母源性抗旋毛虫抗体对子鼠肠道虫荷的影响

目的 探讨母源性抗旋毛虫抗体的传递途径及其对子鼠感染旋毛虫后肠道排虫的作用。方法 98只昆明小鼠子鼠分为4组,感染母鼠所产子鼠感染母鼠哺乳组（A组）、正常母鼠所产子鼠感染母鼠哺乳组（B组）、感染母鼠所产子鼠正常母鼠哺乳组（C组）及正常母鼠所产子鼠正常母鼠哺乳组（D组）。4组子鼠分别在14、21、42日龄时尾静脉采血,用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清抗体水平,然后分别经口感染200条肌幼虫,18 h后剖杀子鼠,计数肠道虫荷。 结果 A、B、C和D等4组14日龄子鼠的肠道平均虫荷分别为5、5、19及18条,21日龄子鼠分别为18、19、75及73条。14日与21日龄的A、B两组子鼠肠道虫荷均显著低于C、D两组子鼠（F₁₄=10.056,F₂₁=35.062,P<0.01）。14日和21日龄子鼠血清吸光度（A₄₉₂）,A组（0.177、0.235）与B组（0.183、0.250）均显著高于C组（0.108、0.105）与D组（0.067、 0.065） （F₁₄=75.326,F₂₁=60.867,P<0.01）;14日和21日龄4组子鼠肠道虫荷与其血清抗体水平均呈负相关（r₁₄=-0.621,r₂₁=-0.756,P<0.01）。42日龄4组子鼠肠道虫荷差异无统计学意义（F₄₂=0.916,P>0.05）,血清抗旋毛虫抗体均为阴性,肠道虫荷与其血清抗体水平无相关性（r₄₂=-0.291,P>0.05）。 结论 母源性抗旋毛虫抗体主要经乳汁传递,可明显促进14日和21日龄子鼠感染旋毛虫后的肠道排虫反应。     

旋毛虫感染母鼠产小鼠抗血吸虫感染保护性的初步研究

目的 探讨旋毛虫感染母鼠产小鼠抗血吸虫感染的保护性效果。方法 用旋毛虫感染母鼠产子代小鼠及该小鼠血清经尾静脉和肌肉注射被动转移小白鼠，在感染血吸虫尾蚴42d后解剖检虫，检测小鼠对血吸虫感染的保护效果。结果 旋毛虫感染母鼠产小鼠减虫率为24．31％，其小鼠血清静脉和肌肉注射被动转移小白鼠减虫率分别为18．65％和20．77％。结论 旋毛虫感染母鼠产小鼠及小鼠血清静脉和肌肉注射被动转移小白鼠均可产生抗血吸虫感染的保护力。     

旋毛虫编码新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白对小鼠的免疫保护性研究

目的 探讨旋毛虫编码新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白WN10对小鼠的免疫保护性。方法 将纯化的重组融合蛋白WN10以20μg/只的剂量分3次免疫小鼠后，攻击感染旋毛虫肌幼虫200条／只，检查旋毛虫7日龄成虫数、雌虫体外产生新生幼虫数、感染35d的肌幼虫数并计算减虫率，同时用ELISA法检测血清中抗WN10抗体IgG滴度。结果WN10免疫小鼠后获得旋毛虫7日龄成虫、肌幼虫的减虫率分别为64．28％和61．21％，均与感染对照组和佐剂对照组差异显著；获得雌虫产新生幼虫的减虫率为16．46％，与感染对照组和佐剂对照组差异不显著；WN10免疫组小鼠在第3次免疫后1周可检测到高滴度的抗WN10抗体IgG，在攻击感染旋毛虫9周后仍维持在较高水平。结论 编码旋毛虫新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白可诱导小鼠产生较强的抗旋毛虫保护性免疫。     

旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用的研究

目的 探讨旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用。 方法 应用旋毛虫Ts21重组蛋白ELISA（Ts21-LISA）与肌幼虫ES抗原ELISA（ES-LISA）对旋毛虫病与其他寄生虫病患者血清及5种旋毛虫（T1、T2、T3、T4和T7）感染小鼠血清进行检测,并观察不同剂量旋毛虫感染小鼠后不同时间的血清抗体水平。将Ts21重组蛋白皮下注射免疫小鼠（20 μg/只,免疫3次,每次间隔10 d）,末次免疫后10 d,每只小鼠用300条旋毛虫肌幼虫经口攻击感染,3.5 d和42 d 后剖杀,观察肠道成虫与肌幼虫数并计算减虫率。 结果 Ts21-LISA检测旋毛虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的抗体阳性率分别为94.7%（18/19）、15.8%（3/19）、9.1%（1/11）和7.7%（1/13）,与血吸虫病、华支睾吸虫病患者血清及健康人血清无交叉反应;Ts21重组蛋白与ES抗原ELISA检测旋毛虫病患者血清抗体的敏感性与特异性差异均无统计学意义（χ²=0,P＞0.05;χ²=0.358,P＞0.05）。Ts21重组蛋白与ES抗原检测T1感染小鼠血清的敏感性差异无统计学意义（χ²=0.104,P＞0.05）,与T2、T3、T4、T7感染小鼠血清的交叉反应率明显低于ES抗原（χ²=17.069,P＜0.05）。小鼠感染300条旋毛虫后4 周,应用Ts21-LISA检测的血清抗体阳性率为100%（10/10）;小鼠感染5条旋毛虫后6周,血清抗体阳性率为100%（10/10）。Ts21重组蛋白免疫小鼠用旋毛虫攻击感染后3.5 d和42 d,肠道成虫与肌幼虫减虫率分别为42.71%和49.8%。 结论 Ts21重组蛋白可用于旋毛虫病的血清学检测,但不能忽视与并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的交叉反应。     

实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的研究

目的 观察小鼠感染旋毛虫后不同时间肉汁中抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性。 方法 将288只昆明小鼠随机分成3组（每组96只）： 轻度（A组）、 中度（B组）及重度（C组）感染组，每鼠分别经口感染100、300、500条旋毛虫幼虫，感染后各组每周或隔周随机剖杀8只小鼠，收集血清和肉汁，用旋毛虫肌幼虫排泄物分泌抗原（ES抗原）ELISA检测血清及肉汁中抗体水平；另取30只小鼠，每鼠感染500条旋毛虫幼虫，感染后6周剖杀，制备肉样，用ELISA检测4 ℃及-20 ℃保存不同时间后的肉汁中抗体动态水平。 结果 轻度、中度和重度感染组小鼠分别在感染后4、3和3周开始从肉汁中检出抗体，抗体阳性率分别为87.5%、50%和87.5%；3组小鼠的肉汁抗体阳性率均随感染后时间的延长而逐渐升高，分别在感染后6、4和4周达100%，抗体水平均在感染后8周达高峰，吸光度（A₄₉₀值）分别为0.43、0.49及0.52，之后肉汁中抗体水平稍有下降，但感染后第18周抗体阳性率仍均为100%，A490值分别为0.35、0.41及0.46。3组小鼠感染后不同时间肉汁与血清抗体水平均具有相关性（r₁₀₀=0.940，r₃₀₀=0.970，r₅₀₀=0.983，P<0.05）。感染旋毛虫小鼠肉样在4 ℃保存7 d和1 d的抗体水平A₄₉₀值均为0.53（F=0.250，P>0.05）。在-20 ℃保存8周和1周的肉汁抗体水平A490值分别是0.46和0.50，保存8周的肉汁抗体水平与1周的相比无明显下降（F=2.273， P>0.05）；虽然保存10周的肉汁A₄₉₀值已降至0.43，与保存1周的相比差异有统计学意义（F=15.675， P<0.05），但抗体阳性率仍为100%并持续至实验结束时（保存20周）。 结论 动物死亡或屠宰后不能采集血清时，可从新鲜、冷藏及冷冻胴体采集肉汁代替血清进行抗旋毛虫抗体的检测。     

不同佐剂对旋毛虫Ts87重组蛋白免疫小鼠保护性的影响

目的 比较福氏完全佐剂（CFA）等6种佐剂对于旋毛虫Ts87重组蛋白（rTs87）免疫保护性的影响。 方法 经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析鉴定的rTs87分别与上述各种佐剂免疫ICR小鼠，每间隔2周免疫1次，共免疫3次。ELISA检测免疫小鼠血中抗原特异性IgG抗体水平。攻击感染45 d后剖杀小鼠取肌幼虫（ML）并计数，计算肌幼虫减虫率。 结果 rTs87相对分子质量（Mr）约为40 000，可被旋毛虫感染鼠血清和rTs87免疫鼠血清识别，分别与佐剂CFA（或IFA）、IMS 1312、ISA720、Quil-A及氢氧化铝免疫后均引起较强的IgG抗体反应，各佐剂免疫组减虫率分别为49.4%、49.2%、63.5%、65.1%和70.8%，与空白对照组比较有统计学意义；单纯抗原rTs87免疫组获得了23.7%的减虫率，与对照组及各佐剂免疫组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 佐剂CFA（或IFA)、IMS1312、ISA720、Quil-A及氢氧化铝均能不同程度增强rTs87对小鼠的保护性免疫力，其中佐剂ISA720、Quil-A和氢氧化铝的保护效果更好。     

旋毛虫成囊前期幼虫抗原保护性免疫的研究

目的比较旋毛虫成囊前期幼虫虫体抗原、排泄分泌抗原和表面抗原对小鼠产生的免疫保护作用。方法分别用旋毛虫成囊前期幼虫虫体抗原、排泄分泌抗原、表面抗原免疫小鼠,同时设佐剂组和阴性对照组,间隔7d免疫1次,共3次。末次免疫后7d,每只小鼠用200条旋毛虫感染期幼虫经口进行攻击感染。感染后7d和30d分别检查各组小鼠肠道成虫数和肌幼虫数;用ELISA测血清中抗旋毛虫肌幼虫IgG抗体。结果虫体抗原、排泄分泌抗原、表面抗原和佐剂组的成虫减虫率分别为84．89％、89．73％、85．65％、2．57％;肌幼虫减虫率分别为71．71％、80．98％、73．66％、5．60％。排泄分泌抗原组、表面抗原组的成虫减虫率（P均〈0．05）及肌幼虫减虫率（P均〈0．01）均高于虫体抗原组。各免疫组小鼠血清IgG抗体滴度明显升高,虫体抗原组、排泄分泌抗原组和表面抗原组的几何平均倒数滴度分别为2798．89、3474．51、2984．83,分别为阴性对照组（459．32）的6．09、7．56、6．50倍。结论旋毛虫成囊前期幼虫虫体抗原、排泄分泌抗原和表面抗原均能诱导宿主产生较强的抗攻击感染保护力。成囊前期幼虫的排泄分泌抗原显示出更强的免疫原性。     

旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平的研究

目的观察旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷(larvae per gram diaphragm,lpgd)与血清及肉汁抗体水平的关系。方法将32只雄性昆明小鼠随机分成4组(每组8只),每只分别感染50(A组)、100(B组)、300(C组)、500条(D组)旋毛虫幼虫,感染后42d剖杀,收集血清及肉汁,观察膈肌虫荷并用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清及肉汁抗体。另将50只小鼠随机分成5组(每组10只),每组分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染500条幼虫,感染后42d剖杀,观察感染不同种旋毛虫小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平。结果感染旋毛虫的A、B、C、D4组小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平均无相关性(P>0.05),但与感染剂量呈正相关(P<0.05),每组小鼠的血清与肉汁抗体水平也均具有相关性(P<0.05)。5种旋毛虫感染小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平相比均无相关性(P>0.05),但血清与肉汁抗体水平相比均具有相关性(P<0.05)。旋毛虫感染小鼠的血清及肉汁抗体水平明显高于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫)感染小鼠的血清和肉汁抗体水平(P<0.05)。结论旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染小鼠血清及肉汁中抗旋毛虫抗体的检测。     

旋毛虫机蚴抗原诱导小鼠抗日本血吸虫保护性免疫的研究

目的：探讨旋毛虫幼虫抗原免疫小鼠对日本血吸虫攻击感染的交叉保护作用。方法：用4种不同的旋毛虫幼虫抗原制剂经颈部皮下多点免疫小鼠，然后用日本血吸虫尾蚴30条或100条攻击感染，攻击后45d剖杀小鼠，收集成虫、肝组织和粪便中的虫卵，并计数。结果：4种不同制剂均可诱导不同程度的保护性免疫效应，以旋毛虫幼虫匀浆上清可溶性抗原（TsSA）效果较好，减虫率为21．3％，加用福氏佐剂时，其减虫率为29．3％，肝组织和粪便中的虫卵减少率分别达48％和58．5％，平均每鼠肝组织和粪便中的虫卵EPG减少率分别为41．7％和48．9％；当抗原剂量为10000条旋毛虫并加用福氏佐剂时，其减虫率达39．6％。结论：旋毛虫抗原免疫小鼠能诱导抗日本血吸虫攻击感染的免疫效应。     

旋毛虫肌幼虫抗原免疫小鼠抗感染能力及其机制的研究

目的探讨旋毛虫肌幼虫抗原免疫后小鼠产生的抗感染能力及其机制。方法制备旋毛虫肌幼虫抗原,免疫小鼠,再用旋毛虫感染性幼虫对免疫小鼠实施攻击感染,检查感染后小鼠肠道成虫和肌肉幼虫数并计算减虫率;同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测旋毛虫肌幼虫抗原免疫后7、14、284、2 d小鼠外周血单个核细胞(PBMC)培养上清中IL-4和IFN-γ水平。结果肌幼虫抗原免疫组小鼠的肠道成虫数减虫率为38.54%,肌幼虫减虫率为35.31%;ELISA检测免疫小鼠PBMC培养上清IL-4和IFN-γ水平均升高,直至免疫后42 d,以免疫后14、28、42 d的IL-4水平升高更显著(P0.01)。结论旋毛虫肌幼虫抗原免疫能诱导小鼠产生有效的抗旋毛虫感染作用,其抗感染机制以Th2细胞介导的体液免疫为主。     

旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠免疫保护作用的比较研究

目的　比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用。方法　收集人工感染大鼠小肠内的成虫, 经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原。采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原。分别用两种抗原免疫小鼠, 间隔１ 周共免疫３ 次, 末次免疫后１ 周, 每只小鼠攻击感染１００ 条旋毛虫感染性肌肉幼虫。感染后１ 周检查小鼠小肠内成虫数量和雌虫生殖力, 感染后５ 周检查肌肉幼虫负荷。结果　成虫可溶性抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别为７９５５ ％ 、６２２５ ％ 和６５０ ％ 。成虫排泄分泌抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别是９７２７ ％ 、８６６０ ％ 和９００ ％ 。结论　实验结果表明旋毛虫成虫可溶性抗原和成虫排泄分泌抗原均能够诱导宿主产生较强的抗攻击感染的免疫力, 但后者的免疫原性更强。     

Congenital transmission of Trichinella spiralis in experimentally infected mice

Summary Congenital transmission of T. spiralis infectio in BALB/c mice was studied. Pregnant mice were each infected with 300 larvae 5, 7, 15 and 17 days after fertilization. Newborn mice were examined by artificial digestion of muscles. Out of 6 offspring born to the mother-mouse infected 7 days after fertilization, two offspring were found to be infected, 7 and 24 larvae were recovered respectively. Other 7 female mice were first infected with T. spiralis larvae and then gestated, only the offspring born to the mother-mice fertilized 8 and 22 days after infection were found to be infected with a larval burden ranging from 1–3 larvae per animal. All of the larvae recovered from the offspring were the non-encapsulated larvae. The cross-fostering in which one-day old young born to healthy mother-mice were nursed by infected mothers for 21 days, showed that no young were found to be infected. These findings showed that tansplacental transmission of T. spiralis could occur in mice, if the female were infected during mid-pregnancy or fertilized in 1 month after infection (e.g., infected in one month before fertilization). The larvae transmitted from maternal-to-neonatal mice may be migrating. Transmammary transmission of T. spiralis was not observed.     

Perinatal transmission of coxsackievirus B3 in mice

Oral infection of pregnant mice with coxsackievirus B3 (CB3) late in gestation produced maternal viremia, which peaked three to four days after challenge, then rapidly diminished. Ninety percent of mice developed IgG antibody to CB3 by ten days after challenge. CB3 titers from placental tissue peaked at two to four days after maternal infection, but moderate titers persisted for at least eight days. Though virus could be recovered (less than 1.0-1.5 log10 pfu/g) from fetal tissue in only a small percentage (3%-13%) of pregnancies, virus could be found in some fetuses eight days after maternal infection. Despite the low rate of fetal infection, many pups born to dams infected one to eight days before delivery were either stillborn (4%-41%) or died from infection shortly after birth (14%-68%). The actual percentages depended on the time interval from infection of the dams to delivery. Maternal IgG antibody to CB3, which appeared at six to eight days after infection, protected against postnatal mortality, but did not protect against stillbirth.     

肌幼虫可溶性抗原与ES抗原检测抗旋毛虫抗体效果的比较

目的比较旋毛虫肌幼虫可溶性抗原(SAg)与ES抗原(ESAg)检测抗旋毛虫抗体的效果。方法应用SAg-ELISA和ESAg-ELISA对旋毛虫病患者血清、感染旋毛虫的小鼠血清及肉汁、其他寄生虫感染人及动物血清进行抗旋毛虫抗体的检测。结果SAg-ELISA和ESAg-ELISA对10例旋毛虫病患者血清检测时抗体阳性率均为100%,但对10份正常人血清检测时SAg-ELISA的背景较深,两种抗原的A值相比较具有显著性差异(P<0.05);应用两种抗原对旋毛虫感染小鼠和正常小鼠血清及肉汁的检测结果与对人血清的检测结果相似。SAg与肝吸虫、肺吸虫、血吸虫等寄生虫感染人及动物血清均有交叉反应,而ESAg仅与1例肺吸虫病患者血清有交叉反应。结论旋毛虫肌幼虫SAg和ESAg检测抗旋毛虫抗体的敏感性相同,但ESAg的特异性优于SAg;肉汁也可作为样本进行抗旋毛虫抗体的检测。     

The Effects of Maternal Ethanol Consumption on Lactational Transfer of Immunity to Trichinella spiralis in Rats

Transient immunity to the intestinal parasite Trichinella spiralis can be transferred from the mother to the neonate during lactation. The goal of this study was to determine whether maternal ingestion of ethanol during pregnancy and lactation inhibited expression of anti- T. spiralis immunity in nursing pups. Groups of female rats were infected with 1000 T. spiralis L1 larva, mated, and fed either ethanol-containing or isocaloric liquid diets and maintained on diets through pregnancy and lactation or were fed the liquid diets for 30 days before T. spiralis infection, mated, and maintained on diets through pregnancy and lactation. Pups were challenged orally with 200 T. spiralis larva at 14 days postdelivery (preweaning period) or 21 days postdelivery (postweaning period) and were sacrificed either 3 or 8 days after respective challenge. Intestinal worm counts and serum titers of anti-T. spiralis IgG antibodies were determined for each pup. No difference in the number of intestinal worms between pups of ethanol-treated and pair-fed dams that received ethanol diet after T. spiralis infection was observed in the preweaning period. This was also true of pups from the dams sacrificed at 3 days after challenge in the postweaning period. However, similar pups sacrificed at 8 days after challenge showed significantly higher worm counts (decreased immunity) relative to their pair-fed controls. Pups of dams that received ethanol containing diet 30 days prior to T. spiralis-infection showed significantly higher numbers of intestinal worms relative to pair-fed pups at both the preweaning and postweaning periods.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD抗原诱发小鼠保护性免疫的研究

为探讨旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴｓＬ１ＥＳ）中４６５８ｋＤ抗原的保护性免疫作用，本文用该纯化抗原组分加福氏完全佐剂（ＦＣＡ）腹腔注射免疫昆明小鼠３次，继以旋毛虫感染性幼虫３００条攻击感染，感染后第７天计数小鼠肠道成虫数、第３０天肌肉幼虫数和血清抗体ＩｇＧ滴度。结果：４６５８ｋＤ抗原免疫鼠的肠道成虫减虫率、肌肉幼虫减虫率和血清抗体ＩｇＧ的几何平均倒数滴度分别为４１８％、４６１％和２８４１２；与ＴｓＬ１ＥＳ诱导的保护性免疫力（４８３％、５０２％和３４５８６）水平接近；显著高于佐剂对照组（４８％、８３％和７４８６）。表明：ＴｓＬ１ＥＳ中４６５８ｋＤ抗原组分可产生明显的保护性免疫作用     

免疫层析试纸条检测实验感染猪肉汁抗旋毛虫抗体的研究

目的观察免疫层析试纸条对实验感染猪肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备了免疫层析试纸条。将30头家猪随机分为2组：实验感染组20头,每头经口感染5000条旋毛虫幼虫,正常对照组10头。感染后10w用试纸条进行血清及肉汁抗体检测,并与镜检法进行比较。结果应用试纸条检测旋毛虫幼虫感染的家猪血清及肉汁的抗体阳性率均为100%（20/20）,肌肉压片镜检法的幼虫检出率亦为100%（20/20）,每克腿肌虫荷为111～400条幼虫（平均为231.36条）。应用试纸条和镜检法对正常对照组肉汁及膈肌时均为阴性。感染猪肌肉-20℃保存8个月的肉汁抗体阳性率亦为100%（20/20）。结论试纸条检测肉汁中旋毛虫抗体可用于新鲜肉及冷冻猪肉中旋毛虫检疫的初筛。