阿托伐他汀对外周血培养内皮祖细胞数量及功能的影响

目的 观察阿托伐他汀对体外培养外周血内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的影响.方法 分离培养人外周血单个核细胞,分别接种在普通培养基(A组)及阿托伐他汀干预培养基(B组),7d后收集贴壁细胞进行分析.激光共聚焦显微镜下双染色阳性细胞鉴定为正在分化的EPCs,采用transwell小室、细胞计数法评估EPCs扩增、黏附及迁移能力的差别.结果 与A组相比,B组体外培养EPCs的数量显著增多,黏附及迁移能力显著提高.结论 阿托伐他汀在外周血EPCs培养中能促使细胞扩增,增强黏附及迁移功能,可作为EPCs培养的一种改良方法.     

阿托伐他汀对稳定型心绞痛患者循环血中内皮祖细胞的影响

目的探讨阿托伐他汀对稳定型心绞痛患者循环血中内皮祖细胞的影响。方法选取2014年10月至2015年11月我院心内科收治的86例稳定型心绞痛患者,随机分为两组,对照组43例患者使用常规药物进行治疗,阿托伐他汀组43例患者在常规药物治疗的基础上加用阿托伐他汀。观察两组患者治疗前后循环血中内皮祖细胞的数量及血脂情况。结果治疗前对照组患者总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平与阿托伐他汀组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后阿托伐他汀组患者总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组患者循环血中内皮细胞数量比较,无统计学意义(P>0.05);治疗后对照组患者循环血中内皮细胞数量少于阿托伐他汀组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者均无严重不良反应。结论阿托伐他汀治疗稳定型心绞痛患者不仅增加了循环血中内皮祖细胞数量,还改善血脂水平,无严重不良反应,值得临床使用。     

他汀类药物的研究进展

他汀类药物属于羟甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂，主要包括普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatn)、氟伐他汀(nuvatatn)、阿托伐他汀(atorvastatin)及西立伐他汀(eerivastatm)等。其中洛伐他汀和普伐他汀是从真菌培养基中产生的，辛伐他汀是半合成产品，氟伐他汀，阿托伐他汀和西地伐他汀是全合成产品。     

新型调脂药物西立伐他汀

西立伐他汀是一种新型的第 3代羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂 ,具有与肝脏和HMG CoA还原酶亲和力强、作用强度大、副作用小、与其他药物无药物动力学相互干扰等优点。     

阿托伐他汀对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞功能的影响及其机制的初步探讨

目的观察阿托伐他汀对2型糖尿病患者(T2DM)患者外周血内皮祖细胞功能的影响并初步探讨其机制。方法将40例糖尿病患者随机分为他汀治疗组和对照组,前者给予阿托伐他汀40 mg/d口服,治疗前及治疗后2、4周抽取外周血,采用密度梯度离心法分离培养内皮祖细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测内皮祖细胞增殖情况,Transwell小室检测迁移,Matrigel管腔形成实验检测管腔形成能力。另取20例T2DM患者血培养内皮祖细胞,加入阿托伐他汀、一氧化氮合酶(NOS)/NO途径抑制剂L-NAME后观察对其功能的影响。结果阿托伐他汀治疗后2周、4周外周血内皮祖细胞数量明显上升,功能明显改善(P<0.01)。体外实验他汀+L-NAME组的血内皮祖细胞数目较他汀组明显下降(P<0.01)。结论阿托伐他汀对糖尿病患者内皮祖细胞的功能具有一定保护作用,这种作用能被L-NAME阻断。阿托伐他汀的作用机制可能与激活NOS/NO信号通路有关。     

单次追加瑞舒伐他汀对经皮冠状动脉介入治疗围手术期心肌标志物影响

目的观察经皮冠状动脉介入(PCI)治疗前追加20mg瑞舒伐他汀能否降低围手术期心肌标志物水平。方法 150例择期PCI冠心病,稳定型心绞痛患者随机分为两组:瑞舒伐他汀组予冠心病基础药物治疗,并在PCI前次日晚给予追加20mg瑞舒伐他汀;对照组仅予基础药物治疗。PCI后次日晨测肌钙蛋白I(TnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)。结果术后瑞舒伐他汀组CK-MB和TnI水平显著低于对照组(P<0.01)。结论对于稳定型心绞痛患者,介入术前给予追加20mg瑞舒伐他汀能显著降低围术期心肌标志物水平。     

瑞舒伐他汀与阿托伐他汀治疗老年高胆固醇血症的疗效和安全性比较

目的比较瑞舒伐他汀10 mg·d~(-1)与阿托伐他汀20 mg·d~(-1)治疗老年高胆固醇血症病人的疗效和安全性。方法采用单盲随机对照的前瞻性研究。经4 wk调脂药物洗脱的老年病人67例,空腹血脂符合低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)≥4.14 mmol·L~(-1)且≤6.50 mmol·L~(-1)、三酰甘油(TG)<4.52 mmol·L~(-1)入组标准,随机分为瑞舒伐他汀组(n=33,瑞舒伐他汀10 mg·d~(-1))和阿托伐他汀组(n=34,阿托伐他汀20 mg·d~(-1)),疗程4 wk,观察2药的疗效和安全性。结果治疗4 wk后,瑞舒伐他汀组病人血清LDL-C显著降低[(3.4±s0.9)mmol·L~(-1) vs(2.8±0.8)mmol·L~(-1),P<0.05],总胆固醇(TC)亦显著降低[(5.5±1.1)mmol·L~(-1)vs(4.8±0.9)mmol·L~(-1),P<0.051,HDL-C和TG无明显改变(P>0.05);阿托伐他汀组病人血清LDL-C水平也显著降低,[(3.3±1.2)mmol·L~(-1) vs(2.4±0.7)mmol·L~(-1),P<0.05],TC降低明显[(5.2±1.2)mmo]·L~(-1)vs(4.5±0.6)mmol·L~(-1),P<0.05],HDL-C和TG无显著改变(P>0.05)。2组间比较各指标均无显著差异(P>0.05)。研究期间未发现与药物有关的严重不良事件。结论瑞舒伐他汀和阿托伐他汀均为安全快速降低老年人群LDL-C的候选药物。     

他汀类药物对糖代谢的利与弊

他汀类药物为羟甲基戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶抑制剂，可提高肝脏中的低密度脂蛋白（LDL）受体的表达，同时通过抑制胆固醇在肝脏的合成来降低LDL在血液中的浓度。来自不同人群的大量临床试验表明，他汀类药物可以降低心血管疾病的危险。另外，其可通过改善血栓形成，抗氧化，改善血管内皮细胞的损伤，抗炎和促进斑块的稳定等多重作用，抑制动脉粥样硬化的发展。     

阿托伐他汀药动学相关的基因多态性研究进展

阿托伐他汀是目前最常用的调血脂药物,可显著降低血浆低密度脂蛋白胆固醇水平,有效预防心血管疾病的发生。但对于不同的人群,阿托伐他汀的疗效存在很大差异。研究表明,药物相关基因多态性是造成个体之间药动学差异的重要原因。本文就阿托伐他汀的药动学特征及其相关基因多态性研究进展作一综述,为临床上阿托伐他汀的个体化使用提供参考。     

阿托伐他汀治疗老年高脂血症临床研究

为证实羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂阿托伐他汀的临床降脂疗效及耐受性.笔者于2009年2～6月,对66例老年原发性高脂血症患者进行了随机双盲安慰剂对照试验,现报告如下.     

Effects of resveratrol on number and activity of endothelial progenitor cells from human peripheral blood

1. It has been well established that oestrogens can increase the number of endothelial progenitor cells (EPC) by anti-apoptotic effects. Resveratrol, a polyphenolic phytoalexin extracted from grapes and wine, has been reported to act as an oestrogen receptor agonist. We hypothesize that putative phyto-oestrogen may promote EPC proliferation and survival in vitro. 2. Endothelial progenitor cells were isolated from human peripheral blood and identified immunocytochemically. Endothelial progenitor cells were incubated with resveratrol (1, 10, 25 and 50 mmol/L) or control for specified times. Cell proliferation, migration and in vitro vasculogenesis were assayed using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetra-zolium bromide (MTT) assay, modified Boyden chamber assay and in vitro vasculogenesis detection, respectively. 3. Resveratrol increased the number of EPC and promoted EPC proliferation, adhesion and migration in a dose- and time-dependent manner. Cell number peaked at 50 mmol/L resveratrol after incubation for 24 h compared with vehicle control (61.3 +/- 5.8 vs 112.8 +/- 7.2, respectively; P < 0.01). 4. Furthermore, cell cycle analysis showed that 50 mmol/L resveratrol significantly increased the S phase and decreased the G(0)/G(1) phase of EPC. In addition, resveratrol increased vascular endothelial growth factor production and further induced vasculogenesis in vitro. 5. In conclusion, resveratrol significantly induces EPC proliferation, migration and further promotes angiogenesis in vitro.     

内皮祖细胞的鉴定及培养方法

近10年来,内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的研究受到越来越多的关注。研究发现,循环血液中EPCs储量的改变伴随着心血管疾病的不同表现。因此,EPCs作为心血管疾病的生物标志物及修复受损血管的一种细胞疗法被广泛研究。该文对1997年至今大多数研究中EPCs的鉴定及培养方法做了简要综述。     

骨髓动员对大鼠骨髓源内皮祖细胞功能的影响

目的观察大鼠骨髓动员后骨髓源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能的改变,探讨骨髓动员后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的可能机制。方法按是否接受重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulatory factor,rhG-CSF)注射液注射将Lewis大鼠分为动员组和对照组,获取骨髓单个核细胞用EBM-2培养液进行诱导分化,培养7d后对贴壁细胞进行EPCs的鉴定;采用黏附能力测定实验观察EPCs的黏附能力。另取Lewis大鼠制备单侧后肢缺血模型,在模型制备后7d将8×106个EPCs移植至缺血侧后肢的肌肉内,按照移植EPCs来源不同将后肢缺血大鼠分为动员组和对照组。EPCs移植4周后行后肢血管造影,计算缺血侧后肢侧支血管数目。结果大鼠骨髓单个核细胞培养7d后黏附能力测定实验中动员组黏附EPCs数量为(22.3±2.8)个/×100高倍视野大于对照组(16.8±4.4)个/×100高倍视野(P<0.05);大鼠骨髓源EPCs移植至缺血肢体后4周动员组EPCs移植后缺血侧后肢侧支血管数目为(4.7±1.0)大于对照组(3.3±0.5)(P<0.05)。结论骨髓动员使骨髓源EPCs功能改善,其可能是骨髓动员后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的机制之一。     

Decreased mobilization of endothelial progenitor cells contributes to impaired neovascularization in diabetes

• 1 Circulating bone marrow (BM)‐derived endothelial progenitor cells (EPCs) play an important role in neovascularization. In the present study, we investigated the mechanisms underlying the reduction in circulating EPCs in a mouse model of diabetes induced by streptozotocin.
• 2 Compared with non‐diabetic controls, diabetic mice had reduced circulating EPCs (0.59 ± 0.11 vs 0.94 ± 0.21%, respectively; P < 0.01) and increased plasma endothelial microparticles (18 642 ± 6809 vs 5692 ± 1862/mL, respectively; P < 0.01). In a mouse bone marrow (BM) transplantation model, increased adhesion of transplanted BM cells to aortas of diabetic mice was observed compared with control (900 ± 194 vs 431 ± 109 cells/mm², respectively; P < 0.01).
• 3 Following hindlimb ischaemia, diabetic mice exhibited suppressed EPC mobilization, a reduction in the expected increase in capillary density and suppressed restoration of transcutaneous oxygen pressure in the ischaemic tissue. Diabetic mice also showed impaired ischaemia‐induced upregulation of vascular endothelial growth factor (VEGF), hypoxia‐inducible factor (HIF)‐1α and interleukin‐1β, an exaggerated increase in matrix metalloproteinase (MMP)‐2 and ‐9 and a suppressed increase in tissue inhibitor of matrix metalloproteinase (TIMP)‐1. On multivariate analysis, VEGF expression was the only independent factor related to circulating EPC count.
• 4 In conclusion, the data indicate that the decrease in basal circulating EPCs in diabetes may be attributable, in part, to consumptive loss of EPCs due to increased endothelial damage. Impairment of ischaemia‐induced EPC mobilization in the diabetic mouse model is associated with altered HIF‐1α/VEGF and MMP/TIMP regulation and represents a novel mechanism underlying defective postischaemic neovascularization in diabetes.

     

大鼠外周血内皮祖细胞分离培养与鉴定

目的 获得大鼠外周血内皮祖细胞（EPCs）并进行鉴定。方法 首先采用密度梯度离心法获得大鼠外周血单个核细胞,然后用EGM-2完全培养基体外培养条件下诱导单个核细胞分化为靶标细胞,最后分别用EPCs特异性标记物CD133和Flk-1检测及内吞乙酰低密度脂蛋白（ac-LDL）和荆豆凝集素-1（UEA-1）的能力,识别和鉴定靶标细胞。结果 靶标细胞培养至第6天呈纺锤形,梭状排列,具有与典型EPCs形态一致的生物学特征,CD133及FLK-1双抗体荧光检测结果阳性,内吞ac-LDL及UEA-1的能力实验结果阳性,证明该纺锤形细胞为EPCs。结论 通过密度梯度离心法及多细胞因子诱导大鼠外周血单个核细胞获得EPCs的方法可行,该方法可为EPCs的基础研究及临床应用提供理论与实验方法学基础。     

银杏叶提取物对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

目的观察银杏叶提取物对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell, EPC)数量和功能的影响。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞，培养7 d后，收集贴壁细胞并加入银杏叶提取物(10, 25和50 mg·L^-1)干预一定时间(6,12,24和48 h)。激光共聚焦显微镜和流式细胞仪鉴定EPC，分别观察EPC的增殖、迁移、粘附和体外血管生成能力。结果银杏叶提取物促进外周血EPC扩增，25 mg·L^-1银杏叶提取物作用24 h对EPC数量的影响最为显著(较对照组增加了1倍， p<0.01)。银杏叶提取物也显著改善了外周血EPC的粘附、迁移、增殖和体外血管生成能力。结论银杏叶提取物可增加EPC数量并改善其功能。     

Effects of electroacupuncture on endothelial function and circulating endothelial progenitor cells in patients with cerebral infarction

This study evaluated the effects of electroacupuncture (EA) on endothelial function and endothelial progenitor cells (EPC) in patients with cerebral infarction. In a randomized, placebo‐controlled, crossover study, 20 patients with cerebral infarction were randomized into two treatment groups: EA or placebo. Before and after each intervention, pulse amplitude tonometry (PAT) was used to assess endothelial function and peripheral blood was analyzed for the number of EPCs. Circulating EPCs were quantified by flow cytometry as CD45^lowCD34⁺KDR2⁺ cells. Plasma vascular endothelial growth factor (VEGF) and interleukin (IL)‐10 levels were measured. Seven days later, crossover was performed on each group, with each group receiving the other treatment using the same protocol. The PAT hyperemia ratio ranged from 1.57 ± 0.41 to 2.04 ± 0.51 after EA, representing a significant improvement (P = 0.002); however, there was no improvement in the placebo group (P = 0.48). Circulating EPCs, as measured by flow cytometry, increased to 110.6 ± 74.3/100 μL in the EA group (P = 0.001) but did not change in the placebo group (45.9 ± 35.3/100 μL, P = 0.08). The increases in the number of EPCs and the PAT ratio after treatment were correlated (r = 0.78, P < 0.001). Plasma VEGF levels increased with EA compared to baseline (261.2 ± 34.0 vs 334.9 ± 80.5 pg/mL, P = 0.003). The number of circulating EPCs was positively correlated with plasma levels of VEGF (r = 0.50, P = 0.02). In conclusion, EA induced improvement of EPC levels and the PAT ratio in patients with cerebral infarction.     

普伐他汀对人内皮祖细胞一氧化氮合成的影响

目的观察普伐他汀对人内皮祖细胞（EPCs）一氧化氮（NO）合成的影响。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7d后,收集贴壁细胞并分别加入普伐他汀,10μmol/L及100μmol/L干预48h,免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪鉴定EPC,用RT-PCR方法测定对细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）mRNA表达的影响,并用硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮（NO）的水平。结果普伐他汀组的人内皮祖细胞eNOS mRNA的表达、NO的合成明显增加。结论普伐他汀可增加人内皮祖细胞eNOS mRNA的表达和NO的合成     

丹参酮ⅡA对外周血内皮祖细胞增殖、粘附和迁移功能的影响

丹参酮ⅡA(TanⅡA)是中药丹参(salvia miltiorrhiza Bge)中分离提取的一种有效单体。实验表明丹TanⅡA可促进心肌梗死冠脉侧支循环形成,对损伤内皮细胞功能障碍具有保护作用[1,2]。作为内皮细胞前体的内皮祖细胞(endo-thelial progenitor cell,EPC)在内皮损伤后的修复及侧支循环形成中起重要作用[3]。本文采用体外培养外周血EPC,观察TanⅡA对内皮祖细胞增殖、粘附和迁移功能的影响,以进一步探讨TanⅡA治疗冠心病的作用机制。1材料与方法1.1材料人纤维连接蛋白(HFN)和VEGF购自Chemicon公司;M199和FITC-UEA-I为Sigma产品;acLDL…     

促红细胞生成素对慢性肾衰竭大鼠骨髓红系祖细胞的增殖作用

促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）是哺乳动物调节红细胞生成的主要刺激因子，成人90％以上由肾脏合成，通过与骨髓红系祖细胞表面的特异性EPO受体（erythropoietin receptor，EPOR）结合，促进骨髓红系祖细胞生长、增殖、分化和成熟。慢性肾衰竭时由于EPO产生相对不足，出现肾性贫血，目前临床上针对肾性贫血患者给予重组EPO（recombinant human erythropoietin，rh-EPO）治疗，效果明显。基于此缘故，增加rh—EPO应用剂量，能否快速纠正肾性贫血？本文通过^3H-TdR参入实验观察rh—EPO对慢性肾衰竭大鼠骨髓红系祖细胞增殖的影响，旨在探讨这一问题，以此指导临床合理用药。