通州区水产品污染副溶血性弧菌和其引起腹泻情况的调查研究

目的:了解北京市通州区水产品污染副溶血性弧菌情况和由其引起食源性腹泻的危险性。方法:监测本区内超市、菜市场及餐饮业水产品中副溶血性弧菌的污染情况;对引起食物中毒的可疑样品和医院肠道门诊腹泻病人的粪便进行副溶血性弧菌分离鉴定;对部分所分离菌株进行毒力检测(神奈川试验和脲酶试验)、血清分型和rDNA(核糖核酸)指纹图谱分析,并进行同源性比较。结果:(1)超市、菜市场水产品副溶血性弧菌阳性检出率35.0%,餐饮部门阳性率8.6%,总阳性率22.7%;(2)从2家餐饮单位的可疑食物中毒样品(水产品和凉拌菜)中分离出4株副溶血性弧菌;(3)检测303份腹泻病人的粪便,分离出腹泻病原菌76株,排在前三位的是副溶血性弧菌33株,占腹泻病原菌的43.42%,以6～10月份最多;各种沙门菌16株,占21.05%;第三是志贺氏菌13株,占17.11%。(4)对其中27株副溶血性弧菌检测其毒力基因tdh(神奈川试验)全部阳性t,rh基因(脲酶试验)有3株阳性(从食品中分离),其余全部阴性;27株副溶血性弧菌分别属于17个不同的血清型r,DNA指纹图谱分为22个核糖型。提示除由一起食物中毒病人粪便中分离的6株菌外,其余各菌株间同源污...     

脲酶阳性副溶血性弧菌的病原学研究

目的描述引起食物中毒的脲酶阳性副溶血性弧菌(Vp)菌株的血清分型和有关毒力基因的分布,为防制Vp食物中毒的有关研究提供基础。方法对86株脲酶阳性的副溶血性弧菌食源性疾病分离株按照GB/T 4789.7—2008进行血清分型和神奈川试验;用复合PCR技术同时检测Vp的耐热直接溶血素毒力基因(tdh)和耐热直接相关溶血素毒力基因(trh)。调阅、分析食物中毒事故个案调查登记表中被采样人的临床症状。结果 86株脲酶阳性Vp神奈川试验全部阳性,均来自有腹痛、腹泻等细菌性食物中毒症状且最终被判定为食物中毒病例。其中O3∶K6血清型28株,O4∶K8血清型10株,其他血清型16株,不能分型32株。86株脲酶阳性中47株携带tdh基因,1株携带trh基因,未发现同时携带tdh基因和trh基因的菌株。结论引起辖区食源性疾病脲酶阳性Vp主要血清型为O3∶K6,其次是O4∶K8。脲酶阳性的菌株也可拥有tdh毒力基因,有较强的致病性,当食品检测中检出此类菌株时,应特别引起重视。     

广东省副溶血性弧菌rDNA指纹图谱特征分析

目的通过对广东省监测食品及腹泻病人中分离的副溶血性弧菌(vibrio parahaemo-lyticu,s VP)进行rDNA(核糖体核酸)指纹图谱分析,为VP引起的食物中毒事件流行病学调查提供诊断依据。方法对从2003~2004年广东省食品及食物中毒病人中分离的64株VP采用R iboPrinter微生物鉴定系统进行核糖分型,并利用R iboExplorer软件处理rDNA指纹图谱,运用B io Numerics软件分析菌株的同源性。结果64株VP共分为51个核糖型,其中源自食品的52株分离株分为41个核糖型,源自食物中毒病人的12株分离株分为10个核糖型。来源于同一起食物中毒的E408-18-S-7核糖型的3株VP其相似度为100%,其他病人株均非同型或相似度较低(<95%)。结论监测地区食品分离株核糖型多、分布广,有部分核糖型相似度较高;rDNA指纹图谱对于同一核糖型或相似度>95%的菌株能达到溯源能力。     

PFGE技术对一起副溶血性弧菌引起食物中毒的同源性研究

目的:了解一起食物中毒事件中副溶血性弧菌(VP)分离株的同源性。方法:按国标方法进行VP的分离与鉴定;对分离出的VP做血清分型及tdh、trh毒力基因检测;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行基因分型。结果:从10例患者肛拭子和1份砧板涂抹物中分离到的11株VP,血清型均为O3:K6,tdh毒力基因均为阳性,PFGE分型图谱也完全相同。结论:这是一起因VP污染了食品加工环节而导致的食物中毒事件。     

PFGE法分析多血清型副溶血性弧菌引起的食物中毒

目的:对从食物中毒样品中分离到的7株副溶血性弧菌作常规鉴定及脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性分析,以明确致病因子。方法:按GB/T4789.7-2008进行副溶血性弧菌分离、生化鉴定、神奈川试验、血清分型;Pulse-Net PFGE分子分型标准实验室操作方法作同源性分析。结果:7株副溶血性弧菌分成三个血清型,即O3∶K6型5株,O4∶K8型和O1∶K56型各1株,分别属于三种不同的PFGE条带型,其中6株菌神奈川试验阳性。结论:这次食物中毒可能为以O3∶K6型为主的不同克隆群副溶血性弧菌混合感染所致。     

义乌市33株副溶血性弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型结果

副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus ,VP）是一种分布极广的海洋细菌,夏季海水及海产品中常带有此菌。近年来,VP成为我国首要的食源性致病菌,特别是在一些沿海城市,由该菌引起的食物中毒占细菌性食物中毒总数的比例高达60％以上［1－2］。义乌市海产品资源丰富,VP也是主要的食源性致病菌［3］。脉冲场凝胶电泳（ PFGE ）技术因其分辨力高、结果重现性好,而被认为是细菌分子分型的“金标准”［4］。我们对2013年义乌市不同来源的33株VP进行了血清分型和PFGE分子分型研究,旨在初步分析相关菌株间的亲缘关系,了解其内在联系和流行规律,为本市VP食物中毒的防制提供参考。     

一起副溶血性弧菌食物中毒的病原学分析

目的对一起食物中毒事件分离的菌株进行病原学分析。方法参照《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》(GB 4789.7—2013)等标准对29份样本进行副溶血性弧菌检测,对分离的菌株进行血清学试验和tdh毒力基因检测,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果 16份样本检出副溶血性弧菌20株,分属5个血清群:7株O1,5株O4,3株O5,4株O10,1株O11。分离自患者水样便和肛拭的6株菌株tdh均为阳性,分离自食品和加工环节的14株菌株tdh均为阴性。PFGE分子分型显示:分离自患者的同一血清群的菌株同源,不同血清群为不同克隆;分离自加工环节的与分离自患者的同一血清群的菌株为不同克隆。结论这是一起由O4和O10血清群副溶血性弧菌混合感染引起的食物中毒。     

2016-2019苏州市副溶血性弧菌的毒力基因和耐药性及分子分型研究

目的 了解2016-2019年苏州市副溶血性弧菌( Vibrio parahaemolyticus ,VP)分离株毒力基因携带情况,耐药性及分子分型。 方法 利用荧光定量PCR 技术对154株分离自苏州各区、县级市的VP的3种毒力基因（ tlh 、 tdh 、 trh ）进行检测。采用微量肉汤稀释法测定其对14 种抗生素的耐药性。采用脉冲场凝胶电泳（Pulsed-Field Gel Electrophoresis, PFGE）进行分子分型。采用卡方检验对统计结果进行分析（ α =0.05）。 结果 154株VP分离株 tlh 基因均为阳性; trh 基因阳性4株,阳性率为2.60%,均为病患分离; tdh 基因阳性107 株,阳性率为69.48％,其中病患分离株阳性106株,食品及环节(用具)分离株阳性1株。154株VP仅对氨苄西林耐药,总体耐药率为80.52%（124/154）,其中病患分离株耐药率为88.98%（105/118）高于食品及环节分离株耐药率52.78%（19/36）,差异具有统计学意义（ P <0.001）。154株VP 经PFGE分子分型显示带型相似性为45%～100%,按相似度85%为判读标准可分为73个带型簇（各带型簇:1≤n≤10）。 结论 苏州市VP的 trh 基因的携带率较低,病患分离株的 tdh 基因的携带率较高,远高于食品及环节分离株。VP分离株对多数抗生素不耐药,仅对氨苄西林存在较高的耐药率。PFGE带型较为分散,没有明显的优势带型簇。     

湖南省食源性德尔卑沙门菌耐药谱及PFGE分型研究

目的了解湖南省食源性德尔卑沙门菌的耐药谱及分子分型,建立沙门菌指纹图谱数据库。方法运用肉汤稀释法对食源性德尔卑沙门菌进行药敏试验,并采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)进行分子分型。结果 47株德尔卑沙门菌中,有46株对1种以上抗生素耐药(97.87%),有29株多重耐药菌株(61.70%);德尔卑沙门菌分为32种PFGE型,其中有10种PFGE型的菌株数超过1株。结论湖南省食源性德尔卑沙门菌分离株呈高耐药和多重耐药趋势,PFGE分子型别呈多态性,有同源菌株存在,PFGE分型为食源性疾病溯源和预警提供技术基础。     

上海市C群沙门菌暴发菌株鉴别诊断研究

目的:C群沙门菌血清型的鉴别诊断研究。方法:对2007年上海市黄浦区的C群食源性暴发沙门菌鉴定中存在与泰国产沙门菌分型血清H相因子有交叉凝集的菌株使用丹麦(SSI)血清参比;分析菌株的抗生素耐药性和脉冲凝胶电泳(PFGE)图谱,选择部分猪霍乱和汤卜逊沙门菌腹泻株进行多位点基因序列分析(MLST)分子分型;通过PluseNetChina非伤寒沙门菌数据库图谱比对上海的汤卜逊暴发菌株与重庆市C群沙门菌暴发菌株的分子型。结果:2007年黄浦区报告8株猪霍乱暴发菌株经丹麦血清分型鉴定为汤卜逊沙门菌;2007年的4株猪霍乱和5株汤卜逊沙门菌经丹麦SSI血清复核鉴定均为汤卜逊沙门菌ST26型;汤卜逊沙门菌暴发菌株对6种抗生素的耐药率均为100%,耐药谱与散发株显著不同;2007年重庆市的多起食源性暴发案例中的C群沙门菌经复核鉴定亦为汤卜逊沙门菌ST26型,并与上海的暴发菌株在遗传学上存在高度同源。结论:泰国血清的H相因子间存在交叉凝集现象。推测2007年上海市发生的食源性暴发病例可能由输入性汤卜逊沙门菌ST26型多重耐药克隆株引起。     

A comparison of Listeria monocytogenes serovar 4b isolates of clinical and food origin in Austria by automated ribotyping and pulsed-field gel electrophoresis

In this study, two typing methods, automated ribotyping and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), were evaluated for the subtyping of Listeria monocytogenes serotype 4b. The strains originated from patients and food samples collected in Austria during 2001-2005 and from Europe and North America in the World Health Organization collaborative study on the subtyping of this species. The largest group of Austrian clinical isolates was of the same PFGE subtype as those isolated from foodborne outbreaks in Switzerland and in the United States. Another subtype of clinical isolates from Austria was indistinguishable to that obtained from isolates responsible for a foodborne outbreak in the United States in 1985. Although the discriminatory power of PFGE was higher than that of automated ribotyping, some PFGE types were differentiated by ribotyping. Thus, combining data obtained by both automated ribotyping and PFGE increases the strain discrimination. Still, many of the Austrian strains remain indistinguishable from strains of foodborne outbreaks in other countries although there is no known epidemiological relation. This complies to previous studies which show the highly clonal nature of L. monocytogenes 4b strains which are responsible for both large outbreaks and sporadic cases.     

2010年济南地区人肠道病毒71型VP1区基因特征的分析

[目的]研究济南地区肠道病毒71型（EV71）的基因特征。[方法]对2010年济南地区手足口病病人的粪便、咽拭子等标本,通过RT—PCR扩增EV71VP1基因片段;选取EV71阳性的18株进行VP1全基因序列测定,用DNAS—TAR、Mega．4．0软件进行同源性分析,并构建系统进化树。[结果]与EV71A型和B型代表株亲缘性较远,核苷酸（氨基酸）同源性分别为81．8％～82．7％（83．7％～85．ooA）和94．3％～94．9％（97．3％～97．6％）;与C型代表株亲缘性较近,核苷酸（氨基酸）同源性为87．5％～99．1％（98．3％～100．0％）;18株EV71之间在VP1区核苷酸和氨基酸水平上有一定差异,同源性分别为97．1％～100．0％和99．3％～100．0％。构建系统进化树表明,18株EV71与C4亚型处于同一簇,属EV71型C4基因亚型。[结论]20LO年济南地区流行的EV71属肠道病毒71型属C4基因亚型。     

2005～2007年中国食品中疑似O157大肠埃希菌的鉴定及毒素基因的检测

目的对中国2005～2007年食源性疾病监测网分离疑似O157大肠埃希菌进行鉴定,了解各种不同类型监测食品中大肠埃希菌O157的分布及毒力基因的携带情况。方法运用API20E生化试剂条进行初步鉴定,使用血清分型和PCR方法确定菌株,并检测毒力基因。结果(1)通过API20E生化初步鉴定共获得154株疑似O157大肠埃希菌。(2)通过血清学方法和特异基因的检测,共确定89株大肠埃希菌O157,其中42株是O157:H7(47%),其余的菌株为O157:NM和O157:hund(未确定型)。(3)毒力基因的检测:42株O157:H7和6株O157:NM携带eaeA+hlyA基因;共29株菌携带stx基因,主要分布在不发酵山梨醇O157:H7菌株中。(4)监测的生羊肉、生牛肉、生猪肉、生鸡肉、蔬菜沙拉等食品中均检出了携带stx基因的O157:H7。结论鉴定结果显示中国部分监测食品中均分离到有一定程度致病力的大肠埃希菌O157。     

多重PCR方法检测沙门氏菌血清型适用性探讨

目的 探讨在食源性疾病病例监测中,多重PCR方法用于沙门氏菌的血清型分型的适用性。方法 利用多重PCR方法对113株分离自食源性疾病病例的沙门氏菌进行血清分型,得到菌株可能血清型。同时,菌株血清型经Luminex xMAP（）沙门氏菌血清分型法及传统的血清玻片凝集方法最终确定。比较可能血清型与菌株确定血清型间的符合程度,探讨多重PCR方法用于沙门氏菌血清分型的适用性。结果 在113株菌株中共检出23个沙门血清型。多重PCR方法可准确推测其中11个血清型,涵盖了113株中的94株（83.2%）。结论 多重PCR方法为食源性疾病监测中的沙门氏菌血清分型提供了简便快速、价格低廉的辅助方式,利于在基层公共卫生实验室推广。     

2010 - 2016年昆明市肠道病毒71型流行特征及VP1基因特征分析

目的 分析昆明市2010 - 2016年肠道病毒71型（Enterovirus A71,EV - A71）的流行特征和VP1编码区基因特征。方法 采用描述流行病学方法,对本市手足口病（Hand,Foot,and Mouth Disease,HFMD）资料进行统计分析;对EV - A71阳性株的VP1编码区进行逆转录 - 聚合酶链反应,并对扩增产物进行核苷酸序列测定,使用Mega6.0软件分析VP1区基因亲缘关系。结果 2010 - 2016年昆明市每年均有EV - A71报告,发病有明显季节特征,高峰期在4 - 6月,5月达最高峰。全市各区县均有EV - A71病例报告,主城区发病数远高于郊县。0～5岁儿童是感染EV - A71的高危人群,发病高峰为0～3岁。EV - A71感染病例中男性远多于女性。58株EV - A71均为C4基因型的C4a亚型,分为2个传播链,传播链2包含了7年间绝大多数毒株。结论 昆明市2010 - 2016年HFMD主要病原是EV - A71,其亦是引起HFMD重症的主要原因。昆明市EV - A71毒株全部是C4a亚型,可针对二季度、0～3岁男性儿童及主城区等关键要素合理配置防控资源,做好EV - A71防控工作。     

不同来源副溶血性弧菌血清群和毒力基因及其耐药性

目的了解副溶血性弧菌水产品分离株和食物中毒患者分离株的血清群、毒力基因及其耐药性,为预防控制溶血性弧菌引起的食物中毒提供依据。方法对副溶血性弧菌分离株利用血清凝聚试验进行分群,应用聚合酶链式反应(PCR)方法检测耐热直接溶血素(TDH)和耐热直接溶血素相关毒素(TRH)毒力基因,采用纸片扩散法进行药敏试验。结果 35株水产品分离株分布于O4、O3、O2、O11、O5、O1共6个血清群,无优势菌群,TDH与TRH毒力基因均阴性。22株食品中毒分离株分布于O3、O4、O1共3个血清群,以O3群为主,占81.8%,TDH阳性率77.3%,TRH阳性率13.6%。药敏试验结果显示副溶血性弧菌对青霉素类、头孢类、磺胺类抗生素部分耐药或完全耐药,对其他类抗生素敏感。结论副溶血性弧菌水产品分离株与食物中毒分离株的血清群、毒力基因存在较大的差异,所分离菌株对多种常用药物敏感性高。     

2019年陕西省手足口病的病原构成及柯萨奇A16型病毒的VP1区序列分析

目的 了解2019年陕西省手足口主要病原构成和流行规律,为制定陕西省手足口病防控策略提供依据.方法 收集2019年陕西省122家县(区)级疾病预防控制中心采集的手足口病例的血清分型结果和病例资料,分离肠道病毒核酸检测阳性样本,并对流行优势病原的肠道病毒VP1区进行PCR扩增和序列测定,应用最大邻接法(neighbor ...     

浙江省临海市2004年病毒性脑膜炎暴发疫情的病原学及其分子特征研究

目的 为确证2004年浙江省临海市病毒性脑膜炎暴发疫情的病因,分析病原的遗传变异及进化关系.方法 采集患者脑脊液样本60份,采用RD和Hep-2细胞同时分离病毒,中和试验法鉴定病毒型别;对分离株VP1和VP4/VP2基因测序,进行同源性与进化分析.结果 从60份脑脊液样本中分离到埃柯病毒30型(E30)19株,分离率为31.7％;对4株E30分离株VP1区核苷酸序列测定,其长度均为876个核苷酸(nt),编码292个氨基酸(aa).临海分离株与E30原型株Bastianni在VP1区的nt和aa同源性分别为82.4％～84.1％和93.5％ ～ 94.2％;4株临海E30株之间nt和aa的同源性分别为87.1％～99.9％和97.9％ ～ 100.0％.临海分离株分成两类,同类病毒株间的差异很小,而两类病毒株间的差异很大,nt和aa的最大差异率分别为12.9％和2.1％.与临海E30株同源性最高的为2002-2003年浙江E30株.在VP1基因进化树上,临海E30株分别位于G和H基因亚型分支上,其中临海G基因株与2003年浙江、江苏和山东E30株位于同一进化分支,临海H基因株与2002年浙江诸暨株位于同一进化分支.VP4/VP2区进化分析结果与VP1区相似.结论 2004年临海市病毒性脑膜炎暴发疫情由E30G和H不同基因亚型的E30流行株引起;临海E30株与2002-2003年浙江、江苏和山东E30株具有密切的亲缘关系;H基因亚型株推测为新的E30变异株,首先分离于2002年浙江省.