变形链球菌定居的关系

龋病是细菌感染性的可传播的疾病[1],人类龋病的主要致病菌为变形链球菌群细菌(mutans streptococci,简称MS),其在牙面上粘附和定居是MS致龋的初始步骤.MS具有广泛的适应能力,可以持续生存在口腔中.根据遗传型鉴定,MS在儿童5岁后就已经稳定地定居于宿主,成为口腔菌群的一部分.近年来一些学者对儿童龋病与定居MS关系进行了研究,据报导,婴幼儿期,MS在口腔中的定居及其水平对乳牙列龋病的发生[2,3],而且与恒牙列龋病流行密切相关[4].Kohler等[5]]报告,儿童口腔中MS发生定居时间越早,其患龋危险性越高.Twetman等[6]认为,龋病的严重程度与定居的MS水平有联系,口腔中MS的水平越高,龋牙数量越多;儿童口腔内MS的早期定居者有家庭成员依赖性,主要是母婴传播.儿童MS定居的时间及发生龋病在一定程度上与母亲唾液MS水平有关,具有高水平MS的母亲,其孩子的MS定居时间较早[7].现对婴幼儿龋病与变形链球菌定居的关系作一综述.     

变形链球菌中釉原蛋白序列在龋病预防中的矿化机理初探

目的 探讨变形链球菌中的釉原蛋白序列在龋病脱矿、矿化过程中作用及分子机理。方法 体外重组、纯化变形链球菌和正常人釉基质中的釉原蛋白功能片段,比较其结构和功能的异同,从蛋白质量、自组装形态、体外成核能力和结晶形态等方面逐一分析区别。结果 二者单体形态和大小类似（3～5 nm）,都能初级组装为纳米小球,在变形链球菌中纳米球相互重叠形成网状的纳米链,而人类样本中纳米球端端相接组合成规律的纳米链。结论 分子水平的结构差异令二者引导形成羟基磷灰石晶体质地和形态大相径庭:在变形链球菌组中杂乱无章、表面粗糙;人釉原蛋白组中规则平行排列、表面致密。此发现对龋病的病因学探讨和预防及釉质再生提出了新的切入点和思路。     

变形链球菌表面蛋白可变区(V+)基因克隆与表达

目的 分离变形链球菌表面蛋白可变区（V＋）基因，构建V＋表达克隆。方法 用PCR从sr基因中扩增目的基因片段V（＋），亚克隆入中间载体pCR2．1和表达载体pET21( )。对重组体进行诱导表达并表达产物进行SDS－PAGE和Western blotting分析。结果 PCR扩增产物为1．16kb的DNA带，带克隆入载体，获得重组克隆pCVf和重组表达克隆pSRVf，表达产物为43kDa抗原，可以被抗Ⅰ/Ⅱ抗体特异性地识别。结论 本试验成功地构建了携带V＋基因片段原表达克隆pSRVf。     

肺炎链球菌分离株的耐药性与毒力基因研究

目的探讨新生儿肺炎链球菌分离株耐药性、毒力基因的携带状况与菌株间的亲缘性。方法选择2012年1月-2016年12月期间于医院分娩的未曾出院的新生儿肺炎患儿分离出的39株肺炎链球菌,采用pbp2B种特异聚合酶链反应(PCR)检测判定肺炎链球菌,采用纸片扩散法(K-B法)测定药物敏感性,采用PCR及序列分析的方法分析5种耐药基因(pbp2B突变型、ermB、mefA、tetM、intTn)与10种毒力基因(pspA、pspC、rrgA、nanA、pavA、iga、hysA、lytA、lytB、ply),并对检测结果作样本聚类分析。结果 39株肺炎链球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素、四环素的耐药率均>89.0%,对头孢噻肟、万古霉素、替考拉宁均敏感;39株菌5种耐药基因均有检出,且检出率非常高,大环内酯类药物耐药基因总检出率达100.0%,并检出7种毒力基因;样本聚类分析提示39株菌存在9个小克隆,但具有多样性,9个小克隆分别为1-34-39号株、6-35号株、3-10-19号株、13-16-14号株、15-17-18号株、23-30号株、36-37号株、24-25-26号株、4-28号株。结论本组菌株中检出pbp2B突变型、ermB、mefA、tetM、intTn等5种耐药基因是导致本组菌对青霉素、大环内酯类药物和四环素耐药率高的重要原因,耐药表型与基因型基本对应;分离株携带的6种毒力基因有黏附、侵袭、自溶、细胞毒、生物膜形成等毒力作用。     

霍乱弧菌毒力因子的检测

霍乱是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病。霍乱致病主要依靠毒素和定居因子作用在小肠粘膜上皮细胞引起大量肠液分泌导致腹泻。霍乱的主要致病因子是由霍乱弧菌产生的霍乱毒素（ＣＴ），此外还有许多别的毒力因子，如近来新发现的毒力因子Ｚｏｔ（Ｚｏｎｕｌａｏｃｃｌｕ－...     

沙眼衣原体的毒力因子研究进展

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种常见的专性细胞内寄生微生物,他能够引起女性宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎、子宫内膜炎等多种疾病,是最为常见的性传播病原体之一,迄今也没有特异性Ct疫苗可以预防其传播。目前关于Ct的致病机制还没有完全研究明白,但由于分子生物学,生物信息学,生物物理学的迅速发展,现在已经克隆并验证了包括热休克蛋白、主要外膜蛋白、衣原体分泌蛋白、质粒蛋白和一些新发现的可能的毒力蛋白。本研究对其毒力因子的进展进行研究,为预防和控制Ct所致的疾病提供参考。     

毒力基因pspA在肺炎链球菌入侵血液系统中的作用研究

目的研究不同来源肺炎链球菌(SPN)刺激THP-1细胞和A549细胞前、后毒力基因pspA表达的变化,探讨其在SPN入侵血液中的作用。方法从住院患者分离、搜集23株SPN,与SPN标准株ATCC49619一起进行培养,并提取RNA;THP-1和A549细胞经培养后调至一定浓度,再分别用上述24株SPN在37℃5%CO2环境下分别刺激4h和8h;然后,搜集细胞悬液进行离心,沉淀物用于RNA的提取;用荧光实时定量逆转录PCR法对刺激前、后毒力基因pspA的mRNA与16srRNA进行同时测定,用SPSS17.0软件进行数据分析。结果临床SPN刺激THP-1和A549细胞后毒力基因pspA的△Ct值均低于刺激前;临床SP株毒力基因pspA的△Ct值与ATCC49619间,血源性和痰源性SPN相比,刺激细胞后psaA的△Ct值间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论临床SPN刺激THP-1和A549细胞后毒力基因pspA的表达均有上调,临床SPN株毒力基因pspA的表达与ATCC49619不同;毒力基因pspA表达的异化可能是血源性SPN入侵血液的原因之一。     

分泌型IgA、变形链球菌与儿童龋病的关系

变形链球菌(Streptococcus utans，S．mutans)是口腔环境的常驻菌，现已被国内外学者公认是主要的致龋菌。分泌型IgA(secretory mmunoglobulin A SIgA)是口腔局部免疫中主要的免疫球蛋白，它可通过对口腔微生物的凝集作用和口腔清除作用或影响细菌代谢的特殊酶类来抑制细菌聚集，此时SIgA与微生物结合并产生凝集反应，凝集的微生物可被吞噬或聚集成丛由唾液清除。本研究是对不同牙列儿童唾液SIgA水平的检测，主要是探讨唾液中变形链球菌、SIgA与儿童龋病的关系。     

军团菌毒力因子研究及在分子流行病学的应用

军团菌毒力因子研究及在分子流行病学的应用卢锡华，万超群军团病是一种潜在的传染性疾病，人类因吸入含有军团菌的气溶胶而感染，一般以爆发和散发为主。老年人和免疫抑制者最为易感且病死率高，军团菌感染还与吸烟、饮酒、旅游及住院等因素有关。迄今尚未发现军团菌在人...     

肺炎链球菌感染研究进展

肺炎链球菌（S.pn）作为细菌性肺炎、中耳炎、脑膜炎和败血症的主要病原体,其感染一直以来是全球不可忽视的健康问题。近年来,肺炎链球菌毒力和耐药性的不断增强,对公共健康的威胁越来越大。PCR和基因测序等基因组领域新的实验室诊断方法逐渐受到重视,本文旨在通过对肺炎链球菌的病原学、黏附和侵袭方式、毒力因子以及现有实验室诊断方法和防治手段进行分析,从而为深入理解肺炎链球菌以及寻找有效的防治措施提供参考。     

鉴定致病菌毒力因子方法的进展

综述鉴定致病菌毒力因子的分子生物学和遗传分析方法，如签名标记法、简并引物PCR、体内表达技术、差减杂交法、随机引物PCR、差异显示 技术、酵母双杂交系统和噬菌体显示系统等。     

感染罗非鱼的无乳链球菌对人致病性的研究进展

无乳链球菌是引起链球菌病的重要致病菌,具有广泛的宿主感染性,既能感染人类引起新生儿脑膜炎,感染奶牛引起乳腺炎,又能引起鱼类链球菌病。近年来罗非鱼感染无乳链球菌的情况越来越严重,给全世界的罗非鱼养殖业造成极大的损失,我国南方地区近年来也出现了严重的罗非鱼链球菌病的暴发流行。本文对无乳链球菌的病原特征、毒力因子、对罗非鱼的感染情况,以及对人及哺乳类动物的致病性等方面进行综述,旨在探讨人源性无乳链球菌与罗非鱼源性无乳链球菌之间的联系,以及感染罗非鱼的无乳链球菌对人类的致病作用,同时为我国罗非鱼链球菌病的防控提供科学依据。     

脱氧核糖核酸酶deoC对变形链球菌生物膜形成的影响

目的研究分析deo C蛋白对变形链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)生物膜形成的影响。方法建立变形链球菌成熟生物膜模型,将变形链球菌UA159分别接种于两种不同的BHI培养液中厌氧培养,实验组加入含有deo C蛋白的BHI+1%蔗糖培养基,对照组加入等体积的BHI+1%蔗糖培养基。运用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察各组生物膜中活菌数及其厚度。结果实验组生物膜菌量明显减少,呈条状散在分布;对照组可见生物膜细菌致密,且大部分为活菌。实验组的变形链球菌生物膜厚度及内层、中间层与外层的活菌百分比均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 deo C蛋白可能通过分解变形链球菌生物膜形成的胞外基质e DNA而抑制变形链球菌的生物膜形成;通过过表达deo C蛋白,减少变形链球菌在口腔软硬组织或修复体表面的附着,降低其对抗菌药物的耐受性可能成为龋病治疗的新方法。     

武汉市306名儿童牙菌斑中变形链球菌分离及其血清型研究

检测306名5～6岁学龄前儿童的牙菌斑,从226名中分离到变链菌,阳性率为73.86％,其中患龋组208名,变链菌阳性率为91.83％;无龋组98名,变链菌阳性率为35.71％。将儿童牙菌斑中分离出的366株变链菌用双向琼脂扩散法进行血清学鉴定,其中c、e、f血清型菌株数分别为217、49、32;未定型的有68株。分析变链菌c、e、f血清型与龋病的关系,其比值比(OR)分别为5.6、2.19、2.1。提示变链菌c、e、f型均与儿童患龋病有联系,但以c型联系强度最大。     

青藏铁路沿线鼠疫菌毒力因子检测

目的 检测青藏铁路沿线鼠疫菌是否具有公认的毒力因子.方法 采用反向间接血凝试验检测FraⅠ;利用假结核菌对PstⅠ敏感可产生抑菌环的复盖种子层法检测PstⅠ;采用乏Ca²⁺时37℃鼠疫菌不能生长观察Vwa,利用色素培养基观察Pgm.结果 所检测青藏铁路沿线菌株都具有PstⅠ⁺、Vwa⁺、FraⅠ⁺、Pgnn⁺4种毒力因子.结论 根据其地理位置和宿主判断所检测菌株属于强毒力菌株.     

用多元PCR同时检测3个腹泻毒力因子

腹泻是常见病，其病因有多种，其中产毒性大肠杆菌（EnterotoxigenicEscherichiacoil，ETEC）和副溶血弧菌（VibrioParahaemolyt－icus，VP）是发展中国家和热带及沿海地区常见的腹泻病原菌［1.2］。ETEC通过产生两种质粒编码的肠毒素，即热稳肠毒素（heat—stablaen－terotoxin，ST）和热敏肠毒素（heat—labileen－terotoXin，LT）而引起腹泻。ETEC可只带一个st或lt基因，也可同时携带st和lt基因。用形态学和生化学方法不能区别ETEC和普通大肠杆菌，检测LT可用血清学方法，而ST无抗原性，不能用免疫学方法检测，传统采用的是…