鼠疫F1抗原(抗体)ELISA检测试剂盒的应用研究

目的对鼠疫F1抗原(抗体)ELISA检测试剂盒进行现场应用评价。方法结合鼠疫常规监测工作,对现场采集的标本同时进行常规鼠疫检验和ELISA检测,然后进行统计分析。结果鼠疫菌分离培养和ELISA检测人和动物脏器标本1798份,ELISA与鼠疫菌分离培养比较检出率较高(7.01%),符合率可达98.23%,鼠疫抗原ELISA检测试剂盒敏感性好、时间短。ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝试验检测人和动物血清1份,结果无明显差异,但符合率低,ELISA加胶体金标记层析检测鼠疫F1抗体阳性可提高符合率(91.56%)。结论鼠疫F1抗原(抗体)ELISA检测试剂盒可以用于鼠疫的早期快速诊断。     

用被动血凝和酶联免疫吸附试验做鼠疫血清学诊断的结果比较

为探索一种检测人、食肉动物和啮齿动物体内鼠疫抗体的方法,我们对酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了研究。结果表明,ELISA 可以代替标准的被动血凝试验(PHA),用于诊断人类鼠疫、鼠疫控制和监测活动。与 PHA 不同,ELISA 可用于测定病人血清和其他样品中的特异免疫球蛋白(IgG、IgM 等)。本文报告用 ELISA做鼠疫血清学诊断在某些方面比 PHA 先进,同时也对上述两种检验技术的优点和局限性进行了比较。     

不同鼠疫检测技术在河北省鼠疫监测中的应用研究

目的通过用鼠疫血凝试验、胶体金标记免疫层析(金标)和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清,用金标、ELISA、PCR与鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器,评价其在鼠疫监测中的应用效果。方法用鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清;用金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器。结果鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法对啮齿动物血清的阳性检出率分别为0.32%、0.32%和1.26%。金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离对啮齿动物脏器的阳性检出率分别为3.15%、0.70%、4.90%、0.70%和0.70%。结论金标、ELISA、PCR值得推广应用,非常适合基层和快速诊断应用。     

鼠疫耶尔森菌检测技术研究进展

鼠疫(plague)是由鼠疫耶尔森菌(yersinia pestis)引起的自然疫源性疾病,其传染性强,传播速度快,病死率高,被列为甲类传染病之首[1].鼠疫在历史上曾有过3次大流行,罹难者数以亿计.为了防止鼠疫的大面积的流行,维护社会的生命和财产安全,对鼠疫的快速诊断提出了更高的要求.如今,新技术新手段的应用,为有效的控制鼠疫的传播和流行提供了保障.本文对鼠疫检测技术和方法进展进行综述.     

一例腺鼠疫患者血清F1抗体谱的检测分析

鼠疫具有发病急、传染快、病死率高等特点,呈世界性分布。对鼠疫感染患者的抗体时间谱进行分析,一方面可以为基于血清型的快速检测提供检测介入点的时间参考,另一方面为疫苗免疫效果的评价提供参照。1974年,WHO将基于鼠疫F1抗原的间接血凝试验(IHA)作为鼠疫诊断的常规方法,随着血清学技术的不断更新,尤其是标记技术的发展,如胶体金、ELISA等方法已逐步用于鼠疫辅助诊断。上转发光免疫层析技术(UPTLF)是近年来在传统免疫层析技术上衍生的一种新型     

单克隆抗体用于鼠疫的特异诊断

以单克隆抗体(McAb)作为试剂,应用于鼠疫的诊断、监测,现已着手研究。与鼠疫菌(Yersinia Pestis)封套抗原特异部分1 (F1)起反应的McAb,已经应用于放射免疫测定(RIA),酶联免疫吸附试验(ELISA)和被动血疑试验。     

悬浮芯片定量检测鼠疫菌的方法研究

目的利用编码微球悬浮芯片技术,探讨直接从"白色粉末"样品中检测鼠疫菌的可行性,为建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种生物恐怖因子的技术平台奠定基础。方法用抗体包被编码微球作为反应载体,双抗体夹心法为反应模式,建立鼠疫菌F1抗原悬浮芯片检测方法,对"白色粉末"中的鼠疫耶尔森菌进行检测。通过盲样和标准实验室检测评估对现场样品的适用性。结果建立的定量检测鼠疫菌F1抗原的悬浮芯片方法具有较高的特异性和敏感性,并在0.154～4514ng/ml浓度范围内具有良好的动力学响应特性,比ELISA方法有较高的灵敏度和较宽动态检测范围。结论定量检测鼠疫菌的悬浮芯片方法能快速、敏感、特异地定量检测"白色粉末"中鼠疫菌,在早期识别、快速诊断和应对生物恐怖威胁、传染病暴发中具有广阔的应用前景。     

鼠疫检验技术的概况和PCR在鼠疫检验中的应用

鼠疫是一种自然疫源性烈性传染病 ,其特点是发病急、传播快、病死率高 ,主要通过跳蚤叮咬从染疫宿主动物传播到人 ,还可通过空气飞沫在人与人之间传播。目前鼠疫菌的检验方法主要是按《中华人民共和国传染病法》的四步检验法 ,此法只能从染疫的动物或鼠疫患者分离出鼠疫菌为准 ,且需要的时间较长 .而对于感染早期和恢复期病人以及与鼠疫患者密切接触者则难以做出诊断 ,因此很有必要研究一种快速、准确的检验方法。随着分子生物学的发展 ,PCR的技术逐渐在鼠疫诊断、监测中得到推广和应用。1　我国鼠疫自然疫源地及长期存在的机理　　纪树立…     

不同方法检测宿主动物体内鼠疫菌F1抗原的应用

目的了解不同方法在鼠疫监测现场中的应用效果,掌握检测方法的可行性、可操作性及对鼠疫监测的影响因素,评价方法间的一致性,制订适于现场应用的有效监测机制。方法对广西隆林、西林县鼠疫监测点收集的鼠脏器同时进行分离培养、反向间接血凝试验(RIHA)、胶体金免疫层析试验(RGICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(F1-Pla-PCR)。结果分离培养、RIHA、RGICA、ELISA、PCR检测鼠脏器中鼠疫菌F1抗原均为阴性,5种方法间一致性比较Kappa值等于0,呈轻度一致。结论新技术胶体金免疫层析试验、酶联免疫吸附试验、聚合酶链反应具有操作简便易学、特异、快速、敏感等特点,适宜在鼠疫监测现场中应用。     

鼠疫盘桓于人类头顶的“幽灵”

鼠疫是危害人类健康最严重的烈性传染病之一,在当代仍然能构成对人类的威胁。因此在《中华人民共和国传染病防治法》中,把鼠疫列入甲类传染病,并定为01号病。WHO(世界卫生组织)曾发出"虽然人类鼠疫在世界大多数国家已不再是一个问题。但是,由于鼠疫自然疫源地在世界各地区继     

ELISA在广西鼠疫监测中的应用评价

目的 了解酶联免疫吸附试验(ELISA)在鼠疫监测中的优势及特性,对其在鼠疫监测现场应用做出评价.方法 对2006年鼠疫监测收集的鼠脏器及血清(鼠、犬、人)分别检测鼠疫菌F1抗原及F1抗体.结果 分离培养、RIHA、胶体金、ELISA、PER法检测鼠脏器中F1抗原的检出率均为阴性;血清利用IHA、胶体金、酶标法检测鼠疫...     

编码微球悬浮芯片与改良ELISA鼠疫杆菌检测方法的比较研究

[目的]寻求快速、准确、简便的鼠疫杆菌检测方法。[方法]分别建立鼠疫杆菌编码微球悬浮芯片检测方法和改良ELISA方法,并进行比较。[结果]悬浮芯片对F1抗原最低可以检测到840 pg/ml,检测鼠疫杆菌到1×10~3cfu/ml；用改良ELISA法检测,对F1最低可以检测到53ng/ml,检测鼠疫杆菌到1×10~4cfu/ml。[结论]悬浮芯片检测比ELISA具有更高检测灵敏度,并且具有高效、快速、敏感、特异、低成本等优点。     

鼠疫盘桓于人类头顶的"幽灵"

鼠疫是危害人类健康最严重的烈性传染病之一,在当代仍然能构成对人类的威胁.因此在<中华人民共和国传染病防治法>中,把鼠疫列入甲类传染病,并定为01号病.WHO(世界卫生组织)曾发出"虽然人类鼠疫在世界大多数国家已不再是一个问题.但是,由于鼠疫自然疫源地在世界各地区继续存在.因此,有必要提醒各有关国家的卫生主管当局,人类受鼠疫威胁的可能性依然存在.要对此给予经常不断的注意和警惕"的警告.进入90年代,WHO重新制定了针对新出现的传染病的预防策略.1987年4月7日,世界卫生日的宣传主题就是"全球警惕,采取行动防范重新出现的传染病."     

基于TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光PCR法检测玉树藏族自治州鼠疫耶尔森菌rpsL基因耐药突变

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(以下简称鼠疫菌)引起的一种烈性传染病, 发病急、传播快且病死率极高。历史上发生过3次鼠疫大流行, 导致上亿人口死亡。近20年来全球鼠疫疫情呈上升趋势, 2000 - 2018年, 世界卫生组织(WHO)共收到来自美洲、非洲和亚洲21个国家报告的2万多起鼠疫病例[1]。我国动物间鼠疫一直较为活跃, 且除个别年份外, 几乎每年都有人间鼠疫发生。2019年11月, 北京市首先出现2例内蒙古自治区输入性肺鼠疫病例, 随后内蒙古自治区又报道2例腺鼠疫病例, 提示这一甲类传染病仍对人们的生命安全具有极大的潜在威胁[2,3,4]。链霉素是WHO鼠疫手册[5]和我国《鼠疫诊疗方案(试行)》(卫办应急发[2011]第18号)[6]中治疗鼠疫的首选药物。但值得注意的是, 2021年Dai等[7]发现国内1株鼠疫菌因编码核糖体蛋白S12的rpsL基因第128 bp位点的碱基发生了突变, 从而产生了对链霉素的高度耐药性。为此, 本研究应用基于TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光PCR法(简称MGB荧光探针法), 选取鼠疫流行较为严重的玉树藏族自治州(以下简称玉树州)鼠疫自然疫源地内分离...     

生物素-抗生物素免疫标记技术及其在传染病研究中的应用

传染病的研究,无论是病原微生物的生活史、致病机理,还是早期诊断或制备疫苗,均需要灵敏、快速和准确的检测方法,但目前许多方法均尚有不足之处,如普通的酶联免疫吸附试验(ELISA)法灵敏度有限,放射免疫测定(RIA)法价格昂贵并产生放射性污染,因此,寻找理想的检测方法是研究传染病的重要任务。七十年代中期,Bayer 等首先将生物素-抗生物素系统(Biotin-Avidin System,     

鼠疫菌素抗体检测方法的应用研究

目的 检测宿主动物血清中鼠疫菌素(Pesticin,Pst)抗体,探究Pst作为鼠疫抗体检测诊断试剂的可能性.方法 采用重组Pst和鼠疫F1抗体间接ELISA法,对351份不同来源的鼠疫宿主动物血清样本进行检测.结果 在鼠疫感染的宿主动物体内可以检测到Pst抗体,Pst抗体水平随着F1抗体水平的升高而明显升高,鼠疫患者血清中20个月时ELISA检测A值为0.438,Pst抗体维持在可检出水平.结论 Pst抗体检测方法可以与传统鼠疫F1抗体检测相结合,使鼠疫抗体检测方法更具可靠性.     

云南边境口岸鼠疫控制对策

鼠疫是危害人类生命健康最严重的烈性传染病,是《国际卫生条列》和我国《国境卫生检疫法》规定的检疫传染病之一。自1840年鸦片战争以后我国在香港、广东、厦门、上海、牛庄(营口)等通商口岸由于缺乏有效的检疫措施,以致使鼠疫数次传入我国造成暴发和流行。历史上记载我国有人间鼠疫流行     

反向血凝试验应用于鼠疫监测中的效果观察

为了进一步阐明反向血凝试验(RIHA)在鼠疫快速诊断及鼠疫自然疫源地调查及监测中的效果,我们于2000～2001年在河北康保牧场收集的部分被检材料中分别用RIHA和间接血凝试验(IHA),进行对照.对EV菌感染动物,鼠疫强毒菌株,特别是对腐败脏器材料的检查进行了RIHA,并将RIHA和IHA、细菌培养3法进行了比较.     

广西鼠疫指示动物犬血清IHA、ELISA检测鼠疫F1抗体的一致性研究

目的 了解应用IHA、ELISA检测鼠疫F1抗体的一致性,评价方法的优劣,以便更好地制订鼠疫监测的方法及防治策略.方法 对广西鼠疫监测点隆林、西林县的犬血清使用IHA及ELISA两种试验方法,并进行一致性研究,评价IHA与ELISA方法的可靠性.结果 IHA检测鼠疫F1抗体阳性率为0,ELISA检测鼠疫F1抗体的总阳性率为4.4%(12/273);IHA与ELISA之间的一致性为95.6%,其Kappa值等于0,呈轻度一致.结论 间接血凝试验方法特异、操作简便是传统的鼠疫监测手段之一;酶联免疫吸附试验具有敏感性高、特异性强、操作简便等特点,且与间接血凝试验有轻度一致性,适宜在鼠疫监测中推广应用.     

胶体金技术在鼠疫监测中的应用

目的 选择快速、敏感的鼠疫检测方法,为鼠疫防治提供科学依据.方法 胶体金免疫层析法(GICA)与鼠疫间接血凝(IHA)和反向血凝(RIHA)同步检测鼠疫抗体/抗原.结果 在四川省191份动物肝脾标本中,GICA检出阳性10份,RIHA阳性6份;检测动物血清标本417份,GICA与IHA均检出阳性13份.结论 GICA简便快速,适合现场鼠疫监测.