肝纤维化的药物治疗进展

肝纤维化是各种致病因子引起的慢性肝病的共同病理过程。致病因子造成肝细胞损伤并激活枯否细胞(KC)，分泌多种细胞因子，随同血小板、肝窦内皮细胞(SEC)和肝细胞等分泌的多种细胞因子及一些化学介质共同作用于肝星状细胞(HSC)，使其激活，转化为肌成纤维细胞。细胞因子还通过旁分泌、自分泌作用，使HSC增殖，合成大量的细胞外间质(ECM)。ECM合成、分泌增加，降解减少，导致肝纤维化形成。     

肝纤维化的诊治

肝纤维化是肝脏对各种原因所致的损伤的愈合反应，有多种细胞和细胞因子参与，以细胞外间质(EMC)增加，肝内纤维和结缔组织沉积为基本特征。肝结缔组织由胶原、非胶原基质蛋白及有关细胞组成，前二者即为ECM。肝星状细胞(HSC)活化是ECM合成增多的主要因素，枯否细胞所分泌的细胞因子对HSC的激活而促进肝纤维化的形成也起重要作用。     

从肝星状细胞激活过程中的信号转导途径谈肝纤维化的干预措施

近年来,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的激活以及由此而产生的一系列复杂生物学效应在肝纤维化发生、发展过程中所处的重要地位已经得到普遍共识。当肝脏受到多种因素如病毒、生物、化学物质等损伤后,由细胞因子、生长因子、氧化活性应激产物以及受损肝细胞的旁分泌刺激等多种因素,通过不同或相同的HSC胞内信号转导途径介导了HSC的激活并使其转化成为肌成纤维细胞(myofibroblastic cell,MFB);一旦HSC活化后,其功能发生诸多变化,直接导致肝纤维化的形成。     

肝纤维化与炎性细胞因子介导的相关信号通路的研究进展

纤维化是肝脏受到损伤后的一种自我修复反应,主要伴随着细胞外基质(ECM)的大量合成以及降解不足。肝星状细胞的激活在纤维化过程中起关键作用。肝星状细胞的激活涉及多种炎性细胞因子以及相关的信号通路,包括转化生长因子β_1、血小板衍生生长因子、核因子κB通路等。在细胞因子的作用下,这些通路被激活,以自分泌或旁分泌的方式作用于肝星状细胞。肝星状细胞激活后可分化、增殖,进而分泌大量纤维蛋白等ECM。     

以肝星状细胞为靶标的中医药抗肝纤维化实验研究概况

综述了近几年中医药以肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)为靶标防治肝纤维化机制研究的概况。中医药干预HSC的途径主要通过阻断HSC活化,抑制HSC增殖,干扰HSC自分泌及旁分泌活性因子功能,调节胶原代谢,抑制HSC收缩及调控其细胞内信号传导。目前中医药制剂抗肝纤维化的作用仍较弱。随着HSC在肝纤维化中的作用及其机制的阐明．有望能开发出作用更强、疗效确切的抗肝纤维化中药制剂。     

细胞因子对肝星状细胞激活调控的研究进展

肝纤维化是各种慢性肝病的不良后果，其病理生理基础为以胶原为主的细胞外基质(Extracellar matrix，ECM)的合成与降解失衡，ECM过度沉积所致。肝星状细胞(Hepatic stellate cell，HSC)是合成ECM的主要来源，而各种细胞因子参与HSC激活的调控。因此研究各种细胞因子对HSC的作用，对揭示肝纤维化的机制及其防治有极其重要的意义。本文仅就细胞因子与肝星状细胞激活的关系作一综述。     

细胞因子对肝纤维化影响的中医药研究进展

肝纤维化(HF)是慢性肝病向肝硬化发展的必经病理过程。其关键病机是肝星状细胞(HSC)的活化,导致细胞外基质(ECM)的合成与降解失衡,ECM在肝内大量沉积。HSC的激活受多种细胞因子的调控,促进因子主要有:转化生长因子(TGF-β)、血小板衍生生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子(TNF),基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)、结缔组织生长因子(CTGF);抑制因子主要有:基质金属蛋白酶家族(MMPS)、肝细胞生长因子(HGF)。两大类细胞因子的调控维持着ECM在肝内的合成与降解平衡。近年来,在中医药研究抗HF过程中发现,中药可通过下调促进因子或上调抑制因子达到减轻及逆转肝纤维化进程,并具有多成分、多环节的作用特点,在治疗上具有综合优势。     

酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的机制研究进展

肝星状细胞（HSC）活化是各种病因所致肝纤维化过程中的关键环节。在酒精性肝病的发展过程中,乙醇和代谢产物乙醛可改变机体氧化还原状态,活化枯否细胞,释放大量细胞因子,诱导HSC活化、增殖和胶原合成,形成肝纤维化。本文将对酒精性肝纤维化中HSC活化的机制和相关靶点加以综述,为开发抗肝纤维化药物和临床治疗提供新的思路。     

肝纤维化相关因子与治疗展望

中国是乙肝大国，肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的必经阶段，肝细胞、内皮细胞、枯否细胞等能够通过产生转化生长因子．血小板衍生生长因子、肝细胞生长因子、肿瘤坏死因子等细胞因子直接或间接地促进肝星状细胞（HSC）活化，继而原癌基因和核因子等转录因子被激活，导致HSC增殖，细胞外基质（ECM）降解减少并沉积。因此，针对特定的细胞因子，在体细胞基因水平进行调控，可以阻止肝纤维化病理进程。研究肝纤维化及细胞因子的关系，可以为通过相关因子治疗肝纤维化提供理论基础。     

COX-2和PPARγ在肝纤维化中的研究进展

肝纤维化是多种慢性肝病转为肝硬化的中间过程,其特征为肝脏细胞外基质(ECM)的合成超过降解。而肝星状细胞(HSC)是细胞外基质的主要来源,激活并不断增殖成为肝纤维化发生、发展中的核心环节。多种细胞因子与肝纤维化存在着密切关系,其中环加氧酶(COX)是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶,有COX-1、COX-2与COX-3三种异构体,其中C0X-2属诱导型酶,在多种因素刺激下表达上调,促进HSC活化、增殖及ECM生成、增加,诱导肝纤维化的进展。过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARs)属于核激素核受体超家族,有PPARα、PPARβ、PPARγ三种亚型,其中PPARγ抑制HSC活化、增殖及ECM生成、增加,在肝纤维化进展过程中起重要作用。该文就COX-2、PPARγ在肝纤维化疾病中研究的进展予以综述。     

肝细胞生长因子与肝纤维化关系研究进展

肝细胞生长因子是一种多效性的细胞因子,具有促细胞分裂、增殖、运动、抗纤维化等多种生物学活性。它可以通过抑制减少转化生长因子β1合成和信号转导、减少肝星形细胞活化和增殖、抑制胶原纤维合成、促进细胞外基质降解、抑制上皮-间质转化等多种机制来发挥抗肝纤维化效应,具有开发成为一种有效的抗纤维化临床药物的巨大潜能。     

蛋白芯片技术研究吲哚-3-原醇抗肝纤维化的分子机制

目的:利用高通量蛋白芯片技术,观察吲哚-3-原醇(I3C)对活化肝星状细胞(HSCs)内多种蛋白表达的影响,初步探讨I3C抗肝纤维化作用的分子机制。方法:培养永生化肝星状细胞株HSC-T6,该细胞具有活化的HSC表型,用100μmol/L的I3C处理细胞24h。高通量蛋白芯片技术观察HSC中与细胞周期、DNA损伤修复、细胞凋亡、骨架蛋白和细胞外基质等相关的主要蛋白的表达变化,分析变化达2倍以上的蛋白分子。结果:I3C可抑制炎症过程,减少HSC活化;阻滞细胞周期的进展,抑制HSC增殖;抑制NF-"B相关信号通路,促进HSC凋亡;调节细胞骨架和细胞外基质的合成与分解,减少肝脏胶原沉积。结论:I3C可通过多途径发挥其抗肝纤维化作用。     

福尔肝6号对肝星状细胞增殖的影响

目的：探讨福尔肝6号对肝星状细胞增殖影响的抗肝纤维化作用机理。方法：采用血清药理学实验方法作用于活化的大鼠肝星状细胞（HSC）,以^3H-TdR掺入法观察肝星状细胞增殖。结果：福尔肝6号和秋水仙碱药物血清能抑制肝星状细胞增殖,福尔肝6号药物血清组优于秋水仙碱药物血清组。结论：福尔肝6号药物血清能抑制HSC的增殖,从而减少胶原等ECM合成。     

PICK1在肝纤维化中的表达变化及功能研究

目的：研究蛋白激酶 C 结合蛋白1（PICK1）在小鼠肝纤维及活化的肝星状细胞中的表达变化,并探讨其对人肝星状细胞株（LX-2）活化的影响。方法建立四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化模型,观察 PICK1在肝纤维化过程中的表达变化;转化生长因子β1（TGF-β1）刺激 LX-2活化,West-ern blot 测定 PICK1的蛋白表达情况;转染 PICK1过表达质粒至 LX-2中,再以 TGF-β1诱导活化,Western blot 检测PICK1、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I 型胶原（Col1a1）和Smad2、3及其磷酸化水平的蛋白表达情况。结果正常组小鼠肝脏中 PICK1表达较高,随着肝纤维化的加重,PICK1的表达逐渐递减。TGF-β1诱导活化的 LX-2细胞中 PICK1表达降低。转染 PICK1过表达质粒后,TGF-β1诱导的α-SMA、Colla1的表达明显减少,且 Smad2、3磷酸化水平显著下降。结论 PICK1在纤维化肝组织及活化的 HSC 中表达下调。过表达 PICK1可抑制 TGF-β1诱导的 LX-2活化,可能是通过抑制 TGF-β／Smad 通路而发挥作用,为肝纤维化的防治研究提供了新的思路和靶点。     

Effects of vitamin E on the proliferation and collagen synthesis of rat hepatic stellate cells treated with IL-2 or TNF-α

Objective To study the effects of vitamin E on the proliferation and collagen synthesis of rat hepatic stellate cells treated with interleukin-2 (IL-2 ) or tumor necrosis factor-α (TNF-α). Methods Hepatic stellate cells were isolated from male Sprague-Dawley rats by using modified Friedman’s method. Using the isolated cells cultured and treated with IL-2 or TNF-α, we studied the effects of vitamin E on their proliferation and collagen synthesis through an (3)H-thymidine and (3)H-proline incorporation assay, as well as through observation of these cells under a contrary phase microscope. Results Adding IL-2 increased the both proliferation and collagen synthesis of hepatic stellate cells. Their proliferation was also increased by the addition of TNF-α, although it decreased collagen synthesis. Vitamin E had marked inhibitory effects on the ability of cells treated with IL-2 or TNF-α to reproduce or synthesize collagen. Conclusion Vitamin E can inhibit the proliferation and collagen synthesis of hepatic stellate cells. It is possible that vitamin E affects liver fibrosis through these activities.     

血管紧张素Ⅱ及其受体AT1R与肝纤维化的相关性

肝纤维化是各种慢性肝损伤修复过程引起的肝脏疾病,以细胞外基质(extracellular matrix,ECM)增生和降解失衡导致过度沉积为特征。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)中的主要效应成分。越来越多的证据表明,AngⅡ及其1型受体(angiotensin receptor 1,AT1R)之间的相互作用在对长期肝脏损伤引起的纤维化中起重要作用,包括促进肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的活化、增殖及收缩,诱导人类活化型HSCs产生活性氧簇(reactive oxygen species,ROS),促进胶原合成及沉积等。本文就AngⅡ及其受体AT1R在肝纤维化的发生、发展及抗纤维化治疗中的作用作一综述。     

EFFECTS OF VITAMIN E ON THE PROLIFERATION AND COLLAGEN SYNTHESIS IN RAT HEPATIC STELLATE CELLS TREATED WITH INTERLEUKIN-2

R68umeObjectifPourdtudierlk/ftdevitamineEsurlaprolofdrationetla8ynthdsedecollagdnedescellulesstellairesdesrats.MdthodesLescellulesstellairesdtaientisoldesaveclamdthodeFriedmanmodofide,Le8cellulesisoldesdtaientcultivdesettraitdesparinterleukiene-2.LeselfetBdevitamineEdtaientdtudidssurlaprolofdrationetlasynthdsedecollagdneavecde8essaisd'incorPorationde3H-thymidineet'H-proline.RJsuItats1.LaprolWrationetlasynthdsedecollagdnedescellulesstellairesdtaientaugmentdessousl'actiondeinterleukine-2.2…     

槲皮素对人肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响与其细胞周期研究

目的 探讨中药提取物槲皮素对培养肝星状细胞的细胞周期与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响,分析槲皮素对肝纤维化、肝硬化的作用机制.方法 体外培养人肝星状细胞,分为对照组(无干扰)和实验组(槲皮素干扰),观察细胞生长特征,并用免疫组织化学、免疫荧光技术检测Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白的表达,流式细胞仪检测的细胞周期.结果 (1)细胞核按大中小3类半定量计数,结果显示实验组与对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)免疫组织化学与免疫荧光结果显示,吸光度、阳性面积比值(PN-area)和荧光强度实验组Ⅰ型胶原蛋白表达与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ型胶原蛋白表达实验组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);(3)流式细胞仪检测细胞周期结果显示,对照组和实验组G1期细胞比例比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 槲皮素对肝星状细胞胶原蛋白表达、细胞周期具有调控作用.     

Effects of ribozyme targeting platelet-derived growth factor receptor β subunit gene on the proliferation and apoptosis of hepatic stellate cells in vitro

Background Activation and proliferation of hepatic stellate cells (HSC) is essentially involved in the development and progression of hepatic fibrosis. The most potent growth factor for HSC is platelet-derived growth factor receptor (PDGF) and PDGF receptor β subunit (PDGFR-β) is the predominant signal transduction pathyway of PDGF which is overexpressed in activated HSC. This study investigated the cleavage activity of hammerhead ribozyme targeting PDGFR-β mRNA in HSC and the effect on biological characteristics of HSC.Methods Expression vector of anti-PDGFR-β ribozyme was constructed and transfected into rat activated HSC with lipofectamin. The positive cell clones were gained by G418 selection. The expression of PDGFR-β, α-smooth muscle actin, and typeⅠand type Ⅲ collagen were detected by using Northern blot, Western blot and immunocytochemical staining, respectively. The cell proliferation was determined with MTT colorimetric assay. The cell apoptosis was analyzed by using flow cytometry, acridine orange fluorescence vital staining and transmission electron microscopy.Results The expression of PDGFR-β at mRNA and protein level was markedly reduced in ribozyme-transfected HSC by 49%-57% (P&lt;0.05-0.01). The proliferation and α-smooth muscle actin expression of ribozyme-transfected HSC were significantly decreased (P&lt;0.05-0.01), and the type Ⅰ and type Ⅲ collagen synthesis were also reduced (P&lt;0.01). In addition, the proliferative response of ribozyme-transfected HSC to PDGF BB was significantly inhibited. Otherwise, the apoptotic cells were significantly increased in ribozyme-transfected HSC (P&lt;0.01), and typical apoptotic cells could be found under transmission electron microscopy.Conclusions The anti-PDGFR-β ribozyme effectively cleaved the target RNA and significantly inhibited its expression, which blocked the signal transduction of PDGF at receptor level, inhibited HSC proliferation and collagen synthesis, and induced HSC apoptosis. These results suggest that inhibiting PDGFR-β expression of HSC may be a new target for the therapy of liver fibrogenesis, and ribozyme may be a useful tool for inhibiting PDGFR-β expression.     

调肝理脾方抗酒精性肝纤维化大鼠的免疫组化及图像分析研究

肝纤维化的形成主要是细胞外基质 (ECM)的过度产生和沉积所致 ,肝脏星形细胞 (HSC)的活化和增殖是多数ECM的细胞来源 ,抑制HSC的活化和增殖是治疗的关键。通过应用免疫组织化学染色的方法 ,观察了调肝理脾方对实验性酒精性肝纤维化大鼠肝脏HSC形态及功能的影响 ,并通过图像分析及统计学处理 ,验证了药物抗酒精性肝纤维化的作用机理和作用效果。结果提示调肝理脾方是通过抑制HSC的活化和增殖 ,从而起到抑制ECM合成的作用。这也是调肝理脾方预防和治疗酒精性肝纤维化的机理所在