复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用

目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据。方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型组和阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14天。于用药前(T0)、用药7天(T7)、14天(T14)及停药后3天(P3)分别采血,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测血清DHBVDNA的含量。结果:CLYX各剂量组用药后血清DHBV DNA含量显著降低(P<0.01),停药3天后,CLYX低剂量组和阳性对照组血清DHBV DNA有反跳现象,而CLYX中、高剂量组血清DHBV DNA没有反跳现象。CLYX抑制DHBV DNA的作用有明显的量效和时效反应关系。结论:CLYX可有效地抑制DHBV DNA的复制。     

复方三姐妹治疗鸭乙型肝炎的实验研究

为进行复方三姐妹片（简称ＣＲＴ）清除乙肝病毒的疗效研究，建立鸭乙肝动物模型。经２个月的用药观察，结果表明，药物对ＤＨＢｓＡｇ滴度下降及转阴疗效优于对照组。病理活检及电镜超微结构显示，治疗后均较治疗前明显好转，并有清除ＤＨＢＶ－ＤＮＡ及护肝作用。     

复方六月雪对HepG2.2.15细胞HBV DNA的抑制作用

目的:观察复方六月雪体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用MTT法检测复方六月雪对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在最大无毒浓度(TC0)基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量。结果:TC50为3.070mg/ml,TC0为0.945mg/ml,复方六月雪对HepG2.2.15细胞毒性较低。无毒浓度下的复方六月雪在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBVDNA的复制。结论:CLYX在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。     

饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型肝炎的保护作用研究

目的:研究饿蚂蝗总黄酮对鸭乙型病毒性肝炎的作用。方法:采用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)血清感染1日龄广西麻鸭。感染7d后采用PCR法筛选出DHBV DNA强阳性鸭,随机分为5组:模型组、阳性药拉米夫定组(50mg/kg)、饿蚂蝗总黄酮组(300,150,75 mg/kg),每组10只。另设正常对照组(经PCR筛选出的未造模DHBV阴性鸭)10只。各组从造模后第14d开始给药,每天灌胃给药1次,持续给药14d。每组动物分别于给药前0天(T0)、给药后7天(T7)、给药后14天(T14)、停药后3天(P3)自颈静脉采血,检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV DNA)、鸭乙型肝炎表面抗原(DHBs Ag)和鸭乙型肝炎e抗原(DHBe Ag)的水平,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性,白介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)的含量变化。结果:与模型组比较,在T14时,饿蚂蝗总黄酮300、150、75 mg/kg剂量组能够降低T14时鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量,升高IL-2和IFN-γ水平;在P3时,饿蚂蝗总黄酮300、150mg/kg剂量组对鸭血清DHBV DNA载量以及ALT和AST含量的抑制仍然明显,停药后无反跳。结论:饿蚂蝗总黄酮具有抗鸭乙型病毒性肝炎作用,其机制与抑制病毒复制、保肝降酶、调节免疫功能有关。     

复方六月青对鸭乙型肝炎病毒诱导肝损伤的保护作用研究

目的研究复方六月青(CLYQ)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)诱导麻鸭肝损伤的保护作用。方法采用DHBV诱导广西麻鸭乙型肝炎病毒肝损伤模型。于用药前(T0)、用药7d(T7),14d(T14)及停药后3 d(P3)分别检测鸭血清的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织病理变化。结果用药后CLYQ中、高剂量组鸭血清ALT和AST的含量显著降低(P<0.01),并且有量效和时效关系。鸭肝脏病理学检查表明CLYQ对DHBV引起肝损伤有显著的保护作用。结论 CLYQ可有效地保护DHBV诱导麻鸭肝损伤。     

玉郎伞水提物对慢性鸭乙型肝炎的保护作用

目的:建立鸭乙型肝炎慢性感染模型,研究玉郎伞水提物对鸭慢性乙型肝炎的保护作用。方法:1日龄的广西麻鸭经颈静脉接种0.2 m L的鸭乙型肝炎病毒(DHBV)强阳性血清,7 d后用荧光定量PCR筛选DHBV阳性鸭,随机分为4组,即:模型组,玉郎伞水提物高、低剂量组(按生药量计分别为20,10 g·kg-1)和秋水仙碱组(0.02 g·kg-1)。将未感染鸭作为正常组。除正常组外,其余各组每周均接种0.2 m L的DHBV强阳性血清,直到实验结束,以造成鸭乙型肝炎慢性感染。从造模第25周开始,连续灌胃给药5周。末次给药24 h后,所有动物从颈静脉采血,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,血清鸭乙型肝炎病毒表面抗原(DHBs Ag),DHBV-DNA含量。将所有动物处死,迅速摘取肝组织,测定肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,丙二醛(MDA)的含量,肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。通过HE染色观察肝细胞损伤程度。结果:与正常组比较,模型组血清ALT,AST活性,HBs Ag,DHBV-DNA含量均显著升高(P0.05,P0.01)。肝组织中SOD,GSP-Px活性均显著降低,MDA和Hyp含量则显著升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,玉郎伞水提物高、低剂量组均能降低血清ALT活性和DHBV-DNA含量(P0.05,P0.01),均能增加肝组织匀浆中GSH-Px活性,降低MDA和Hyp的含量(P0.05,P0.01)。玉郎伞水提物高剂量组能降低血清AST活性和HBs Ag含量,增加肝组织SOD活性(P0.05,P0.01)。HE染色显示玉郎伞水提物能显著减轻肝细胞损伤。结论:玉郎伞水提物对DHBV所致的慢性鸭乙型肝炎有一定的保护作用。     

中药复方肝得宁片体内对鸭乙型肝炎病毒的影响

乙型肝炎一直是感染率高且危害严重的传染病之一 ,目前尚缺乏理想防治药物。肝得宁片是以五味子等常用中药组成的复方制剂 ,其原剂型肝得宁丸多年来一直是我院乙型肝炎治疗的首选药 ,在急、慢性乙型肝炎治疗中取得了较好疗效。近年来 ,我院通过处方优化、工艺改革和剂型改变 ,将其开发为国家中药三类新药。为了验证其对病毒性肝炎的治疗作用 ,本实验以鸭乙型肝炎病毒静脉感染雏鸭为模型 ,观察肝得宁片治疗后鸭血清中ＤＨＢＶＤＮＡ的动态变化 ,并检测肝得宁片对ＤＨＢＶＤＮＡ复制的抑制作用。从而为肝得宁片在临床应用提供理论依据。1　实…     

扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用

目的 探讨扶正利湿活血中药复方水提物和醇提物对先天感染乙肝病毒(HBV)的鸭胚肝细胞乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用.方法 荧光定量PCR技术对鸭胚尿囊液DHBV DNA分析筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚,对DHBV阳性的鸭胚肝细胞原代培养;细胞接种后第3天分组加入不同剂量扶正利湿活血复方水提物和醇提物,共6 d,分别于药物干预前、药物干预第3天、第6天、停药第2天收集培养上清;辛酸钠法提取上清DHBV DNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测分析血清DHBV DNA的含量.结果 水提物各剂量组组内不同时间点DHBV DNA载量相比无显著性差异(P﹥0.05),仅水提物低剂量组DHBV DNA载量显著低于相同时间点病毒对照组(P<0.05);醇提物中、低剂量组在给药后和停药后培养上清DHBV均明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),扶正利湿活血复方醇提物高剂量组在给药后第3天时DHBV明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),第6天时组内比较无明显下降(P>0.05),而在停药后第3天时组内与组间比较又均有显著性差异(均为P<0.01).结论 扶正利湿活血复方醇提物对鸭胚肝细胞中的DHBV有直接抑制作用,水提物在鸭体内可能不是通过直接抑制DHBV而起作用.     

草河车对DHBV感染雏鸭急性肝坏死的保护作用

目的:评价草河车对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染雏鸭急性肝坏死的作用。方法:用脂多糖(LPS)诱发 DHBV 感染雏鸭急性肝坏死,建立实验模型。腹腔注射200mg·kg~(-1)·d~(-1)草河草,治疗过程中观察鸭血清丙氨酸氨基转移酶(ATL)、肿瘤坏死因子(TNF)和 DHBV-DNA 的动态水平,并进行鸭肝病理检查。结果:LPS 能诱发 DHBV 感染35天鸭急性肝坏死。草河车给药组 LPS 不能诱发鸭肝坏死。给药组在第2次注射 LPS 后9、18、24、48和72h,与未给药组同期比较,血清 ALT 水平显著降低,血清 TNF 水平也明显下降,但血清 DHBV-DNA 水平无明显变化。结论:草河车对 DHBV 感染雏鸭急性肝坏死具有显著性保护作用。     

鸭乙型肝炎病毒DNA聚合酶和逆转录酶在抗乙型肝炎病毒药物研究中的应用

本实验改进了鸭乙型肝炎病毒(DHBV)复制复合体(RCs)的制备方法,研究了14种中药复方和单味药提取物及30种成分药对DHBV DNA、聚合酶(DNAP)和逆转录酶(RT)的抑制作用。发现小柴胡汤提取物对DHBV RT和DNAP有轻度抑制作用,其7味药提取物中,黄芩和半夏对RT的半数抑制浓度(IC50)分别为1.25和18.6mg/ml,黄芩对DNAP的IC50为0.925mg/ml。鸭体内实验证明,口服给予黄芩水煎剂(5g/kg,每日3次,共10天)可显著降低鸭血清中DHBV DNA水平。此外,虎杖提取物对RT的IC50为1.76mg/ml,鱼腥草素等9种成分药对RT有轻度抑制作用。     

复方六月雪含药血清对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的:观察复方六月雪(六月雪、白花蛇舌草、栀子根等)体外抗HBV的作用。方法:采用血清药理学法进行实验,复方六月雪含药血清作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用ELISA法测定上清液HBsAg和HBeAg的滴度。结果:复方六月雪含药血清在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBsAg和HBeAg的表达(P<0.05、P<0.01),抑制作用有明显的量效反应关系。结论:复方六月雪含药血清在体外具有显著的抗HBV作用。     

六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用

六月青系爵床科(Acanthaceae)肖鸡笼属植物肖鸡笼(顶花马兰)Taraphochlamys offinis(Ciff)Bremekhu的干燥地上部分[1],为广西民间草药.在<本草拾遗>中记载,其能活血、凉血、舒肝泻湿、消肿止痛,主要用于急慢性肝炎、黄疸等[1].本文采用荧光定量PCR法,研究六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用,为开发六月青用于乙型肝炎治疗提供实验依据.     

六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用研究

目的:研究六月雪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组及六月雪组,每组10只,通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病肾病大鼠模型。干预6周后,比较各组大鼠的空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及24 h尿蛋白定量(24 h-UP);HE染色及PAS染色观察肾脏组织病理的变化,计算并比较各组病理评分;ELISA法检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1及IL-6的表达水平并进行比较。结果:六月雪组大鼠的FBG、BUN、Scr及24 h-UP较模型组降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠的肾脏病理改变有所减轻,病理评分降低(P<0.01);与模型组比较,六月雪组大鼠TGF-β1及IL-6表达有所下降(P<0.05)。结论:六月雪能够改善肾功能,减少尿蛋白,减轻肾脏损伤,其肾脏保护作用可能与TGF-β1及IL-6的表达下调有关。     

复方黄根对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：研究复方黄根对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法：采用卡介苗（BCG）＋脂多糖（LPS）造成免疫性肝损伤动物模型,观察复方黄根对小鼠血清各（ALT）、（AST）活性及肝组织匀浆超氧化酶歧化酶（SOD）、（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）水平的影响,并观察肝组织病理学改变。结果：复方黄根可明显降低小鼠血清中ALT、AST活性;减少肝匀浆MDA含量,并能使肝匀浆降低的SOD、GSH-PX活性升高。结论：复方黄根有明显的保肝作用,其抗氧化保肝作用可能与抗脂质过氧化有关。     

治疗乙型肝炎新药肝龙胶囊的药效学初步研究

目的观察肝龙胶囊对鸭乙型肝炎病毒的抑制效果和对实验性肝损伤的保护作用。方法(1)以鸭乙型肝炎病毒(DHBV)静脉注射感染雏鸭为模型,于感染第7天后分组灌胃肝龙(GL)胶囊浸膏0.5,1.5,3.0 g.k-g1.d-1,阳性对照组给予无环鸟苷(ACV)或磷羧基甲酸钠(PFA)。采用斑点杂交方法检测鸭血清DHBV-DNA,以病毒抑制率为疗效指标;(2)以昆明种小鼠腹腔注射CC l4肝损伤为模型,给予GL浸膏(200 mg.kg-1)。测定SGPT值,并取肝脏作病理形态学观察。结果(1)GL三个不同剂量组对DHBV均有不同程度的抑制作用,有一定的量效关系;(2)GL降低CC l4肝损伤小鼠血清SGPT值并减轻肝细胞损伤。结论肝龙胶囊可抑制雏鸭体内DHBV-DNA的复制并能保护CC l4所致的小鼠肝损伤。     

复方黄根对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究复方黄根对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用四氯化碳、D-氨基半乳糖盐酸盐诱导小鼠急性肝损伤模型,观察复方黄根对小鼠血清ALT、AST活性及肝组织匀浆SOD、MDA、GSH-PX水平的影响,并观察肝组织病理学改变。结果:复方黄根可明显降低小鼠血清中ALT、AST活性,同时能减少肝匀浆MDA含量,并能使降低的肝匀浆SOD、GSH-PX活性升高。结论:复方黄根有明显的保肝作用,其保肝作用与抗脂质过氧化有关。     

叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

1　材料和方法1 1　受试药物　叶下珠复方由本所制剂研究室提供 ,采用两种提取方法 ,叶下珠水提复方、叶下珠醇提复方 ,均为红色浸膏或粉剂 ,以蒸馏水配成所需浓度。阿昔洛韦 (ＡＣＶ)购自湖北医药工业研究所。1 2　动物　 1ｄ龄广州麻鸭 ,购自广州辛村孵化场 ,体重 40～ 5 0ｇ/只 ,雄性 ,每组 5～ 8只。1 3　病毒　鸭乙型肝炎病毒ＤＨＢＶ -ＤＮＡ强阳性血清 ,采自上海麻鸭 ,-70℃保存。ＤＨＢＶ质粒由军事医学科学院生物技术研究所陈鸿删教授惠赠 ,ＮＣ膜 :购自Ａｍｅｒｓｈａｍ公司。缺口翻译药盒 ,购自ｐｒｏｍｅｇａ公司。α 32 ｐ -ｄ…     

苦参碱脂质体抗鸭乙型肝炎病毒的体内实验研究

目的:观察苦参碱脂质体对鸭乙型肝炎病毒的影响。方法:对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)实验感染的广州麻鸭雏鸭灌胃口服苦参碱脂质体和苦参碱,前者设20mg·kg~(-1)和10mg·kg~(-2)组,后者设20mg·kg~-组,每天1次,连续给药20天,另设病毒对照组。采用DHBV-DNA Dot Blot法,测定鸭血清DHBV-DNA水平值。结果:苦参碱脂质体20mg·kg~-组在给药后第10、15、20天鸭血清DHBV-DNA水平明显下降(P<0.01),效果优于苦参碱20mg·kg~(-1)组(P<0.05),与病毒对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。苦参碱脂质体10mg·kg~(-1)组在给药后第20天及停药后3天鸭血清DHBV-DNA水平也有下降(P<0.05),与病毒对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05),但与苦参碱20mg·kg~(-1)组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。苦参碱脂质体2个剂量组停药后3天鸭血清DHBV-DNA水平无回升。结论:苦参碱脂质体对鸭乙型肝炎病毒有较好的抑制作用,优于同等剂量的普通苦参碱,其抗病毒效应相当于普通苦参碱1/2剂量的作用效果。     

六月雪化学成分的研究

<正> 六月雪系茜草科六月雪属植物,又名白马骨、满天星等。分布于我国东南部和中部各省区,具有治疗小儿疳积、急慢性肝炎、经闭、白带、风湿腰痛等症。至今尚未见报道该植物的化学成分的研究。我们对采自江西的六月雪进行了化学成分的研究。     

山芝麻对鸭乙型肝炎动物模型体内血清超氧化物歧化酶等3项指标的影响

目的 研究山芝麻水提物( Helicteres angustifolia)在鸭乙型肝炎病毒(DHBv)持续性感染模型中对血清超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(N0)及过氧化脂质类(LPO)的影响.方法 将DHBV- DNA阳性麻鸭随机分为山芝麻高、中、低剂量组、拉米夫定组和模型组,分别给予相应药物进行干预,并于用药前、用药第7,14天,及停药第7天取静脉血,检测血清中SOD活性及NO、LPO的含量.结果 与模型组比较,山芝麻高、中剂量组和拉米夫定组用药后7～14d,血清SOD活性明显升高(P＜0.05或P＜0.01),而NO和LPO含量显著下降(P＜0.05或P＜0.01).停药后7d,拉米夫定组即有反跳现象,山芝麻高、中剂量组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象.山芝麻低剂量组血清SOD、NO和LPO含量没有明显变化.结论 山芝麻具有抗脂质过氧化及护肝作用.