运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体4转位机制的影响

目的　研究运动对链脲佐菌素 (STZ)引起的糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体 4(Glucosetransporter 4,GLUT4)转位机制的影响。 方法　将实验大鼠分为 3组 :正常对照组、糖尿病组和糖尿病运动组。糖尿病运动组大鼠进行 6周游泳训练。实验到期分离各组大鼠大腿股四头肌 ,制备细胞内、外膜 ,以Western印迹法检测GLUT4蛋白含量 ,同时检测大鼠血清胰岛素和血糖浓度。结果　糖尿病大鼠骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量明显减少 ,与正常对照组相比 ,细胞内膜GLUT4蛋白含量减少 2 4.1% (P <0 .0 1) ,细胞外膜减少 48.1% ,(P <0 .0 1)。糖尿病大鼠经过 6周运动训练 ,与糖尿病组大鼠相比 ,骨骼肌细胞内膜GLUT4蛋白含量无明显变化 ,而细胞外膜GLUT4蛋白含量增加 10 8.7% (P <0 .0 1) ,血糖由18.5± 1.9mmol/L降至 14 .0± 3 .3mmol/L(P <0 .0 1)。结论　糖尿病状态下骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量明显减少 ,其中以细胞外膜GLUT4蛋白含量的减少更为显著 ,即在糖尿病状态下骨骼肌细胞GLUT4蛋白转位机制出现障碍 ,使肌细胞对葡萄糖的转运发生障碍 ,血糖升高。糖尿病大鼠经过运动训练可增加骨骼肌细胞GLUT4蛋白含量 ,并改善GLUT4蛋白转位机制 ,从而增加肌细胞对葡萄糖的转运和利用 ,降低血糖 ,改善糖尿病大鼠糖代谢紊乱的状况。     

耐力运动对大鼠骨骼肌葡萄糖运载体基因表达的调节作用

本实验的目的是观察耐力运动对大鼠骨骼肌葡萄糖运载体（ＧＬＵＴ４）基因表达的影响。将Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ大发为对照组和耐力运动组。耐力运动组大鼠进行６－７周的游泳训练。运用斑点印迹杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法测试骨骼肌细胞内ＧＬＴ４基因表达。结果表明耐力运动 大鼠骨骼肌细胞内ＧＬＵＴ４基因表达明显增加，斑点印迹杂交测试表明耐力运动组大鼠与对照组大鼠比较，骨骼肌细胞内ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ增加     

运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体4转位机制？…

目的 研究运动与链脲佐菌素（ＳＴＺ）引起的糖尿病大鼠骨骼肌细葡萄糖运载体４转位机制的影响。方法 将实验大鼠分为３组：正常对照组、糖尿病组和糖尿运动组。糖尿病运动组大鼠进行６周游泳训练,实验到期分离各组大鼠大腿股四头肌,制备细胞内、外膜、以Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测ＧＬＵＴ４蛋白含量,同时检测大鼠血清胰岛素和血糖２。结果 糖尿病大鼠骨骼２肌细胞ＧＬＵＴ４蛋白含量明显减少,与正常对照组相比,细胞内膜ＧＬ     

不同强度的耐力运动对糖尿病大鼠骨骼肌 GLUT4 mRNA表达的影响

目的探讨不同强度的耐力运动对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达的影响.方法雄性SD大鼠,其中36只大鼠经尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型.然后随机分为低强度运动组(EL)、高强度运动组(EH)、低强度运动加胰岛素治疗组(LI)、高强度运动加胰岛素治疗组(HI)、胰岛素治疗非运动组(DI)和非胰岛素治疗非运动组(DM).6只SD大鼠为非运动正常血糖组(CN).耐力训练采用活动平板,胰岛素采用皮下注射,共8周.运用RT-PCR法测定骨骼肌GLUT4 mRNA.结果DM组骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平显著低于其它各组(P＜0.05).LI组骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平明显增高接近CN组,并且显著高于DI组.DI组GLUT4 mRNA含量与EL、EH、HI各组相当,差异无显著性意义.结论运动可以促进GLUT4 mRNA的表达,而运动强度对GLUT4 mRNA表达量无显著影响;低强度运动加胰岛素所具有最佳的GLUT4 mRNA表达水平是其它单独干预措施所无法替代的.     

耐力训练对糖尿病大鼠骨骼肌p38信号激酶的调节作用

目的:研究不同强度的耐力训练对糖尿病大鼠骨骼肌细胞丝裂素活化蛋白激酶p38活性的调节作用,为制订适宜的糖尿病运动疗法程序提供分子生物学依据。方法:雄性SD大鼠34只,尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型。然后随机分为低强度运动组(E1,n=6)、高强度运动组(E2,n=6)、低强度运动加胰岛素治疗组(EI1,n=6)、高强度运动加胰岛素治疗组(EI2,n=6)、非胰岛素治疗非运动组(C,n=5)和胰岛素治疗非运动组(CI,n=5)。耐力训练采用活动平板,胰岛素皮下注射,共8周。运用化学发光法测定p38活性。结果:训练8周前后,EI1组安静血糖下降46%(P<0.01),其余各组血糖无明显下降。单次运动前后E1组、EI1组、EI2组和CI组血糖均见明显下降,其中EI1组血糖降低尤为显著达83%(P<0.01)。骨骼肌p38活性在EI1组显著高于其余各组(P<0.05),E1组显著高于E2组、C组、CI组(P<0.05)。结论:低强度运动训练以及低强度运动训练加胰岛素治疗均能显著提高糖尿病大鼠骨骼肌细胞p38信号激酶,提示低强度运动训练加胰岛素治疗是内源性胰岛素缺乏性糖尿病的适宜治疗方案。     

耐力训练对大鼠骨骼肌超微结构的影响

目的：探讨大鼠骨骼肌对中等负荷耐力训练的适应性变化。方法：实验于2004-02／09在第四军医大学基础部完成。选择健康雄性8周龄Wistar大鼠40只进行上坡跑中等负荷运动，坡度是＋5&;#176;。以16m／min的速度持续奔跑45min。每周训练6d，休息1d，持续8周。自由活动组5只设为对照组，不施加干预，饲养笼内自由活动。训练组按训练时间分为1，2，3，4，6，8周6个时间水平。每组分别为4，4，6，6，7，8只。按不同的训练时间水平处死大鼠，取比目鱼肌肌腹，用30g/L戊二醛和体积分数0．1的甲醛固定，苏木精伊红染色，中性树胶封固，光镜观察。每组任选4只大鼠的比目鱼肌制备电子显微镜切片，电镜观察在不同训练阶段大鼠比目龟肌超微结构的变化。主要观察肌原纤维和肌节排列的规则程度，肌节明带（I带）和暗带（A带）的完整情况与位置关系；Z线异常变化包括Z线流、Z线模糊、Z线扭曲和Z线消失，有上述任何一种情况出现的Z线均算作异常Z线。异常Z线数占被观察Z线总数的百分率即是Z线异常率。每只动物所观察的Z线总数在1500条以上行方差分析。各组间差别用独立样本t检验进行比较。结果：40只大鼠实验过程中无死亡，全部进入结果分析。①对照组肌纤维排列紧密，横切片上纤维大小较一致，呈多角形；在纵切片上可见到清晰、规则的肌横纹，肌核均匀分布在肌纤维周围的肌膜下，无增生、肿胀或固缩。组织间血管形态正常，无破裂；肌外膜无纤维增生。训练组可见程度不一的肌肉空泡变性、颗粒变性和透明样变性等，以3周组明显。可见炎症细胞浸润。②训练组比目鱼肌Z线异常率在训练后开始增加．在第3周达到高峰，后逐渐减少。训练组2，3，4周组比目鱼肌Z线异常率均高于对照组，差异显著（10．8&;#177;0．566，15．763&;#177;0．537，11．812&;#177;1．274，2．713&;#177;0．203．P〈0．01）。结论：肌肉组织学病理改变提示大鼠比目鱼肌发生运动性肌肉损伤，并在第3周时损伤最重，出现骨骼肌结构相对“薄弱期”。运动4周后，Z线异常率逐渐降低，病理改变逐渐减少。说明肌肉损伤有一个逐渐加重后经修复逐渐减轻的过程。在损伤积累的同时，肌肉表现出良好的适应能力，但适应的机制尚不清楚。     

耐力运动增加糖尿病大鼠血清瘦素水平的研究

目的：探讨耐力运动与体重调节密切相关的血清瘦素水平的关系，观察耐力运动对正常大鼠和糖尿病大鼠体重、血糖、血清胰岛素和血清瘦素的影响。方法：将实验动物分成4组，分别为正常对照组、正常耐力运动组、糖尿病组、糖尿病耐力运动组。所有运动组按Ploug方法进行游泳训练。结果：正常耐力运动组大鼠8周游泳训练后的血清瘦素浓度较运动前显著降低。糖尿病耐力运动组大鼠8周游泳训练后的血糖浓度较运动前降低35％，血清胰岛素浓度较运动前升高38％，血清瘦素浓度较运动前升高40％，8周期间每周体重增加数明显回升。结论：正常生理状态耐力运动能降低血清瘦素水平，这是机体为维持自身体重稳定和能量平衡的一种适应性反应；而在STZ糖尿病状态下，瘦素似乎与胰岛素关系更密切，耐力运动在降低血糖、改善机体对胰岛素敏感性的同时，似乎也改善了对瘦素的敏感性，耐力运动可增加糖尿病大鼠血清瘦素的水平。     

骨骼肌细胞葡萄糖运载体4的实验研究

制备大鼠骨骼肌葡萄糖运载体４羧基端１３肽的多克隆抗本，分离正常大鼠骨骼肌细胞内，外膜，并测定膜上ＧＬＵＴ４的含量。方法；采用Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ固相合成法制备ＧＬＵＴ４羧基端１３肽，免疫兔子后得到抗血清和抗体。运用蔗糖梯度超速离心法分离大鼠骨骼肌细胞内外膜，并以Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法测定细胞内外膜ＧＬＵＴ４蛋白的含量。     

耐力运动对大鼠葡萄糖运载体基因表达及转位的影响

目的　研究耐力运动对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体 4(glucosetransporter 4,GLUT4)基因表达及转位机制的影响。方法　将SD大鼠随机分为两组 :对照组和耐力运动组。耐力运动组大鼠进行 6周游泳训练。用Western印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内膜和外膜的GLUT4蛋白含量 ,用Northern杂交法和斑点印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量。实验前后检测大鼠血清胰岛素和血糖浓度。结果　运动组大鼠经过 6周游泳训练后 ,与对照组大鼠相比 ,骨骼肌细胞内膜GLUT4含量增加 16.0 %(P <0 .0 1) ,细胞外膜GLUT4含量增加 71.9% (P <0 .0 1) ,骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量增加2 5 .6% (P <0 .0 1)。结论　耐力运动可增加骨骼肌细胞内GLUT4基因表达水平 ,促进骨骼肌细胞内的GLUT4从内膜向细胞外膜转位 ,从而提高骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。     

耐力训练对大鼠骨骼肌超微结构的影响

目的:探讨大鼠骨骼肌对中等负荷耐力训练的适应性变化。方法:实验于2004-02/09在第四军医大学基础部完成。选择健康雄性8周龄Wistar大鼠40只,进行上坡跑中等负荷运动,坡度是+5°。以16m/min的速度持续奔跑45min。每周训练6d,休息1d,持续8周。自由活动组5只设为对照组,不施加干预,饲养笼内自由活动。训练组按训练时间分为1,2,3,4,6,8周6个时间水平。每组分别为4,4,6,6,7,8只。按不同的训练时间水平处死大鼠,取比目鱼肌肌腹,用30g/L戊二醛和体积分数0.1的甲醛固定,苏木精伊红染色,中性树胶封固,光镜观察。每组任选4只大鼠的比目鱼肌制备电子显微镜切片,电镜观察在不同训练阶段大鼠比目鱼肌超微结构的变化。主要观察肌原纤维和肌节排列的规则程度,肌节明带(I带)和暗带(A带)的完整情况与位置关系;Z线异常变化包括Z线流、Z线模糊、Z线扭曲和Z线消失,有上述任何一种情况出现的Z线均算作异常Z线。异常Z线数占被观察Z线总数的百分率即是Z线异常率。每只动物所观察的Z线总数在1500条以上行方差分析。各组间差别用独立样本t检验进行比较。结果:40只大鼠实验过程中无死亡,全部进入结果分析。①对照组肌纤维排列紧密,横切片上纤维大小较一致,呈多角形;在纵切片上可见到清晰、规则的肌横纹,肌核均匀分布在肌纤维周围的肌膜下,无增生、肿胀或固缩。组织间血管形态正常,无破裂;肌外膜无纤维增生。训练组可见程度不一的肌肉空泡变性、颗粒变性和透明样变性等,以3周组明显。可见炎症细胞浸润。②训练组比目鱼肌Z线异常率在训练后开始增加,在第3周达到高峰,后逐渐减少。训练组2,3,4周组比目鱼肌Z线异常率均高于对照组,差异显著(10.8±0.566,15.763±0.537,11.812±1.274,2.713±0.203,P<0.01)。结论:肌肉组织学病理改变提示大鼠比目鱼肌发生运动性肌肉损伤,并在第3周时损伤最重,出现骨骼肌结构相对“薄弱期”。运动4周后,Z线异常率逐渐降低,病理改变逐渐减少。说明肌肉损伤有一个逐渐加重后经修复逐渐减轻的过程。在损伤积累的同时,肌肉表现出良好的适应能力,但适应的机制尚不清楚。     

小牛血清去蛋白注射液对2型糖尿病大鼠糖耐量及骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响——附90例报告

目的：探讨小牛血清去蛋白注射液（deproteinized calf serum injection,DCSI）对2型糖尿病模型大鼠的糖耐量及骨骼肌的葡萄糖转运子4（glucose transporter4,GLUT4）mRNA表达的影响。方法：将90只3月龄健康远交系大鼠随机分为6组,每组15只。分别制作正常对照组（正常组）、糖尿病对照组（糖尿病组）、罗格列酮对照组（罗格列酮组）、DCSI高剂量组（高剂量组）、DCSI中等剂量组（中等剂量组）、DCSI低剂量组（低剂量组）等6组模型。在给药4周后行葡萄糖耐量试验,分别测定6组餐后0min、30min、1h、2h的血糖水平;次日处死小鼠,采用逆转录PCR法检测6组大鼠模型骨骼肌中GLUT4mRNA的相对表达量。结果：糖尿病组、低剂量组、中等剂量组、高剂量组、罗格列酮各时间段的血糖水平均高于正常组（均为P〈0．01）。低剂量组、中等剂量组、高剂量组和罗格列酮组的各时间段的血糖水平均明显低于糖尿病组（均为P〈0．01）。上述4组治疗组中,低剂量组、高剂量组餐后1h、餐后2h的血糖水平均高于罗格列酮组（均为P〈0．05）,中等剂量组餐后1h、餐后2h的血糖水平与罗格列酮组比较差异则无统计学意义（均为P〉0．05）。另外,糖尿病组的骨骼肌GLUT4mRNA的相对表达量明显低于正常组。罗格列酮组、低剂量组、中等剂量组及高剂量组GLUT4mRNA的相对表达量明显高于糖尿病组。上述4组治疗组中,中等剂量组GLUT4mRNA的相对表达量最高,接近于正常组。结论：DCSI尤其是中等剂量的DCSI可改善2型糖尿病模型大鼠的糖耐量,使其骨骼肌的GLUT4mRNA表达量增加。     

饮食和运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSOD mRNA表达的影响

目的:探讨饮食和运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞Cu/ZnSODmRNA表达及其血浆酶活性的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠24只采用高糖高脂饮食后腹腔注射小剂量链脲霉素,建立糖尿病模型,随机分为4组:糖尿病高脂饲料非运动组(DFN,n=6),糖尿病常规饲料非运动组(DRN,n=6),糖尿病常规饲料低强度运动组(DRL,n=6),糖尿病常规饲料高强度运动组(DRH,n=6)。活动平板进行耐力训练8周,测定骨骼肌Cu/ZnSODmRNA和血浆Cu/ZnSOD活性的变化。结果:两运动组骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达显著高于DFN组和DRN组,两运动组之间无显著差异。两运动组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组和DRN组,DRN组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组。结论:饮食调整加运动训练可以促进糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达,提高Cu/ZnSOD酶活性,而运动强度对此无显著影响。     

运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白-4的影响

目的研究运动对高糖高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法将实验大鼠随机分为正常组、模型组和运动组,每组各10只。各组以基础饲料适应性喂养1周后,模型组和运动组改用高糖、高脂饲料喂养,第5周时运动组进行为期6周的游泳训练。各组于实验第1,5和11周检测大鼠的体重、血甘油三酯、血胆固醇、空腹血糖和血浆胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数。采用Westernblot法检测大鼠脂肪细胞内、外膜GLUT4含量。结果模型组大鼠与正常组相比,脂肪细胞内、外膜GLUT4含量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,经过6周游泳训练的运动组大鼠脂肪细胞内膜GLUT4含量无明显变化,而细胞外膜GLUT4含量显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论运动可提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞外膜GLUT4含量,促进葡萄糖的摄取和利用。     

耐力训练对大鼠骨骼肌比较基因组学鉴定蛋白-58，脂滴包被蛋白基因表达的影响

摘要 目的：研究不同强度耐力训练对大鼠骨骼肌比较基因组学鉴定蛋白-58(CGI-58)基因和脂滴包被蛋白(perilipin)基因的表达,分析其变化规律,为运动时维持机体能量的动态平衡和代谢健康提供理论依据。 方法：选用SD雄性大鼠48只,随机分为4组,每组12只,即安静对照组（N组）;低强度耐力组（L组）;中等强度耐力组（M组）;大强度耐力组（H组）。运动负荷采用Bedford设定的大鼠运动强度等级,大鼠在跑台上进行不同坡度的递增负荷耐力训练;5周耐力训练结束后,宰杀大鼠。通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定腓肠肌、比目鱼肌CGI-58基因和perilipin基因表达。 结果：在腓肠肌组织中,CGI-58基因的表达随着运动强度的增加出现上升的趋势,其中在H组CGI-58表达达到最大并且高于U组（P<0.01）,其次是M组和L组。在比目鱼肌组织中,各组大鼠CGI-58基因的表达为：L组、M组和H组的表达都高于N组,其中在M组时表达最强并且高于U组和H组（P<0.05）。在相同训练方式下,H组腓肠肌CGI-58 mRNA表达高于比目鱼肌（P<0.01）。在腓肠肌组织中,perilipin基因的表达随着运动强度的增加出现上升的趋势,在H组表达达到最大并且高于U组和L组（P<0.01）,其次是M组。在比目鱼肌组织中,L组、M组和H组的perilipin基因表达都高于N组,在M组和H组均高于N组（P<0.05）。腓肠肌和比目鱼肌在相同训练方式下,两种肌肉perilipin mRNA表达差异也不明显（P>0.05）。 结论：5周不同强度的耐力训练可以诱发大鼠骨骼肌CGI-58 基因和perilipin基因发生差异表达,表明CGI-58 基因和perilipin基因在不同强度的耐力训练下参与了不同程度的脂肪水解调控。     

大鼠骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达与4周耐力运动的影响

背景:已有研究提示,雷帕霉素靶蛋白信号调控骨骼肌蛋白翻译过程,在运动引起的蛋白质合成变化中起作用.目的:观察耐力运动对骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达的影响,以及雷帕霉素靶蛋白在运动诱导骨骼肌生长中的作用途径.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/12北京体育大学运动人体科学学院实验室完成.材料:健康雄性、SPF级2月龄的SD大鼠12只,体质量180～200 g,随机为运动组和对照组,每组6只.方法:运动组先进行适应性训练:上坡跑,坡度为5°,速度分别为10,15,20 m/min强度递增的跑台运动,30 min/次, 1次/d,共6 d;然后进行正式运动:上坡跑,跑台坡度5°,速度20 m/min,60 min/次,1次/d,6 d/周,共4周的跑台运动.②对照组均不运动,其他生活条件与运动组相同.主要观察指标:采用反转录-聚合酶链反应方法测定腓肠肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达,采用BCA方法测定腓肠肌总蛋白含量.结果:实验纳入的12只大鼠全部完成训练,均进入结果分析,中途无脱落.①运动组腓肠肌总蛋白含量显著高于对照组 (67.0±11.7, 46.8±7.9;P < 0.05).②运动组雷帕霉素靶蛋白表达量显著高于对照组表达量(0.43±0.04, 0.25±0.03;P < 0.05).结论:耐力运动后大鼠腓肠肌总蛋白含量上升,骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达上升,提示雷帕霉素靶蛋白可能参与肌肉生长对运动适应的调控.