Occult disseminated tumor cells in lymph nodes of patients with gastric carcinoma. A critical appraisal of assessment and relevance

Background and aims  In gastric cancer, regional lymph node metastasis verified by histopathological examination is the most important prognostic factor after complete surgical tumor resection (R0). However, the prognostic value of immunohistochemically identifiable disseminated tumor cells in lymph nodes without histopathological tumor burden in patients with gastric cancer is still controversially discussed. The aim of the study was to assess the frequency and prognostic impact of minimal tumor cell spread to lymph nodes in these patients. Patients–methods  One hundred sixty lymph nodes judged as “tumor free” on routine histopathology obtained from 58 patients with gastric adenocarcinoma were analyzed immunohistochemically using the monoclonal anti-EpCAM antibody Ber-EP4 for occult disseminated tumor cells. Results  Tumor cells in lymph nodes were detected in 62 (38.8%) of the 160 “tumor-free” lymph nodes obtained from 39 (67.2%) patients. Multivariate Cox regression analysis confirmed the presence of disseminated tumor cells in “tumor-free” lymph nodes as an independent prognostic factor for both a significantly reduced relapse-free survival (p = 0.008) and overall survival (p = 0.009). Conclusions  The frequent occurrence and prognostic impact of minimal disseminated tumor cells in lymph nodes of patients with gastric carcinoma support the need for a refined staging system of excised lymph nodes, which should include immunohistochemical examination.     

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目的 探讨提高大肠癌淋巴细胞微转移诊断率的敏感方法。方法 用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测基质金属蛋白酶－７（ＭＭＰ－７）ｍＲＮＡ在３８例大肠癌和２５个淋巴结听表达,对部分淋再次行组织学检查,结果 ９７．４％的大肠癌中ＭＭＰ－７ｍＲＮＡ表达阳性,而正常膜几乎不表达。传统组织学检查发现癌转移的１３个淋巴结ＭＭＰ－７ｍＲＮＡ表达均为为阳性,而正常粘膜几乎不表达。传统组织学检查发现癌转移的１３     

淋巴结清除数目对结直肠癌患者预后的影响

目的研究结直肠癌患者局部淋巴结切除标本中切除淋巴结数目和预后的关系。方法对 1989年 1月至 2 0 0 0年 12月间有完整病理学检查和随访资料的 76例外科手术治疗的结直肠癌病例做回顾性分析。以有无淋巴结转移分为两组 ,每组根据淋巴结切除数再分两组 ,即切除数 >5 0枚组和≤ 5 0枚组 ,计算 5年生存率并进行生存率Log rank检验。 结果无淋巴结转移组中 ,切除淋巴结数 >5 0枚者较≤ 5 0枚者 5年生存率高 2 3% ,生存率差异有显著性意义 (χ2 =5 4 8,P <0 0 5 )。在有淋巴结转移组中 ,切除淋巴结数 >5 0枚者较≤ 5 0枚者 5年生存率高 36 % ,生存率也有显著差异 (χ2 =13 6 5 ,P <0 0 1)。结论充分的淋巴结切除可以改善结直肠癌患者的预后。淋巴结切除数目应作为规范结直肠癌手术的质量控制指标     

逆转录-聚合酶链反应检测乳腺癌腋淋巴结微转移的研究

目的探讨乳腺癌患者淋巴结内癌微转移灶的临床意义。方法采用逆转录－聚合酶链反应技术,扩增细胞骨架角蛋白１９（ＣＫ１９）,对１５例乳腺癌患者的癌组织及其６１个腋窝淋巴结进行检测。结果１５例患者乳腺癌组织均有ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达,５个正常淋巴结均无表达。６１个淋巴结同时进行逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及组织学检查,７个淋巴结病理证实有转移,其ＣＫ１９ｍＲＮＡ亦都表达阳性;病理未发现转移的５４个淋巴结中有１２个ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达阳性。结论ＣＫ１９ＲＴ－ＰＣＲ方法检测乳腺癌腋淋巴结癌微转移比组织学检查敏感（χ２检验,Ｐ＜０．０１）,特别在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的患者具有实用价值。     

利用逆转录聚合酶链反应及DNA印迹杂交技术检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移

目的　评价检测原发性乳腺癌腋窝淋巴结微转移的方法。方法　用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Southern杂交方法,检测腋窝淋巴结中CK-19基因表达。同时与免疫组织化学(组化)方法比较其检测敏感性。结果　RT-PCR、Southern杂交及免疫组化方法的检测敏感性分别为1∶5×10     

鸟苷酸环化酶C在大肠癌淋巴结中表达的意义

目的:探讨在新鲜淋巴结组织检测鸟苷酸环化酶C(GCCmRNA)对大肠癌淋巴结微转移的诊断意义,以求更准确地评估大肠癌的转移情况。方法:收集本院2001.10～2002.3大肠癌根治术标本42例,计得淋巴结618枚;其中经病理形态学诊断无淋巴结转移者25例,得淋巴结370枚。用RT-PCR法检测GCCmRNA、CEAmRNA及CK20mRNA,分别以形态学证实转移淋巴结、良性大肠疾病淋巴结及正常大肠粘膜组织作为对照。全组病例随访6～26个月。结果:病例中临床分期为:DukesA期14例、B期11例、C期17例。总的阳性检出率为GCC22.65%(140/618)、CEA44.01%(272/618)、CK2043.69%(270/618);而在25例形态学诊断无转移病例中,三者的阳性率分别为12.16%(45/370)、42.16%(156/370)和41.62%(154/370)。25例常规病理阴性病例中14例检出GCCmRNA阳性淋巴结,其中4例出现复发转移,GCC诊断试验的灵敏度及特异度分别为100%、52.38%。淋巴结GCCmRNA阳性与复发/转移有统计学相关,影响无瘤生存率。结论:在传统病理形态学阴性的淋巴结中仍可能存在癌转移,用RT-PCR法检测微转移可提高淋巴结转移检出率,更准确地评估大肠癌患者的临床病理分期。GCCmRNA具有较好的特异性。     

乳腺癌无转移、微转移和宏转移淋巴结中树突状细胞的变化

目的 观察乳腺癌无转移、微转移和宏转移淋巴结中树突状细胞(DC)的变化.方法 对53例乳腺癌患者580枚腋窝淋巴结中常规病理诊断阴性的淋巴结共477枚进行重新切片,以组织特异性标志物细胞角蛋白-19(CK-19)单克隆抗体为一抗,采用免疫组织化学法检测有无微转移病灶,根据检测结果将淋巴结标本分为无转移、微转移和宏转移3组.分别以S-100、CDla和CD83单克降抗体为一抗采用免疫组织化学法检测无转移、微转移和宏转移淋巴结中DC的数量.结果 477枚常规病理诊断阴性的淋巴结经免疫组织化学检测发现36枚淋巴结存在微转移.S-100阳性DC的数量在无转移、微转移和宏转移淋巴结3组之间差异有统计学意义,两两比较发现无转移组大于微转移组和宏转移组,差异有统计学意义(P＜0.01).CD1a阳性DC的数量在无转移、微转移和宏转移淋巴结3组之间差异无统计学意义(P＞0.05).CD83阳性DC的数量在无转移、微转移和宏转移淋巴结3组之间差异有统计学意义,两两比较发现微转移组大于无转移组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 乳腺癌转移到区域淋巴结后,淋巴结内DC的总体数量减少,局部免疫功能下降.但在淋巴结微转移阶段,成熟DC的数量相对增多,可能局部免疫功能下降还不明显.     

Clinical significance of colorectal cancer: Metastases in lymph nodes <5 mm in size

Background: The clinical significance of metastases in small lymph nodes is not known. Our objective was to evaluate possible relationships between the number and size of lymph node metastases and survival after potentially curative colorectal resection. Methods: A retrospective chart review was performed in patients with Dukes' C (any T, N_1–3, M₀) colorectal cancers from July 31, 1971 to December 31, 1987. All specimens underwent the lymph node clearing technique. Statistical analysis was performed with the log rank test and the Cox proportional hazards model. Results: In 77 patients there were 253 (8%) of 3,087 cleared lymph nodes with metastases. One hundred seventy-five (69%) of these metastatic nodes were 5 mm or less in diameter. The distal margin of resection (p=0.011) and number of positive lymph nodes (p=0.036) were statistically significant factors influencing overall survival. There was no significant difference in overall survival (p=0.73) or disease-free survival (p=0.56) whether the involved lymph nodes were < or >5 mm in size. Conclusion: Most metastatic lymph nodes were <5 mm in diameter. Based on our results, the size of lymph node metastases do not affect disease-free or overall survival in colorectal carcinoma.     

前列腺癌根治术前盆腔淋巴结微转移检测的研究

目的 明确新辅助治疗后前列腺癌根治术前,real-time PCR检测盆腔淋巴结微转移的意义.方法 2007年8月至2010年3月对21例临床局限性前列腺癌病例,根据病理检查阳性(A组)、real-time PCR检查前列腺特异性抗原(PSA)mRNA和前列腺特异性膜抗原(PSMA)mRNA阳性(B组)、病理检查及real-time PCR检查PSA mRNA及PSMA mRNA均阴性(C组)进行分组,D组为对照组.术前行淋巴管造影显示盆腔淋巴结,对可疑淋巴结在X线定位下穿刺抽吸淋巴液,用real-time PCR方法检测淋巴液中PSA mRNA和PSMA mRNA的表达,阳性表达提示淋巴结转移的存在,术后对淋巴结组织切片进行免疫组化检查.结果 对术前盆腔淋巴结穿刺抽吸淋巴液用real-time PCR方法检测PSA mRNA和PSMA mRNA的表达,证实有14例淋巴结存在微转移,术后对清扫淋巴结进行免疫组化检查有3例存在淋巴结转移,A组与B组PSA mRNA和PSMA mRNA的表达存在明显的差异;A、B组淋巴液中PSA mRNA及PSMA mRNA的表达明显高于淋巴结(P＜0.01).结论 采用real-time PCR方法检测淋巴液中PSA和PSMA mRNA的表达有利于探测到淋巴结微转移的存在,术前穿刺淋巴结抽吸淋巴液提高了术前前列腺癌分期的准确性.     

多重荧光PCR方法对结直肠癌进行微卫星不稳定检测及其临床价值

目的探讨多重荧光PCR方法检测结直肠癌微卫星不稳定（MSI）及其临床意义。方法将2004-2005年间进行手术治疗的110例结直肠癌患者建立队列，以多重荧光PCR方法检测结直肠癌MSI，并对MSI和微卫星稳定（MSS）结直肠癌患者的临床病理特点进行比较。结果多重荧光PCR方法扩增出所有患者的5个微卫星序列。其中MSI．H10例（8．1％），MSI-L13例（11．8％），MSS为87例（79．1％）。共检测BAT．26变异9例（8．2％）、BAT．25变异11例（10．0％）、D2S123变异11例（10．0％）、D5S346变异6例（5．5％）和D17S250变异8例（7．3％）。MSI-L、MSI．H和MSS组结直肠癌患者年龄比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；其他临床病理特点差异无统计学意义（P〉0．05）。结论多重荧光PCR方法检测MSI结果稳定，宜于临床应用；MSI和MSS结直肠癌患者临床病理特点比较未见差异。     

PCR检测非细菌性前列腺炎沙眼衣原体的初步研究

对３０例非细菌性前列腺炎（ＮＢＰ）患者的前列腺按摩液（ＥＰＳ）沙眼衣原体（ＣＴ）进行了聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测，并与经二乙氨基葡聚糖处理的ＨｅＬａ细菌培养法进行对比研究，结果发现，６例ＰＣＲ和细胞培养双阳性，２１例ＰＣＲ和细胞培养双阴性，３例两种检测结果不一致，包括２例ＰＣＲ阳性但培养阴性，１例培养阳性但ＰＣＲ阴性，将ＰＣＲ与细胞培养进行比较，ＰＣＲ的敏感性为８５．７％，特异性９１．３％，阳性预     

Expression of nm23-H1 gene product in mediastinal lymph nodes from lung cancer patients

Objective: Although numerous studies have shown that nm23-H1 gene product expression is inversely related to metastatic potential in some cancers, the expression in lymph nodes has not been studied in detail. An analysis of nm23-H1 gene product expression in mediastinal lymph nodes from lung cancer patients is reported. Methods: One hundred and thirty-four, randomly selected lymph nodes (63 with positive pathological lymph node status) from 39 surgically treated lung cancer patients were examined. Expression of nm23-H1 gene product was determined using specific monoclonal antibodies. Metastatic cancer cells were highlighted using anti-cytokeratin antibody. Results: Expression of nm23-H1 gene product in patients with less and more than 50% nodes-positive was 12/23 (52.2%) and 15/16 (93.8%) cases, respectively. Immunohistochemical studies with cytokeratin revealed micrometastasis in 6/39 (15.4%) patients and 9/71 (12.7%) nodes previously reported as cancer negative. Expression of nm23-H1 gene product in micrometastasis and metastasis-positive nodes was 5/9 (55.6%) and 55/63 (87.3%), respectively. We also found nm23-H1 gene product expression in germinal center cells. However, we found no relationship between expression of nm23-H1 gene product in germinal center cells and extent of metastasis. Conclusions: Our study demonstrates a positive relationship between expression of nm23-H1 gene product and extent of metastasis in mediastinal lymph nodes from lung cancer patients. Our data for normal germinal center cells suggests that nm23-H1 gene product expression does not play a specific biological role in suppressing tumor metastasis in lung cancer.     

结直肠癌淋巴结微转移病灶中CK20检测方法的比较

目的 比较免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对结直肠癌淋巴结微转移病灶中CK20的检测价值.方法 对40例结直肠癌患者共326例经HE染色证实无转移的淋巴结,使用RT-PCR技术检测CK20 mRNA,并与免疫组织化学染色检测方法进行比较,以寻找更为敏感的淋巴结微转移检测方法.结果 免疫组织化学法和RT-PCR分别发现41枚和105枚微转移淋巴结,两种方法发现的微转移阳性率分别为12.8%和32.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05).结论 RT-PCR法是比免疫组织化学染色法更为敏感的检测结直肠癌淋巴结微转移的方法.     

大肠癌患者外周血中癌细胞检测的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法以CK20非同位素RT．PCR方法,检测54例大肠癌患者术前和术后不同时间外周血中结肠癌细胞。结果54例病人外周血中查出CK20阳性表达32例,阳性率59．63％,CK20阳性检出与Duke’s分期、淋巴转移存在差别有显著性。术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出3例,术后早期短程化疗结束后16例转阴。结论大肠癌在早期就可能已累及全身,外周血中CK20的检测可帮助综合判断疾病恶性程度及患者预后,为指导辅助化疗提供了理论依据。术后早期短程化疗对控制大肠癌微转移具有一定的作用。     

淋巴结切除数目对无淋巴结转移的结直肠癌患者预后的影响

目的 探讨淋巴结阴性的结直肠癌患淋巴结切除数目与预后的关系。方法 分析42例无显微镜下淋巴结转移的结直肠癌手术患的临床病理资料，将他们按淋巴结切除数目分为A组(50枚或以下)和B组(50枚以上)，用Kaplan-Meier方法计算5年生存率，用χ^2检验两组间的差异。结果 B组5年生存率为100％，较A组(78．4％)明显增加，P=O．027；A组患肿瘤复发5例，其中5年内死亡3例；而B组患无肿瘤复发和死亡。结论 对无显微镜下淋巴结转移的结直肠癌患。尽量切除全数淋巴结可明显延长患的存活时间。     

乳腺癌淋巴结微小转移状态下前哨与非前哨淋巴结免疫细胞的改变

目的观察乳腺癌淋巴结微小转移状态下前哨淋巴结(SLN)与非前哨淋巴结(Non- SLN)免疫细胞密度的改变。方法53例符合研究标准的女性乳腺癌患者按SLN不同转移状态分为阴性、游离肿瘤细胞及微转移3组。从各组随机选择6对SLN和Non-SLN与DC-LAMP,CD68,CD123,Foxp3抗体行免疫组织化学染色,半定量评估染色细胞密度改变;所有SLN和Non-SLN蜡块切片均行与DC-LAMP抗体免疫反应的免疫组织学检查以确认成熟树突状细胞(DC)。蔡司图像分析系统定量分析每个淋巴结DC-LAMP阳性细胞的相对密度(DC-LAMP阳性细胞面积/淋巴结面积)。Wicoxon检验和Mann-Whitney检验分别用于DC-LAMP阳性细胞的相对密度的组内和组间比较。结果DC-LAMP阳性细胞密度改变显著。组内比较显示阴性组和微转移组SLN内DC-LAMP阳性细胞平均密度较Non-SLN高(P<0.05);组间比较显示微转移组SLN和Non-SLN内DC-LAMP阳性细胞密度较阴性组显著升高(P<0.05)。结论SLN和Non-SLN内DC-LAMP 细胞平均密度在淋巴结肿瘤转移形成早期发生改变,揭示SLN在肿瘤与引流淋巴结免疫相互作用中起重要作用。     

荧光定量聚合酶链反应检测大肠癌外周血角蛋白19、20的联合表达

目的研究大肠癌患者外周血CK19、CK20mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术,检测大肠癌患者术前外周血CK19、CK20mRNA,并将其与临床、病理各项指标进行统计学分析。结果45例大肠癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性率31.11%(14/45);CK20mRNA阳性率15.56%(7/45);联合检测CK19、CK20mRNA阳性率37.78%(17/45),较单项检测有明显提高。统计结果显示联合检测CK19、CK20mRNA与临床分期(χ2=4.54,P<0.05)、病理类型(χ2=5.66,P<0.05)、外周血CEA值(χ2=9.94,P<0.01)相关,差异有显著性。结论CK19、CK20mRNA是检测大肠癌微转移的标志物,对有外周血CK19、CK20RNA升高的患者应给予有效的免疫治疗、化疗和手术,并加以密切随访,以阻止微转移向转移灶的转变。     

乳腺癌前哨淋巴结活检技术

目的 探讨不同方法检测乳腺癌前哨淋巴结（sentinel lymph node,SLN)的可行性及其临床意义。方法 71例经细针穿刺或术中冰冻切片诊断为乳腺癌而临床无腋窝淋巴结肿大的女性患者,随机分为4组,其中亚甲蓝淋巴示踪24例,活性染料异硫蓝示踪29例,核素^99m锝－硫胶体示踪8例,染料与核素联合示踪10例,确认并切除前哨淋巴结,将其单独送病理,随后行乳腺癌手术,包括传统的腋窝淋巴结清扫术。结果 71例患者中有60例成功确定前哨淋巴结,检出率84．5％,其中亚甲蓝组75．0％（18／24）,异硫蓝组86．2％（25／29）,核素组检出7例,联合组全部检出;该技术总的敏感性83．3％,4组分别为70．0％、90．0％、100％、100％;假阴性率各组分别为30．0％、10．0％、0、0;总的准确率93．3％,各组分别为83％、96．0％、100％、100％。各组寻找前哨淋巴结平均花费时间分别为29、22、7、6min。结论 前哨淋巴结活检技术在临床是可行的。绝大多数前哨淋巴结可以比较准确地反映其余腋窝淋巴结的组织学特点。活性染料与核素联合示踪既直观又准确,是最佳的选择方法。